药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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那曲肝素钙的紫外光谱法检测与应用
研究发现以1 mol/L乙酸钠(NaAc)溶液为介质,那曲肝素钙(Nadroparin Calcium,NC)在邻菲啰啉-硫酸锌(phen-ZnSO4)体系中有显著的紫外吸收峰(λmax为302 nm),其吸光度与NC溶液的浓度成线性正比关系,由此建立了一种新的测定NC的分析方法.该方法的线性范围为5.38×10-3～3.87×10-2 mol/L,检出限为2.06×10-3mol/L.干扰实验结果表明,所得方法对钙离子具有很强的抗干扰能力.将所建立的方法应用于NC的实际生产工艺过程中,结果令人满意.同时,对其机理进行了探究.这些结果为NC的药品生产工艺提供了一种监控技术.
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规模化制备小牛胸腺DNA的工艺研究
脱氧核糖核酸(DNA)作为生物遗传物质的基础,具有多种生理功能,广泛用于医药、畜牧业、食品等领域.因此,规模化制备DNA具有良好的经济效益和社会效益.该研究以小牛胸腺为实验材料,对DNA的提取方法和规模化制备工艺进行了研究.在传统的盐溶法及十二烷基硫酸钠(SDS)法基础上,通过2次调节提取液的pH值,进一步提高DNA纯度.采用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法对DNA规模化提取过程中的产物纯度及回收率的变化进行检测.结果表明,规模化提取小牛胸腺30 kg,可得到DNA 549 g,回收率达到1.83％,A260/A280值为1.93,纯度为92.3％.该方法工艺简单,适用于规模化工业制备DNA.
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核心组蛋白生物色谱的建立及筛选相互作用蛋白的应用
通过提取细胞核,以超声波剪切染色质,利用酸提取和分段盐析等提取纯化核心组蛋白,将其固定于Sepharose-4B上制备核心组蛋白生物色谱柱.以细胞核蛋白为复杂组分的考察对象,测定该色谱柱在筛选相互作用蛋白中的性能,筛选出组蛋白相互作用蛋白.对核蛋白、穿透色谱柱蛋白、洗脱蛋白的非变性SDS-PAGE比较表明,核心组蛋白色谱柱对核蛋白复杂组分的保留行为存在差异,至少能筛选出9种组蛋白作用蛋白.固定化核心组蛋白能够特异性、选择性的与对核心组蛋白有活性的物质结合,可以排除大量非作用杂质成分的干扰,因此可应用于以组蛋白为靶分子的蛋白质等活性成分或药物的筛选.
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多柔比星白蛋白纳米粒的制备及其对肝癌细胞Bel-7404的杀伤作用
制备多柔比星白蛋白纳米粒(DOX/BSANP),观察其药物缓释规律,探讨其对肝癌细胞的杀伤作用.去溶剂-化学交联法制备DOX/BSANP载药纳米粒;透射电镜观察其形态及粒径;分光光度法测定包封率及载药率;体外药物释放实验考察缓释特性;MTT法及FCM观察其对肝癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应.透射电镜下DOX/BSANP呈圆球形,分布均匀,直径约为120 nm,动态光衍射测定其水合粒径约为170 nm,包封率为82％,载药量为5％,体外药物释放实验显示,载药纳米粒中约50％的药物持续缓慢释放,可持续长达7 d;MTT实验显示DOX/BSANP能显著抑制细胞的增殖,FCM检测显示其能诱导肿瘤细胞凋亡;体内抑瘤实验显示,载药纳米粒的疗效优于DOX原药的疗效.成功制备多柔比星白蛋白纳米粒.体内外实验证明DOX/BSANP纳米粒可有效抑制肝癌细胞Bel-7404的生长.
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β-hCG单抗在亲和双水相体系中的分配研究
以磺胺二甲基嘧啶(SM2)作为亲和配基,构建聚乙二醇(PEG)/柠檬酸钠亲和双水相体系,并对β-hCG单克隆抗体在该体系中的分配效果进行研究.结果表明β-hCG单克隆抗体在PEG/柠檬酸钠双水相亲和体系中具有较好的分配特性,进一步考察了成相聚合物分子质量、体系各组分浓度、PEG-SM2加入量、pH值、抗体加入量等因素对分配效果的影响,优化后的分配条件为:PEG 4 000 9％,PEG-SM2 8％,柠檬酸钠浓度12％,pH6.0,抗体加入量0.5 mg/g,抗β-hCG单克隆抗体的分配系数达7.6,收率为91.1％.
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透明质酸修饰阳离子脂质体的制备及初步评价
制备透明质酸(Hyaluronic acid,HA)修饰的载基因阳离子脂质体三元复合物(HA/liposome/DNA ternary complexes,TC),评价其物理化学和生物学性质.采用薄膜分散法制备空白阳离子脂质体(Liposome),与DNA 孵育得liposome/DNA脂质复合物(Lipo/DNA),将其与HA孵育即得TC.考察其物理化学性质、体外抗核酸酶能力、血浆稳定性、细胞毒性及体外转染效率.制备的liposome、Lipo/DNA、TC均呈类球形,粒径分别为(93.1±3.0),(156.6±5.4),(234.8±2.7) nm;Zeta电位分别为(43.71±1.33),(29.00±0.71),(-22.13±2.94)mV;TC与核酸酶孵育4h,其中的DNA几乎无降解;TC与血浆蛋白孵育24h内吸光度变化不大;细胞毒性与Lipo/DNA相比,显著降低;体外转染实验显示TC在有、无血清条件下均有较好的转染效率.TC是一种制备工艺简单、细胞毒性低、体外转染效率高、极具应用潜力的非病毒纳米基因载体.
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雌雄小鼠肝脏中Ⅰ相代谢酶的mRNA表达谱
将6个月不同性别的C57BL/6小鼠分为雌、雄两组(n=6),分别取其肝脏,以荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,RT-qPCR)测定肝脏中Ⅰ相代谢酶mRNA的相对表达量.在分析的24个Ⅰ相代谢酶中有8个代谢酶(Cyp2b9、Cyp4a14、Cyp2b10、Cyp2b13、Cyp4a10、Cyp2c38、Fmo3、Nqo1)的mRNA水平在雌性小鼠肝脏中高表达(P＜0.01或P＜0.05);5个代谢酶(Cyp4a12、Cyp7b1、Cyp2d9、Fmo5、Cess2c)的mRNA水平在雄性小鼠肝脏中表达较高(P＜0.01或P＜0.05);其它Ⅰ相代谢酶在雌雄小鼠肝脏中的mRNA表达没有显著性差异.研究显示,性别差异显著影响小鼠肝脏中Ⅰ相代谢酶的mRNA表达谱,这将导致药物在药动学和药效学方面的个体差异.
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重组大肠杆菌生物合成白藜芦醇条件的优化研究
白藜芦醇是一种具有抗肿瘤、抗衰老等医疗和保健功能的非黄酮类多酚化合物,在天然植物中含量极低.目前采用化学法合成白藜芦醇需要使用有毒催化剂且会产生大量副产品.在构建成功大肠杆菌代谢工程菌基础上,文章着重报道了重组大肠杆菌培养条件和生物转化合成白藜芦醇条件的优化研究.研究表明,将在YM9培养基中培养10 h后经离心获得的重组菌体进一步重悬于含有1.2 g/L对香豆酸和聚乙二醇的YM9培养基中,在优化条件下24 h培养液经乙酸乙酯萃取经液相测定白藜芦醇的产量达到598 mg/L.此研究为利用重组大肠杆菌大规模生物合成白藜芦醇打下了基础.
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耐热阿拉伯糖苷酶三维结构模拟和底物对接分析
阿拉伯糖苷酶能催化L-阿拉伯糖和木糖间糖苷键的水解,在半纤维素降解及阿拉伯糖制备过程中有重要作用.源自乙醇热厌氧杆菌Thermoanaerobacter ethanolicus的阿拉伯糖苷酶具有阿拉伯糖苷酶和木糖苷酶的双重活性,且具有高度的热稳定性.为深入研究该酶的催化机理,预测了该酶的空间结构和活性中心关键残基,以便指导进一步的实验研究;使用同源模建的方法,以Thermotoga neapolitanaβ-糖苷酶3b的结构为模版,模建了T.ethanolicus阿拉伯糖苷酶的结构,并使用分子对接的方法,将底物对硝基苯基-L-阿拉伯糖苷(pNPAP)和对硝基苯基-D-木糖苷(pNPX)对接到酶的活性中心;预测的底物-酶复合物结构表明酶活性中心Asn90、Arg164、Lys201、Asp281等残基在底物结合和水解过程中可能发挥有重要的作用.
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骨化三醇,全反式维甲酸和乌索酸对参与单核分化的转录因子以及单核细胞表面标记的调节
骨化三醇,全反式维甲酸和乌索酸是3种能诱导U937细胞单核分化的试剂,但它们对单核分化的影响并不是完全相同.为了研究这3种试剂促进单核分化的机制,采用qRT-PCR来检测它们对一组参与单核分化的转录因子和3个单核细胞表面标记的mRNA表达水平的影响.结果表明:这3种试剂均上调RBSP3,Egr-1,Egr-2和E2F1的表达,此外,ATRA和UA对CD64,CEBPA和E2F3具有相似的影响,但对CD11c和CD18的影响则相反,骨化三醇对所检测的基因除了对CEBPA无显著影响外,对其它基因均上调.以上结果表明,尽管这3种试剂均能诱导U937的单核分化,它们对所检测的基因的影响并不完全相同,这表明它们影响单核分化的机制是不同的.本研究为进一步研究骨化三醇,全反式维甲酸和乌索酸促进单核分化的机制奠定了基础.
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鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的纯化和复性研究
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一种造血生长因子和促炎细胞因子.重组鼠源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在抗肿瘤及抗炎研究中有着极其重要的作用.以NcoⅠ和BamHⅠ为酶切位点将mGM-CSF编码序列插入到pET-28a载体中.转染E coli宿主菌BL21后得到以包涵体形式表达的蛋白,表达量占菌体总蛋白量51.6％.包涵体的纯化条件在实验中进一步优化,然后溶解于8 mol/L尿素中.采用稀释法在2 mol/L尿素缓冲液中添加PEG对蛋白进行复性.复性后的产物经过离子交换层析纯化后得到高纯度的有活性的mGM-CSF.通过体内白细胞计数和体外髓样细胞增殖检测表明纯化的蛋白具有mGM-CSF全部的生物活性.这种制备方法能够从每升发酵液中获得8.06 mg蛋白,具有蛋白表达量高,复性和纯化方法简便易得的特点,适用于规模生产.
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多肽HM-3与吉西他滨联合用药治疗Lewis肺癌的研究
检测HM-3与吉西他滨联合用药治疗实验性Lewis肺癌的活性是否优于单用两种药物.建立Lewis 肺癌肿瘤模型,观察HM-3单用或与吉西他滨合用对Lewis肺癌生长的抑制作用,分别用Bürgi氏规律公式和金氏公式计算增效q值,评价合用的效应强度是否优于单用.结果显示HM-3与吉西他滨合用使抑瘤率有显著提高,其中G4、G5、G6组联合给药的肿瘤抑制率分别高达88.3％,89.4％,88.5％,与阴性组及G2、G3相比,有极显著差异(**P＜0.01).HM-3与吉西他滨合用的抑瘤效果强于单用,且根据Bürgi氏规律公式与金氏公式验证结果为协同作用.
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氨氮降解菌的筛选及适生长条件的探究
从南京江宁的污泥中筛选出氨氮降解菌并研究生长条件对菌株氨氮降解能力的影响,为城市的污水中氨氮污染问题研究提供了途径.通过从生活污水及污泥中多次分离纯化,筛选出优势菌并研究了温度,pH值,转速对其氨氮降解能力的影响,探究出该氨氮降解菌的适生长条件,成功筛选出具有高降解能力的菌株,在30℃、pH值为8.0,120 r/min的适生长条件下,当氨氮的初始浓度为50 mg/L时,其24 h的氨氮降解能力可以达到84.5％.此菌种廉价易获得,短时高效,可以作为改善水体氨氮污染的一种可行性方法.
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基于神经网络和遗传算法的非天然氨基酸突变蛋白的培养优化
非天然氨基酸定点改构技术已被广泛应用于蛋白质结构与功能研究以及新药开发等,然而常用的无机盐培养基营养匮乏导致突变蛋白的产量过低,严重限制了该技术的进一步应用.相比传统的优化方法,文章结合了人工神经网络以及遗传算法,更方便、更准确地对大肠杆菌发酵突变蛋白的培养条件进行了优化.试验以引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶作为模式蛋白,以尿酸酶的酶活测定直观反映蛋白表达量,对培养条件中4个因素进行了摸索并优化,终获得了佳培养条件为:甘油1.04％、非天然氨基酸溶液1 mmol/L、金属离子综合液0.86×、IPTG 0.5 mmol/L,并且利用优化后的培养条件发酵获得的尿酸酶产量较未优化前提高了14％.并且通过测定尿酸酶酶活的精确比较,验证了ANN方法较响应面法在优化复杂的非线性生物工艺方面的优势.本试验的顺利完成,不仅提高了引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶的产量,同时也为其他非天然氨基酸定点引入蛋白的发酵培养基优化提供了重要参考.
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腺相关病毒(AAV)及其编码的Rep蛋白治疗肿瘤的研究进展
腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)是单链DNA病毒.AAV基因载体由于安全性好、宿主细胞范围广(分裂和非分裂细胞)、免疫原性低,在体内表达外源基因时间长等特点,被视为有前途的基因转移载体之一,在世界范围内的基因治疗和疫苗研究中得到广泛应用.AAV编码的非结构蛋白Rep具有抑制肿瘤和病毒的作用,并可以对宿主细胞周期和增殖产生重要影响.Rep蛋白也可以对许多异源启动子产生抑制效果,并同时对胞内许多转录原件产生影响.文章就AAV的基本生物学特性和其Rep蛋白在肿瘤治疗方向的新进展进行了综述.
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植物中绿原酸合成途径研究进展
绿原酸是植物中常见的多酚类有机酸,可以清除细胞中的自由基,保护组织免受氧化胁迫,阻止细胞发生癌变.另外它还具有抗病毒作用,常被应用到抗菌消炎的药物中.目前,随着对天然抗氧化剂需求量的增加,从植物中提取的绿原酸供不应求.因此对绿原酸生物合成途径的研究备受关注.该文对绿原酸的生物活性、药理作用以及3种可能的生物合成途径进行了阐述,总结概述了关于绿原酸生物合成途径在分子生物学方面的新研究进展.这将为利用生物技术方法大量生产绿原酸提供理论依据.
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发酵法生产谷胱甘肽的新进展
谷胱甘肽是细胞内重要生物活性物质,在维持生物体内稳态方面起着重要作用.发酵法生产谷胱甘肽中应用的菌种选育和条件优化等策略使得谷胱甘肽的产量得到了提高,但尚不能满足规模化生产的要求.新近基于代谢调控和应激机制的新思路的引入为谷胱甘肽的生产提供了新的方法,该文针对在谷胱甘肽生产中应用的新方法,新思路总结综述,以便相关研究者了解该方面的新进展.
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核磁共振波谱法在药物分析中的应用
核磁共振技术(Nuclear magnetic resonance,NMR)作为结构分析的手段已经广泛应用于化学、结构生物学等多个领域,但是在药物分析中的应用仍处于初级阶段,文章简要综述NMR法在药物分析中的应用现状和关键技术,并列举其在不同类药物分析中的几个应用实例.
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双分子荧光互补技术的应用与展望
双分子荧光互补技术是近年发展起来的用于体内或体外检测蛋白质相互作用的一项新技术.该技术是将荧光蛋白在合适的位点切开形成不发荧光的2个片段,这2个片段借助融合于其上的目标蛋白的相互作用,彼此靠近,重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子,从而产生荧光.BiFC方法简单直观,具有可视性的特点,对温度敏感,荧光片段种类较多,被广泛地应用到不同的细胞中,既可以检测蛋白之间的相互作用,也可以定位蛋白质相互作用的位点.此外,BiFC还能在蛋白构型的确定以及RNA的检测方面发挥作用.经过若干年的发展,双色荧光互补技术已经发展成包括多色荧光互补技术,BiFC和FRET联用技术以及BiFC和YTH联用技术在内的多种技术,拓宽了BiFC的应用.
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红树共附生真菌活性代谢产物的研究进展
在有关红树林共附生微生物的研究中,共附生真菌的研究工作是目前相关研究领域的热点.目前已鉴定的红树林真菌超过200种,成为海洋真菌的第二大类群,研究和开发红树来源真菌具有重要意义.该文介绍了红树共附生真菌种属的多样性及分布,以及近年来红树共附生真菌次级代谢产物的多样性及生物活性,并对该研究领域中存在的问题进行了探讨.
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免疫分析检测平台的规划、建设及其对新药研发的推动
文章以医药生物技术国家重点实验室免疫药物研发平台为案例,介绍了医药生物技术国家重点实验室如何围绕免疫药物研发的特点开展在专业性公共技术平台的布局、建设、管理和运行方面的经验.医药生物技术国家重点实验室在已有的分子生物学、生物化学、细胞生物学、生物信息学等分析平台基础上,按照免疫细胞的分析、分离、细胞因子高通量分析、整体动物水平免疫细胞分布分析等需求,整体规划和布局,建设完善的免疫分析检测平台.以提高保障仪器设备的使用效率和科研产出为目标,建立了科学、合理的管理制度.免疫药物研发平台以“管理保障运行,平台保障科研”为定位,科学布局和稳步建设,良好的运行和管理大大提高了医药生物技术国家重点实验室在免疫性疾病机制研究及免疫药物研发的工作水平,提升了重大项目的竞争能力、产出了一批高水平科研成果,为创新性免疫药物的开发和应用奠定了基础.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
