应用基因重组微藻生产生物活性物质

微藻是指进行光合自养的微型藻类,其种类繁多,代谢途径与生物活性物质也极具多样性,是理想的基因工程生物反应器.文章综述了微藻应用基因工程技术,开发生产高价值产品的国内外研究进展.

硫酸皮肤素的药理作用研究进展

根据硫酸皮肤素在抗凝、抗栓、抗炎、抗病毒、抗增殖以及保护血管壁等方面的药理作用研究,表明硫酸皮肤素作为一种新型抗血栓药,具有广阔的应用前景.

转化生长因子β1

转化生长因子β1作为一种细胞生长和肿瘤恶化的潜在抑制剂,失去这一负向调节能刺激肿瘤发展.文章重点介绍了转化生长因子β1在结肠癌患者中作为肿瘤标记物的潜能,其表达水平与该病复发率、患者生存率的关系,并简述了转化生长因子β1在肝硬化、膀胱癌诊断中的应用价值.

诱生型一氧化氮合酶FAD结合区的克隆、表达和活性鉴定

诱生型的一氧化氮合酶(iNOS)的表达可以被多种细胞因子、IPS、多种试剂及创伤等诱导,很多疾病的产生发展都与iNOS的过度表达有关.为进一步研究iNOS FAD结合区的功能和特异性抑制肽的筛选,用PCR方法克隆出iNOS FAD结合区编码基因片段(iNOS2031-2660bp),并在大肠杆菌中得到高效表达,得到表达率＞30%的包涵体;经过Ni金属螯合亲和柱层析和电泳纯化,得到纯度＞95%的重组蛋白,相对分子质量为23 000.运用波长扫描,证实纯化蛋白具有与FAD的结合活性,它可以作为筛选iNOS特异性抑制肽的靶蛋白.

人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达

为获得大量的人胰岛素样生长因子-1(human Insulin-like Growth Factor-1,hIGF-1)产品,构建了hIGF-1原核表达系统.设计引物,引入Nde I和HindⅢ酶切位点,以人工合成构建的pUCIGF质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因.酶切后,克隆于原核表达载体pRSET B中,构建pRSET-IGF重组质粒,转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达.带有重组质粒pRSET-IGF的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:可表达出相对分子质量78000的蛋白,重组蛋白以非融合、可溶性形式表达,表达量占菌体总蛋白量的10%～20%,Western印记表明重组蛋白具有hIGF-1的抗原活性.构建的pRSET-IGF重组质粒成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶性表达,为获得大量基因工程产品奠定了基础.

根霉产生抗生物质发酵条件初步研究

通过对不同培养基及不同C源、N源、接种量等影响因素的单因素多水平实验,确定了佳发酵工艺:以5%麸皮水,1%玉米浆为培养基,初始pH4.0,种龄为10 h,接种量5%,装液量100mL/500mL三角瓶,160r/min,30℃,发酵48 h.在优化后的条件下,培养基的成本及制作时间均降低,而且总活力提高为140 U/mL.

合成胸腺肽α1的分离与纯化

胸腺肽a1(Ta1)的合成粗肽,经DEAE-Sephadex A50离子交换层析和PepMap C18介质纯化后,使合成的Ta1经HPLC鉴定纯度达到98.5%以上.电泳呈一条带,总收率为20%,该工艺操作简便、容易放大,适应产业化生产.

微波法提取魁蒿叶中的总挥发油

运用连续微波反应器提取魁蒿叶中总挥发油,反应时间缩短15倍,魁蒿叶中总挥发油的含量从0.60ml/100g原料提高到0.75ml/100g原料.

魔芋葡甘低聚糖硫酸酯化衍生物的制备及结构分析

以魔芋精粉为原料,经酶解、羟丙基化和硫酸酯化修饰,制成了水溶性良好的魔芋葡苷聚糖(KGM)硫酸酯化衍生物.该物质有机硫含量为20%,凝胶色谱显示其相对分子质量为3000～4000,红外光谱和1H核磁共振光谱表征其具有类肝素的结构.可望开发成一种有前途的新型低分子类肝素物质.

纳米级磁性微粒的制备及固定化纤维素酶的研究

研究了明胶改性新途径,制备了核壳式纳米级磁性明胶微粒.以此为载体对纤维素酶进行固定化,确定了固定化工艺条件,研究了磁性固定化酶的适温度、适pH,使磁性固定化酶的热稳定性、贮存稳定性及操作稳定性均显著提高.

三嗪染料Cibacron Blue F3GA-吐温80亲和分离介质的合成与应用

研究了一种新的亲和分离介质三嗪染料Cibacron Blue F3GA修饰吐温80的合成条件.采用正交设计合成了染料-吐温80.佳反应条件为:吐温80,4.05 mmol/L;Cibacron Blue F3GA,1.01 mmol/L;氢氧化钠,2.0 mol/L;油浴温度,110℃;反应时间,4 h.染料转化率72.3%.用溶剂萃取法分离出染料-吐温80,并做了紫外测定.应用该合成物在吐温80-盐液-固萃取体系中,对猪心肌匀浆中乳酸脱氢酶的亲和分离纯化做了研究.结果表明,在硫酸铵体系中,一步萃取酶活收得率90%,纯化倍数4.5;在磷酸钾盐体系中,一步萃取酶活收得率95%,纯化倍数6.0.

传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP2比较及高表达毒株的分离

对29个传染性法氏囊病病毒(IBDV)的病理组织和毒株分别增殖后,采用不连续蔗糖密度梯度离心的方法纯化病毒,经SDS-PAGE分析,病毒结构蛋白VP2在不同毒株表达量有较大差异.对其中00ZB和99TA32个VP2相对高表达的IBD病理组织样品进行病毒分离,获得了2个IBDVVP2相对高表达毒株.

L-精氨酸产生菌的选育及其发酵条件

以谷氨酸棒杆菌(Glutamicum corynebacterium)JHA5(His-,SGr)为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍(NTG)逐级诱变处理,获得一株精氨酸高产菌JDN28-50(His-SGrD-ArgrL-HAr).在以120g/L葡萄糖为碳源、50 g/L硫酸铵为氮源的培养基中培养4 d,产酸可达30 g/L.

苦荞麦麸皮中类黄酮的抗氧化活性研究

选用山西黑苦荞的麸皮为原料,用70%乙醇加热提取其中的类黄酮物质,采用邻苯三酚自氧化法测定其类超氧化物歧化酶(L-SOD)的活性及不同环境条件对L-SOD活性的影响.苦养麦麸皮提取物中的类黄酮(TBF)含量为8.1%;在350 nm处有一个特征吸收峰;其L-SOD活性为660 U/mg.TBF中L-SOD活性的适温度在40℃左右;适pH为8.0左右;在80℃条件下仍可保持87%的活性;并且在碱性范围内的稳定性高于人血红细胞SOD.在一定浓度的Cu2+、Mg2+和Cd2+存在下,其L-SOD活性分别有不同程度的提高,表明苦养麦麸皮中的类黄酮物质有较强的L-SOD活性.

固定化青霉素酰化酶在DMSO一水介质中催化合成头孢氨苄

与传统的化学方法相比较,酶法合成头孢菌素工艺具有明显优点,通过酶的固定化与非水相酶催化技术相结合为提高产率找到了简捷的途径.实验以7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-amino-3-deactoxy-cephalosporanic,7-ADCA)为母核,苯甘氨酸甲酯盐酸盐(D-phenylglycine methyl ester chlorohydrate,PGME)为酰基供体,在二甲亚砜(DMSO)-水共溶剂体系中,采用聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶(penicillin acylaseEC3.5.1.11,PA)催化合成头孢氨苄(Cephalexin).发现DMSO浓度、反应温度、pH、底物浓度等对转化率均有影响.在25℃,pH6.5,40%DMSO-水体系中,7-ADCA、PGME浓度分别为85 mmoVL,128 mmol/L时,7-ADCA转化率达90%.在15次反复合成Cephalexin期间,转化率保持90%以上.

文摘

<中国新药与临床杂志>2002年改为月刊

<中国药品标准>杂志2002年改为双月刊

植物组织培养中的染菌及预防

介绍了常见植物组织培养过程中的染菌现象及简单辨别方法,提出一些实用预防措施,强调植物组织培养过程中每个环节都应遵守严格的无菌操作.

α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效与血清白细胞介素-12水平的关系*

为了探讨α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效与血清白细胞介素-12水平的关系,应用ELISA双抗体夹心法动态检测36例接受α-1b干扰素治疗的慢性乙型肝炎患者血清IL一12的水平.治疗后血清IL-12水平显著高于治疗前,治疗应答组(HBV清除和/或HBeAg/抗Hbe血清转换)血清IL-12水平显著高于无应答组.结论IL-12能特异性促进TH1细胞发育,是一种重要的抗HBV细胞因子.动态监测血清IL-12水平变化,是预测α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎患者疗效的良好指标之一.

690例门诊病人抗生素应用分析

抗生素临床应用较为广泛.也是合理用药的难点.从广州市第一人民医院2500例门诊病例调查中,使用抗生素有690例占27.6%.690例中抗生素联用发生率占27.38%.抗生素在使用中存在较多不合理现象,应重视如何使患者用低的费用,获得有效的治疗.