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快速测定组织中残留的甲胺磷和对硫磷农药
对硫磷和甲胺磷属于有机磷类农药,因其毒性较大,已造成多起特大中毒事件.我们采用液-液提取方法和气质联用(GC/MS)监测技术对胃组织样品中的甲胺磷和对硫磷成分进行提取和分析,建立了一个组织样品中有机磷农药的快速分析方法.
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大脑3D图谱揭示神经细胞芳容
《科技日报》报道,美国科学家已绘制出一幅超精细的老鼠大脑的3D图谱。该图谱由一系列高清图像拼接而成,单个神经细胞在纳米尺度下的特征清晰可见,且清晰度前所未有。科学家们希望借助这一图谱发现大脑细胞之间非同寻常的关联,并终理清躁郁症和抑郁症等神经疾病的发病机理。新的研究颠覆了一个存在很久的假设,即所谓的彼得规则--如果两个神经细胞彼此接近,那么它们很可能会形成突触,相互沟通。这个假设似乎合乎逻辑,但该研究的主要负责人、波士顿大学医学院助理教授纳拉亚南·卡斯瑟里表示,它其实是假的,至少在小鼠大脑的某个特定区域(一块从胡须接受感官信息的皮层)内是这样的。卡斯瑟里说:“大脑的复杂性远远超出我们的想象……两个神经元呆在一起很多时间并不意味着它们建立了连接,成年哺乳动物大脑内这个区域就是如此,而在大脑的其他部位、婴儿的大脑内,每个神经细胞或许会与其邻居相连。因此,我们也需要对其他大脑进行成像,从而弄清楚这一点。”在这项研究中,科学家们使用了新的成像系统包括硬件和软件,对数据进行分析。硬件名为自动化磁带收集超薄切片机(ATUM),由卡斯瑟里和哈佛大学的研究人员研制而成,已经取得了专利。它使用钻石刀将已染色并增塑的脑组织样品,切割成30 nm厚的切片,然后用电子显微镜收集和拍摄样品。名为VAST的软件程序则对数据进行分析,制造出在神经细胞单个突触尺度上的彩色图像。软件由该研究的合作者、哈佛大学的丹尼尔·伯格同麻省理工学院的科学家联合研制而成。就目前而言,这项新技术的成本很高,对数据存储的要求也很高,但研究人员希望能像基因测序技术一样,不断降低其成本,该研究结果发表在新一期的《细胞》杂志上。
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血清HIV抗体阴性静脉药瘾者肝组织HIV DNA测定
为评估HIV抗体阴性HIV感染高危人群潜在的HIV传播性,本研究对来自德国的38例HIV抗体阴性的静脉药瘾者肝组织样品进行常规DNA抽提,用HIV不同结构区(gag,pol,env)6对引物同时扩增HIV DNA。结果发现38例肝组织中有30例在HIV gag区(M667/sk03c,M661/sk01c)发生特异性扩增。10例对HIV env区(env526/C02,envC01/571K)发生特异性扩增。进一步分析发现38例中有3例同时在gag、pol、env 3个区域产生特异性扩增,12例分别对HIVgag和pol区或gag、env区产生特异性扩增,17例产生单一gag或pol或env特异性扩增,6例在gag、pol、env区均阴性。对env阳性的部分标本经荧光标记自动测序仪测序并与国际HIV标准株比较,其感染HIV株与欧美B亚型同源性为86%。此研究提示,抗HIV阴性的静脉药瘾者为潜在HIV感染的高危人群,加强对这类人群“窗口期”的监测,对预防HIV的传播有重要意义。
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急性缺氧时内源性一氧化碳的变化及外源性一氧化碳对肺动脉高压的影响
内源性一氧化碳(CO)作为一种新型的血管扩张剂可通过激活平滑肌细胞的鸟苷酸环化酶,增加环磷酸鸟苷(cGMP)水平, 维持正常血管张力[1].我们的实验观察了急性缺氧时CO的变化及外源性CO对肺动脉高压的影响.材料与方法雄性Wistar大鼠60只,体重220~250 g,实验分为两部分:第一部分30只,用于观察急性缺氧时内源性一氧化碳的变化;第二部分30只,用于观察外源性一氧化碳对肺动脉高压的影响.3%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射麻醉后,向右颈外静脉和左颈总动脉分别插入自制导管至肺动脉及颈总动脉以测定平均肺动脉压(mPAP)和体动脉压:收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP).气管切开行气管插管并接美国DH-140型小动物呼吸机控制呼吸,维持呼气末二氧化碳分压(PETCO2) 在35~45 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).稳定20 min测量基础值后,进行以下两部分实验.第一部分:大鼠随机分为三组:对照组(10只):大鼠吸入 21% O2 30 min;缺氧组(10只):大鼠吸入90% N2+10% O2的混合气30 min; ZnPPIX组(10只):腹腔注入血红素氧化酶抑制剂ZnPPIX 10 μmol/kg后,大鼠吸入90% N2+10% O2的混合气30 min.然后分别从三组大鼠的颈动脉导管采集动脉血测血气,血浆CO含量及血浆cGMP含量.并取肝、肾、肺组织称重、匀浆.血及组织样品在3 000 r/min离心 15 min,取血浆及组织上清液进行CO分析.
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中国人器官组织中天然放射性含量及与膳食摄入量的关系
放射性核素进入人体后造成内照射,全身测量和器官组织样品浓度测定是估算人体放射性核素含量和所致内照射剂量的直接方法.由于人体器官组织采样困难,内照射剂量通常依据摄入量和相应生物动力学与剂量学模型间接估算.联合国原子辐射效应委员会(UNSCEAR)用这两种方法来估算世界人口所受平均天然放射性内照射剂量[1].放射性核素与元素在体内行为是一致的,深化人或动物体内元素行为的认识和发展放射性或微量元素测定新技术为完善与更新生物动力学模型提供了新依据.
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浅谈病例分析在临床生化检验教学中的应用
《临床生物化学检验》既是一门研究人体健康和疾病时生理生化过程的医学基础理论学科,又是一门应用各种技术和方法分析机体健康和疾病时体液或组织样品中各种化学成分的医学应用技术学科,是高等医学检验专业的核心课程之一.它要求检验学生不仅要具有扎实的检验医学知识,熟练的技术操作能力,还要具有一定的临床知识,合理地选择、评价和组合检验项目,提供检验应用指南及有效的检验服务.而教师的职责也由单纯地向学生传授知识向着重于对学生能力的培养;激发学生积极思考、发挥学生学习的主动性;使学生学会如何学习、充实提高其自学能力的方向转变.作为教师,如何能够提高生化检验的教学质量,使学生"学有所思,学有所乐,学有所成,学有所用",已经成为每个教师的迫切需要.笔者单位自2006年开始有计划、有步骤地进行临床生化检验教学改革,将病例分析引入课堂教学,通过丰富多彩的课程设置,引导学生较好地掌握了生化检验核心知识和主要内容,教学效果明显提高.
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肾脏穿刺术患者健康教育需求的调查指导
经皮肤肾穿刺活体组织检查,简称肾穿刺,是为了安全地获取病人肾脏组织样品,送病理检查,从而明确诊断,提示预后,指导治疗.但肾穿毕竟是一种创伤性检查,除临床上严格掌握适应证,认真排除禁忌证外,患者对医生的积极配合也十分重要.
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PCR技术在放射生物学中的应用
1 PCR仪的主要特点PCR技术具有高效、灵敏,特异性强,应用范围广等特点.DNA序列的快速扩增使在DNA水平上进行大量的种群研究成为可能.单链扩增对几十或几百个个体进行快速测序而不经过以前所需的繁琐的克隆步骤.一旦得到了一组具代表性的庄到数据,可用更方便且简单的分析方法.来获得等位基因的序刿数据.对分析来说,传统分子技术所需的组织样品用量相对较多,尤其是许多无脊椎动物,它们对于进行分子检测所用的一般操作方法来讲太小.因此,对于小生物、共生生物或那些在培养基中不易生长的生物个体的直接分析是困难的.
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肝硬化大鼠钠潴留与一氧化氮的关系
我们通过测定假手术、肝硬化腹水及给予一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-精氨酸甲酯(L-NAME)的肝硬化腹水3组大鼠血浆和肾组织匀浆中NO依赖性环磷酸鸟苷(cGMP)浓度与血浆醛固酮和利钠肽(ANP)浓度及24 h尿钠排泄量,旨在探讨肝硬化钠潴留的发生机制,现将结果报道如下。 一、材料与方法 1. 实验动物: 同批雄性SD大鼠,体重195~245 g(由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供),分为3组,I组为假手术组(8只),Ⅱ组为肝硬化腹水组(8只),Ⅲ组为给予L-NAME的肝硬化腹水给药组(8只)。L-NAME于术后第22天开始口服给药,连用7 d ,剂量为每天0.5 mg/kg体重。 2. 模型制备:采用胆管结扎复制肝硬化腹水动物模型,假手术组仅分离出胆管,不结扎和剪断。 3. 观察指标和方法:(1)血浆和肾组织匀浆中cGMP浓度测定:按上海中医学院同位素室提供的125I-cGMP放射免疫试剂盒使用说明处理血和组织样品,然后用放射免疫法分别测定其cGMP浓度;(2)血浆醛固酮和ANP浓度测定:采用放射免疫法测定。(3)24 h尿钠排泄量测定:大鼠分别放入代谢笼中收集第28天的24 h尿量,用电极法测定尿钠含量。
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一种相对简易的从人胃组织样品中扩增L-Myc基因片断的方法
运用多聚酶链反应(PCR)从人各种细胞或组织中扩增特异的基因片段,然后进行多态性或突变序列分析,已成多种生物医学学科(如遗传学、分子流行病学及肿瘤学等)常用的研究手段.越来越多的研究表明原癌基因的多态性或体细胞突变与肿瘤的发生、转移或预后密切相关[2,4].