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以青霉素8768菌种为主线的推理选育高效菌种的探索
本文对青霉素8768菌种、采用紫外、苯乙酸诱变处理后,得到具有较好遗传稳定性的优良菌种8769.
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中国农作物航空航天诱变育种的进展及其前景
1987年以来,中国先后将300多个品种50多种农作物种子,搭载返回卫星和高空气球.选育出的品(系)种主要有:丰产、抗病、优质的水稻新品系,能恢复籼稻不孕系的粳稻恢复系材料,果大500g以上的青椒新品,抗病、优质的番茄新品系,大荚型油菜新类型,果大一倍的白莲种子和百合鳞.空间特殊条件能够引起植物种子后代众多的变异,是农作物诱变育种的一个新的途径.
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编后语
本期刊登学术论著16篇,文献综述2篇.其中,邬堂春等的"跳伞后空降兵血浆中的生化变化"一文报道了对空降兵每天跳伞1次,连续3天训练后血液生化变化的初步观察与分析,实验中,应激反应指标测得较全,为研究跳伞的应激反应积累了宝贵的资料.重离子辐射的医学生物学效应研究是目前国际上空间辐射医学研究的热点,但我国起步较晚,袁雄等的"重离子辐射致人支气管上皮细胞的失活效应"一文的内容在国内属较新研究结果,具有一定学术价值,定会对该领域的研究工作产生促进作用.李金国等利用返回式卫星进行了绿菜花干种子的飞行实验,观察了发芽率、植株的生长势、花粉细胞的细胞学变化,结果显示,利用空间条件可诱导植物产生变异,改变其遗传性状,为植物诱变育种的研究提供了新的方法.
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Avermectin B1a高效突变株的选育及发酵条件的优化
目的 筛选获得Avermectins B1a高效突变菌株.方法 通过离子注入诱变、紫外线与氯化锂复合诱变法处理阿维链霉菌出发菌株N-5-9.获得高效突变株,再对其进行发酵条件的优化,寻找适发酵培养条件.结果 筛选获得Avermectins高效突变菌株A-30-6,总效价达到6 988.2μg·ml-1,B1a含量达到79.4%,较出发菌株N-5-9的B1a组提高46.3%.结论 利用离子注入诱变、紫外线与氯化锂复合诱变方法,诱变效果显著,再进行发酵条件的优化,获得目的菌株.
关键词: Avermectins 离子注入 诱变育种 高效菌株 发酵条件优化 -
L-赖氨酸高产菌株的选育及发酵培养基优化
目的以L-赖氨酸产生菌钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)D60-95为出发菌株,提高L-赖氨酸产量.方法采用紫外线诱变处理,对大量抗七叶苷(esculin)突变株进行初筛、复筛;在此基础上,利用均匀设计方法对发酵培养基成分进行优化组合.结果得到抗性突变株E0.9-37,其发酵液中L-赖氨酸产量较出发菌株提高20.6%;发酵培养基主要成分佳配比为葡萄糖140 gL-1,硫酸铵55 g·L-1,碳酸钙50 g·L-1和盐酸豆饼水解液18 g·L-1.结论以上方法是选育L-赖氨酸高产菌株的有效途径.
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阿维菌素产生菌的诱变育种
目的提高产生菌B1a组分的产量.方法采用诱变剂亚硝基胍处理菌种,以含1 g·L-1甲硫氨酸的分离培养基作为定向筛选的分离平板,挑选生长快的菌落进行初筛、复筛.结果筛选得到高产菌株中B组分含量显著提高,其中得到的突变株M-20经摇瓶初、复筛和传代实验表明是稳定的B组分高产变异株,其B组分含量达82.1%,较出发菌株提高14.6%,其中B1组分达52.4%,较出发菌株提高19.3%.结论采用NTG诱变结合使用含1g·L-1甲硫氨酸的平板进行筛选可以获得阿维菌素B组分显著提高的菌株.
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氮离子注入土霉素产生菌的诱变育种
目的 获得土霉素产生菌的高产菌株,提高发酵单位.方法 用土霉素产生菌龟裂链霉菌经分离纯化的2810#菌株的分生孢子作处理样品,使用发射能量为15×103 eV的氮离子束对其进行诱变处理,氮离子的注入剂量为每平方厘米注入2.0×1015个离子,分生孢子死亡率为98.2%.结果 诱变处理后经摇瓶筛选得到1082#高产菌种,其摇瓶发酵单位提高11.2%,投入发酵生产后平均发酵单位提高8.9%.结论 氮离子注入方法对提高龟裂链霉菌的产量正向突变频率有明显效果.
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L-缬氨酸高产菌选育及营养需求研究
以黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)L-缬氨酸产生菌ZQ-2为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍(NTG)诱变处理,氨基酸结构类似物定向筛选,获得一株L-缬氨酸高产菌XQ-6(Leul AHVr α-ABhr 2-TAhr).在以14%葡萄糖为碳源、5%硫酸铵为氮源的培养基中直接发酵72 h,产酸达58~62 g/L.同时添加Fe2+和Mn2+比单独添加Fe2+更有效.还进行了氨基酸、核酸、维生素和其它营养对L-缬氨酸发酵影响的试验.
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纳他霉素高产菌株的选育
从琼脂块中筛选得到纳塔尔链霉菌103号为出发菌株,经紫外诱变后筛选乙酸钠、丙酸钠、硫酸链霉素抗性突变株,以琼脂块法分离纯化,经发酵液纳他霉素含量测定,得到突变株VU-37,产量由0.59g/L到0.66g/L,提高了12%.
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青霉素产生菌的诱变育种
本试验通过用化学诱变剂对现有青霉素生产菌种试验结果表明,筛选得到的239#菌株是优于232#菌株的高产、稳定菌株.
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紫外线与亚硝酸复合诱变在顶头孢霉菌选育中的应用
为了提高头抱菌素C的产量,通过对头孢菌素C产生菌顶头孢霉菌B42-V2进行紫外线和亚硝酸的复合诱变处理,得到变株B42-V2N,单位提高10.04%,且遗传性状非常稳定.实验表明:紫外线和亚硝酸复合诱变,操作简便、安全高效,所选育菌种遗传性状稳定.
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杆菌肽产生菌的诱变育种及培养基优化
以地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis SIPI-669-3为出发菌株进行诱变选育和发酵培养基优化,以提高杆菌肽产量.采用硫酸二甲酯(DMS)、紫外(UV)及钴-60(60Co)γ射线对SIPI-669-3进行诱变选育,并采用单因素试验和响应面法优化高产菌株发酵培养基.经过连续复合诱变,筛得高产突变株SIPI-γ93-14,产量较出发菌株提高了81.4%.优化后的发酵培养基碳、氮源为淀粉5.71%、豆粕10.0%和硫酸铵0.15%,此条件下杆菌肽产量较优化前提高14.5%.
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尿苷酸微生物转化菌株的选育
以产氨短杆菌K13为出发菌株,采用离子注入诱变,并以5-氟胞嘧啶筛选,终获得了尿苷酸高转化突变株KU-F14-14.突变株生物转化生产尿苷酸能力药为900mg/L,比出发菌株提高了161.6%.
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紫外和微波结合诱变选育lipstatin产生菌
以紫外和微波结合诱变选育lipstatin产生菌Streptomycestoxytricini SIPI-HJ-80,获得高产突变株SIPI-UM-5,其lipstatin摇瓶发酵单位是出发株的3.25倍.菌株经多次传代,遗传性状稳定.
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阿卡波糖产生菌的诱变育种
阿卡波糖(acarbose)是α-葡萄糖苷酶抑制剂,用于口服降血糖,其生物合成主要受到易利用的结构类似物麦芽糖(maltose)的阻遏和终产物的反馈抑制.通过诱变育种可部分解除其合成途径中的阻遏和抑制作用,促进产物合成.本文采用了紫外光预处理、在种子培养基中递增添加高剂量麦芽糖的连续诱变模式,希望获得抗性突变株或解除前体生物合成途径中反馈抑制的突变株,以提高前体的生成速率,满足生物合成需要[1].结果表明,此法优于涂布平板诱变方法,所得的M-20突变株的生产能力比出发菌株提高74%.
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雄甾烯二酮转化菌的诱变育种
分别采用紫外光、YAG倍频脉冲激光、紫外光与倍频激光复合处理等方法,以不同剂量对雄甾烯二酮(1)转化菌进行诱变照射,同时对激光的修复作用、诱变效果进行探讨.结果表明,被照菌株产1能力有不同程度的提高.当菌株经紫外光照射后再以不同剂量YAG倍频激光照射,获得一株高产优质突变株L-3-195,产1能力提高了116%,且不再产生结构类似副产物雄甾二烯二酮,经4次传代,突变株遗传性状稳定.
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紫外线和氯化锂对核糖苷链霉菌原生质体诱变作用的探讨
核糖霉素产生菌核糖苷链霉菌(Streptomyces ribosidificus)原生质体经紫外线和氯化锂复合处理得到2株新的菌株RF2-25和RF3-173,产生抗生素核糖霉素的能力分别比出发株RF-5提高了17%和15.3%,且已供工业化正常生产。该方法简单易行,效果很好。
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纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化
用紫外线对纳他霉素(Natamycin)产生菌褐黄孢链霉菌(Streptomyces glvosporeus)ATCC13326菌株孢子进行诱变处理后,利用链霉素抗性突变选育得122株链霉素抗性突变株.其中纳他霉素产量高于出发菌株的有13株.突变株SG-56的生产能力达到出发菌株的146%,研究了其发酵性能,优化了培养基组成和发酵工艺条件,纳他霉素产量为2.81g/L,较出发菌株产量提高了170%.
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复合酶高产菌株选育的研究
出发菌株黑曲霉FJ008,经紫外线、紫外线和亚硝基胍复合诱变获得一株复合酶高产菌株SL2111.该菌在基础发酵培养基上,变温培养72h,每克鲜曲酸性蛋白酶酶活可达4525 U/g、果胶酶7015 U/g、纤维素酶4497 U/g,分别比出发菌株提高97.9%、70.1%和13.4%.经斜面传代培养5代,产酶特性稳定.并运用相关分析法对17株变株所产的酸性蛋白酶酶活力、纤维素酶酶活力和果胶酶酶活力进行分析,结果表明:酸性蛋白酶酶活力与纤维素酶、果胶酶酶活力的变化呈正相关,因此可以选择酸性蛋白酶酶活力的高低作为复合酶菌种筛选及其持性研究的依据.
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L-精氨酸产生菌的选育及其发酵条件
以谷氨酸棒杆菌(Glutamicum corynebacterium)JHA5(His-,SGr)为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)和亚硝基胍(NTG)逐级诱变处理,获得一株精氨酸高产菌JDN28-50(His-SGrD-ArgrL-HAr).在以120g/L葡萄糖为碳源、50 g/L硫酸铵为氮源的培养基中培养4 d,产酸可达30 g/L.