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没药倍半萜诱导的p21WAF/CIP1蛋白参与抑制前列腺癌细胞增殖
目的 探讨没药的两个倍半萜单体化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制.方法 应用细胞增殖实验噻唑蓝(MTT)法检测化合物对人前列腺癌细胞株LNCaP的影响;流式细胞术进一步分析前列腺癌细胞经化合物处理后细胞周期时相的变化;Western blot检测化合物对细胞周期相关蛋白p21WAF/CIP1(p21)和cyclin D表达的影响;利用细胞转染技术检测化合物对cyclin D启动子表达活力的影响.结果 两个没药倍半萜单体化合物对前列腺癌细胞均有显著的抑制活力,使细胞停滞于GO/G.期;且能在蛋白水平诱导p21WAF/CIP1的表达,同时降低cyclinD的表达.结论 没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞的增殖,可能是通过上调p21WAF/CIP1的表达、下调cyclinD蛋白的表达来实现的.
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卵巢癌组织中Cyclin E和Cyclin D表达水平特征及临床意义
目的 探讨细胞周期调节蛋白cyclin E和cyclin D蛋白在卵巢癌组织中的表达情况,及其与病理特征相关性.方法 采用免疫组化法检测40例正常卵巢组织、20例良性卵巢上皮肿瘤组织和40例卵巢癌组织中cyclin E和cyclin D蛋白表达水平,并与病理资料进行交叉比较.结果 cyclin E和cyclin D蛋白在卵巢癌组织、良性组织和正常组织中表达率均呈显著下降趋势(X2=26.813,X2=18.742,P＜0.05).卵巢癌组织中cyclin D蛋白阳性率随组织分级升高、淋巴转移而增高(X2=8.189,X2=14.115,P＜0.05).cyclin E蛋白随阳性率随手术病理分期、组织分级升高、淋巴转移而增高(X2=13.190,X2 =4.682,X2=9.122,P＜0.05).cyclin E和cyclin D表达正相关(r=0.038,P＜0.01).结论 cyclin E和cyclinD均参与了卵巢癌的发生,且与卵巢癌的发展具有相关性并可能起到了协同作用.
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电离辐射对胸腺细胞及脾细胞p16、CyclinD1、CDK4蛋白表达的影响
目的研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinDl及CDK4蛋白表达的影响.方法采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化.结果时效实验证实,2.0 Gy X射线全身照射后8,24及48 h,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高(分别P＜0.05、P＜0.0l及P＜0.05);照射后24 h,脾细胞p16蛋白表达显著增高(P＜0.05).然而,照射后8～24 h,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P＜0.05～P＜0.01);照射后8～72 h,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P＜0.05～P＜0.01).量效实验证实,1.0,2.0及4.0Gy全身照射后24 h,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高(P＜0.05～P＜0.01).然而,2.0 Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P＜0.05);0.5～6.0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P＜0.05～P＜0.01).研究还发现,胸腺细胞及脾细胞中CyclinDl蛋白表达于照射后均明显降低.结论电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高.p16-CyclinD1/CDK4通路可能在X射线诱导胸腺细胞G1期阻滞中起重要作用.
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乳腺癌新辅助化疗与Cyclin A1、CyclinD、ki-67表达水平的关系
目的 通过研究Cyclin A1、CyclinD在乳腺癌患者新辅助化疗前后的相关性,探索CyclinA1、CyclinD表达及相关性在乳腺癌新辅助化疗中的意义.方法 收集河南省肿瘤医院2008年8月—2011年7月收治的行TEC/PEC新辅助化疗的乳腺癌患者的临床及病理学信息,并对对应的石蜡标本进行Cyclin A1、CyclinD的免疫组化化学染色,采用秩和检验和Spearman相关性分析Cyclin A1、CyclinD表达的相关性,及预后的影响,并进行亚组分析.结果 在204例接受新辅助化疗的患者中,在CR或PR组中,在化疗前后CyclinA1、CyclinD的表达具有显著差异,化疗前后Cyclin A1/Ki67、CyclinD/Ki67具有显著差异,但新辅助患者的生存时间与化疗前后Cy-clin A1/Ki67、CyclinD/Ki67差值无相关性.结论 新辅助化疗前后的Cyclin A1、CyclinD可作为明确乳腺癌新辅助疗效及药物敏感性的参考数据,但与患者生存无关.
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CyclinD(-/-)/Patched(+/-)双基因敲除鼠的构建
目的 构建CycD(-/-)/Ptc(+/-)双基因敲除鼠以验证Hh传导系统与Rb系统的关系.方法 应用已有的杂合子CycD基因敲除鼠CycD(+/-)与杂合子Ptc基因敲除鼠Ptc(+/-)进行交配繁殖,得到双基因杂合子敲除鼠CycD(+/-)/Ptc(+/-),再利用该双基因杂合子敲除鼠进行二次交配繁殖,得到实验组CycD(-/-)/Ptc(+/-)双基因敲除鼠.结果 实验得到了双基因敲除鼠CycD(-/-)/Ptc(+/-)、双基因杂合子基因敲除鼠CycD(+/-)/ptc(+/-)、cycD单基因敲除鼠CycD(-/-)/Ptc(+/+).结论 通过本实验方法得到CycD(-/-)/Ptc(+/-)双基因敲除鼠,可用于进一步揭示Ptc基因与CycD基因相互影响调控的作用及Hedgehog与Rb信号传导通路在哺乳动物中的相关性.
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Livin阳性乳腺癌中细胞周期调控相关蛋白的变化
目的 探讨Livin阳性乳腺癌中细胞周期调控相关蛋白的变化,以初步明确Livin对细胞周期调控相关蛋白的影响.方法 采用免疫组化SP法检测Livin在45例乳腺癌中的表达,利用Western blot法检测45例乳腺癌中Cyclin D、Cyclin A、CyclinE的表达.结果 45例乳腺癌中Livin阳性率为75.56％ (34/45).Livin阳性乳腺癌中,Cyclin A的阳性率为88.23％(30/34),而在Livin阴性乳腺癌中,Cyclin A的阳性率为54.55％ (6/11),差异有统计学意义(P＜0.05);Livin阳性乳腺癌中,CyclinD的阳性率为61.76％ (21/34),而Livin阴性乳腺癌中,Cyclin D的阳性率为81.82％ (9/11),差异无统计学意义(P＞0.05);在Livin阳性乳腺癌中,Cyclin E的阳性率为82.35％ (28/34),而在Livin阴性乳腺癌中,Cyclin E的阳性率为45.46％ (5/11),差异有统计学意义(P＜0.05).乳腺癌组织中Livin与Cyclin A、Cyclin E蛋白表达显著相关(P＜0.05).结论 Livin蛋白在乳腺癌中表达上调,提示其可能在促进乳腺癌发生、发展中起重要作用.Livin表达可导致Cyclin A和Cyclin E表达上调,而对Cyclin D表达作用不明显,提示Livin除了抗细胞凋亡作用外,还可能通过引起细胞周期调控紊乱促进乳腺癌的发生、发展.
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人参皂苷Rg1抗衰老作用可能与改变p16、cyclin D、CDK4的表达有关
目的:探讨人参皂苷Rg1对抗三丁基过氧化氢 (t-BHP)诱导的WI-38细胞衰老作用及其可能细胞周期调控机制.方法:将WI-38细胞随机分为4组,用不同剂量Rg1预处理.从30代开始,隔代用t-BHP作用,每次 1 h,共4次,诱导细胞衰老.从光镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构;流式细胞术分析G1期细胞比例;以及SA-β-半乳糖苷酶的细胞化学染色,确定Rg1的抗衰老作用.并采用免疫印迹技术对CDK4、cyclin D1和p16等表达情况进行检测.结果:Rg1预处理组与单纯t-BHP处理组相比,细胞形态体积小、胞体不如后者扁平,次级溶酶体减少,G1期细胞比例下降,SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞百分比下降,说明Rg1在t-BHP诱导细胞衰老模型中有抗衰老作用.进一步发现用Rg1预处理后,p16、cyclin D1表达水平降低、CDK4表达水平增加.结论:提示Rg1可能通过改变细胞周期调控因子的表达而发挥其抗t-BHP诱导的WI-38细胞衰老作用.
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丁酸钠和曲古抑菌素A促进K562细胞分化机制的研究及其对比
目的探讨丁酸钠与曲古抑菌素A(TSA)促进K562细胞分化的机制,并对比二者的异同.方法台盼蓝拒染实验观察药物对细胞生长曲线的影响;四氮唑盐还原试验和细胞表面分化抗原检测观察药物对细胞的分化作用;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR和Western Blot分别检察细胞周期蛋白在mRNA和蛋白质水平的表达.结果丁酸钠和TSA分别将细胞主要阻滞于G0/G1期和G2期;丁酸钠下调cyclin D1 mRNA的水平基本上不影响其蛋白质的表达,上调cyclin D3蛋白质表达水平基本上不影响其mRNA的水平;TSA与丁酸钠的作用相同;二者均可以在mRNA和蛋白质水平刺激K562细胞p21的表达.结论丁酸钠和TSA促进K562的分化是通过诱导p21和cyclinD3蛋白质的表达而完成的,丁酸钠和TSA均有望成为治疗慢性髓系白血病的药物.
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腹腔镜手术对胆囊癌患者血清E-cadherin、β-catenin和cyclin D影响和预后分析
探讨腹腔镜手术对胆囊癌患者血清上皮钙粘蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)和G/S-特异性周期蛋白-D(Cyclin D)的影响和预后分析.方法:选取201 6年1～12月汉中市人民医院收治的80例胆囊癌患者,按数字随机法分为观察组(40例,行腹腔镜胆囊切除术)和对照组(40例,行开腹胆囊癌根治术).比较两组患者疗效及手术前后血清E-cadherin、β-catenin和cyclinD水平变化.对照组和观察组患者术后血清E-cadherin水平上升,β-catenin和cyclin D水平下降,观察组术后血清E-cadherin水平上升更为明显,β-catenin和cyclin D水平下降更为明显(P＜0.05)与对照组相比,观察组患者术后切口长度、手术时间、术中出血量、术后排气时间明显减少,术后住院时间和卧床时间明显缩短,术后切口感染、胆囊窝积液、胆囊漏和肺部感染等并发症明显减少(P＜0.05).两组术后随访1年,患者生存率和复发率差异无统计学意义(P＞0.05).腹腔镜手术治疗胆囊癌创伤小,并发症少,能够有效改善患者体内E-cadherin、β-catenin和cyclinD水平.
关键词： 胆囊癌 腹腔镜手术 E-cadherin β-catenin cyclin D -
参附注射液对前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期蛋白表达的影响
目的 研究参附注射液(SF)对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及可能机制.方法 实验设立空白对照组和参附注射液不同浓度组,用MTT方法检测细胞增殖,碘化丙碇(PI)染色流式细胞术检测细胞周期分布,RT-qPCR检测细胞周期蛋白Cyclin D、Cyclin E mRNA的表达.结果 与空白对照组比较,作用24,48,72 h后,参附注射液100μL/mL对PC-3细胞均有明显的增殖抑制作用(P＜0.05),细胞增殖指数下降,Cyclin D、Cyclin E mRNA的表达量均明显降低(P＜0.05).结论 参附注射液可以抑制PC-3细胞增殖,作用机制可能与降低Cyclin D、Cyclin E mRNA表达相关.
