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星点设计-效应面法优化龙须藤提取工艺
目的:优选龙须藤的提取工艺.方法:以乙醇体积分数、液料比、提取时间为自变量,浸膏得率、3',4',5',5,7-五甲氧基黄酮(黄酮1)和3 ',4'-亚甲二氧基-5',5,6,7-四甲氧基黄酮(黄酮2)含量的总评“归一值”为因变量,通过Design-Expert7.0.0软件对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,利用效应面法优选提取工艺并进行预测分析.采用HPLC测定黄酮1和黄酮2含量,色谱条件为流动相乙腈(A)-水(B)洗脱梯度(0～20 min,30％～40％ A;20～36 min,40％ ～48％A),检测波长324nm.结果:二项式拟合的复合相关系数较高,总评“归一值”达0.995 6;佳提取工艺为加14倍量45％乙醇提取2次,每次116 min;黄酮1和黄酮2的质量分数依次为0.046％,0.027％,浸膏得率21.21％.结论:利用星点设计-效应面法优化的龙须藤提取工艺稳定简便,具有良好的预测性.
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诸葛菜水溶性化学成分的研究
目的 研究诸葛菜的水溶性成分.方法 采用柱色谱技术对诸葛菜种子的提取物进行分离纯化,采用波谱技术结合化学方法进行结构鉴定.结果 从诸葛菜种子的水溶性部位中分离得到15个化合物,分别鉴定为blumeno1A(1)、3',5',5,7-四羟基二氢黄酮(2)、儿茶素(3)、槲皮素(4)、腺苷(5)、水杨酸(6)、2'-脱氧腺苷(7)、对羟基桂皮酸(8)、香草酸(9)、原儿茶酸(10)、咖啡酸(11)、丁香酸(12)、胡萝卜苷(13)、丁二酸(14)和壬二酸(15).结论 所得化合物均为首次从诸葛菜中分离得到,为该植物的化学成分分类奠定了良好的基础.
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PCB153对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响
目的 研究2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(2,2',4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl,PCB153)对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响.方法 采用0(对照)和25、100、200 μmol/L的PCB153分别处理人B淋巴母细胞2、24、48 h,收集细胞后提取总RNA.PCB153处理24 h的RNA样本用Illumina人HT-12 v4全基因组表达谱芯片筛测差异表达基因,并对差异基因进行基因本体论(gene ontology,GO)分类分析.在PCB153处理2、24、48 h样本中用实时定量PCR对候选差异基因进行验证.结果 芯片结果显示,各剂量PCB153处理样本中分别发现161、191、1 006个差异基因,三个剂量组重叠差异基因数为15个,其中,上调基因4个、下调基因11个.选取6个差异基因用定量PCR进行验证,发现2个上调基因(CCDC92和TMEM175)及3个下调基因(CCL22、STK38L和GZMK)的表达改变与芯片结果一致.基因CCDC92、CCL22、GZMK和TMEM175等可影响多种淋巴细胞功能,基因STK38L可作用于细胞周期和细胞凋亡等,基因CCL22和MTDH的异常表达则与多种癌症密切相关.结论 体外急性染毒PCB153干扰了人B淋巴母细胞某些重要功能基因的表达,为多氯联苯毒性的分子作用机制提供了依据.
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马尾松花粉化学成分的研究
目的 研究马尾松Pinus massoniana花粉的化学成分.方法 采用反复柱色谱法进行分离纯化,根据光谱数据及理化性质鉴定化合物的结构.结果 分离鉴定了11个化合物,分别是β-谷甾醇(1)、单硬脂酸甘油酯(2)、1-正十六烷酸甘油酯(3)、对羟基苯甲醛(4)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(5)、3,3',5,5',7-五羟基二氢黄酮醇(6)、双氢山奈素(7)、对羟基苯甲酸(8)、3,4-二羟基苯甲酸(9)、山柰酚(10),丁二酸(11).结论 化合物2～11均为首次从马尾松花粉中分离得到.
关键词： 马尾松 花粉 3 3' 5 5' 7-五羟基二氢黄酮醇 1-正十六烷酸甘油酯 -
4',5',7'-三羟基异黄酮对肺癌细胞的抑制作用及其机制
目的:探讨4',5',7'三羟基异黄酮对肺癌细胞的抑制作用及其相关的机制.方法:选择人肺腺癌细胞株A549为研究对象,分成3组:Genistein处理组、无水乙醇对照组和正常对照组.各组细胞应用MTT方法检测细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测细胞的周期,并计算增殖指数,并应用流式细胞仪检测细胞线粒体的膜电位的变化.结果:应用Genistein处理后细胞增殖受到明显抑制,表现为MTT吸收值降低,PI下降;同时△ψm下降的细胞百分率增加.结论:Genistein可以抑制肺癌细胞的增殖,其机制是通过改变细胞线粒体膜电位而促进肿瘤细胞的凋亡.
关键词： 4' 5' 7'-三羟基异黄酮 肺腺癌细胞株A549 线粒体膜电位 -
甲氧基黄酮类化合物对囊性纤维化跨膜电导调节因子的激活作用
囊性纤维化跨膜电导调节因子(CFTR)是一种cAMP依赖的C1-通道蛋白,其在上皮液体分泌过程中具有重要作用.本研究组在前期工作中观察到两种甲氧基黄酮类化合物3',4',5,5',6,7-六甲氧基黄酮(HMF)和5-羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(HTF)能够有效地激活CFTR Cl-通道,但是作用机制尚不清楚.本研究旨在利用细胞荧光淬灭模型和短路电流技术系统研究HMF和HTF对CFTR C1通道的激活作用.荧光淬灭实验结果显示两种化合物均能以剂量依赖的方式激活CFTR Cl-通道,该激活作用具有快速、可逆的特点,可被CFTR特异性抑制剂CFTRinh-172完全抑制;引人注目的是,HMF (EC50=2μmol/L)是迄今发现的亲和力高的黄酮类CFTR Cl-通道激活剂.HMF和HTF对CFTR Cl-通道的激活作用具毛喉素(forskolin,FSK)依赖特性,与FSK和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-Isobutyl-1-methylx,IBMX)的作用存在相加效应,但是与三羟基异黄酮(genistein,GEN)的作用之间不存在协同效应.离体组织研究结果显示,HMF和HTF能够显著促进大鼠结肠粘膜C1-电流及小鼠气管粘膜下腺液体分泌.以上结果提示,HMF和HTF能够通过提高cAMP水平和直接与CFTR蛋白作用两条途径发挥CFTR Cl通道激活作用.本研究为深入揭示黄酮类CFTR Cl-通道激活剂结构与功能之间的关系奠定了基础.
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3,3'-二溴-5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚的合成
目的 为了合成有效的手性配体,催化不对称杂Diels-Alder反应.方法 联二萘酚(BINOL)通过两种不同氢化后得到5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚,在CH2C12.溶液中,控制反应温度和反应时间,用单质溴取代,生成3,3'-二溴-5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚.结果 产物产率可达到90%.结论 此合成方法相对简单,却有很高的产率.
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3,3'-二溴-5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚的合成
目的 为了合成有效的手性配体,催化不对称杂Diels-Alder反应.方法 联二萘酚(BINOL)通过两种不同氢化后得到5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚,在CH2C12.溶液中,控制反应温度和反应时间,用单质溴取代,生成3,3'-二溴-5,5',6,6',7,7',8,8'-八氢-1,1'-联二萘酚.结果 产物产率可达到90%.结论 此合成方法相对简单,却有很高的产率.
