首页 > 文献资料
-
喜树碱(CPT)诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡及其机制的研究
目的 测定不同浓度的喜树碱(CPT)对前列腺癌PC-3细胞的促凋亡作用,并进一步探讨其促凋亡机制.方法 人前列腺癌PC-3细胞,加入不同浓度的CPT(10 ～ 100 μmol/L),继续培养24 h.采用形态学观察及MTT方法检测细胞增殖,流式细胞仪测细胞早期凋亡率.Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和PARP的表达.结果 形态学观察及MTT试验显示,不同浓度的CPT可导致PC-3细胞形态改变,并对其生长有明显抑制作用,具有剂量依赖性,其IC50为23.25 μmol/L;细胞凋亡检测表明不同浓度的CPT可使早期凋亡比率增加.Western blot结果显示,不同浓度CPT可使PC-3细胞Bcl-2蛋白表达降低,而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白,89-kDa PRPP蛋白表达增加且呈剂量依赖性.结论 CPT可以诱导PC-3细胞凋亡,其作用机制可能为激活Caspase依赖途径,并活化其作用底物PARP来实现.
-
番茄红素对前列腺癌细胞PC-3增殖和细胞周期的影响
目的 研究番茄红素对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3的抑制作用及其可能的作用机制.方法 采用MTT法和H3-TdR掺入法观察番茄红素对癌细胞增殖的影响,流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化,RT-PCR检测cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达的变化.结果 番茄红素抑制PC-3细胞的增殖和DNA合成、诱导其凋亡、改变细胞周期分布(使C0/G1期细胞增多、而S期和G2/M期细胞减少).RT-PCR结果显示,cyclin D1和bcl-2的mRNA表达水平下调,而bax的mRNA表达水平上调.上述作用呈剂量效应关系.结论 番茄红素可诱导PC-3细胞凋亡、改变细胞周期分布、影响cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖.
-
丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响
目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125～ 16 μmol·L-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析.结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P ＜0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P＜0.05).结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用.
-
壁虎醇提物体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡及机制研究
目的:研究壁虎醇提物(GAE)体外诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡作用及其可能机制,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据.方法:以前列腺癌PC-3细胞为研究对象,MTT法检测3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L-1GAE作用细胞24,48,72 h后对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用;3.5,4.0,5.0 g·L-1的GAE作用48 h后,另设空白组,Hoeehst33342荧光染色法,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,SP免疫组化法检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)和Fas的表达情况并做统计学处理.结果:3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L-1 GAE作用细胞24,48,72 h后能显著抑制PC-3细胞的生长且呈剂量和时间依赖性;与空白组比较,3.5,4.0,5.0 g·L-1的GAE作用48 h后Hoeehst33342荧光染色发现部分PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测显示3.5,4.0,5.0 g·L-1的GAE作用48 h后,早期凋亡细胞分别占6.51％,12.48％和22.81％,且免疫组化显示细胞内蛋白Caspase-3和Fas的表达均上调且呈浓度依赖性(P＜0.05).结论:GAE能够诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与死亡受体介导的信号通路有关.
-
补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响
目的:通过体外细胞实验研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖的干预作用及其机制.方法:首先按照血清药理学方法, 给予SD大鼠连续灌胃用药7 d, 取血制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清;然后以人前列腺癌细胞PC-3为模型研究补肾抑瘤汤含药血清对前列腺癌细胞增殖及Notch1/Jagged1信号通路的影响, 噻唑蓝 (MTT) 比色法检测补肾抑瘤汤含药血清 (2.5％, 5％, 10％, 15％) 处理PC-3细胞后不同时间点 (12, 24, 36 h) 的细胞增殖情况, 分别应用逆转录-聚合酶链式反应 (RTPCR) 及蛋白免疫印迹法 (Western blot) 分析补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1, Jagged1 mRNA和蛋白表达的影响.结果:与空白组比较, 经补肾抑瘤汤含药血清处理12, 24, 36 h后, PC-3细胞增殖受到了不同程度的抑制, 其中以36 h的抑制作用为显著 (P＜0.01);补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1, Jagged1 mRNA和蛋白表达均有抑制作用, 尤其是补肾抑瘤汤10％, 15％含药血清组抑制效果明显 (P＜0.05, P＜0.01) .结论:补肾抑瘤汤含药血清能明显抑制PC-3细胞增殖, 作用可能与调控Notch1/Jagged1表达有一定相关性.
-
前列消癥汤对前列腺癌PC-3细胞PI3K/Akt信号通路表达的影响
目的:观察前列消癥汤(QLXZT)对前列腺癌(PCa)PC-3细胞PI3K/Akt信号通路影响.方法:制备含药血清,培养PC-3细胞24 h,Western Blot、PCR检测QLXZT对PI3K通路上下游分子表达影响.结果:(1)QLXZT各组p-Akt、mTOR及NF-κB蛋白水平下降,而PTEN蛋白水平升高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);(2)QLXZT各组mTOR、RelA基因表达被抑制,PTEN基因表达增强,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:QLXZT能下调Akt、mTOR和NF-κB表达,上调PTEN表达,这可能是治疗PCa的分子机制.
关键词： 前列消癥汤 PC-3细胞 含药血清 PI3K/Akt通路 -
灰黄霉素对人前列腺癌PC-3细胞体内外作用的实验研究
目的 探讨灰黄霉素在体内外对人前列腺癌PC-3细胞抗肿瘤作用的可能机制.方法 不同浓度(0、5、10、15、20、25 μg/ml)的灰黄霉素作用于PC-3细胞48 h,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞活率;荧光显微镜下观察细胞形态变化;膜联蛋白5-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双标记染色法检测PC-3细胞的凋亡;比色法检测Caspase-3、8、9活性变化.采用灰黄霉素对PC-3细胞BALB/C荷瘤裸鼠瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,12d后免疫组化法检测Bcl-2、Bax、p53和Survivin的表达.结果 灰黄霉素能抑制PC-3细胞增殖,半数抑制率浓度为(18.17±2.10) μg/ml;镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变.15 μg/ml灰黄霉素处理组PC-3细胞凋亡率(31.37±2.93)％,与对照组(2.89±0.67)％比较差异有统计学意义(P＜0.01).15μg/ml灰黄霉素处理组PC-3细胞caspase3、8、9的活性分别为0.562±0.050、0.337±0.053和0.293±0.038,对照组分别为0.113±0.014、0.120±0.017和0.109±0.018,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).肿瘤接种后第23天,灰黄霉素组移植瘤体积为( 961.17±78.12) mm3,移植瘤质量为( 742.50±78.63) mg,对照组为( 1732.96±120.73) mm3,(1387.33±71.47)mg,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).灰黄霉素组Bcl-2、Bax、p53和Survivin蛋白表达阳性率分别为(16.10±3.45)％、(39.50±6.88)％、( 48.20±8.04)％和( 16.50±2.22)％,对照组分别为(41.30±3.95)％、(13.70±2.98)％、(17.60±3.21)％和(52.11±6.28)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 灰黄霉素能抑制前列腺癌PC-3细胞的生长,诱导PC-3细胞凋亡并抑制PC-3细胞的动物体内致瘤能力.
-
SLP-2对前列腺癌PC-3细胞增殖和早期凋亡的影响
目的 探讨SLP-2(stomatin-like protein 2)基因对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 合成和构建SLP-2沉默和过表达载体,用LipofectamineTM 2000分别转染5组人前列腺癌PC-3细胞:pcDNA3.1-SLP-2组,空质粒pcDNA3.1组,siRNA-SLP-2组,siRNA阴性对照组以及空白对照组.采用Q-PCR和Western-Blot分别检测PC-3细胞中SLP-2的mRNA和蛋白表达量;用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测PC-3细胞增殖;采用细胞线粒体膜电位JC-1试剂盒检测PC-3细胞的早期凋亡情况.结果 转染pcDNA3.1-SLP-2质粒和siRNA-SLP-2后PC-3细胞SLP-2基因mRNA表达水平分别为(324.884± 16.508)和(0.195±0.016),蛋白表达水平分别为(5.013±0.284)和(0.296±0.011),与空白对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);转染pcDNA3.I-SLP-2基因48 h、72 h、96 h后PC-3细胞增殖吸光度值(OD值)分别为(0.714±0.007)、(1.103±0.018)、(1.348±0.018),均显著高于空白对照组(P＜0.05).采用siRNA沉默SLP-2基因48 h、72 h、96 h后PC-3细胞增殖率分别为(0.571±0.004)、(0.875±0.010)、(1.044±0.008),均显著低于空白对照组(P＜0.05);细胞凋亡结果显示,转染pcDNA3.1-SLP-2和siRNA-SLP-2的PC-3细胞早期凋亡率分别为(2.433 ±0.577)和(9.197±0.602),与空白对照组(4.993±0.710)相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SLP-2可促进人前列腺癌PC-3细胞的增殖,并抑制细胞的早期凋亡.
-
前列腺癌组织PPAR-γ及其配体表达和作用机制的研究
目的:研究人前列腺癌组织及前列腺癌细胞中PPAR-γ的表达及其配体曲格列酮对前列腺癌细胞生长的影响,探讨曲格列酮抑制前列腺癌的机制.方法:免疫组化法检测成人前列腺组织、前列腺增生组织和前列腺癌组织PPAR-γ蛋白表达.不同浓度的曲格列酮处理人前列腺癌PC-3细胞,采用MTT法观察细胞增殖抑制作用；Annexin V/PI法流式细胞仪检测细胞凋亡；免疫组化法检测前列腺癌细胞PPAR-γ蛋白表达.结果:PPAR-γ在前列腺癌组织中的表达高于成人前列腺组织和前列腺增生组织；PPAR-γ的表达与细胞分化程度、TNM分期有密切关系.PC-3细胞存在PPAR γ表达,曲格列酮作用PC-3细胞后PPAR-γ表达呈剂量依赖性上调趋势:曲格列酮对PC-3细胞增殖有明显的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性；曲格列酮呈剂量依赖性加速细胞凋亡.结论:PPAR-γ表达与前列腺癌的临床病理特征密切相关.曲格列酮通过激活PPAR-γ能在体外抑制肿瘤细胞生长并诱导其凋亡,提示PPARγ可能是前列腺癌治疗的一个新的分子靶点.
-
HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响
目的 研究HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响.方法 构建靶向HIP1的shRNA表达载体pSilence-shHIP1,应用脂质体转染到PC-3细胞,RT-PCR检测HIP1基因沉默效果,Western blotting确认有效作用靶点.通过细胞划痕实验和细胞生长曲线研究HIP1基因对PC-3细胞增殖的影响.结果 转染PC-3细胞后,沉默HIP1基因效率达83％(P＜0.01); Western blotting证实该基因片段为抑制HIP1的有效作用靶点.细胞划痕实验和生长曲线显示HIP1基因沉默可抑制PC-3细胞的增殖.结论 pSilence-shHIP1表达载体可特异性地抑制HIP1基因的表达,沉默HIP1基因可抑制PC-3细胞增殖和迁移.
-
叶酸介导表没食子儿茶素没食子酸白蛋白纳米粒的制备及其体外靶向性与活性评价
研究能主动靶向于前列腺癌细胞PC.3的表没食子儿茶素没食子酸(EGCG)白蛋白(BSA)纳米粒的制备工艺与体外靶向性和活性评价.去溶剂法制备叶酸介导EGCG白蛋白纳米粒(FA-EGCG-BSANP),采用原子力显微镜(AFM)观察纳米粒形状和粒径,HPLC测定EGCG的载药量和包封率,紫外分光光度法测定叶酸偶联量.以激光共聚焦和荧光分光光度计测定FA-EGCG-BSANP对PC-3细胞的靶向性,用MTT法测定其体外活性.所得FA-EGCG-BSANP的平均粒径为200nm左右,分布均匀;EGCG的包封率可达(8115±1.8)%,载药量为(29.3±0.6)%,叶酸偶联量为18.363μg·mg-1BSA;PC-3细胞对FA-EGCG-BSANP的摄取量为EGCG-BSANP的23.65倍.并且呈现较强的浓度依赖性;同等浓度下FA-EGCG-BSANP对PC-3细胞的抑制率为82.8%,而EGCG溶液和EGCG-BSANP分别为58.6%和55.1%,并且抑制率与PC-3细胞对这些纳米粒的摄取能力呈正相关.FA-EGCG-BSANP能明显提高EGCG对PC-3细胞的靶向效果,并提高了对细胞的致死作用,从而提高了EGCG作为一种潜在抗癌药物的治疗效果,为进一步探索该纳米粒在体内的靶向性、活性和代谢规律提供了实验基础.
-
藤苦参素的体外抗肿瘤活性及其对癌细胞凋亡的作用
藤苦参(Streptocaulon griffithii Hook.f.)系萝摩科(Asclepiadaceae)马连鞍属(Streptocaulon Wight et Arn.)植物马连鞍的干燥根,又名古羊藤、南苦参、有毛老鸦嘴、虎阴藤、红藤、地苦参、小暗消、哈骂醒合(傣语)、哈骂不果(哈语)等,产于我国广西、贵州、云南等地[1].藤苦参为傣药经方雅叫哈顿散中的主治药之一,雅叫哈顿散已被中国药典2005版(一部)收载.张琳等[2]研究了藤苦参的化学成分,未见有关藤苦参药理作用的研究报道.文献资料表明,藤苦参的同属植物多具有抗肿瘤作用[3～5].本实验对从藤苦参中分离得到的藤苦参素的体外抗肿瘤活性及其对癌细胞凋亡的作用进行研究.
-
姜黄素对前列腺癌PC-3细胞热休克蛋白27表达的影响
目的：探讨姜黄素对前列腺癌PC-3细胞热休克蛋白27（HSP27）表达的影响。方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞，随机将其分为4组，空白对照组不给药；大剂量组给予50μmol/L姜黄素2μl；小剂量组给予25μmol/L姜黄素2μl；阴性对照组给予等体积二甲基亚砜（DMSO）。采用免疫荧光染色检测PC-3细胞HSP27的表达情况，采用RT-PCR检测PC-3细胞HSP27 mRNA的表达情况。结果免疫荧光染色结果显示，姜黄素治疗组PC-3细胞HSP27染色强度明显低于空白对照组和阴性对照组，并且大剂量组 HSP27染色强度降低更加明显，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。RT-PCR分析结果显示，姜黄素治疗组PC-3细胞HSP27 mRNA的表达明显降低（50%和60%），且呈剂量依赖性，与空白对照组比较（128%），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论姜黄素可抑制PC-3细胞HSP27的表达，可能是其抗前列腺癌的机制之一。
-
前列通片抑制肿瘤细胞生长作用的实验研究
目的 研究前列通片对前列腺癌的体内和体外抑制效果.方法 选用3株前列腺癌肿瘤细胞对前列通片含药血清进行体外抑瘤试验.根据体外试验筛选PC-3细胞株,制作80只的PC-3荷瘤裸鼠.筛选肿瘤直径约100 mm,相对均一的50只荷瘤裸鼠,随机分为模型(溶媒)对照组、阳性对照组、前列通低、中、高剂量组,10只/组.每只动物按照20 mL/kg体积灌胃给药,1次/d,连续32 d.结果 体外筛选:前列通片含药血清(浓度为20%,10%,5%)对PC-3细胞存活率分别为47.6%、87.2%、112.9%;对22 RV1细胞的存活率分别为90.9%、89.6%、85.3%,对DU145细胞的存活率分别为82.7%、106.3%、100.4%.体内实验:与模型对照组比较,前列通片低剂量组肿瘤重量未见显著降低,肿瘤生长抑制率18.5%,前列通片中、高剂量组及阳性对照组肿瘤重量显著降低(P<0.05),肿瘤生长抑制率分别为40.3%、23.8%、62.6%.结论 在本实验条件下,前列通片含药血清对PC-3细胞抑制效果较为明显.2.04 g/kg的前列通片对PC-3前列腺癌裸鼠移植瘤有一定的抑制作用.
-
硫化氢抑制前列腺癌骨转移PC-3细胞增殖和侵袭的体外研究
目的 探讨硫化氢对前列腺癌骨转移PC-3细胞增殖和侵袭的影响及其可能机制.方法 分别用0、1、2、4 mmol/LNaHS(硫化氢载体)作用前列腺癌骨转移PC-3细胞36 h,CCK-8比色法法检测细胞存活率,transwell法检测细胞侵袭能力,ELISA法检测细胞MMP-2和MMP-9分泌能力,Western-Blot法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 硫化氢对PC-3细胞生长的影响:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1.0 mmol/L NaHS组细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,细胞存活率降低,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞的生长,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).硫化氢对PC-3细胞侵袭的影响:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1 mmol/L NaHS组细胞侵袭数与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,细胞侵袭数减少,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞的侵袭,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).ELISA法检测PC-3细胞MMP-2和MMP-9分泌能力:用硫化氢孵育PC-3细胞36 h,1 mmol/L NaHS组细胞MMP-2和MMP-9分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);2、4 mmol/L NaHS作用PC-3细胞36 h,MMP-2和MMP-9分泌量减少,与对照组比较,能不同程度抑制PC-3细胞MMP-2和MMP-9的分泌,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜ 0.01).Western blot检测PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白表达:1、2、4 mmol/L NaHS组,Bcl-2表达降低,Bax表达升高,呈浓度依赖性.结论 2 mmol/L浓度以上的NaHS能影响Bcl-2和Bax表达和MMP-2 MMP-9分泌来抑制PC-3细胞的生长和侵袭.
-
昆布多糖硫酸酯对非激素依赖型人前列腺癌PC-3细胞及bcl-2、caspase-3基因表达的影响
目的 研究昆布多糖硫酸酯(LAMS)对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌PC-3细胞株的作用.以及对bcl-2和caspase-3基因表达的影响.探讨其抗肿瘤的作用机制.方法 分别用0、50、100、200μg/mL.LAMS作用于Pc-3细胞.用WST-8法检测细胞生长的抑制作用,利用流式细胞术(FCM)分析细胞周期和凋亡的变化,用荧光显微镜观察PC-3细胞形态,RT-PCR和Western blotting检测细胞增殖、凋亡相关基因bcl-2和caspase-3mRNA及蛋白的表达.结果 LAMS能抑制PC-3细胞的增殖,呈时间-剂量效应;不同质量浓度LAMS诱导PC-3细胞出现剂量依赖性S+G_2期阻滞;LAMS作用于PC-3细胞后出现凋亡的形态学改变,LAMS对PC-3细胞bcl-2 mRNA和蛋白表达均呈剂量依赖性减弱,对PC-3细胞caspase-3 mRNA和蛋白表达均呈剂量依赖性增强.结论 LAMS能抑制体外PC-3细胞的生长,并促进其S+G_2期阻滞和凋亡,LAMS影响PC-3细胞相关基因蚩白的表达,可能足其抑制前列腺癌的作用机制之一.
-
前列腺癌组织中cripto-1的表达变化及意义
目的 探讨前列腺癌组织中cripto-1的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学实验检测110例前列腺癌组织及20例癌旁组织标本中cripto-1蛋白表达情况,Western blot和qPCR分别检测20例前列腺癌及其配对癌旁组织中cripto-1蛋白及mRNA表达水平并且分析cripto-1表达与前列腺癌患者的临床病理特征之间的关系.结果 cripto-1在前列腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);血清前列腺特异性抗原水平高、Gleason评分高、临床分期晚、有淋巴结转移患者的cripto-1蛋白阳性表达率增高(P<0.05),而不同年龄、精囊侵袭及手术切缘阳性情况患者的cripto-1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05).结论 cripto-1在前列腺癌中呈高表达,可能成为前列腺癌临床治疗和预后判断的基因靶点.
-
抑制survivin表达对前列腺癌细胞pc-3凋亡的影响
[目的]研究survivin与前列腺癌的关系,探讨survivin对前列腺癌细胞pc-3凋亡的影响及其机制.[方法]运用RNA干扰技术阻断survivin在前列腺癌细胞pc-3中的表达,采用流式细胞计数等方法检测survivin被阻断后,对前列腺癌细胞pc-3凋亡的影响.[结果]阻断survivin在前列腺癌细胞pc-3中的表达后,能够引起pc-3细胞的凋亡,其机制可能是由于活化了凋亡通路的caspase-3.[结论]Survivin可以做为治疗前列腺癌的一个潜在的基因靶点.
-
KDR反义寡核苷酸对人前列腺癌PC-3细胞增殖调控的研究
目的 探讨血管内皮生长因子受体2(kinase insert domain-containing receptor,KDR)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对人前列腺癌PC-3细胞的增殖调控作用.方法 设计并合成KDR的正义、反义寡核苷酸,经脂质体介导转染人前列腺癌PC-3细胞.用噻唑盐法观察不同浓度(0.01,0.05,0.1,0.2,0.4 μmol/L)正义、反义寡核苷酸及阳离子脂质体对肿瘤细胞增殖的抑制作用,RT-PCR方法检测不同浓度(0.01,0.05,0.1,0.2,0.4 μmol/L)ASODN转染后KDR mRNA的表达情况,流式细胞仪分析细胞周期分布和细胞凋亡.结果 转染ASODN后48 h达抑制高峰,低浓度(0.01 μmol/L)即发生抑制,抑制强度与反义寡核苷酸浓度有相关性,而正义寡核苷酸和阳离子脂质体对PC-3细胞的增殖无显著影响.转染KDR反义寡核苷酸各浓度组细胞中KDR mRNA的表达都不同程度地降低,各浓度组与空白对照组相比KDR mRNA表达的差异有统计学意义.各组均出现不同程度的细胞凋亡,但各浓度组间细胞周期分布无显著性差异.结论 KDR基因在促进人前列腺癌PC-3细胞增殖中发挥着一定的作用,有望成为治疗雄激素非依赖性前列腺癌的分子靶点.
-
胡桃醌对人前列腺癌PC-3细胞抑制作用
目的 探讨胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用.方法 溴化四氮唑蓝(MTT)法检测不同剂量胡桃醌对PC-3细胞生长抑制影响；采用Annexin V-FITC/PI染色实验,流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡情况；蛋白印迹法检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量.结果 与对照组比较,12.5、25、50和100 μmol/L胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞具有抑制作用且呈剂量依赖性,抑制率分别为20.6％、39.7％、57.3％和66.2％；流式细胞仪检测胡桃醌(≥25 μmol/L)作用细胞后诱导PC-3细胞发生早期和晚期凋亡,当胡桃醌浓度为25、50和100 μmol/L时其早、晚期凋亡率分别是7.37％和2.07％、11.03％和5.8％及18.62％和8.54％,均高于对照组诱导的细胞凋亡率(P＜0.05)；随着胡桃醌浓度(≥50 μmol/L)不断增加,可上调Bax并下调Bcl-2蛋白的表达(P＜0.05).结论 胡桃醌对前列腺癌PC-3细胞具有细胞毒作用,抑制细胞生长.
