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β-淀粉样蛋白对大鼠海马细胞内钙浓度和线粒体膜电位的影响
目的 研究β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)对SD大鼠脑海马细胞内Ca2+-ATPase、游离钙离子浓度和线粒体膜电位的影响,探讨Aβ25-35对大鼠神经毒性作用的机制.方法 将90只SD大鼠按体重随机分为6组,采用海马内注射染毒方式,剂量分别为Aβ10、5和1 μg/只组,设立生理盐水组、假手术组和正常对照组.分别于术后7、14和21 d处死实验大鼠,取海马检测神经细胞内Ca2+-ATP活力、细胞内游离钙离子浓度和线粒体膜电位的改变.结果在术后7、14和21 d时,Aβ10 μg/只组海马细胞内Ca2+-ATPase分别为(0.24±0.05)、(0.14±0.01)和(0.09±0.01)U/mg,显著低于生理盐水组(P<0.01),同时具有明显的剂量-时间依赖关系;Aβ25-35可以增高细胞内Ca2+浓度,与生理盐水组相比,差异有统计学意义(P<0.01),并且具有明显的剂量-反应关系与剂量-时间关系,差异有统计学意义(P<0.01);同时,Aβ25-35染毒组实验动物细胞内线粒体膜电位随时间延长和剂量升高而降低,差异有统计学意义(P<0.01);假手术组、生理盐水组与正常对照组之间各指标检测差异无统计学意义.结论 Aβ25-35可以通过增加细胞内钙浓度,破坏线粒体功能而发挥神经毒性作用.
关键词： Aβ25-35 Ca2+-ATPase 游离钙离子 线粒体膜电位 -
阿特拉津对小鼠淋巴细胞钙离子浓度和钙调蛋白表达的影响
目的 研究阿特拉津对小鼠脾脏淋巴细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)及钙调蛋白(CaM)表达水平的影响.方法 选用BALB/c小鼠分别以100、200和400mg/kg剂量的阿特拉津灌胃染毒,3周后处死,采用原子吸收光谱法测定血清中[Ca2+]i;脾淋巴细胞与荧光探针Fura-2/AM孵育后,用荧光分光光度法检测细胞内[Ca2+]i,蛋白印迹法观察细胞内CaM表达水平.结果 各剂量组血清中[Ca2+]i无显著变化;中、高荆量纽淋巴细胞内游离钙离子浓度显著高于阴性对照组(P＜0.01);中、高剂量组细胞内CaM的表达均显著低于阴性对照组(P＜0.01).结论 阿特拉津可致小鼠淋巴细胞内钙离子浓度升高,抑制其CaM的表达.
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丹参酚酸B盐对内皮素诱导的人肝星状细胞收缩的抑制作用及机制研究
目的 以培养的人肝星状细胞(HSC)为研究对象,观察内皮素-1(ET-1)对HSC的收缩作用及丹参酚酸B盐(SA-B)对ET-1的抑制作用,并探讨SA-B抑制HSC收缩的作用环节和可能作用机制.方法 采用酶消化、Nycodenz密度梯度离心的方法分离人HSC,以胶原凝胶收缩法观察ET-1对于传代HSC的收缩作用,以及低、中、高3种剂量的SA-B对其不同的干预作用;将ET-1、SA-B直接添加于传代HSC的无血清培养液中,以激光共聚焦显微镜技术观测HSC内钙离子浓度的变化.结果 胶原凝胶收缩实验显示,ET-1可诱导HSC收缩(尸<0.01);3种剂量的SA-B可明显抑制ET-1诱导的HSC收缩(均P<0.01);加入ET-1后,HSC形态学改变明显,细胞数量减少,但SA-B对这些改变也有抑制.激光共聚焦显微镜下观察,ET-1可刺激细胞内钙离子短暂迅速增加,加入SA-B后,该作用被明显抑制.结论 SA-B能显著抑制ET-1诱导的HSC收缩,其抑制收缩的机制与降低HSC内的钙离子浓度有关.SA-B的抑制HSC收缩作用可能是其抗肝纤维化及门脉高压的机制之一.
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川芎嗪对肺心病患者急性加重期血小板功能的影响
测定肺心病患者急性加重期血小板活性、血小板胞浆内游离钙离子及血小板表面α颗粒膜糖蛋白(GMP-140)含量[1,2]变化,观察川芎嗪对血小板活性的影响,以探讨血小板活化对肺心病形成的意义及川芎嗪的药理作用.
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培养的海马神经元致癎模型中钙离子的动力学研究
以往的研究证实,癫（疒间）发作中存在神经元内钙离子(Ca2+)超载现象,这种异常的Ca2+内流是神经元同步化放电的先决条件,同时也能触发神经元一系列病理生理改变,导致神经元损伤和可塑性的改变.我们利用培养的海马神经元致（疒间）模型,对神经元内游离钙离子([Ca2+]i)的时空分布和动力学进行研究,以探讨[Ca2+]i在NFDA4性活动中的作用.
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钙离子内流参与利妥昔单抗增强辐射诱导的Raji细胞凋亡
钙离子是细胞生命活动的重要信使，刺激B细胞受体可诱导细胞内钙库的损耗，导致质膜上调控钙库的钙通道激活。已经发现，随着游离钙离子稳态被打破以及CD20与其单克隆抗体（利妥昔单抗）偶联，可导致细胞凋亡。细胞转染CD20后，可增加钙离子通过质膜进入细胞内，证明CD20具有调节细胞周期进程和作为钙离子通道平衡细胞内外钙浓度的功能。在Ramos B细胞中，src家族蛋白酪氨酸激酶的CD20调节刺激提高了细胞内钙离子浓度，并且诱导了Caspase 3的活性。除此之外，利妥昔单抗诱导的CD20和脂筏的高亲和性是钙进入细胞和激活下游凋亡信号的先决条件，与B细胞抗原受体的表达密切相关。在淋巴瘤细胞系中，利妥昔单抗联合辐射能显著提高辐射诱导细胞凋亡，利妥昔单抗通过改变细胞程序性死亡相关蛋白的表达、提高细胞内ROS水平、调节细胞周期等提高淋巴瘤细胞的辐射敏感性。然而，钙离子是否参与辐射和CD20靶向诱导细胞死亡尚不明确。闵凤玲等的“Influx of extracellular calcium participates in rituximab-enhanced ionizing radiation-induced apoptosis in Raji cells”一文，研究了利妥昔单抗和X射线照射后，淋巴瘤细胞内钙离子水平变化与DNA双链断裂和辐射诱导细胞死亡的关系，探讨了利妥昔单抗在辐射诱导细胞死亡中的作用机制。
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蝙蝠葛酚性碱对血小板聚集的影响及其机制研究
目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对血小板聚集的影响,探讨其抗血小板聚集的作用机制.方法用比浊法测定血小板聚集度;放免法测定兔血小板内环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)的浓度;荧光探针Fura-2/AM标记测定兔血小板内游离钙离子浓度.结果体内外实验表明,PAMD对由二磷酸腺苷(ADP),花生四烯酸(AA)和凝血酶(THR)诱导的大鼠和兔血小板聚集的抑制作用具剂量或浓度依赖性;PAMD能明显升高免血小板内cAMP,cGMP的浓度,并抑制由THR诱导的血小板内游离钙离子浓度的升高.结论PAMD具有抗血小板聚集的作用,其机制可能与增加血小板内cAMP和cGMP的含量和抑制血小板[Ca2+]i浓度的升高有关.
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刺五加的心肌保护作用及其机制的研究
目的:研究刺五加对急性心肌缺血大鼠的心肌保护作用及可能机制.方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,刺五加高、中、低剂量 (100、50、25 mg/kg) 组,每组各8只.采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死模型,观察刺五加对心肌缺血的保护作用;采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记(TUNEL)法检测刺五加对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响;采用激光扫描共聚焦技术检测刺五加对细胞内游离钙离子浓度的变化.结果:高剂量刺五加可缩小心肌梗死面积(P＜0.05),改善缺血心肌的心功能,减少缺血心肌细胞凋亡(P＜0.05),对60 mmol/L KCl诱导的缺血细胞内游离钙离子浓度的升高有明显抑制作用(P＜0.05).结论:刺五加对大鼠心肌缺血具有保护作用,其机制可能是通过下调细胞内游离钙离子浓度,抑制了心肌细胞凋亡.
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丹参酮对肥厚心肌组织中钙调神经磷酸酶的影响
目的:通过腹主动脉缩窄所致心肌肥厚模型,探讨丹参酮的抗心室重构与钙调神经磷酸酶信号通路的关系.方法:SD大鼠通过腹主动脉缩窄建立高血压的心肌肥厚模型,4周后将手术大鼠分为手术组(B组),丹参酮低剂量组[C组,10 mg/(kg·d)],丹参酮高剂量组[D组,20 mg/(kg·d)]及缬沙坦组[E组,10 mg/(kg·d)],每组各8只,另有8只SD大鼠作为假手术组(A组).用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数(LVMI),病理切片HE染色测量心肌纤维直径(MFD),采用逆转录-聚合酶链式反应法检测AT1受体 mRNA表达,采用免疫印迹法检测AT1受体和CaN的蛋白表达,通过Fura-2双波长荧光法检测心肌细胞内游离Ca2+浓度.结果:与A组和E组比较,B、C、D组的血压值显著升高,差异有高度统计学意义(P＜0.01),B、C、D组间血压差异无统计学意义(P＞0.05).C、D、E组的LVMI、MFD值均高于A组,且显著低于B组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与其他各组相比,AT1受体蛋白和mRNA水平在B组中表达高,差异有高度统计学意义(P＜0.01),而C、D组间表达差异无统计学意义(P＜0.05),但均高于E组,差异有统计学意义(P＜0.05),C、D、E组的AT1受体 mRNA表达水平均未降至A组水平,差异有统计学意义(P＜0.05).B组的CaN蛋白表达水平较其他各组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),且丹参酮对其表达的干预呈剂量依赖性,D、E组间CaN蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).B组细胞内Ca2+浓度明显高于其他各组,差异有高度统计学意义(P＜0.01),但D、A组间差异无统计学意义(P＞0.05),E、C组Ca2+浓度均高于A、D组,差异有高度统计学意义(P＜0.05).结论:丹参酮可通过阻止心肌细胞的钙离子内流,减少钙调神经磷酸酶的表达,起到抑制心肌肥厚的作用.
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苦碟子总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的 研究苦碟子总黄酮(TFS)对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 按 pulsinelli 方法制成全脑缺血模型,大鼠全脑缺血 30min 后再灌注 40min.记录脑缺血前、缺血 30min 及再灌注 40min 后的脑电图(EEG),取脑组织,采用荧光指示剂 Fura-2 定量测定大鼠前脑皮层组织细胞内游离钙离子浓度,测定超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 、乳酸脱氢酶(LDH) 、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA) 、一氧化氮(NO)含量.结果 TFS 可促进缺血后 EEG 的恢复,降低缺血再灌后细胞内游离钙离子浓度的升高,抑制 SOD、GSH-Px 和 LDH 活力的下降,降低 NOS 的活力和脑组织中 MDA、NO 的含量.结论 TFS 对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用,其机制可能与其抗自由基、抑制钙超载和 NO 生成有关.
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壬基酚对雌性SD大鼠脾脏及脾淋巴细胞损伤作用的研究
目的 研究环境雌激素壬基酚( nonylphenol,NP)暴露对雌性SD大鼠脾组织及脾淋巴细胞的损伤作用,探讨壬基酚对雌性大鼠免疫功能的影响.方法 将32只健康8～9周龄SPF级雌性SD大鼠按体重随机分为溶剂对照组(玉米油)和低(20 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量壬基酚染毒组,每组8只.采用灌胃方式进行染毒,灌胃容量5 ml/kg,隔天染毒1次,连续60 d.观察脾组织病理学改变.采用流式细胞仪检测脾淋巴细胞内活性氧(ROS)、游离钙离子([Ca2+]i)浓度、线粒体膜电位(MMP)水平的变化.结果 与溶剂对照组相比,中、高剂量壬基酚染毒组大鼠脾淋巴细胞内ROS水平和高剂量壬基酚染毒组脾淋巴细胞内[Ca2+]i水平明显升高,高剂量壬基酚染毒组脾淋巴细胞内MMP水平明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).且脾淋巴细胞内ROS、[Ca2+]i水平与壬基酚浓度呈正相关(ROS:r=0.488,P＜0.05；[Ca2+]i:r=0.497,P＜0.05),MMP水平与壬基酚浓度呈负相关(r=-0.565,P＜0.05).病理学检查可见,中、高剂量壬基酚染毒组脾脏白髓减少,脾窦内血管扩张充血.结论 壬基酚对雌性大鼠脾脏及脾淋巴细胞具有一定的毒性作用,并可引起免疫功能损伤.
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海马内注射淀粉样蛋白对大鼠海马细胞内钙稳态的影响
目的 研究海马内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)对大鼠海马细胞内钙稳态的影响.方法 将30只成年清洁级SD雄性大鼠按体重随机分为6组,每组5只.采用海马内注射方式染毒Aβ25～35,剂量分别为10、5、lμg/只,设立生理盐水组、假手术组和正常对照组.于术后14d,检测大鼠海马Ca2+-ATPase的活力及海马细胞内游离钙离子的浓度和海马内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平.结果 与生理盐水组相比,各Aβ25～35染毒组大鼠海马Ca2+-ATPase活力均降低,5、10μg Aβ25～35染毒组大鼠海马细胞内游离钙离子浓度和各Aβ25～35染毒组大鼠海马细胞内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)；且随着Aβ25～35染毒量的升高,大鼠海马Ca2+-ATPase活力呈下降趋势,海马细胞内游离钙离子的浓度和海马内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平均呈上升趋势.而假手术组、生理盐水组与正常对照组大鼠海马以上4个指标间比较,差异均无统计学意义.结论 Aβ25～35可以通过破坏大鼠海马细胞内钙稳态而发挥神经毒性作用.
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壬基酚对雄性大鼠精子功能的影响及其可能机制
目的 观察环境雌激素壬基酚(nonylphenol,NP)对成年雄性大鼠附睾精子功能的影响,并探讨其毒作用机制.方法 将32只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为溶剂对照(玉米油)组和低(40 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高剂量(250mg/kg)壬基酚染毒组,每组8只.从大鼠12周龄开始,采取隔天灌胃方式进行染毒,染毒容量为1.5 ml/kg,连续染毒90 d.观察睾丸组织形态学改变,分别采用活细胞工作站、流式细胞仪和改良Kennedy法检测附睾尾精子的活动度、顶体完整性、线粒体膜电位(MMP)及顶体酶活力等精子功能指标.结果 与溶剂对照组比较,中、高剂量壬基酚染毒组大鼠精子活动度均降低、顶体不完整型活精子占全部精子的百分比[(PI-/PNA+)％]明显升高,高剂量壬基酚染毒组精子的顶体酶活力下降、高线粒体膜电位精子占全部精子的百分比(hMMP％)降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);而各剂量壬基酚染毒组大鼠精子存活率和精子[Ca2+]i水平均无明显变化.且随着壬基酚染毒剂量的升高,精子顶体完整性和顶体酶活力及精子MMP和[Ca2+]i的水平均呈逐渐降低的趋势.病理学检查可见,中、高剂量组睾丸部分曲细精管萎缩、管间隙增大,生精细胞层变薄、结构排列紊乱.结论 壬基酚对大鼠睾丸和附睾具有一定的毒性作用,能破坏成年雄性大鼠精子顶体、抑制顶体酶活力、降低精子线粒体膜电位和活动度,损伤精子功能.
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针刺镇痛与中枢神经系统神经元内外游离钙离子浓度的关系
[目的]探讨针刺镇痛与中枢神经系统神经元内外游离钙离子浓度的关系.[方法]首先通过大鼠痛阈的变化,观察外源性升高中脑中央灰质(PAG)部位游离Ca2+浓度对针刺效应的影响.其次,通过实验性疼痛大鼠模型,观察疼痛刺激及针刺镇痛对PAG细胞内游离Ca2+浓度的影响.[结果]外源性升高PAG部位游离Ca2+浓度后,针刺提高大鼠痛阈的效应受到抑制.疼痛刺激使大鼠PAG部位神经元内游离Ca2+浓度显著升高,针刺镇痛则可使其明显降低.[结论]中枢神经系统神经元内游离Ca2+可能是伤害性刺激信息和针刺信息相互作用的物质基础之一.
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吲哚美辛诱导K562细胞凋亡过程中半胱天冬酶及细胞内游离钙浓度的变化
目的了解在吲哚美辛诱导的K562细胞凋亡过程中半胱天冬酶3，8的表达、活化情况及亚细胞定位；细胞内游离钙离子浓度(［fCa2+］i)变化及其机制；并探讨其凋亡调控是否依赖于环氧化酶(COX)的活性抑制。方法用共聚焦激光扫描显微镜(LSCM)观察在吲哚美辛诱导凋亡过程中K562细胞内半胱天冬酶3，8的变化及亚细胞定位，并用Western blot分析其蛋白质的表达、活化情况；用钙荧光探针结合LSCM检测K562细胞［fCa2+］i变化，并行钙螯合剂乙二醇双四乙酸(EGTA)阻断试验探讨细胞内［fCa2+］i变化的可能机制；对K562细胞加用COX抑制剂并观察细胞活力变化(MTT试验)。结果①半胱天冬酶3，8分子呈散点状分布于胞浆及胞核，在吲哚美辛诱导凋亡过程中其表达水平随吲哚美辛浓度增加而上调，Western blot分析证实其表达上调并被裂解激活。②K562细胞内［fCa2+］i随吲哚美辛浓度增高而增高；在Ca2+螯合剂EGTA阻断胞外Ca2+内流的情况下，吲哚美辛仍能诱导细胞内［fCa2+］i增高及细胞凋亡，但增高的幅度较无EGTA干预明显为低。③低浓度吲哚美辛对K562细胞活力无明显影响，高浓度则明显抑制细胞活力。结论①半胱天冬酶3，8的表达上调和裂解激活是吲哚美辛诱导K562细胞凋亡的重要机制；活化的半胱天冬酶3，8呈弥漫性散点状分布于胞浆和胞核。②细胞内［fCa2+］i增高在吲哚美辛诱导K562细胞凋亡过程中可能起重要作用；胞外钙内流是细胞内［fCa2+］i增高的主要原因；胞内钙库释放可致［fCa2+］i浓度增高并能触发细胞凋亡。③吲哚美辛诱导的K562细胞凋亡不依赖于COX活性抑制。
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Aβ对大鼠海马细胞钙浓度和线粒体膜电位影响
目的 探讨β-淀粉样蛋白(Aβ25～35)对原代培养大鼠脑海马细胞内游离钙离子浓度和线粒体膜电位影响.方法 原代培养8d的SD大鼠脑海马神经细胞,利用老化的Aβ25 ～35 1、10和20 μmol/L对其染毒,分别观察染毒后24、48和72 h时海马细胞形态改变、细胞内游离钙离子浓度和线粒体膜电位.结果 随着染毒剂量增加,海马神经细胞开始变形、萎缩、神经元胞体模糊,突起变细、变短、分支减少,边缘模糊,神经网络破裂中断；电镜结果显示,随着染毒剂量增加和染毒时间延长,海马细胞凋亡比例增加；20 μmol/L Aβ25～35染毒24、48和72 h后,细胞内Ca2+浓度分别为(30.79±1.28)、(38.19±2.13)和(41.65±3.60),细胞内线粒体膜电位分别为(46.94±9.55)、(39.98±6.51)和(34.52±5.67),与对照组比较,Ca2+浓度均升高,膜电位均降低(P＜0.01).结论 Aβ25～ 35可以通过破坏细胞内钙稳态和线粒体膜电位而发挥神经毒性作用.
关键词： β-淀粉样蛋白(Aβ25～35) 线粒体 游离钙离子 膜电位 -
丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究
目的 观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate,TSN) 对腹主动脉缩窄高血压大鼠肥厚心肌的作用以及对细胞内游离钙离子浓度、Janus激酶及其信号转导子和激活子(JAK/STAT)的影响.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,随机分为心肌肥厚组(n=8)、丹参酮ⅡA组(n=8)和缬沙坦组(n=8);另取8只行假手术.用药8周后通过超声心动图测定左室后壁、室间隔的厚度;测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)和左室质量指数(LVMI);HE染色检测心肌细胞的直径(MDF);激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化;Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达.结果 ①TSN对血压没有影响,显著高于假手术组和缬沙坦组(P<0.01).②TSN组和缬沙坦组的左室后壁、室间隔厚度、LVMI、MFD虽然高于假手术组(P<0.05),却显著低于手术组(P<0.01).③TSN与缬沙坦均可显著降低肥厚心肌的[Ca2+]i,丹参酮对[Ca2+]i 的影响显著超过缬沙坦(P<0.05).④与假手术组相比,肥厚心肌的JAK1和STAT3蛋白表达显著升高(P﹤0.05);丹参酮ⅡA、缬沙坦均可显著降低肥厚心肌JAK1和STAT3的蛋白水平.结论 JAK/STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用;丹参酮ⅡA可能是通过降低心肌细胞[Ca2+]i浓度、阻滞JAK/STAT信号通路的转导,起到抑制心肌肥厚的作用.
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丹参酮ⅡA对高血压肥厚心肌细胞游离钙离子及一氧化氮合酶基因表达的影响
目的 通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄的高血压大鼠肥厚心肌血管紧张肽Ⅱ受体(ATR)基因表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,术后4周将手术大鼠随机分为假手术组(A组)、手术组(B组)、丹参酮低剂量组(C组,10 mg·kg-1·d-1腹腔注射)、丹参酮高剂量组(D组,20 mg·kg-1·d-1腹腔注射)及缬沙坦组(E组,10mg·kg-1·d-1灌胃).用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数(LCMI)、病理切片HE染色测量心肌纤维直径(MFD);采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分别检测AT1受体mRNA和蛋白的表达水平.利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化.结果 ①c、D组的血压[(188±11、187±14)mm Hg]显著高于A、E组[Vs(117±8、136±15)EtlIn Hg,P＜0.01],C、D组与B组[(186±13)mm Hg]之间差异无统计学意义(P＞0.05).②C、D组和E组的LVMI、MFD均高于A组(P＜0.05),显著低于B组(P＜0.01).③B组的ATlR mRNA和蛋白的表达显著高于其他各组(P＜0.01);C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于E组(P＜0.05);C、D、E组的AT1R基因表达均未降至A组水平(P＜0.05).④B组细胞内[ca2+]i明显高于其他各组(P＜0.01);D组与A组之间差异无统计学意义(P＞0.05);E组和C组仍高于A、D组(P＜0.05).结论 丹参酮ⅡA可通过下调心肌细胞AT1基因表达、阻止心肌细胞的钙离子内流发挥逆转心肌肥厚的作用,该作用是非血压依从性的.
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丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄大鼠肥厚心肌血管紧张肽受体及细胞内游离钙离子浓度的影响
目的 通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄的高血压大鼠肥厚心肌血管紧张肽Ⅱ受体(ATR)基因表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]I)的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,术后4周将手术大鼠随机分为假手术组(A组)、手术组(B组)、丹参酮低剂量组(C组,10 mg·kg-1·d-1腹腔注射)、丹参酮高剂量组(D组,20 mg·kg-1·d-1腹腔注射)及缬沙坦组(E组,10 mg·kg-1·d-1灌胃).用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数(LVMI)、病理切片HE染色测量心肌纤维直径(MFD);采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分别检测AT1受体mRNA和蛋白的表达水平.利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化.结果 ①C、D组血压[(188±11、187±14)mm Hg]显著高于A组、E组[vs(117±8、136±15)mm Hg,P<0.01],C、D组与B组[(186±13)mm Hg]之间差异无统计学意义(P>0.05).②C、D组和E组LVMI、MFD均高于A组(P<0.05),显著低于B组(P<0.01).③B组的AT1R mRNA和蛋白的表达显著高于其他各组(P<0.01);C、D组间无差异(P>0.05),但均高于E组(P<0.05);C、D、E组的AT1R基因表达均未降至A组水平(P<0.05).④B组细胞内[Ca2+]I明显高于其他各组(P<0.01);D组与A组之间差异无统计学意义(P>0.05);E组和C组仍高于A、D组(P<0.05).结论 丹参酮ⅡA可通过下调心肌细胞AT1基因表达、阻止心肌细胞的钙离子内流发挥逆转心肌肥厚的作用,该作用是非血压依从性的.
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机械牵张应变对人牙周膜细胞内游离钙离子浓度的影响
目的:观察机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内游离Ca2+浓度的变化.方法:体外培养HPDLCs,利用动态机械应变细胞加载装置,对1%、10%和20%应变组的细胞分别进行30、60和120min的动态牵张加载,通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca2+浓度的变化,并应用SPSS13.0软件包对数据进行方差分析.结果:当HPDLCs加载30min时,各组检测到的胞内游离Ca2+浓度与对照组无显著差异(P＞0.05);60min时,各个应变组的胞内Ca2+浓度明显升高,与对照组相比均有非常显著的差异(P＜0.01);加载时间延长到120min时,各组Ca2+浓度又降至对照组水平(P＞0.05).结论:机械牵张应变可通过钙离子信号系统影响HPDLCs的生物学活性.
