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稽留流产绒毛及蜕膜组织中Survivin及Caspase-3的表达及相关性研究
目的 探讨生存素(Survivin)及半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)在稽留流产发生中的作用及相关性,从而从细胞和分子水平进一步阐明稽留流产的发病机制.方法 采用免疫组化方法检测30例稽留流产(实验组)患者绒毛及蜕膜组织中Survivin及Caspase-3的表达,并设30例正常早孕人工流产绒毛组织作为对照组.结果 稽留流产组绒毛及蜕膜组织中Survivin的表达均低于正常早孕组,Caspase-3的表达则高于正常早孕组. 以上差异均有统计学意义(P＜0.05). 实验组的绒毛及蜕膜组织中Survivin与Caspase-3的表达均呈负相关(P＜0.05).结论 Survivin及Caspase-3的异常表达在稽留流产的发生中起重要作用.
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威灵仙水提物对阿霉素耐药的人甲状腺未分化癌细胞株HTh74Rdox的作用机制
目的:探讨威灵仙水提物对阿霉素诱导耐药的人甲状腺未分化癌细胞株HTh74Rdox增殖的影响及机制.方法:用不同浓度威灵仙水提物处理HTh74Rdox后观察细胞形态;噻唑蓝(MTT)比色法检测威灵仙水提物对HTh74Rdox细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测HTh74Rdox细胞凋亡;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及其活性片段(cleaved-Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达.结果:威灵仙水提物对HTh74Rdox细胞的增殖有明显抑制作用,联合阿霉素后可减少阿霉素剂量;威灵仙水提物可显著诱导细胞凋亡(P＜0.01);且能明显提高cleaved-Caspase-3/Caspase-3,Bax/Bcl-2(P＜0.05).结论:威灵仙水提物可以抑制HTh74Rdox细胞的增殖,其机制可能与提高cleaved-Caspase-3/Caspase-3,Bax/Bcl-2有关;联合化疗药物使用具有减毒增效的作用.
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丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响
目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125～ 16 μmol·L-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析.结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P ＜0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P＜0.05).结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用.
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17-羟-岩大戟内酯B对K562细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人白血病K562细胞增殖及凋亡的影响.方法:将K562细胞分为3组,分别为:空白对照组,5-氟脲嘧啶组(浓度为100μmol·L-1),HJB组(浓度为6.25,12.5,25,50,100,200,400μmol·L-1).用不同浓度的药物作用24 h和200 μmol·L-1的HJB浓度作用不同时间(12,24,48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,并与空白对照组和5-氟脲嘧啶组作对比；流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率；分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的相对活性.结果:与空白对照组相比,HJB对K562细胞的增殖有显著性抑制作用,并呈浓度依赖关系及时间依赖关系(P＜0.05),作用24 h后IC50为158.7μmol·L-1.HJB可诱导K562细胞凋亡,用50,100,200 μmol·L-药物分别处理细胞24h后,早期凋亡率较空白组明显升高(P＜0.05),且呈浓度依赖关系；Caspase-3及Caspase8的相对活性均较空白对照组升高(P＜0.05),并呈浓度依赖关系.结论:HJB明显抑制体外K562细胞生长并诱导其发生凋亡,且死亡受体途径可能是诱导其凋亡的一个机制.
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黄芪加红花对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶-3的影响
能通过抑制caspase-3的表达,阻断caspase级联反应的终执行而实现.
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益肾解毒方对小鼠肺腺癌骨转移瘤RNase L蛋白表达的调控作用
目的:研究益肾解毒方对小鼠溶骨性骨转移瘤细胞核糖核酸酶L(ribonuclease L,RNase L)蛋白及凋亡终末蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达的调控作用.方法:将已经获得国家专利的肺腺癌溶骨性骨转移细胞株,给予裸鼠左心室注射,制备溶骨性骨转移模型,随机分为5组,益肾解毒方高、中、低剂量(24,12,3 g·kg-1)组,帕米磷酸二钠组及模型组,以MicroSPECT/CT显像及病理组织学方法观察骨转移发生情况,定时定量给药并于5周后取材,通过免疫组织化学、蛋白免疫印迹法(Western blot)以及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法研究RNase L,Caspase-3及益肾解毒方的干预作用.结果:与模型组比较,帕米磷酸二钠组、益肾解毒方高、中、低剂量组骨转移瘤细胞RNase L蛋白,mRNA表达降低(P＜0.01),益肾解毒方中、低剂量组及帕米磷酸二钠组骨转移灶中Caspase-3蛋白,mRNA表达升高(P＜0.01).讨论:肺腺癌骨转移灶中RNaseL高表达,而细胞凋亡过程中主要的终末剪切酶Caspase-3表达降低,其内在机制可能与肺腺癌骨转移细胞的凋亡逃避机制相关,益肾解毒方能够降低RNase L表达,增强Caspase-3表达,一定程度上抑制了肿瘤细胞的凋亡逃避,这可能是益肾解毒方抗肿瘤的内在机制.
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山精胶囊对心肌缺血大鼠NF-κB信号通路调控机制探讨
目的:探讨山精胶囊对心肌缺血大鼠能量代谢、氧自由基及细胞凋亡相关基因的作用及其机制.方法:选取Wista大鼠采用冠状动脉结扎法,建立慢性心肌缺血模型.将筛选出来的大鼠随机分为山精胶囊低、中、高剂量组(283.5,850.5,1 701.0 mg·kg-1)和阳性药组(心安胶囊324.0 mg·kg-1),假手术组和模型组灌胃给予同等剂量的0.9％的氯化钠注射液,给药10 d.紫外可见分光光度计检测血清及组织中乳酸(LD),游离脂肪酸(NEFA),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),一氧化氮(NO)及三磷酸腺苷酶(ATP)水平;蛋白质免疫印迹(Western blot)法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织中核转录因子-κB(NF-κB),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠LD,NEFA,MDA明显升高(P＜0.05),NO,Na+-K+-ATP,Ca2+-ATP酶,SOD,GSH-Px明显降低(P＜0.05),心肌NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达明显上调(P＜0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.05);与模型组比较,山精胶囊能显著降低LD,NEFA,MDA(P ＜0.05),NO,Na+-K+-ATP,Ca2+-ATP酶,SOD,GSH-Px显著升高(P＜0.05),明显下调NF-κB,Caspase-3,Bax mRNA及蛋白表达(P＜0.05),明显上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达(P＜0.05).结论:山精胶囊可能通过调控NF-κB信号通路,提高心肌缺血大鼠清除氧自由基能力,改善心肌细胞能量代谢,调节凋亡相关蛋白和基因的表达,从而抑制了心肌细胞凋亡,减少缺血缺氧对心肌细胞的病理损害,起到保护心肌的作用.
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白屈菜红碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及机制探讨
目的:研究白屈菜红碱(CHE)体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用与机制.方法:以肝癌HepG2细胞为研究对象,通过噻唑蓝(MTT)法测定CHE对细胞的增殖作用,荧光染料Hoechst 33285染色观察CHE对人肝癌细胞HepG2凋亡形态的变化,免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),Bcl-2家族的抑凋亡蛋白Bcl-xl,促凋亡相关半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白和基因表达.结果:与溶剂组比较,CHE能显著抑制HepG2细胞的增殖,其6,12,24 h的半数抑制浓度(IC50)分别为12.98,10.53,11.21 μmol·L-1,在Hoechst 33258染色结果中,CHE组出现细胞凋亡的典型特征;与溶剂组比较,高浓度CHE能明显上调Bax,Caspase-3的蛋白及mRNA表达,明显降低Bcl-xl蛋白及mRNA表达(P＜0.05).结论:白屈菜红碱能抑制肝癌细胞HepG2的增殖,并能上调促凋亡蛋白和mRNA,下调抗凋亡蛋白和mRNA表达,进而诱导凋亡.
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银杏叶提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及Caspase-3表达的影响
目的:探讨银杏叶提取物(EGB)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及半胱氨酸蛋白酶(Caspases)-3表达的影响.方法:将质量浓度为0,10,20,40,80,160 mg·L-1的EGB作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞上,培养24h或48 h,然后应用四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT法)检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspases-3蛋白表达.结果:EGB对MCF-7细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01),半数抑制浓度(IC50)为83.65 mg· L-1.经流式细胞仪检测表明,EGB能使MCF-7细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着质量浓度的增加,MCF-7细胞凋亡率明显增加(P＜0.05或P＜0.01).EGB能增强MCF-7细胞Caspases-3蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01),并呈浓度依赖性.结论:EGB能有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞Caspases-3蛋白表达,诱导MCF-7细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖.
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磷酸化P38 MAPK对帕金森病MPTP模型小鼠黑质caspase-3表达的影响
目的 研究磷酸化P38 MAPK在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)模型小鼠中对黑质半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的调控作用.方法 将小鼠随机分为MPTP模型组,腹腔注射MPTP(30 mg/kg,生理盐水溶);抑制剂组,在注射MPTP前1 h腹腔注射SB203580(10 mg/kg,溶于5 mg/mL DMSO).均1次/d,连续5 d;对照组,注射与模型组和抑制剂组等量生理盐水和DMSO.观察行为学、免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH)、caspase-3和磷酸化P38 MAPK(p-P38 MAPK)的表达.结果 与对照组相比,模型小鼠出现典型的PD症状,TH阳性神经元和蛋白水平分别下降约60%和65%(P<0.01),p-P38 MAPK、caspase-3阳性细胞及蛋白水平显著增加(P<0.01);经P38 MAPK抑制剂SB203580处理后,上述变化均显著减轻(P<0.01).结论 磷酸化P38 MAPK在MPTP诱导的PD小鼠黑质caspase-3表达中可能有重要调控作用,SB203580对PD小鼠具有一定的神经保护作用.
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VEGF降低家兔脑缺血再灌注损伤与caspase-3表达的关系
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)治疗家兔局灶性脑缺血/再灌注损伤与半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的关系.方法 复制兔局灶性脑缺血/再灌注模型,分别在缺血2 h,再灌注0、1和3 h应用微量进样器将VEGF立体定向导入梗死灶周,于再灌注3 d观察神经功能、梗死体积、水肿体积、灶周凋亡数和caspase-3表达.结果 缺血/再灌注0和1 h时,灶周给予VEGF,梗死体积分别较对照组下降23.3%、17.9%,相应的水肿体积、灶周凋亡率及caspase-3表达明显下降(P<0.01),神经功能恢复较好,用药越早越明显;再灌注3 h后给药,则无明显作用.梗死体积下降与caspase-3表达下降明显相关(P<0.05).结论 VEGF可能通过抑制caspase-3的表达减少脑缺血/再灌注损伤细胞凋亡的发生.
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甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响及其机理
目的:研究甲基强的松龙(MP)对大鼠横断性脊髓损伤(SCI)后神经细胞凋亡的影响及其作用机理.方法:60只成年Wistar大鼠随机分成正常对照组、脊髓损伤组和MP治疗组,每组20只,MP治疗组在横断T10脊髓组织后30min经尾静脉给予MP治疗,损伤组和对照组未予任何治疗.MP治疗组和脊髓损伤组大鼠于脊髓损伤后8h、24h、3d和1周取材,采用透射电镜、TUNEL染色观察细胞凋亡情况,采用免疫组织化学染色观察Fas、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-8和caspase-3在SCI前后的变化情况,采用改良Tarlov评分方法观察大鼠后肢运动功能.结果:SCI后24h大鼠后肢运动功能逐渐恢复,MP治疗组大鼠的后肢运动功能恢复优于损伤组,7d后尤其明显.TUNEL染色和电镜检查证实SCI后8h即有凋亡细胞出现,其中既有神经元也有胶质细胞:3d凋亡细胞数达到高峰;7d仍有凋亡细胞存在,但已明显减少;各时间点治疗组凋亡细胞数量明显少于损伤组(P＜0.05).治疗组和损伤组在SCI后8h可以检测到少量的Fas和caspase-8阳性神经元及胶质细胞,Fas和caspase-8的表达在SCI后3d达到高峰,7d表达下降,各时间点治疗组的Fas和caspase-8灰度值明显大于损伤组,二者有显著性差异(P＜0.05).治疗组和损伤组caspase-3的表达在SCI后8h均逐渐增加(与对照组相比),7d达到高峰,治疗组灰度值大于损伤组,但二者无显著性差异.结论:MP能抑制大鼠脊髓横断性脊髓损伤后的神经细胞凋亡,但不能推迟细胞凋亡出现的高峰时间;MP抑制细胞凋亡的途径可能通过非特异性抑制Fas和caspase-8的表达来实现.
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FTY720对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响及相关机制
目的:观察FTY720对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后神经功能的影响,并探讨其相关机制.方法:168只雌性SD大鼠,随机分成A、B、C三组,每组56只,A组(假手术组)大鼠麻醉后仅切除T9椎板,不打击脊髓,缝合后立即以0.3ml生理盐水灌胃.B、C组采用Allen's法制作T9脊髓损伤模型,B组(对照组)以0.3ml生理盐水灌胃,C组(治疗组)以FTY720按3mg/kg生理盐水稀释至0.3ml灌胃.每组取8只大鼠分别于术后1d、3d、7d、14d、21d行斜板试验及BBB评分.分别于术后6h、12h、24h、48h、72h、7d、21d处死大鼠,每个时间点每组8只,取损伤段(A组取相应部位)脊髓行超薄切片,HE染色观察各组脊髓坏死情况、炎细胞浸润情况、胶质瘢痕形成情况及脊髓空洞大小,并计数各组术后12h淋巴细胞数、术后12h与72h炎性细胞、术后7d胶质瘢痕区细胞,计算伤后21d脊髓空洞面积与脊髓面积比值；取术后6h、12h、24h、72h的切片行SP免疫组化染色观察caspase-3表达及Tunel染色观察细胞凋亡情况,计算相应时间点免疫组化染色阳性细胞比值和凋亡指数.所有数据以SPSS 13.0进行统计学分析.结果:B、C两组各时间点斜板实验及BBB评分均较A组同时间点差(P＜0.05),在术后1d时B、C组之间无显著性差异(P＞0.05),术后3d、7d、14d、21d时C组优于B组(P＜0.05).HE染色结果显示A组各时间点脊髓形态正常;B、C组脊髓术后6h可见脊髓内出血、血肿形成,术后12h～48h脊髓进行性水肿、损伤中心区出现液化坏死,伴有炎细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞为主,至术后72h,损伤中心区形成无组织结构空洞,空洞周围有大量炎细胞浸润,以小胶质细胞/单核细胞为主；术后12h及72h,B组炎细胞浸润程度明显重于C组(P＜0.05),术后12h C组淋巴细胞浸润程度相对B组明显减少(P＜0.05),术后7d,脊髓水肿减轻,空洞周围形成胶质瘢痕,胶质瘢痕细胞计数B组明显大于C组(P＜0.05),术后21d脊髓空洞形成,脊髓空洞比值B组明显大于C组(P＜0.05).SP免疫组化染色和Tunel染色结果显示A组各时间点几乎见不到caspase-3和细胞凋亡表达阳性细胞,B、C组脊髓损术后6h即可见凋亡细胞,到术后24h达高峰,而后随术后时间延长而逐渐减弱,但是仍然保持在较高水平；caspase-3表达与细胞凋亡同步,各时间点C组caspase-3表达阳性细胞比值和细胞凋亡指数均显著低于B组(P＜0.05).结论:FTY720 可以显著改善大鼠ASCI后神下功能,其可能是通过抑制脊髓损伤后的炎症反应,减少caspase-3的表达及神经细胞凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤.
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三氧化二砷对原发性肝癌的作用及其机理研究
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞系BEL-7402的影响及其作用机理,并观察不同应用途径对原发性肝癌患者的治疗效果.方法观察As2O3作用后肝癌细胞的形态学改变、并通过流式细胞仪和DNA梯状电泳观察细胞凋亡的情况,应用逆转录聚合酶链式反应和荧光分光光度计检测半胱氨酸蛋白酶-3的变化情况.观察其对裸鼠移植瘤生长抑制的效果.并分别通过静脉滴注和动脉持续灌注观察其对原发性肝癌患者的治疗效果.结果不同浓度的As2O3作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性,发生作用后细胞生长明显受抑制,有明显的凋亡特征性改变;流式细胞仪分析存在G2/M期阻滞,在G1峰前出现明显的凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳出现明显的凋亡特征性梯状条带.随着As2O3作用时间的延长,半胱氨酸蛋白酶-3的mRNA无明显变化,而半胱氨酸蛋白酶-3蛋白质的活性逐渐增高.不同浓度的As2O3对于裸鼠肝癌移植模型有明显的抑制生长作用.对28例患者的静脉输注治疗可明显改善患者的生存质量,并且具有毒副作用小的特点.43例动脉灌注治疗患者中,30例肿瘤体积缩小或不变,有效率为69.8%,19例甲胎蛋白下降或降至正常. 结论As2O3可明显抑制肝癌细胞的生长,其机理主要是诱导肝癌细胞凋亡;凋亡的可能机理是通过半胱氨酸蛋白酶-3起作用,作用位点是在酶的前体水平;应用As2O3连续区域化疗对原发性肝癌有很好的治疗效果.
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海生多糖肽对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用
目的研究海生多糖肽对小鼠亚急性辐射损伤的防护作用.方法给小鼠饲以海生多糖肽制剂,用60Co γ射线进行全身性亚急性照射,检测外周血白细胞、脾淋巴细胞转化率、红细胞超氧化物歧化酶、丙二醛和过氧化酶含量、精子畸形率、睾丸精母细胞染色体畸变率和肝细胞半胱氨酸蛋白酶-3等指标.结果海生多糖肽高、低剂量组小鼠的血白细胞数量、脾淋巴细胞转化率、红细胞超氧化物歧化酶值和过氧化酶值均高于照射对照组,红细胞丙二醛值、精子畸形率、睾丸精母细胞染色体畸变率和肝细胞半胱氨酸蛋白酶-3阳性表达率则低于照射对照组,差异有显著性.结论海生多糖肽对亚急性辐射损伤有良好的防护作用.
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半胱氨酸蛋白酶-3基因表达对缺血再灌注心室功能的影响
目的 观察家兔急性缺血再灌注后心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达对心室功能影响.方法 家兔30只,分对照组(10只),缺血组(10只),再灌注组(10只).缺血组套扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注组套扎30 min后再灌注120 min,对照组游离左冠状动脉前降支不结扎.超声心动图测量左室收缩功能,采用RT-PCR和免疫组化方法检测caspase-3基因与蛋白表达情况.结果 对照组:各项指标基本正常.缺血组与对照组比较:caspase-3蛋白表达明显增高(P＜0.01);caspase-3 mRNA表达显著增强;左室应变率明显降低(P＜0.01).再灌注组与缺血组比较:caspase-3蛋白表达进一步增高(P＜0.01);caspase-3 mRNA表达也有所增强;左室应变率有所恢复,但仍明显低于对照组(P＜0.05).结论 缺血再灌注激活capase-3是导致与心室功能的改变的重要原因.
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丁苯酞对大鼠急性一氧化碳中毒后半胱氨酸蛋白酶-3和半胱氨酸蛋白酶-9表达的影响
目的 研究丁苯酞对大鼠急性重度CO中毒后脑组织中半胱氨酸蛋白-3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)表达的影响.方法 通过数字表法将大鼠随机分为3组:正常组、模型组和实验组(均n=10).用CO染毒法制作大鼠急性重度CO中毒模型.实验组大鼠给予丁苯酞80 mg·kg-1,灌胃1次/天,连续7d,正常组和模型组给予等量的0.9％ NaCl.在7d后,用免疫组化染色法观测Caspase-3和Caspase-9阳性细胞数,用反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测Caspase-3和Caspase-9mRNA和蛋白的表达水平.结果 正常组大鼠脑组织中Caspase-3和Caspase-9的阳性细胞数分别为4.98±1.34,8.65 ±1.89,mRNA表达水平分别为0.19 ±0.02,0.18 ±0.03,蛋白表达水平分别为0.09 ±0.01,0.08 ±0.01;模型组大鼠脑组织中Caspase-3和Caspase-9阳性细胞数分别为29.43 ±4.53,40.45±5.23,mRNA表达水平分别为0.47±0.05,0.75±0.05,蛋白表达水平分别为0.78 ±0.05,0.86 ±0.07.与正常组对比,模型组的Caspase-3和Caspase-9mRNA和蛋白表达水平显著增高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).实验组大鼠脑组织中的Caspase-3和Caspase-9阳性细胞数分别为22.26 ±3.12,25.09±4.25,mRNA表达水平分别为0.35±0.05,0.41 ±0.05,蛋白表达水平分别为0.37±0.02,0.45±0.02,与模型组对比,Caspase-3和Caspase-9 mRNA和蛋白表达水平较明显下调,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 丁苯酞可通过下调Caspase-3和Caspase-9的表达水平来抑制神经细胞凋亡进程,从而减轻CO对大鼠脑神经的损害.
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霞草苷对人结肠癌HT－29细胞生长和凋亡的影响
目的：观察霞草苷对人结肠癌HT－29细胞凋亡的影响及其可能机制。方法用MTT法和流式细胞技术检测浓度为5，10，20，40μmol· L－1霞草苷对HT－29细胞生长、凋亡的影响；用实时荧光定量RT－PCR检测细胞Caspase－3、Bax的mRNA水平。结果霞草苷对HT－29细胞的生长有明显的增殖抑制作用，呈浓度和时间依赖性，细胞凋亡率明显增高。 Caspase－3和Bax的mRNA表达量逐渐增加，呈明显的浓度依赖性。结论霞草苷能诱导体外培养的人结肠癌HT－29细胞凋亡，上调Bax表达，活化Caspase－3可能是霞草苷诱导HT－29细胞凋亡的机制之一。
关键词： 结肠癌 霞草苷 细胞凋亡 半胱氨酸蛋白酶-3 Bcl-2相关X蛋白 -
反式白藜芦醇对β－淀粉样肽致痴呆大鼠的保护作用
目的：观察反式白藜芦醇（ TR）对β－淀粉样肽（Aβ25－35）致痴呆大鼠海马旁回的保护作用。方法先将SD大鼠分为3，20月龄2大组，然后再分为假手术组、模型组、低与高剂量实验组。用Aβ25－35制痴呆模型后，实验组灌胃给TR 10，40 mg? kg－1? d－1，假手术组、模型组均给予0．9％NaCl（1 mL／100 g），连续10 d。用实时定量PCR法检测8组大鼠海马及皮质半胱氨酸蛋白酶－3（caspase－3）、DNA聚合酶γ的表达。结果模型组与假手术组的caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平比较差异有统计学意义（ P＜0．01），说明造模成功。 TR对caspase－3、DNA聚合酶γ表达水平的下调非常显著（ P＜0．01）。模型组3月龄较20月龄大鼠的caspase－3表达量明显增高（ P＜0．05）。实验组3月龄与20月龄大鼠caspase－3表达量差别有统计学意义（ P＜0．05）。结论 TR对损伤的大鼠海马周围皮层神经元有保护作用。
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白附子提取物抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及诱导凋亡的机制研究
目的 探讨白附子提取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及其可能机制.方法 分别采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、光镜观察细胞结构变化、Hoechst33342/PI荧光染色检测细胞凋亡,Western blotting法检测caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 0.072～7.2 mg·L-1白附子提取物处理24 h后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;光镜下可观察到细胞凋亡形态的改变;Western blotting结果 显示,半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)酶原蛋白的激活,Bcl-2蛋白表达的降低和Bax蛋白表达上调.结论 白附子提取物通过影响SGC-7901细胞的增殖、周期和凋亡相关蛋白的表达发挥凋亡诱导作用.
关键词： 白附子 凋亡 半胱氨酸蛋白酶-3 B细胞淋巴瘤基因-2 Bax
