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TCDD或β-NF染毒对斑马鱼肝和鳃MROD酶活力的作用
2,3,7,8-四氯-二苯-对-二嘿英(2,3,7,8-tetrachlorod-ibenzo-p-dioxin,TCDD)、β-萘黄酮(beta-naphthoflavone,β-NF)是环境中常见的多环芳烃类(polycyclic aromatic hydrocarbon,PAHs)有机污染物,它们能通过大气环流远距离迁移,在植物表面沉积或通过水体污染饲料,后者被畜禽采食后进入畜禽体内,直接或间接进入人体[1-2].
关键词： 2 3 7 8-四氯-二苯-对-二噁英 β-萘黄酮 7-甲氧基-3-异吩唑噁酮-脱甲基酶 -
TCDD宫内暴露对雄性子代睾丸组织病理学形态和功能的影响
目的 通过设置日常接触(0.2 μg/kg.bw)和子代高非致畸(0.8μg/kg.bw)这两个极限剂量,探讨胚胎性腺性别决定期宫内2,3,7,8-四氯二苯并二嗯英(TCDD)暴露对子代成年雄性大鼠睾丸形态、精子发生及血清睾酮、雌二醇水平的不同影响.方法 孕SD大鼠随机分为TCDD染毒组(0.2和0.8μg/kg.bw)和对照组(玉米油+二甲基亚砜),于GD 8～14天每日定时灌胃染毒.测定90日龄成年雄性子代的体重增重、睾丸总重;睾丸组织切片苏木素-伊红(HE)染色后测量睾丸生精细胞层厚度,计算睾丸间质细胞密度,并使用Johnsen's Score对睾丸的精子发生进行评价;化学发光法测定血清中睾酮及雌二醇的水平.结果 (1)0.8 μg/kg.bw组成年雄鼠睾丸总重明显低于对照组(P＜0.05),0.2μg/kg.bw剂量组睾丸总重和体重增加量与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);(2)两个TCDD组睾丸Johnsen's Score得分均低于对照组(P＜0.05),0.8μg/kg·bw组生精细胞层厚度明显低于对照组(P＜0.05),睾丸间质细胞密度组间差异无统计学意义;(3)两个TCDD组成年雄鼠血清雌二醇水平明显下降(P＜0.05),睾酮水平组间差别无统计学意义.结论 胚胎性腺性别决定期内,孕鼠日常接触剂量和高剂量TCDD暴露均可造成成年雄鼠睾丸组织病理学形态的改变,睾丸生精细胞层厚度变薄,精子发生受损,可能影响睾丸精子生成,造成雄性子代生殖能力降低.
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抑制性消减杂交技术检测反式二羟环氧苯并芘转化细胞与正常细胞基因表达差异
目的 筛选7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(BPDE)转化细胞与正常细胞的基因表达差异.方法以BPDE转化支气管上皮细胞(16HBE)细胞为检测子(tester),正常16HBE细胞为驱动子(driver),应用抑制性消减杂交方法构建cDNA消减文库,经2次消减杂交和2次PCR后,将巢式PCR产物插入TA载体克隆,随机挑选克隆进行鉴定和测序,并用斑点杂交法验证其同源性,将所得序列进行GenBank的BLAST分析.结果发现了7个在BPDE转化细胞中高表达的基因,为翻译延长因子1α1、线粒体基因、溶解物载体家族25、EphA2、酪氨酸-3-加单氧酶/色氨酸-5-加单氧酶活化蛋白、乳酸脱氢酶A、TRIM28等,尚有一条在GenBank的已知基因中找不到对应序列,在EST序列中找到全长对应序列.结论发现的高表达基因可能在BPDE的致癌机制中起作用,另外,可能有未知基因与BPDE的恶性转化作用有关.
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低剂量2,3,7,8-四氯二苯并对二噁英宫内暴露对仔鼠卵巢功能的影响
目的 探讨2,3,7,8-四氯二苯并对二噁英(TCDD)宫内暴露对新生雌鼠早期卵巢功能的影响.方法 母鼠妊娠第13天(GD3)始每2天灌胃5、100、500 ng/kg TCDD.ECLIA法测定出生后3天(PND3)仔鼠雌二醇(E2)和孕酮(P)水平.采用石蜡切片及HE染色、透射电镜观察PND3仔鼠卵巢组织学变化,对原始卵泡和初级卵泡进行计数. 结果 500 ng/kg组的仔鼠血清E2和P水平[(5.4±0.4) pg/ml、(35.4±3.2) pg/ml]下降,与其他组比较,差异有统计学意义.各剂量组的原始卵泡、初级卵泡计数无差异;HE切片提示TCDD暴露后仔鼠卵巢组织有不同程度的病理改变,500 ng/kg组的毒性作用更为显著,透射电镜下可见初级卵母细胞变小、细胞核固缩,细胞器不清;颗粒细胞结构破坏,不完整. 结论 TCDD低剂量宫内暴露明显损害PND3仔鼠卵泡的超微结构、干扰卵巢雌二醇和孕酮的分泌,对子代雌鼠卵巢有毒性作用.
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5，7，3’，4’-O-四甲基槲皮素的制备工艺优化
目的：优化5，7，3’，4’-O-四甲基槲皮素（TMQ）的制备工艺。方法：以5，7，3’，4’-O-四甲基芦丁为原料，采用单因素实验和正交试验对TMQ的制备工艺进行优化。结果：酸性水溶液法制备TMQ的佳工艺条件为：乙醇浓度0，温度80℃，盐酸浓度0.50%，水解时间1.0 h。结论：该方法收率高、工艺简单、稳定可行。
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九里香叶中的化学成分
目的:研究九里香叶的药效物质基础.方法:利用制备薄层、反复硅胶色谱、半制备HPLC等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据对分离的化合物进行结构鉴定.结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为5,7,3’,4’-四甲氧基黄酮(1),5,7-二羟基-3’,4’,5’-三甲氧基黄酮(2),5-羟基-3,7,3 ',4’-四甲氧基黄酮(3),3-羟基-5,6,7,4’-四甲氧基黄酮(4),川陈皮素(5),香草酸(6),咖啡酸乙酯(7),5-羟基-7,3’,4’-三甲氧基黄酮(8),3,5-二羟基-6,7,3’,4'-四甲氧基黄酮(9),5,6,4-三羟基-3,7,-二甲氧基黄酮(10),山柰酚(11).结论:3,4,6,9,10为首次从九里香叶中分离得到.
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HPLC测定龙血竭提取物中龙血素A,B和7,4'-二羟基黄酮的含量
目的:建立龙血竭提取物中龙血素A,B和7,4'-二羟基黄酮的含量测定方法.方法:采用Kromasil C18色谱柱流动相乙腈-1％冰醋酸梯度洗脱,体积流量1 mL· min-1,柱温40℃,进样量10μL,检测波长龙血素A,B为278 nm,7,4'-二羟基黄酮为330 nm.结果:龙血素A,B和7,4'-二羟基黄酮分别在10.05 ～60.36 μg,10.08 ～60.48 μg,3.26 ～19.56 μg呈良好的线性关系；平均加样回收率分别为108.6％( RSD 0.99％),109.6％( RSD 1.03％),102.7％(RSD 1.24％).结论:方法简便易行,结果准确,可用于龙血竭提取物的质量控制.
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HPLC同时测定裸花紫珠中4种黄酮
目的:建立同时测定裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮含量的反相高效液相色谱法.方法:采用HPLC,Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm ×200mm,5im),流动相甲醇-体积分数为0.1％磷酸水系统,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温室温,检测波长350 nm.结果:在上述色谱条件下测得木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮的质量浓度分别在0.000 8 ～0.016,0.001 6～0.032,0.004 ～0.08,0.0024～0.048 g·L-1时与色谱峰面积之间线性关系良好;平均回收率为98.5％ (RSD 1.7％),98.6％ (RSD 1.6％),98.6％ (RSD 1.4％),98.6％ (RSD 1.7％).结论:该方法精密度高,重复性好,可用于裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β--D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮的含量测定.
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HPLC同时测定裸花紫珠中4种黄酮
目的:建立同时测定裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮含量的反相高效液相色谱法.方法:采用HPLC,Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm ×200mm,5im),流动相甲醇-体积分数为0.1％磷酸水系统,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温室温,检测波长350 nm.结果:在上述色谱条件下测得木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮的质量浓度分别在0.000 8 ～0.016,0.001 6～0.032,0.004 ～0.08,0.0024～0.048 g·L-1时与色谱峰面积之间线性关系良好;平均回收率为98.5％ (RSD 1.7％),98.6％ (RSD 1.6％),98.6％ (RSD 1.4％),98.6％ (RSD 1.7％).结论:该方法精密度高,重复性好,可用于裸花紫珠药材中木犀草素-7-O-β--D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮和5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮的含量测定.
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铁甲草化学成分
目的:研究铁甲草的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱法,凝胶柱色谱法,反相柱色谱法等方法进行分离纯化,结合理化常数和波谱数据分析鉴定化合物的结构.结果:从铁甲草中分离得到12个化合物,其结构分别鉴定为香草酸(1),木犀草素-7-O-β-D-葡葡萄糖苷(2),木犀草素(3),大黄酚-龙丹二糖苷(4),5,7,4’-三羟基-3’-甲氧基黄酮(5),槲皮素(6),山柰酚(7),齐墩果酸(8),大黄素(9),大黄素甲醚(10),胡萝卜苷(11),β-谷甾醇(12).结论:其中化合物5为首次从该属中分离得到,化合物1,4,6,7为首次从铁甲草中分得.
关键词： 铁甲草 分离鉴定 5 7 4'-三羟基-3’-甲氧基黄酮 -
HPLC 测定壮药剑叶龙血树中白藜芦醇和7,4'-二羟基黄酮的含量
目的 建立一种同步测定剑叶龙血树中白藜芦醇和7,4'-二羟基黄酮含量的方法.方法 以C18反相键合硅胶为填料,甲醇-乙腈-0.2%磷酸(30:7:63)为流动相,检测波长为306 nm,柱温35 ℃.结果 白藜芦醇和7,4'-二羟基黄酮分别在0.185 0～1.850 μg(r ＝0.999 9)和0.158 2～1.582 0 μg(r ＝0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.02%、99.09%,RSD 分别为2.57%、2.24%.结论 本方法简便、灵敏、准确度高,可用于建立剑叶龙血树质量控制标准.
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中药补骨脂化学成分的研究
目的:研究中药补骨脂的化学成分.方法:用色谱分离,用理化性质及波谱方法鉴定结构.结果:从中分离鉴定了5个化合物,分别为呋喃(2″,3″,7,6)-4′-羟基二氢黄酮(1),补骨脂定(2),5,7,4′-三羟基异黄酮(3),补骨脂素(4),异补骨脂素(5).结论:化合物1为新化合物,命名其为补骨脂二氢黄酮;首次归属了化合物2的13C-NMR数据.
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活血益气汤中1个新的异黄酮类化合物
目的:研究活血益气汤活性部位的化学成分,阐明其产生抗肝纤维化作用的物质基础.方法:采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱分离,通过理化性质和波谱分析鉴定化合物结构.结果:从活血益气汤活性部位中分离并鉴定了14个化合物.结论:以上化合物为首次从该复方中分离得到,其中7,3'-二羟基-5'-甲氧基异黄酮是B环为间位取代的异黄酮类化合物,为新化合物.
关键词： 中药复方 活血益气汤 7 3'-二羟基-5'-甲氧基异黄酮 -
升麻中新三萜皂苷类成分研究
目的:开发利用升麻Cimicifuga foetida 资源,从中寻找新的天然活性成分.方法:利用各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和各种波谱技术辅以化学方法进行结构鉴定.结果:[ HT5"SS 从升麻根茎80%的乙醇浸膏的EtOAc提取部分中分得4个升麻三萜皂苷类成分,分别鉴定为:7,8-二脱氢-27-脱氧升麻亭(7,8-didehydro-27-deoxyactein,1),24-氧 -乙酰升麻醇-3-O-β-D-木糖苷(23R,24R)[24-O-acetylshengmano l-3-O-β-D-xyl(23R,24R),2],升麻醇(cimigenol,3),升麻醇-3- O-β-D-木糖苷(cimigenol-3-O-β-D-xyl,4).结论: 化合物1为新化合物,2～4为首次从该植物中分得的化合物.体外抗骨质疏松药理活性筛选(以SRB法检测)结果表明,化合物1,2和4在浓度为10-9 kg*L-1时 ,对大鼠成骨肉瘤细胞株(URM106)有明显的增殖作用.
关键词： 升麻 三萜皂苷 7 8-二脱氢-27-脱氧升麻亭 抗 骨质疏松 -
桑白皮的化学成分研究(Ⅱ)
目的:研究桑白皮的化学成分.方法:采用硅胶和凝胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和光谱数据分析鉴定化合物.结果:分离并鉴定了11个化合物,分别为:桑辛素C(moracin C,1),桑辛素M(moracin M,2),桑辛素M-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(moracin M-3'-O-β-D-glucopyranoside,3),桑辛素O(moracin O,4),桑皮酮S(kuwanon S,5),桑皮酮T(kuwanon T,6),5,7-二羟基色酮(5,7-dihydroxychromone,7),5,7,2'-三羟基二氢黄酮-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5,7,2'-trihydroxyflawone4,-O-β-D-glucoside,steppogenin-4'-O-β-D-glucoside,8),7-羟基香豆素(7-hydroxycoumarin,9),5,7-二羟基香豆素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5,7-dihydro-xycoumarin-7-O-β-D-glucopyranoside,10),桑叶苷C(mullberroside C,11).结论:其中化合物8为首次从该属植物中分离得到,化合物2,4,6为首次从该植物中分离得到.
关键词： 桑白皮 化学成分 5 7 2'-三羟基二氢黄酮4'-O-β-D.吡喃葡萄糖苷 -
HPLC同时测定龙血竭及其提取物中5个有效成分的含量
目的:建立HPLC同时测定龙血竭及其提取物中龙血素A,龙血素B,7,4’-二羟基黄酮,紫檀茋,白藜芦醇含量的方法.方法:采用Kromasil 100-5 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相乙腈-1％冰醋酸,梯度洗脱;流速1 mL· min-1;柱温40℃;检测波长龙血素A和龙血素B为278 nm,7,4’-二羟基黄酮、紫植茋和白藜芦醇为319 nm.结果:5个有效成分在40 min内均达到基线分离,线性关系良好(r≥0.999 7).龙血竭中龙血素A,龙血素B,7,4'-二羟基黄酮,紫檀茋,白藜芦醇的平均回收率分别为102.9％,96.81％,97.29％,100.7％,103.7％,RSD分别为0.23％,1.5％,0.42％,0.58％,0.34％;龙血竭提取物中龙血素A,龙血素B,7,4’-二羟基黄酮,紫檀茋,白藜芦醇的平均回收率分别为102.2％,96.93％,97.90％,102.0％,103.3％,RSD分别为1.7％,0.91％,1.4％,1.5％,1.2％.结论:本方法操作简便、结果准确,具有较好的重复性和稳定性,为龙血竭及其提取物的质量控制提供了一个很好的参考.
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7,12-二甲基苯丙蒽诱导Wistar大鼠乳腺癌发生过程中端粒酶活性变化
目的动态观察在乳癌发生过程中端粒酶活性的变化,明确端粒酶在乳癌发生中的意义.方法采用7,12-二甲基苯丙蒽(DMBA)诱导雌性Wistar大鼠乳癌,TUNEL法检测凋亡细胞,Rt-PCR-ELISA法检测端粒酶活性.结果在乳癌发生过程中端粒酶活性逐渐增强,乳腺增生组端粒酶活性高于正常乳腺组(P＜0.01),乳癌组端粒酶活性高于乳腺增生组(P＜0.01).单发乳癌组与多发乳癌组间端粒酶活性无明显差异(P＞0.05),乳腺增生组织中凋亡细胞多于乳癌组织中凋亡细胞(P＜0.01).结论在乳癌发生过程中,乳腺凋亡细胞逐渐减少,端粒酶活性逐渐增强.
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三台红花化学成分的研究(Ⅱ)
目的:研究三台红花的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱分离,用波谱学方法确定结构.结果:从乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分得到5个单体化合物, 其结构鉴定为2,5 - 二甲氧基苯醌(Ⅰ) ,5, 7, 4' - 三羟基 -3' - 甲氧基黄酮(Ⅱ),豆甾醇 - 3-O-β-D-葡萄糖苷( Ⅲ).结论:3个化合物为首次从该植物分离得到.
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基于患者体质量指数的68Ga-DOTA-NOCPET/CT佳采集条件
目的 探讨基于患者体质量指数(BMI)的68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-1-柰丙氨酸-奥曲肽(DOTA-NOC) PET/CT佳采集条件.方法 收集89例接受68Ga-DOTA-NOC PET/CT全身扫描的神经内分泌肿瘤患者,根据体质量指数分为偏瘦组(n=13)、正常组(n=40)、超重组(n=31)和肥胖组(n=5).以真符合计数率、随机符合计数率、等效噪声比(NECR)、随机分数和变异系数(CV)评估PET图像质量,分析其与BMI的关系,并比较4组间差异.结果 89例患者平均BMI为(22.99±3.77)kg/m2,68Ga-DOTA-NOC注射剂量为(1.04±0.27)MBq/kg体质量.真符合计数率、随机符合计数率和NECR均与显像剂注射剂量呈线性正相关(r=0.71、0.71、0.72,P均＜0.01).NECR在显像剂注射剂量约为1.65 MBq/kg体质量时获得大值.4组真符合计数率差异有统计学意义(F=6.26,P＜0.01),且BMI正常组患者真符合计数率与偏瘦组、超重组和肥胖组的比值分别为0.82、1.12和1.28.CV值随显像剂注射剂量的增加而下降(r=0.78,P＜0.01),4组间差异有统计学意义(F=16.48,P＜0.01).4组间随机分数差异无统计学意义(F=1.33,P=0.27).结论 基于患者BMI,68Ga-DOTA-NOC PET/CT推荐方案如下:偏瘦患者显像剂注射剂量参考范围为1.05～1.15 MBq/kg体质量,大不超过1.30MBq/kg体质量;超重患者和肥胖患者的每床位采集时间分别延长1.2～1.3倍和1.3～1.5倍.
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基于患者体质量指数的68Ga-DOTA-NOCPET/CT佳采集条件
目的 探讨基于患者体质量指数(BMI)的68Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-1-柰丙氨酸-奥曲肽(DOTA-NOC) PET/CT佳采集条件.方法 收集89例接受68Ga-DOTA-NOC PET/CT全身扫描的神经内分泌肿瘤患者,根据体质量指数分为偏瘦组(n=13)、正常组(n=40)、超重组(n=31)和肥胖组(n=5).以真符合计数率、随机符合计数率、等效噪声比(NECR)、随机分数和变异系数(CV)评估PET图像质量,分析其与BMI的关系,并比较4组间差异.结果 89例患者平均BMI为(22.99±3.77)kg/m2,68Ga-DOTA-NOC注射剂量为(1.04±0.27)MBq/kg体质量.真符合计数率、随机符合计数率和NECR均与显像剂注射剂量呈线性正相关(r=0.71、0.71、0.72,P均＜0.01).NECR在显像剂注射剂量约为1.65 MBq/kg体质量时获得大值.4组真符合计数率差异有统计学意义(F=6.26,P＜0.01),且BMI正常组患者真符合计数率与偏瘦组、超重组和肥胖组的比值分别为0.82、1.12和1.28.CV值随显像剂注射剂量的增加而下降(r=0.78,P＜0.01),4组间差异有统计学意义(F=16.48,P＜0.01).4组间随机分数差异无统计学意义(F=1.33,P=0.27).结论 基于患者BMI,68Ga-DOTA-NOC PET/CT推荐方案如下:偏瘦患者显像剂注射剂量参考范围为1.05～1.15 MBq/kg体质量,大不超过1.30MBq/kg体质量;超重患者和肥胖患者的每床位采集时间分别延长1.2～1.3倍和1.3～1.5倍.
