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5-羟色胺与骨质疏松症
5 羟色胺( 5-Hydroxytryptamine,5-HT) 是一种吲哚胺类化合物.根据其合成部位的不同,而分为外周性5-HT和中枢性5-HT,可以通过两种截然不同的、相反的途径调节骨量.5-HT 相关系统已经展现出其作为新的治疗靶点和改善OP、影响骨代谢的巨大潜力,5-HT受体阻断剂、SERT 拮抗剂等有望成为新的一类有效治疗骨质疏松症的良药.本文就外周性5-HT与骨质疏松症的研究进展作一综述.
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二十碳五烯酸对三种肝癌细胞系作用的实验研究
目的 探讨二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid, EPA） 对3种肝癌细胞系作用。 方法 EPA作用于H epG2（携带有野生型p53基因）、Huh7（携带有突变型p53基因）和Hep3B（p53基因缺失）这 3种肝癌细胞系，通过细胞计数、DNA电泳、流式细胞技术和末端转移酶标记技术等来检测EP A对这3种细胞系的作用和可能的机制。 结果 EPA主要是通过诱导HepG2肝癌细胞系的细胞凋亡来抑制其生长，而且这种抑制作用呈现 出时间和剂量依赖的关系，而且同时发现EPA对于Huh7和Hep3B这两种肝癌细胞系无明显抑制 作用。 结论 细胞凋亡的诱导可能是EPA抑 制HepG2肝癌细胞系生长的主要机制，而且p53基因可能参与EPA诱导HepG2细胞系细胞凋亡的 过程。
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5,7,4′-三羟基异黄酮对增生性瘢痕成纤维细胞增殖细胞核抗原表达及细胞周期的影响
目的 观察5,7,4′-三羟基异黄酮(genistein)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及细胞周期的影响,探讨5,7,4′-三羟基异黄酮抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖的机制.方法 分离培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别加入25、50、100 μmol/L浓度的5,7,4′-三羟基异黄酮共培养48 h,免疫细胞化学法观察成纤维细胞PCNA蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 各组5,7,4′-三羟基异黄酮作用后细胞PCNA的表达均降低(P＜0.05),50 μmol/L及100 μmol/L浓度组的抑制作用为显著(P＜0.01);随药物浓度的增加,G0～G1期细胞比例逐渐下降,G2～M期细胞比例增加,表明细胞分裂受到抑制;100 μmol/L组的S期细胞数量比例也有增加,并于G1期前出现亚二倍体凋亡峰.结论 5,7,4′-三羟基异黄酮可通过影响细胞分裂与DNA合成抑制瘢痕增生.
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Genistein对增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1表达及细胞内游离钙的影响
目的 观察5,7,4'-三羟基异黄酮(Genistein)对增生性瘢痕成纤维细胞TCF-β1的表达及细胞内钙离子浓度的影响,探讨Genistein抗纤维化作用的机制.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,以不同浓度Genistein(25、50、100μmol/L)处理,RT-PCR法检测药物作用48h后细胞TGF-β1mRNA的表达,Western Blot法检测细胞TGF-β1蛋白表达量的变化;激光共聚焦显微镜动态观测Genistein处理后成纤维细胞内Ca2+浓度以及Genistein预处理后再加bFGF刺激的细胞Ca2+浓度的动态变化.结果 Genistein作用后增生性瘢痕成纤维细胞表达TGF-β1的mRNA与蛋白量均显著下调,并具有剂量依赖性;bFGF可使培养的成纤维细胞内游离Ca2+浓度升高,经Genistein预处理的细胞内Ca2+的浓度明显下降.结论 Genistein能抑制增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1,的表达,拮抗生长因子促细胞内游离Ca2+浓度增加的效应,可能是其抗纤维化作用的机制之一.
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MTHFR基因多态性与肺癌的相关性研究
目的:探讨MTHFR基因C677T多态性与肺癌之间的关系,寻找肺癌的易感基因.方法:研究分肺癌组及正常对照组,各100例,分别利用免疫组化法进行MTHFR基因多态性的检测.结果:PCR扩增出的MTHFR基因经Hinf Ⅰ限制性内切酶消化后可产生3种基因型:纯合子突变(TT型)、杂合子突变(CT型)和无突变者(CC型).肺癌组中CC型表达24例,CT型52例,TT型24例;对照组中CC型39例,CT型48例,TT型13例.两组比较,CC基因型差异有统计学意义,χ2=5.214,P=0.022;CT基因型差异无统计学意义,χ2=0.320,P=0.572;TT基因型差异有统计学意义,χ2=4.013,P=0.045.结论:MTHFR基因C677T多态性在肺癌病例与正常人之间的分布有所不同,有助于临床早期发现肺癌的易感人群.
关键词： 肺肿瘤 5 10-亚甲基四氢叶酸还原酶(FADH2) 基因 -
亚甲基四氢叶酸还原酶G1793A基因多态性与溃疡性结肠炎的关系
目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)G1793A基因多态性与浙江汉族人群溃疡性结肠炎(UC)的关系.方法 选择2004年3月-2010年5月收治的UC患者209例及同期健康体检者434例(正常对照),采用PCR-RELP方法检测MTHFRG1793A等位基因和基因型频率的分布.结果 UC患者中,MTHFRG 1793A等位基因和突变基因型GA+AA频率均高于正常对照组(23.21％vs 15.32％,P=0.001,OR=1.670,95％CI 1.246～2.238;37.80％vs25.81％,P=0.002,OR=1.747,95％CI 1.228～2.486).进一步根据UC患者临床特征进行分层分析发现,与远端结肠炎患者相比较,1793A等位基因和突变基因型GA+ AA频率在广泛结肠炎患者中亦明显增高(25.58％vs12.36％,P=0.0006,OR=0.351,95％CI 0.220～0.559;56.09％vs25.98％,P=0.0001,OR=0.275,95％CI 0.152～0.495).结论 MTHFR G1793A突变等位基因和基因型频率在浙江汉族人群UC患者中显著增高,提示该基因突变可能增加UC的发病风险并影响UC病变部位.
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坐骨神经选择性损伤应激对大鼠颌下腺中annexin 5表达的影响
目的 研究坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激态下SD大鼠颌下腺中annexin 5表达的变化.方法 72只SD大鼠随机均分为3组:手术组、假手术组和对照组(每组24只).手术组:用氯胺酮(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开左后肢侧面皮肤和股二头肌,暴露大鼠坐骨神经干及其3个分支:胫神经、腓总神经和腓肠神经,结扎并切断胫神经和腓总神经,保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型.假手术组:只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经.对照组:不做任何处理.分别于手术后14、21、28d从各组中取8只大鼠,麻醉后处死,分离颌下腺组织置于液氮内保存备用.然后通过免疫组织化学和Western blotting检测坐骨神经选择性损伤后14、21、28d时各组大鼠颌下腺中annexin 5蛋白定位及表达的变化.结果 免疫组化结果显示,annexin 5主要定位在颌下腺润管、分泌管及排泄导管上皮细胞中.术后14d,annexin 5在颌下腺的定位明显减少,Western blotting结果显示术后14d时与对照组比较,手术组大鼠颌下腺中annexin 5表达水平显著降低(P<0.01),与假手术组比较,手术组annexin 5表达水平也显著下降(P<0.05).但术后21和48d手术组与对照组、假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激能下调SD大鼠颌下腺中annexin 5的表达,annexin 5可能参与了颌下腺对应激的反应.
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关键词：
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活骨胶囊质量标准研究
目的 建立活骨胶囊的质量标准.方法 采用TLC法对活骨胶囊中当归、骨碎补、葛根、何首乌进行定性鉴别,采用HPLC法测定制剂中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量.结果 TLC分离清晰,阴性无干扰;2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.129～2.064 μg范围内呈良好的线性关系(r =0.9999),平均回收率为100.15％,RSD为0.76％(n=6).结论 该方法简便、灵敏、准确、重复性好,可作为活骨胶囊的质量控制标准.
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2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇对内毒素诱导巨噬细胞活化的影响
目的 检测2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇对细菌内毒素诱导的巨噬细胞RAW264.7释放TNF-α、IL-6及′TNF-α mRNA表达的影响.方法 RAW264.7细胞经不同浓度(0、10、20、40、80、160 mg/L)2′,5,6 ′,7-四羟基二氢黄酮醇预处理后,ELISA法分别检测LPS( 100 μg/L)刺激的RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6的水平,Real-Time PCR法检测TNF-α mRNA的表达水平.MTT法检测2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇对RAW264.7细胞活力的影响,以排除实验用量2 ′,5,6 ′,7-四羟基二氢黄酮醇的细胞毒性作用.结果 不同浓度的2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇预处理后,可显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放′NF-α和IL-6,显著抑制TNF-α mRNA的表达,并都具有量效关系.MTT实验结果显示,低于320 mg/L浓度的2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇对RAW264.7细胞无明显的毒性作用.结论 2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇能够拮抗LPS对炎症反应细胞的刺激效应,有望成为脓毒症防治药物的候选药物前体.
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马银花的化学成分研究
目的研究马银花的化学成分.方法利用硅胶色谱分离纯化马银花根的化学成分,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构.结果分离并鉴定了7个化合物,其结构分别为3,5,7-三羟基色原酮-3-O-β-D-吡喃木糖苷(I),蒲公英赛醇(II),β-谷甾醇(III),白桦酸(IV),槲皮素(V),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(VI)和葡萄糖(VII).结论化合物I为新化合物,化合物II-VII为首次从该植物中分离得到.
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草苁蓉化学成分的研究
目的:研究我国民间草药草苁蓉[Boschniakia rossica (Cham.et Schltdl) Fedtsch.et Flerov.]的化学成分.方法:草苁蓉全草醇提取物的乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱和制备薄层分离,分得8个化合物.通过波谱和化学方法鉴定了它们的结构.结果:8个化合物的结构分别鉴定为4,5,6-三羟基噢酮(1)、β-谷甾醇(2)、β-谷甾醇3-O-β-D-葡糖苷(3)、7-去氧-8-表马钱子酸(4)、没食子酸(5)、肉桂酸(6)、咖啡酸(7)和草苁蓉纳拉苷(8).结论:4,5,6-三羟基噢酮(1)为新的噢酮化合物,4个已知化合物:7-去氧-8-表马钱子酸(4)、没食子酸(5)、肉桂酸(6)、咖啡酸(7)为首次从草苁蓉中分得.
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何首乌水溶性成分2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡糖苷(ST I)对内皮细胞表达VEGF的影响
目的研究何首乌水溶性成分2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡糖苷(ST I)对溶血磷脂酰胆碱(LPC)诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法在ECV304细胞培养基中加入LPC(2.5 mg·L-1)或LPC与ST I共孵24 h,收集各组条件培养基,用基础酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组条件培养基中VEGF蛋白含量;用原位杂交法、RT-PCR及Realtime RT-PCR法检测LPC对内皮细胞VEGFmRNA的表达及ST I的影响.结果ECV304细胞暴露于LPC后,VEGF蛋白分泌明显增加;加入STI后VEGF蛋白含量明显降低;LPC可以使ECV304中VEGF mRNA的表达明显升高,并使VEGF165 mRNA的表达升高;ST I可剂量依赖性地抑制VEGF165 mRNA的高表达.结论LPC能诱导ECV304细胞表达高水平的VEGF蛋白及VEGFmRNA,1×10-5mol·L-1ST I可抑制LPC的作用,降低VEGF的高表达.
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制首乌中1个新的四羟基二苯乙烯苷的结构鉴定及其心血管活性研究
目的从制首乌(Radix Polygoni multiflori Preparata)水溶性部分寻找心血管活性成分.方法采用体外抑制血管平滑肌细胞(SMC)增殖活性跟踪筛选,利用Sephadex,反相硅胶柱色谱、HPLC对制首乌水溶性成分进行分离纯化,应用理化常数测定和光谱(UV,IR,MS,1HNMR,13CNMR,2D-NMR)分析技术鉴定结构.结果分离并鉴定了1个单体化合物2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-(6″-O-α-D-吡喃葡糖)-β-D-吡喃葡糖苷(I).结论 I为新化合物,具有较强的抑制SMC增殖活性.
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制首乌中两个新化合物
目的:研究制首乌(Radix Polygoni multiflori Preparata)化学成分.方法:应用硅胶、Sephadex、反相硅胶柱色谱对制首乌正丁醇萃取部分中化学成分进行分离纯化,应用理化常数测定和光谱(IR,MS,1HNMR,13CNMR,2D-NMR)分析技术鉴定结构.结果:分离并鉴定了5个单体化合物:大黄素甲醚-8-O-β-D-葡糖苷(Ⅰ)、大黄素-8-O-β-D-葡糖苷(Ⅱ)、决明蒽酮-8-O-β-D-葡糖苷(Ⅲ)、6-甲氧基-2-乙酰基-3-甲基-1,4-萘醌-8-O-β-D-葡糖苷(Ⅳ)、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-(2″-O-乙酰基)-β-D-葡糖苷(Ⅴ).结论:Ⅳ和Ⅴ为新化合物.
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海洋来源真菌Aspergillus aculeatus中一个新的具有长交叉共轭系统的甾体
本文对海洋来源的内生真菌棘孢曲霉Aspergillus aculeatus)的次级代谢产物进行了研究,从其提取物中分离得到一个新的具有较长交叉共轭系统的甾体类化合物,通过各种波谱分析方法确定其结构为15α-羟基-(22E,24R)-麦角甾-3,5,8(14),22-四烯-7-酮(15 α-hydroxy-(22E,24R)-ergosta-3,5,8(14),22-tetraen-7-one).测试了该化合物在体外对小鼠白血病细胞株P388、人早幼粒白血病细胞株HL-60、人前列腺癌细胞株PC-3的细胞毒作用.
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RP-HPLC法研究白藜芦醇衍生物(BTM-0512) 在大鼠血浆与组织中的分布
建立大鼠血浆与组织中白藜芦醇衍生物(BTM-0512)高效液相色谱测定方法,用于研究BTM-0512在大鼠体内的分布.色谱柱:BDS Hypersil C18(250 mm ×4.6 mm ID,5 μm),流动相:乙腈-水(55:45),流速:1 mL·min-1,检测波长:319 nm,己烯雌酚作内标.含药血浆与组织匀浆液用乙腈直接沉淀蛋白后,进样分析.本法线性范围为血浆:0.01～10.0 μg·mL-1,组织样品:0.04～40 μg·g-1,r2均大于0.996(n=7),方法的准确度平均值在95.3%～100.1%;提取回收率在95.9%～100.9%;日内、日间RSD＜5.1%.BTM-0512在血浆中含量较低,在肝脏中分布多,在脂肪中有蓄积现象.本法灵敏度高,操作简便、准确,可用于大鼠血浆及组织中BTM-0512的测定及分布研究.
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多基因突变在不同种族人群深静脉血栓形成中的研究现状
静脉血栓栓塞症是指血液在静脉系统中凝聚后形成的一种半固体栓子,其原因是纤维蛋白溶解和血栓形成之间平衡的破坏.凝血因子V Leiden突变(FVL),凝血酶原G20210A(FⅡG20210A),5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR),纤溶酶原激活物抑制药-1(PAI-1)等基因多态性是可以用于评估VTE患病风险的常见的分子生物标记物.鉴于FVL,FⅡG20210A,MTHFR,PAI-1等基因突变存在地域性差异,本文就不同种族间这四种基因多态性的国内外研究进展作一综述.
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RP-HPLC测定心脑康胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量
目的 建立心脑康胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷RP-HPLC含量测定方法.方法 色谱柱为Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5 μm); 流动相为乙腈-水(14:86); 检测波长为320 nm:柱温:25℃.结果 心脑康胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的的线性范围为 2.88～28.8 μg/ml ,(r=0.999 9),平均回收率为99.14%, RSD值为0.3%.结论 该方法简便,结果准确,可作为心脑康胶囊的质量控制方法.
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4',5,7三羟基异黄酮抑制骨髓瘤基质细胞bcl-2,bcl-xl,CyclinD1,ICAM-1和IL-6基因表达
目的:研究4',5,7三羟基异黄酮(Genistein)对人多发骨髓瘤(MM)基质细胞增殖和bcl-2,bcl-xl,CyclinD1,ICAM-1和IL-6基因表达的影响.方法:体外培养人多发骨髓瘤基质细胞,依据浓度梯度分别给予Genistein,用噻唑蓝染色法(MTT)观察Genistein对骨髓瘤基质细胞增殖的影响;10,20,40 mg·L-1 Genistein与溶剂对照组分别作用骨髓瘤基质细胞48 h后,半定量RT.PCR法检测骨髓瘤基质细胞bcl.2,bcl-xl,CyclinD1,ICAM-1和IL-6基因表达.结果:Genistein作用骨髓瘤基质细胞48 h,随浓度增加,细胞增殖逐渐下降;10,20,40 mg·L-1 Genistein处理组bcl.2,bcl-xl,CyclinD1,ICAM-1,IL-6基因mRNA的表达呈浓度依赖性下降,与溶剂对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:Genistein可能通过下调骨髓瘤基质细胞bcl-2,bcl-xl,CyclinD1,ICAM-1和IL-6基因mRNA的表达,抑制骨髓瘤基质细胞的生长.
关键词： 4' 5 7三羟基异黄酮(Genistein) 骨髓瘤基质细胞 基因表达
