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心叶淫羊藿化学成分研究
目的研究心叶淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.)的化学成分.方法利用硅胶柱色谱分离和纯化,通过理化方法及波谱分析鉴定其结构.结果分离得到5个化合物,波谱鉴定为:5,7,4′-三羟基-8,5′-二异戊烯基黄酮(Ⅰ)、淫羊藿素(i-caritin)(Ⅱ)、去甲淫羊藿素(desmethylicaritin)(Ⅲ)、3,7-二羟基-4′-甲氧基黄酮(Ⅳ)和3,7,3′,4′,5′-五羟基黄酮(robinetin)(Ⅴ).结论其中化合物Ⅰ为一新化合物,化合物Ⅳ和Ⅴ首次从该植物中分离得到.
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叶穗香茶菜地下部分化学成分研究(Ⅱ)
目的 研究叶穗香茶菜(Isodon phyllostachys)地下部分的化学成分.方法 采用硅胶、葡聚糖凝胶和反相材料色谱法分离纯化,利用现代波谱技术进行结构鉴定.结果 从石油醚部位和乙酸乙酯部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为13-羟基-8,11,13-三烯-桃柘-19-酸(1)、4-羟基桂皮醛(2)、泡桐素(3)、5,4'-二羟基-6,7,3'-三甲氧基黄酮(4)、7α-羟基谷甾醇(5)、豆甾醇(6)、(E)-2,5-二羟基桂皮酸(7)、松柏醛(8)、2-[N-(2-羟基二十二碳酰基)-亚氨基]-二十烷-12-烯-1,3,4-三醇(9)、桦木醇(10)、7α-羟基豆甾醇(11)、熊果酸(12)、胡萝卜二苷(13)和齐墩果酸(14).结论 化合物1～14均为首次从叶穗香茶菜地下部分获得,1～11为首次从该种植物中获得.
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圆锥铁线莲化学成分的研究
目的 对圆锥铁线莲全草的乙醇提取物进行分离和结构鉴定.方法 通过硅胶和凝胶柱色谱分离;利用多种波谱技术并结合酸水解方法鉴定其化学结构.结果 分离鉴定了7个化合物,分别为正二十三醇(Ⅰ)、正二十七烷酸(Ⅱ)、3,5,7,3'-四羟基黄酮(Ⅲ)、5,7,3',5'-四羟基二氢黄酮(Ⅳ)、芹菜素(Ⅴ)、木犀草素(Ⅵ)和豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ).结论 化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从铁线莲属中分离得到.
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3,4-二-O-甲基-1,2,5,6-四硝酸甘露醇酯对冠状动脉结扎大鼠心肌缺血的保护作用
目的 研究3,4-二-O-甲基-1,2,5,6-四硝酸甘露醇酯(3,4-di-O-methyl-1,2,5,6-D-mannitol tetranitrate,DMMTN)对冠状动脉结扎所致大鼠急性心肌缺血的保护作用及其作用机制.方法 以结扎左冠状动脉前降支方法建立大鼠急性心肌缺血模型,建立假手术组、心肌梗死模型组、鲁南欣康组、DMMTN低、中、高剂量(15,30,60 mg·kg-1)组,测定手术后不同时段心电图ST段和T段的抬高；并于手术3h后硝基四氮唑蓝(NBT)染色法测定心肌梗死面积；测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD).结果 DMMTN能显著缩小心肌梗死面积,抑制术后心电图ST段和T段的抬高；能显著降低CK和LDH的活力,以及MDA的含量,同时能显著提高SOD的活力.结论 DMMTN对冠状动脉结扎所致大鼠急性心肌缺血具有显著的保护作用.
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2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯的合成及其静脉乳剂的制备
目的 研制2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪的前药2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯静脉乳剂,以期延长川芎嗪的生物半衰期.方法 以川芎嗪为原料,经氧化、酰化、水解、酯化等反应合成2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯,进而以大豆油为油相,注射用大豆磷脂与泊洛沙姆188为乳化剂,制备其初乳,再经高压乳匀机匀化,制得其静脉乳剂.结果 所得产物经核磁共振氢谱、质谱、元素分析及紫外光谱确证其结构为2-羟甲基-3,5,6-三基吡嗪棕榈酸酯,色谱纯度大于98%,乳剂平均粒径为253.2 nm,Zeta电位为-28.7 mV;长期留样放置12个月,制剂外观性状、粒径、Zeta电位、pH及含量等指标均未见明显变化.结论 研制的2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯乳剂理化性质稳定,可达到静脉注射制剂要求,为进一步考察其药动学奠定了基础.
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2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯的合成及其静脉乳剂的制备
目的 研制2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪的前药2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯静脉乳剂,以期延长川芎嗪的生物半衰期.方法 以川芎嗪为原料,经氧化、酰化、水解、酯化等反应合成2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯,进而以大豆油为油相,注射用大豆磷脂与泊洛沙姆188为乳化剂,制备其初乳,再经高压乳匀机匀化,制得其静脉乳剂.结果 所得产物经核磁共振氢谱、质谱、元素分析及紫外光谱确证其结构为2-羟甲基-3,5,6-三基吡嗪棕榈酸酯,色谱纯度大于98%,乳剂平均粒径为253.2 nm,Zeta电位为-28.7 mV;长期留样放置12个月,制剂外观性状、粒径、Zeta电位、pH及含量等指标均未见明显变化.结论 研制的2-羟甲基-3,5,6-三甲基吡嗪棕榈酸酯乳剂理化性质稳定,可达到静脉注射制剂要求,为进一步考察其药动学奠定了基础.
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一点红化学成分研究
目的 研究一点红的化学成分.方法 应用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20柱色谱进行分离纯化,并通过波谱数据鉴定其结构.结果 分离得到10个化合物,通过理化及波谱数据分析鉴定化合物分别5,7,3′-三羟基4′-甲氧基黄酮-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(1),芹菜素-6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(3),槲皮素(4),橙酰胺乙酸酯(5),喘宁酰胺(6),木栓酮(7),豆甾醇(8),β-谷甾醇(9),胡萝卜苷(10).结论 化合物1～2,5～7,10首次从该属植物中分离得到.
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诸葛菜水溶性化学成分的研究
目的 研究诸葛菜的水溶性成分.方法 采用柱色谱技术对诸葛菜种子的提取物进行分离纯化,采用波谱技术结合化学方法进行结构鉴定.结果 从诸葛菜种子的水溶性部位中分离得到15个化合物,分别鉴定为blumeno1A(1)、3',5',5,7-四羟基二氢黄酮(2)、儿茶素(3)、槲皮素(4)、腺苷(5)、水杨酸(6)、2'-脱氧腺苷(7)、对羟基桂皮酸(8)、香草酸(9)、原儿茶酸(10)、咖啡酸(11)、丁香酸(12)、胡萝卜苷(13)、丁二酸(14)和壬二酸(15).结论 所得化合物均为首次从诸葛菜中分离得到,为该植物的化学成分分类奠定了良好的基础.
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何首乌不同炮制品中二苯乙烯苷的含量测定
目的测定首乌不同炮制品中二苯乙烯苷的含量.方法采用HPLC进行测定,以乙腈-水(25∶75)为流动相,紫外检测波长为320 nm.结果二苯乙烯苷在1.76～8.80 μg范围内呈线性,回收率为97.96%,RSD为2.13%.结论本法简便、灵敏、专属性强,为何首乌及其不同炮制品的质量评价提供了有效的方法.
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新齐墩果酸衍生物抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导凋亡的研究
目的 探讨一种新齐墩果酸衍生物(3β-hydroxyolea-12-en-28-oic acid-3,5,6-trimethylpyrazin-2-methyl ester,简称为受试物)对人肝细胞癌细胞株SMMC-7721细胞的抗肿瘤作用机制.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及细胞形态学观察新齐墩果酸衍生物对SMMC-7721细胞增殖及形态的影响;AnnexinV联合PI染色法检测新齐墩果酸衍生物对细胞膜以及用JC-1染色法检测线粒体膜电位的损伤程度;Western blotting检测新齐墩果酸衍生物对凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,caspase-9 andcaspase-3的表达.结果 新齐墩果酸衍生物能抑制人SMMC-7721细胞增殖力,与浓度和时间呈正相关,作用细胞48 h后,细胞出现核固缩,细胞裂解,产生凋亡小体等形态学改变,细胞膜完整性被破坏,线粒体膜电位(△Ψm)被降低,Bax、pro-caspase-9、cleaved caspase-9、pro-caspase-3以及cleaved caspase-3蛋白表达水平被上调,Bcl-2蛋白表达水平被下调.结论 这种新齐墩果酸衍生物在人SMMC-7721细胞中发挥抗癌作用可能与其破坏了线粒体功能有关.
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HPLC法测定制首乌药材中羟芪衍生物的含量
采用高效液相色谱法测定制首乌药材中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量.Diamonsil C18色谱柱(5μm,4.6×250mm),流动相:乙腈-甲醇-水(10∶20∶70),流速:1.5ml*min-1,检测波长:320nm.结果2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.0253～0.3542μg范围内线性关系良好;平均回收率为99.34%,RSD为0.49%.方法简便、快速,灵敏度高.
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5,10-亚甲基四氢叶酸还酶基因多态性与砷甲基化代谢的关系
目的:探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)基因多态性及其与叶酸联合作用对砷甲基化代谢的影响.方法:在砷中毒流行区选择饮水史清楚、饮水砷含量高于0.05 mg/L的43名居民,采集空腹静脉血并收集晨尿,以聚合酶链反应-限制性长度多态性方法分析MTHFR基因C677T位点多态性,采用高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光法检测尿中各种形态的砷,采用微生物法测定血清中叶酸水平.比较不同MTHFR基因型及其和叶酸联合作用与尿中砷化物百分构成的关系.结果:和MTHFR原型基因个体相比,MTHFR基因677位突变个体(包括杂合突变和纯合突变)尿中As3+构成增加(r=27.17,P=0.029),而二甲基胂酸百分含量下降(r=26.57,P=0.033);MTHFR C677T基因型和叶酸联合作用未对尿中不同砷化物百分构成产生影响(P＞0.05).结论:MTHFR基因C677T位点多态性可能影响个体砷代谢能力,且这种作用独立于血清叶酸水平.
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基于降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱的多指标成分定量方法研究
目的 建立以降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱参照峰为基准,计算多指标成分含量的定量方法.方法 建立降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为对照品,以其色谱峰为基准,计算主要色谱峰相对含量.结果 确定10个色谱峰为多成分定量指标,计算3批降脂宁调脂抗氧化有效部位中10个成分的总量,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷计分别为12.40%、12.44%和11.85%.结论 建立的多指标成分定量方法简便、可行,可作为降脂宁调脂抗氧化有效部位质量控制和评价方法之一.
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高效液相色谱法测定乌麦口服液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量
目的建立乌麦口服液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法.方法采用RP-HPLC法,YWG-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,10 μm),流动相为甲醇-乙腈-水(50:10:90);检测波长:320 nm;流速:0.5 mL/min.结果 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.0236～0.1410 μg(r=0.9997) 线性关系良好,平均回收率为100.01%,RSD为0.59%(n=5).结论本方法灵敏、准确、操作简便,重现性良好.
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2',5,6',7-四羟基二氢黄酮醇对内毒素刺激巨噬细胞ST2 mRNA表达的影响
目的 检测2',5,6',7-四羟基二氢黄酮醇(THF)对内毒素(LPS)刺激巨噬细胞ST2 mRNA表达的影响.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测不同浓度LPS刺激对RAW264.7细胞ST2 mRNA表达的影响及不同浓度THF对100μg/L LPS诱导的RAW264.7细胞ST2 mRNA表达的影响.结果 LPS(10、100、1000μg/L)可显著上调RAW264.7细胞ST2 mRNA的表达,依LPS浓度升高ST2 mRNA表达增强,呈剂量-效应关系;而以20～160 mg/L THF干预后,则可显著下调LPS(100μg/L)上调的ST2 mRNA表达.结论 THF可在基因水平上拮抗LPS对巨噬细胞ST2 mRNA表达的诱导效应.
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MTHFR基因A1298C多态性与胎儿出生缺陷的相关性
目的 探讨羊水中5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因A1298C多态性与中国人群胎儿畸形发生的关系.方法 抽取89例胎儿畸形孕妇(病例组)及80例无胎儿畸形孕妇(对照组)的羊水,提取胎儿游离DNA,应用聚酶链式反应-限制性片段长度多态性方法进行MTHFR基因A1298C多态性检测,同时采用循环酶法检测羊水中的同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)浓度.采用χ2检验及t检验进行统计分析.结果 病例组89例畸形胎儿中,纯合突变1例(1.1%),杂合突变40例(44.9%),野生基因型48例(54.0%).对照组80例中,纯合突变1例(1.3%),杂合突变22例(27.5%),野生基因型57例(71.2%).两组间比较,野生型及杂合突变差异有统计学意义(P < 0.05).病例组中等位基因(A、C)频率分别为76.4%、23.6%,对照组中分别为85%、15%,两组间A、C等位基因的出现频率均有明显差异,且病例组C等位基因出现频率明显高于对照组(χ2 = 3.96,P < 0.05).病例组羊水中Hcy浓度较对照组明显增高(P < 0.05).结论 MTHFR基因A1298C位点多态性可能是胎儿畸形的遗传易感因素.羊水中Hcy的浓度升高可能是胎儿畸形的危险因素.
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除脂生发片中有效成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯苷的高效液相色谱法含量测定
中成药中采用高效液相色谱法测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯苷的含量已经有文献报道,本文参考养血生发胶囊[1]和防脱生发灵洗液质量标准[2]及中国药典何首乌项下[3]等质量标准,采用高效液相色谱法测定制剂中所含2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯苷的含量,该法灵敏度高、专属性好、操作简便、重现性好,为除脂生发片的质量评价提供可靠的检测手段.
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HPLC法测定降脂减肥片中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量
目的 法测定降脂减肥片中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量.方法 采用HPLC法,选定色谱条件,进行线性关系和精密度考察,并做重复性试验和回收率试验.结果 降脂减肥片中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量基本稳定.结论 该方法简便、快速、结果准确,适用于降脂减肥片的质量控制.
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MTHFR不同基因型人群增补叶酸效果研究
目的 探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)不同基因型人群增补叶酸的效果.方法 120例健康女性志愿者,根据MTHFR 677C/T基因型检测结果 分为野生型(CC)37例、杂合型(CT)42例、突变型(TT)41例.将三种基因型随机分为观察组(61例)和对照组(59例),观察组予以叶酸干预,对照组不进行任何干预.比较CC型、CT型、TT型及三种基因的观察组和对照组血浆叶酸水平、血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平.结果TT型的血浆叶酸水平(5.76±1.56)μg/L明显低于CT型的(6.57±1.68)μg/L、CC型的(9.41±1.77)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05).TT型的血浆Hcy水平(14.15±2.07)μmol/L明显高于CT型的(11.36±1.81)μmol/L、CC型的(10.64±1.36)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05).干预后,CC型、CT型、TT型基因的观察组血浆叶酸水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TT型基因的观察组血浆Hcy水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 对MTHFR不同基因型人群增补叶酸,可有效提高CC型、CT型、TT型基因的血浆叶酸水平,且在TT型中具有显著的降血浆Hcy水平作用.
关键词： 5 10-亚甲基四氢叶酸还原酶 叶酸 同型半胱氨酸 -
骨外尤文氏肉瘤1例报告
目的 探讨骨外尤文氏肉瘤诊疗及预后特点.方法 结合文献分析1 例骨外尤文肉瘤的临床资料.结果 骨外尤文肉瘤早期诊断困难,诊断主要依靠病理组织学及免疫组化.结论 骨外尤文氏肉瘤恶性程度高,转移率高,综合治疗可以提高5 年生存率.
