药物生物技术杂志
Chinese Journal Of Pharmaceutical Biotechnology 약물생물기술
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中国药科大学;中国医药科技出版社;中国药学会
- 影响因子： 0.46
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8915
- 国内刊号： 32-1488/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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必特霉素基因工程菌航天育种的研究
探讨航天技术对必特霉素基因工程菌的育种效果.我国返回式搭载卫星对基因工程必特霉素菌种进行了航天育种,共搭载4个菌株以沙土、甘油、斜面等不同方式,经受航天环境条件处理后计算其孢子存活率、营养缺陷型出现率及菌株的发酵效价.在本实验条件下菌株的存活率均很低,尤其是沙土方式的致死率为100%,甘油及斜面孢子的致死率分别为99.79%～100%和99.81%～100%.营养缺陷型出现率为1.65%.存活菌株的负突变率高于正突变率.经筛选从408株正突变株获得了发酵效价提高11.3%～14.5%的菌株.航天技术有可能应用于基因工程必特霉素的育种,但适于其育种的空间条件必须经过详尽而细致的研究和控制.
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酿酒酵母中的D-(-)-扁桃酸脱氢酶
酿酒酵母BY1.1b对苯乙酮酸不对称还原成D-(-)-扁桃酸的反应具有高度的催化还原活性和光学选择性.采用超声波细胞破碎、硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析及Sephacryl S-200分子筛层析等步骤,从酵母BY1.1b中分离纯化得到D-(-)-扁桃酸脱氢酶.该酶的相对分子质量约60 000.该酶的生物合成模式为非细胞生长偶联型和非底物诱导型.该酶与酵母醇脱氢酶、马肝醇脱氢酶、乳酸脱氢酶及丙酮酸脱氢酶的底物特异性具有显著差别,是一种新型的脱氢酶.
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高效液相色谱法测定发酵液中醋酸可的松及醋酸泼尼松的含量
介绍了用HPLC法对醋酸泼尼松发酵液中的底物醋酸可的松和产物醋酸泼尼松的含量进行测定的方法.采用正相硅胶吸附色谱柱,以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水(体积比86.0∶12.0∶1.6∶0.4)为流动相,在240 nm波长下检测,流速0.8ml/min.发现两种组分分离良好,醋酸可的松和醋酸泼尼松的线性范围均为40～600 μg/ml;检出限均为0.1 μg/ml.该方法准确,灵敏,重现性好.
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抗MRSA链霉菌NJ0510的抑菌活性及发酵影响因素的研究
从土壤中分离到一株有效抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的链霉菌NJ0510.考察了抗菌谱及各种发酵影响因素对链霉菌NJ0510抑菌活性物质产生的影响,通过正交实验对培养基中碳、氮源的组成及发酵天数进行了优化.实验表明该菌的适培养条件为:培养40 h的种子培养液以10%的接种量接入到含1%葡萄糖、2%糊精和4%蛋白胨,40 mg/L FeCl3、20 mg/L CuSO4·5H2O和1 mg/LCoCl2·6H2O的发酵培养基中,在200 r/min振荡条件下,培养5 d.
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同源四倍体桔梗组培技术的优化研究
为了建立优良同源四倍体桔梗的快速繁殖和离体保存技术,采用均匀设计和正交设计以添加不同激素的MS培养基为基本培养基进行筛选和优化.结果表明:同源四倍体桔梗佳丛生芽培养基为MS+BA(6-苄基嘌呤)0.6 mg/L+NAA(萘乙酸)0.4 mg/L+RTCA(病毒唑)3.0 mg/L,丛生芽增殖系数可达到9.13.佳壮苗培养基为:MS+BA 0.2 mg/L+IAA(吲哚乙酸)0.1 mg/L+PP333(多效唑)0.2 mg/L+RTCA3.0 mg/L.佳生根培养基为:1/2 MS+IAA 0.7 mg/L+AC(活性炭)0.2 mg/L+ABT(生根粉)0.2 mg/L,生根率可达100%.适室温离体保存条件为:1/4 MS+蔗糖30 mg/L+甘露醇30 mg/L+PP333 1.0 mg/L+BA 0.3 mg/L+IAA 0.1 mg/L+RTCA 3.0 mg/L,保存150 d时存活率仍可达到59.2%,同时恢复生长快,遗传稳定性好.本研究为优良同源四倍体桔梗的推广应用和优良种质离体保存、减少遗传变异提供了技术依据.
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茯苓摇瓶补料液体发酵和发酵罐补料液体发酵
在茯苓摇瓶液体发酵条件研究的基础上,进一步探讨了茯苓摇瓶补料液体发酵和发酵罐补料液体发酵的发酵工艺,为其产业化打下基础.通过每升发酵液中茯苓菌丝体干重的测定,确定佳的液体发酵补料工艺.发酵罐液体补料发酵较摇瓶补料液体发酵大大缩短了发酵时间,使发酵时间从168 h缩短为120 h;发酵罐液体补料发酵还较摇瓶补料液体发酵提高了茯苓的生物量,使菌丝干重从10.74 g/L增长到11.95 g/L.
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低分子质量牛骨多肽制备及对大鼠破骨细胞的影响
从牛骨制备低分子质量骨多肽,并观察其对大鼠破骨细胞的影响.采用冷冻离心、等电点沉淀方法去除骨胶原,用超滤法得到分子质量10 000u以下的牛骨多肽,并用Sephadex G-10层析脱盐.Tricine-SDS-PAGE对低分子质量牛骨多肽分子质量进行检测,采用抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色法研究牛骨多肽对体外培养大鼠破骨细胞的分化影响,甲苯胺蓝硼酸盐染色法观察对破骨细胞的骨吸收影响以及HE、TRAP、DAPI染色法分别观察凋亡征象.结果:建立和优化了牛骨多肽的制备方法;牛骨多肽对破骨细胞分化无影响,但能抑制其骨吸收功能,促进其凋亡.
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丹参DNA提取方法的优化
针对药用植物丹参含有较多的多酚类、醌类等水溶性次生代谢物,在提取DNA时易发生共沉淀而很难除去等问题,设计双蒸水预洗不同次数和活性碳吸附杂质等处理,对CTAB和SDS两种DNA提取方法进行了系统优化.研究得出,采用2%的CTAB提取液和双蒸水预洗一遍并且添加样品鲜重4%的活性碳于提取液中的提取方法佳.不仅能除去多酚类、醌类等次生代谢物,而且去多糖、蛋白质效果良好,所获DNA纯度高;RAPD-PCR实验结果稳定清晰可靠.
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神经生长因子对视网膜色素上皮细胞增殖、DNA合成及凋亡的影响
用培养的人胚胎视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelium,RPE)细胞研究神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对其增殖、DNA合成及凋亡的影响.取传代培养的RPE细胞,分别用MTT(Methyl thiazo1yl tetrazolium)法和核酸蛋白分析仪测定NGF对细胞增殖及DNA合成的影响;建立吲哚美辛(Indomethacin,IN)诱导细胞凋亡模型,用透射电镜(Transmission electron microsocpy,TEM)和吖啶橙(Acridine orange,AO)荧光染色研究NGF对RPE凋亡细胞的保护作用.结果表明,NGF能促进RPE细胞增殖和DNA合成,随着NGF浓度的升高而促进作用愈明显;NGF对IN诱导的RPE细胞凋亡有保护作用.
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酪丝缬肽在Beagle犬体内药动学初步研究
初步研究酪丝缬肽单次静注给药后在Beagle犬的体内过程.建立了酪丝缬肽在Beagle犬全血中浓度测定的RP-HPLC-UV方法.绘制酪丝缬肽单次给药后在Beagle犬体内全血药物浓度-时间曲线,并求得药动学参数.本检测方法灵敏度不高,低定量限为0.20 μg/ml.酪丝缬肽静注给药后在Beagle犬体内药动学符合单房室模型,低、中、高3个剂量(60,600,6 000 μg/kg)的T1/2分别为(8.88±1.45),(9.00±1.70),(11.12±2.83)s,无显著性差异,C10s和AUC与剂量成良好的线性关系.本实验初步表明:酪丝缬肽静注给药在Beagle犬体内的动力学行为是线性的.酪丝缬肽在Beagle犬体内快速消除,半衰期小于20 s.
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白木香基因组DNA的提取及AFLP银染体系的建立
用改良的CTAB法提取不同居群的白木香基因组DNA,通过优化AFLP技术中关键步骤的参数,建立适合白木香的AFLP银染反应体系.结果表明,改良的CTAB法提取的白木香基因组DNA纯度高,完整性好,满足AFLP分析的要求;250 ng的基因组DNA用EcoR I和Mse I 37℃消化3 h后可以被完全酶切,酶切产物和接头经16℃连接过夜后,用带有一个选择性碱基的引物和带有3个选择性碱基的引物分别进行预扩增和选择性扩增,扩增产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,用AgNO3染色得到了清晰的指纹式样,为下一步的遗传分析奠定了基础.
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纤溶酶产生菌的筛选及酶活力的测定
利用纤维蛋白平板法筛选纤溶酶产生菌株并测定其纤溶酶活性.从土壤、豆豉、猪血粉中分别取样,分离到30株具有溶纤活性的菌株,其中来自土壤12株,豆豉10株,猪血粉8株.选择来自土壤,并与已报道的菌株菌落特征不同的34,37菌株号进行研究,测得其酶比活力分别为9.05,624 U/mg·Pro.
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生产β-胡萝卜素大肠杆菌工程菌的构建
将噬夏孢欧文氏菌β-胡萝卜素合成相关基因crtE,crtB,crtI融合后克隆进表达载体pET-15b,构建表达载体pET-15bcrtEIB;将crtY首先克隆进pET-15b,构建pET-15bcrtY,再将crtY连同T7启动子和终止子切下,插入pACYC-184构建pACYC-184crtY.将以上两重组质粒共转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导工程菌累积橙色色素,经吸收光谱分析,确定工程菌中合成的色素为β-胡萝素.β-胡萝卜素的高含量可达3.5 mg/g·DW,每升发酵液可得6.53g干菌体.
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改造的sTRAIL基因在重组毕赤氏酵母菌中的表达及活性分析
利用甲醇毕赤氏酵母系统对改造的TRAIL基因进行优化表达研究及产物活性分析,确定改造后的基因表达量是否提高.应用电转化技术将4种重组表达载体转化毕赤氏酵母菌GS115,经Zeocin抗生素筛选、PCR检测获得阳性酵母工程菌,采用摇瓶发酵及SDS-PAGE进行高效表达菌株的筛选,经CM-柱层析、Western blot及MTT法对重组蛋白进行初步纯化、抗原活性检测和生物学活性分析,确定了佳摇瓶发酵条件:培养基适pH值5.5～6.5,佳甲醇诱导浓度为1%,适甲醇诱导周期为96 h.筛选到高效表达菌株pPICZα-A-sTRAIL/GS11 5、pPICZα-A-sTRAILK/GS115、pPICZα-A-sTRAILA/GS11 5、pPICZα-A-sTRAILAK/GS115,其表达量分别达到67,113.4,98,145 mg/L,改造后的TRAIL具有抗原活性和生物学活性.对TRAlL基因的改造可以提高其在甲醇毕赤氏酵母系统中的表达.
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死亡素突变体TH1在裂殖酵母中的分泌表达
通过PCR方法人工合成带有K28信号肽的死亡素突变体基因,构建了重组表达载体pRHZ-41-κ28Th1,转化到裂殖酵母中进行表达,发酵液中检测到与TH1理论分子量一致的多肽分子,微量稀释法检验表达产物具有抑菌活性,并计算了粗产物对4种供试菌的低抑菌浓度.
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HIV整合酶抑制剂体外筛选方法研究进展
为了评价HIV整合酶抑制剂体外筛选方法的特点和整合酶抑制剂研究进展,以常用的3'加工反应法、链转移反应法、改良ELISA法及基于结构的筛选为基础归类整合酶抑制剂.整合酶抑制剂按方法分为五类,并可推测其作用机制,通过比较可知以上方法各有利弊,需配合运用.整合酶抑制剂有研究价值.
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新的芯片毛细管电泳及其联用技术研究应用进展
微流路芯片毛细管电泳是20世纪90年代才发展起来的用作微型毛细管电泳分离的新技术.微流路芯片毛细管电泳-质谱联用技术是众多仪器联用中的发展前沿.文章综述微流路芯片的制作,微流路芯片毛细管电泳的分离原理、装置和测定技术及微流路芯片毛细管电泳-质谱联用技术以及这类分析技术在生物技术和生命科学领域研究中的应用进展.
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生物技术在啤酒糟综合利用中的应用
我国每年约产50万吨的啤酒糟,对啤酒糟进行生物发酵可以生产蛋白饲料、粗酶制剂、复合氨基酸、甘油、酒精和沼气等物质.综合利用啤酒糟可以开发出多种产品,使啤酒糟资源化,减轻环境污染.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
| 1999 | 02 03 04 |
