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甾体激素对醋酸棉酚所致大鼠生精功能损伤的恢复研究
目的 甾体激素十一酸睾酮联合去氧孕烯和微量炔雌醇(TU/DSG/EE)对服用醋酸棉酚(GA)大鼠精子发生功能损伤恢复的影响.方法 雄性Wistar大鼠随机分为TU/DSG/EE+GA、1 %甲基纤维素+GA、TU/DSG/EE和1 %甲基纤维素(对照组)4组.TU/DSG/EE组大鼠持续服用TU/DSG/EE,对照组持续服用1 %甲基纤维素,U/DSG/EE+GA组、1 %甲基纤维素+GA组提前服用相应药物4周,再联合服用GA持续4周.各组停药恢复9周.服药4周、8周、停药恢复9周时进行大鼠血清和睾丸内激素水平;服药8周、停药恢复9周时对睾丸重量和睾丸精子头部计数检测及对大鼠睾丸生精上皮进行组织形态学分析.结果 服药8周后,TU/DSG/EE+GA组的大鼠睾丸重量、睾丸精子头部计数分别为(0.3±0.04)g、0,1 %甲基纤维素+GA组分别为(0.71±0.05)g、(24.2±3.3)×106个/克睾丸组织,TU/DSG/EE组分别为(0.53±0.06)g、(46.2±3.9)×106个/克睾丸组织,对照组分别为(1.66±0.08)g、(136.5±10.6)×106个/克睾丸组织,差异均有统计学意义.TU/DSG/EE+GA组的大鼠睾丸切片中未发现A级和B级生精小管,C级小管的比例(7.2 %)显著地低于对照组(50.4 %)、1 %甲基纤维素+GA(19.6 %)和TU/DSG/EE组(70.1 %).TU/DSG/EE+GA、TU/DSG/EE组的大鼠血清LH、FSH和睾丸间液睾酮(TIT)均显著低于对照组.恢复9周后,TU/DSG/EE+GA和TU/DSG/EE组的上述各项指标值均恢复到对照水平.结论 激素可保护大鼠睾丸生精功能免受棉酚不可逆损伤进而促进其完全恢复,保护作用可能与睾丸内睾酮水平的降低密切相关.
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醋酸棉酚诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其机制的实验研究
本研究探讨醋酸棉酚对经典人多发性骨髓瘤细胞系RPM18226的作用及其机制.采用四唑盐比色试验(MTT)、细胞形态学观察、流式细胞仪检测、DNA电泳、Western-blot等方法分别观察醋酸棉酚对RPM18226细胞的抑制增殖、诱导凋亡效应及其机制.结果表明:醋酸棉酚在>16 μmol/L浓度时可显著抑制RPM18226细胞的增殖、促进其凋亡,随着剂量的增加以及时间的延长,效应越明显.研究还发现,醋酸棉酚是通过抑制线粒体膜电位(△ψm)、诱导Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达来实现上述效应的.结论:醋酸棉酚对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞具有选择性抑制增殖、促进凋亡的效应.
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醋酸棉酚诱导淋巴细胞白血病细胞凋亡的作用及联合地塞米松的效应
本研究旨在探讨醋酸棉酚诱导人急、慢性淋巴细胞白血病细胞凋亡的作用及联合地塞米松的效应.用流式细胞仪检测醋酸棉酚对人急、慢性淋巴细胞白血病原代细胞凋亡的影响.用MTT比色法测定醋酸棉酚对人Burkiu淋巴瘤细胞株Raji细胞及正常骨髓单个核细胞存活率的影响.用流式细胞仪检测醋酸棉酚与地塞米松联合诱导Raji细胞的凋亡率.结果表明,≥5 μmol/L醋酸棉酚能诱导原代培养的人急性淋巴细胞白血病细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性.醋酸棉酚对原代培养的慢性淋巴细胞白血病细胞诱导凋亡的浓度更高,50 μmol/L醋酸棉酚作用48h,急、慢性淋巴细胞白血病细胞的凋亡率分别为(90.4±6.2)％和(51.7±10.3)％.≤10 μmol/L醋酸棉酚对正常骨髓单个核细胞的存活率没有明显影响,醋酸棉酚作用镐和72 h,对正常骨髓单个核细胞的IC50值分别为Raji细胞的7.1和9.1倍.≥10 μmol/L地塞米松能诱导Raji细胞凋亡,不同浓度地塞米松与10 μmol/L醋酸棉酚联用,Raji细胞凋亡率明显增加(P＜0.05).结论:醋酸棉酚能诱导原代培养的人急、慢性淋巴细胞白血病细胞凋亡；对正常骨髓单个核细胞的抑制作用明显低于Raji细胞；与地塞米松联用可增强后者诱导Raji细胞凋亡的效应.
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食蟹猴少精弱精动物模型建立的研究
目的为了男性不育研究和药效试验,建立食蟹猴口服醋酸棉酚诱导的少精、弱精症动物模型.方法具有生育史的成年雄性食蟹猴6只,2只为正常对照,其余4只每天口服醋酸棉酚,给药剂量分别为4mg·kg-1 d-1、8mg·kg-1d-1、12mg·kg-1d-1和20mg·kg-1d-1,连续90d;每15d采用阴茎电刺激采精进行精液分析;90d后进行睾丸和附睾的病理活检.结果每组服药动物在给药30d后精子总数、密度、活动度开始明显下降,到90d时精子密度均低于正常范围以下,除4mg·kg-1d-1剂量动物外,其余三个剂量的动物精子活动度均减弱并小于50%,达到了少精弱精症指标;8mg·kg-1d-1至20mg·kg-1d-1剂量动物精子的发生和成熟受到抑制,大剂量(20mg·kg-1d-1)给药对猴子睾丸有明显损伤作用.结论一定剂量的醋酸棉酚经口服给药能诱导食蟹猴形成不同程度少精弱精动物模型,少精弱精程度与服药剂量和时间长短有关.
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小剂量醋酸棉酚治疗严重更年期功血的临床观察
更年期功能性子宫出血(以下简称功血)是常见病,患者常常严重贫血,不能工作,甚至有生命危险,严重者多切除子宫,不少患者因惧怕手术,反复发作.本文采用小剂量醋酸棉酚服用,收到满意效果.
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醋酸棉酚对Raji细胞增殖和凋亡的影响
目的 观察醋酸棉酚对人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用台盼蓝染色和噻唑蓝(MTT)法观察醋酸棉酚对Raji细胞生长存活的影响,瑞氏染色法观察药物处理后细胞形态学变化,琼脂糖凝胶电泳和Annexin V-FITC标记流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期、检测细胞凋亡率及Bcl-2蛋白表达水平变化,比色法测定Raji细胞Caspase-3样蛋白酶活性.结果 5 μmol/L以上浓度醋酸棉酚能抑制Raji细胞生长增殖并诱导其凋亡,效应与药物浓度及给药时间呈正相关.醋酸棉酚作用后,Raji细胞被阻滞于G_0/G_1期.比色法显示Caspase-3样蛋白酶活化.流式细胞仪检测到Bcl-2蛋白表达下调,且与Caspase-3活化在时间上存在同步趋势.结论 醋酸棉酚能抑制aaji细胞增殖并诱导凋亡,其原因可能与调节细胞周期及下调Bcl-2蛋白表达有关.
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醋酸棉酚和左炔诺孕酮对蜚蠊生长繁殖能力的影响
目的 观察醋酸棉酚和左炔诺孕酮对德国小蠊和美洲大蠊的生长、死亡与繁殖情况的影响.方法 采用药物混合诱饵喂饲试虫,在特定环境下观察其生长、死亡、繁殖情况.结果 醋酸棉酚德国小蠊实验组比对照组开始出现卵鞘时间推迟了22天,推迟率为75.9％；产生卵鞘的数量仅为对照组的40％,孵化率为对照组的8.6％；醋酸棉酚美洲大蠊实验组比对照组开始出现卵鞘时间推迟了97天,推迟率为96.0％；产生卵鞘的数量仅为对照组的28.3％,孵化率均为0.结论 左炔诺孕酮对德国小蠊和美洲大蠊的生长、死亡与繁殖能力无明显影响；醋酸棉酚对德国小蠊和美洲大蠊的繁殖能力有明显的抑制作用.
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五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B的影响
目的:观察五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B水平的影响.方法:采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组、甲基睾酮组和五子衍宗方低、高剂量组,每组10只.除正常对照组外,其余各组大鼠按醋酸棉酚50mg/kg体质量灌胃给药,制备生精障碍模型.正常组和模型组大鼠灌服蒸馏水,甲基睾酮组大鼠灌服甲基睾酮混悬液,五子衍宗方低、高剂量组大鼠分别给予低、高浓度(含1.75g、3.5g生药/mL)五子衍宗方混悬液灌胃,每天1次,连续1个月.观察各组大鼠睾丸湿重、睾丸指数及间质细胞数,按WHO标准,采用WLJY - 9000荧光染色精子动(静)态图像分析系统检测附睾精子参数,ELISA法检测大鼠血清抑制素B水平.结果:棉酚可造成大鼠睾丸减轻、睾丸指数减小、间质细胞数减少(P＜o.01)；附睾精子密度降低,活动率和前向运动率(a+b％)下降(P ＜0.05,P＜0.01),血清抑制素B水平降低(P＜0.01)；五子衍宗方能显著改善大鼠睾丸重量及睾丸指数,增加间质细胞数,改善附睾精子参数(P＜0.05,P＜0.01),上调血清抑制素B水平(P＜0.01),拮抗棉酚造成的大鼠睾丸生精功能损伤.结论:通过上调抑制素B水平,改善睾丸生精功能,可能五子衍宗方治疗不育症的作用机制之一.
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醋酸棉酚宫内给药装置治疗子宫腺肌病实验研究
目的 探讨宫内醋酸棉酚给药装置治疗实验性子宫腺肌病的可行性与安全性.方法 采用ICR小鼠异体垂体移植法成功建立子宫腺肌病模型4个月后,模型小鼠子宫内给予3种不同剂量的醋酸棉酚治疗2个月后,测定ICR小鼠醋酸棉酚血浆浓度、病灶大体结节个数以及组织学HE染色评分分数,并与每日灌胃治疗以及对照组比较.结果 模型结节数目与HE染色评分分数随着ICR小鼠宫内局部醋酸棉酚的治疗剂量增加而逐渐下降;当宫内醋酸棉酚剂量增加到每20g体重0.2 mg时,模型结节数目与病灶HE染色评分分数两者差异均有统计学意义(P＜0.05).另外,与灌胃组比较,宫内局部给药组的血浆醋酸棉酚浓度低且稳定.结论 宫内局部给药装置携带合适剂量的醋酸棉酚治疗实验性小鼠模型子宫腺肌病是安全可行的.
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醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞E-cadherin基因mRNA表达的影响及意义
目的 研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人腺样囊性癌ACC-M细胞增殖及E-cadherin基因mRNA表达的影响,初步探讨GAA的抗肿瘤作用机制.方法 本研究于2013年4-7月在昆明医科大学附属口腔医院(云南省高校口腔医学重点实验室)完成.(1)应用四唑盐比色(MTT)法观察GAA对ACC-M细胞生长的作用.(2)应用实时荧光定量(RFQ-PCR)法检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后E-cadherin基因mRNA的表达变化.结果 (1)MTT法检测显示:GAA作用ACC-M细胞24、48和72 h后,细胞的生长受到抑制.(2) RFQ-PCR法检测显示:分别以19、10 μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后,细胞中E-cadherin mRNA的表达水平高于对照组(P＜0.05).结论 GAA能抑制ACC-M细胞生长,增强E-cadherin基因mRNA表达.
关键词： 人腺样囊性癌 醋酸棉酚 抑癌基因 E-cadherin -
醋酸棉酚致多脏器损伤一例
1病例资料患者,女,49岁,已婚,患有子宫肌瘤.因经期延长服用"富丽咛(醋酸棉酚)"治疗20 mg/d,晚饭后服用.服用3个月时出现乏力,未测血钾,服用氯化钾缓释片.服用4个月时逐渐出现周身乏力加重、食欲不振、肌肉酸痛、不能行走,伴有肢端及面部麻木、手足抽搐,并自觉心悸、胸闷.
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复方醋酸棉酚治疗围绝经期功能性子宫出血患者对血清性激素水平的影响
目的 观察复方醋酸棉酚治疗围绝经期功能性子宫出血的临床疗效.方法 选择2015年2月-2016年3月上海交通大学医学院附属同仁医院收治的72例围绝经期功能性子宫出血患者,将所有患者按随机数字表法分为两组,每组各36例.对照组患者在每晚临睡前口服10 mg米非司酮,1次/d,连续服用1个月后改为每日口服5 mg,连续服用2个月,3个月为1个疗程;观察组患者在每日晚饭后半小时给予口服复方醋酸棉酚片20 mg,1次/d,1片/次,3个月为1个疗程.观察两组患者性激素、治疗疗效和不良反应情况.结果 两组患者在治疗前性激素水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后两组患者的性激素水平均显著下降(P＜0.05),且观察组下降程度明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组患者治疗的总有效率为91.67％,对照组患者治疗的总有效率为69.44％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05),对照组患者在治疗过程中有3例患者出现恶心症状,2例患者出现头晕等症状,观察组患者中出现恶心和头晕症状各1例.两组患者在治疗过程中发生的不良反应程度都比较轻,不影响治疗.结论 复方醋酸棉酚治疗围绝经期功能性子宫出血疗效显著,不仅可有效调节患者性激素水平,且治疗的不良反应小,可在临床上推广使用.
关键词： 醋酸棉酚 围绝经期功能性子宫出血 疗效 -
气相色谱法测定醋酸棉酚中丙酮残留量
目的:建立醋酸棉酚中丙酮残留量的检测方法.方法:采用毛细管气相色谱法,以外标法计算含量.结果:线性相关系数r=0.9995;精密度RSD=1.34%;检测限为0.0658μg/ml.结论:该方法简便、可靠,适用于醋酸棉酚中丙酮残留量检测.
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低剂量醋酸棉酚联合十一酸睾丸酮、去氧孕烯和微量炔雌醇可逆抗雄性生育作用
目的:探索低剂量醋酸棉酚(GA)联合十一酸睾丸酮(TU)、去氧孕烯( DSG)和微量炔雌醇(EE)可逆抗雄性生育作用效果和优化组方.方法:成年雄性Wistar大鼠分为联合用药7周+GA组、联合用药7周组、低剂量GA组、高剂量GA组、激素组和对照组.采用交配试验、组织学形态测定分析法、病理学等方法检测服药雄性大鼠生育能力、附睾精子和睾丸的组织学改变.结果:雄性大鼠联合用药7周+GA组服药6周,不育率达100%,大鼠附睾内长形精子数量减少,90%精子头尾断裂、活力丧失;第8周开始停用激素单独以低剂量GA(12.5 mg·kg-1·d-1)可继续维持抗生育效果17周;停药第8周雄鼠全部恢复生育.结论:口服低剂量GA(15mg· kg-1·d-1为起效剂量,12. 5mg· kg-1·d-1为维持剂量)联合TU (100 mg· kg-1·d-1)、DSG(0.125mg· kg-1·d-1)和微量EE(0. 025 mg·kg-1·d-1),通过严重损伤成熟精子、影响精子形成过程和诱导精子延迟释放发挥避孕效应,抗雄性生育作用起效时间短、效果好、可逆、安全,是优化的低剂量GA联合甾体激素男用避孕药实验用药方案.
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吲哚-2,3-二酮对醋酸棉酚致生精障碍小鼠的影响
目的 观察吲哚-2,3-二酮对醋酸棉酚致雄性小鼠生精障碍模型生精功能的影响.方法 雄性昆明种小鼠分为正常对照组、模型对照组和吲哚-2,3-二酮25、50、100 mg·kg-1组(n=8).醋酸棉酚20 mg·kg-1灌胃30 d制备生精障碍模型.制模同时吲哚-2,3-二酮各剂量组灌胃给予相应剂量30 d后,观察小鼠精子、睾丸发育及生育的影响.结果 与空白对照组比较,模型对照组精子密度和活动率均降低(P＜0.01),精原细胞、初级精母细胞及精子细胞数目减少(P＜0.01);吲哚-2,3-二酮25、50、100 mg·kg-1组精子密度和活动率显著高于模型对照组(P＜0.05或P＜ 0.01),吲哚-2,3-二酮25 mg·kg-1组初级精母细胞数目增多(P＜0.05),50 mg·kg-1、100 mg·kg-1组精原细胞、初级精母细胞及精子细胞数目均增多(P＜0.01),呈剂量依赖性.模型对照组孕鼠1只,胎鼠3只;吲哚-2,3-二酮25 mg· kg-1、50 mg·kg-1和100 mg·kg-1组孕鼠分别为2、3、6只,胎鼠分别为(6.1±2.1)、(7.5±1.7)和(8.6±1.4)只.结论 吲哚-2,3-二酮可改善醋酸棉酚致雄性小鼠生精障碍模型的生精功能.
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醋酸棉酚诱导鼠前列腺癌细胞凋亡的研究
目的研究醋酸棉酚对鼠前列腺癌RM-1细胞的抑制作用和诱导凋亡作用,探讨其作用机制.方法将不同浓度的醋酸棉酚作用于鼠前列腺癌RM-1细胞,利用MTT法检测其有效作用浓度,分别采用电子显微镜及流式细胞仪观察和检测RM-1细胞凋亡和bax蛋白表达情况,RT-PCR检测mRNA表达水平变化.结果 MTT法测得其IC50值为34.56 mg/L,浓度为30mg/L的醋酸棉酚具有诱导鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡的作用,且随药物作用时间的延长,凋亡率逐渐增加,同时bax蛋白表达也逐渐增加;RT-PCR显示bax-mRNA水平逐渐升高.结论醋酸棉酚能诱导鼠前列腺癌细胞凋亡,其作用机制之一是上调bax-mRNA水平、增加bax蛋白表达,且具有时间依赖性.
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醋酸棉酚诱导人粘液表皮样癌MEC-1细胞DNA双链断裂
本文研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人粘液表皮样癌细胞MEC-1体外增殖的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制.体外培养人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞,用MTT法检测GAA对MEC-1细胞增殖的影响;用中性彗星实验检测GAA对MEC-1细胞的DNA双链断裂;用免疫荧光染色法检测GAA诱导的磷酸化组蛋白γH2AX焦点形成.结果显示,5～40 μmol/L的GAA以时间和浓度依赖方式抑制MEC-1细胞的生长;2.5～40 μmol/L的GAA作用24 h,或20 μmol/L的GAA作用3～48 h,CASP软件分析显示MEC-1彗星细胞的头部DNA百分含量减少,尾长、彗星长度、尾部DNA百分含量、尾矩和Olive尾矩增加;2.5～20 μmol/L的GAA作用24 h,或20 μmol/L的GAA作用3～48 h,γH2AX阳性细胞率随着浓度和时间的增加而增加.上述结果表明GAA抑制MEC-1细胞增殖,诱导DNA双链断裂是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一.
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醋酸棉酚阴道局部给药治疗大鼠子宫内膜异位症的疗效研究
疼痛是深部浸润型子宫内膜异位症(deep infiltrating endometriosis, DIE)的主要临床症状.虽然DIE病灶手术切除能减轻或消除患者的疼痛症状,但该病的病灶及疼痛症状又会重新复发,后导致卵巢的去势手术.
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原料药醋酸棉酚中残留苯胺含量的测定
本文开发并阐述了醋酸棉酚中残留苯胺测定的一种新的分析方法,并对此方法进行验证.该方法专属性好,线性R2=0.9991,精密度RSD%=1.64%,方法稳定性及耐用性好,检测限低,可作为醋酸棉酚中残留苯胺的质量控制方法.
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醋酸棉酚抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖
目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其可能作用机制.方法:采用MTT法检测GAA对MG-63细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达情况.结果:GAA对MG-63细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;Hoechst 33258荧光染色可观察到明显核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象;流式细胞仪检测发现细胞凋亡相关基因Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对上调.结论:GAA能够抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax实现.
关键词： 醋酸棉酚 人骨肉瘤MG-63细胞 细胞增殖
