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  • 高效液相色谱法测定何首乌及制首乌中羟芪衍生物的含量

    作者:鲁静;粟晓黎;董海荣;李民生

    目的:建立中药何首乌专属性成分的测定方法.方法:应用低压柱色谱法,从中分离得到羟芪衍生物-2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,并以此对照建立了测定方法.结果:采用C18色谱柱,25%乙腈为流动相,320 nm检测.线性关系考察,回归方程为:Y=1 024.04+1 588 084.61X,r=0.999 9.加样回收率平均值为99.76%,RSD=1.22%(n=5).结论:本法简便、灵敏、专属性强,为何首乌及制首乌的质量评价提供了有效的方法.

  • 更年安片质量分析

    作者:施法;侯峰;郭汉文;田金苗;张满来

    目的:通过对更年安片119批次样品进行标准检验及探索性研究,对该品种的质量及标准状况作出总体分析及评价.方法:标准检验依据中国药典2005年版增补本,包括TLC鉴别及HPLC含量测定.探索性研究采用显微鉴别法以检查处方中原粉投料药材;对何首乌及五味子的薄层色谱鉴别进行再研究;建立了在同一色谱条件下测定更年安片中6个化学成分(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、仙茅苷、丹皮酚、哈巴俄苷、五味子醇甲)已明确)的HPLC方法.结果:按现行质量标准检验,合格率100%;按探索性研究检验,提高了方法的可控性.结论:探索性研究增加了标准的专属性、可控性及安全性,为进一步修订药品标准、控制药品质量提供参考.

  • 思南县女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性调查及其与血清同型半胱氨酸水平相关性的研究

    作者:田敏;鲁衍强;毛万成;李瑛;陈绍发;张羽霞;陈燕;杨琦

    目的:研究叶酸代谢障碍关键酶基因5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C位点基因多态性与血清同型半胱氨酸(HCY)的相关性.方法:随机以贵州省思南县2 188例女性为研究对象,检测其MTHFR C677T、A1298C基因位点多态性,采用统计学方法分析该地区基因的多态性分布特征,并与其他同等级区域人群既有数据比对分析;对其中276例孕期女性,测定血清HCY浓度,分析该指标与遗传因素的相关性.结果:本县的汉族、苗族、土家族女性MTHFRC677T、A1298C位点基因型及等位基因分布情况差异无统计学意义(P>0.05).本地区汉族女性MTHFR 677TT基因型频率(14.9%)显著低于尚志、三河、寿光、张家港等地人群(P<0.05),显著高于陵水县人群(P<0.05);与郫县人群数据差异无统计学意义(P>0.05).MTHFR 1298CC基因型频率(4.2%)与郫县人群无统计学差异(P>0.05),与其他各地区人群均有统计学差异(P<0.05).血清HCY水平在C677T位点3种基因型间有统计学差异(P<0.05),而A1298C位点3种基因型间无统计学差异(P>0.05).结论:本县汉族女性MTHFR基因C677T、A1298C位点多态性分布特征有其自身的特点;C677T位点的多态性变化对血清HCY水平有显著影响.

  • 贵州六盘水市彝族与汉族女性叶酸代谢关键酶基因多态性特征分布

    作者:王辉;鲁衍强;王宏;田艳;胡秀颀;涂传荧;彭秋菊;杨琦

    目的 了解六盘水市彝族、汉族育龄女性叶酸代谢水平,为指导当地孕期叶酸补充提供一定的依据.方法 选取2016-2017年期间进行孕期体检的育龄女性1 054例(汉族950例,彝族104例)为研究对象,采集口腔黏膜上皮脱落细胞提取基因组DNA,利用荧光定量PCR方法检测受检者5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)(C677T、A1298C)和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)(A66G)位点基因型与等位基因频率,并通过与西南地区已报道的其他少数民族进行比较,获得本地区彝族、汉族上述基因位点多态性分布特征.结果 六盘水市彝族女性MTHFR C677T位点基因型和等位基因频率与当地汉族、思南苗族、思南土家族、大理白族比较均具有统计学差异,其中MTHFR 677CT,677TT基因型频率均低于其他民族.结论 六盘水市彝族与汉族育龄女性叶酸代谢关键酶基因位点多态性特征有所区别,可以有针对性地制定符合当地民族特征的个性化叶酸补充方案.

  • 柳州市壮族与汉族女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶、甲硫氨酸合成酶还原酶基因型和等位基因频率的分布

    作者:邱萍;鲁衍强;付敏;俞筠;严提珍;唐宁;农铮;王远流;李伍高

    目的:调查柳州市壮族与汉族女性中5,I0-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因的单核苷酸多态性分布特征.方法:通过横断面调查研究方法,以广西省柳州市372位壮族和478位汉族女性为研究对象,检测其MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G基因位点多态性,统计分析该地区基因多态性的分布特征,并与已报道的其他地区少数民族女性数据进行比较.结果:该地区壮族和汉族女性比较,MTHFR C677T的基因型频率差异在两者间有统计学意义(P<0.05),而MTHFR A1298C和MTRR A66G两者间无统计学差异(P>0.05);MTHFR C677T和A1298C的等位基因频率在两民族间的差异有统计学意义(P<0.05),而MTRR A66G则无统计学差异(P>0.05).该地区壮族女性MTHFR C677T的基因型频率和等位基因分布与延边朝鲜族、新疆维吾尔族、银川回族、思南苗族、思南土家族、柳州苗族、三亚黎族间差异均有统计学意义(P<0.05);而该地区壮族女性MTHFR A1298C的基因型频率和等位基因分布与延边朝鲜族、银川回族、思南苗族、思南土家族间亦有统计学差异(P<0.05);MTRR A66G的分布上则与新疆维吾尔族、思南苗族、思南土家族、南宁壮族、三亚黎族有统计学差异(P<0.05).结论:广西省柳州市壮族女性的MTHFR和MTRR基因多态性分布特征与该地区汉族女性不同,与其他地区少数民族也不相同.

  • MTHFR基因多态性检测在生殖健康领域的临床价值

    作者:赵加洪;李瑛;鲁衍强;贾文静;杨琦

    5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)是催化人体内叶酸代谢的关键酶,该酶具有多种基因多态性.众多研究表明其基因多态性会影响体内叶酸及同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)水平,与神经管畸形、复发性流产、妊娠期高血压等疾病的发生密切相关,严重影响母婴健康.本文就该基因多态性的检测在生殖健康领域的临床应用价值作一综述.

  • 游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

    作者:崔素珍;韩世泉;官国英;侯惠仁;李丽波;张莉岭;许文革;刘一兵;王玉肖

    采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法.其灵敏度为0.90 pmol/L,标准曲线范围0.9~45.0 pmol/L,批内变异系数3.1%~8.1%,批间变异系数4.9%~10.6%.测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5~11.1 pmol/L,均值为5.1±2.0 pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7~37.3 pmol/L,均值为20.5±7.1 pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9~3.8 pmol/L,均值为2.0±0.9 pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4~8.5 pmol/L,均值为6.0±2.5 pmol/L.通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(R1A)的测定结果有良好的相关性.应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用.

  • 血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

    作者:官国英;李丽波;刘忠瑞;许文革;韩世泉

    以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3'-三碘甲腺原氨酸(T3)生物素-亲合素酶联免疫分析(T3-BA-EL1SA)方法.结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%~8.3%和6.5%~10.5%,回收率为98.1%~107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.9957.本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用.

  • 纺织品中2,3,5,6-四氯苯酚残留量测定方法的研究

    作者:曹锡忠;沈崇钰;蔡建和;徐鑫华;赵增运

    样品中的TeCP用碳酸钾溶液提取后,再用乙酸酐乙酰化,以正己烷提取,用气相色谱-电子俘获检测器(GC-ECD)测定,外标法定量.探讨了几种天然纤维纺织品试样提取、乙酰化等条件,方法的检出限0.02mg/kg,加标回收率88.4%~102.6%,RSD≤4.0%.

  • 大鼠一次性经皮染毒毒死蜱的毒代动力学和毒效应学研究

    作者:赵敏娴;姚欣雅;曹正颖;王灿楠

    目的:研究大鼠一次性经皮染毒毒死蜱(CPF)的毒代动力学和毒效应学特征.方法:成年雌性SD大鼠按体质量随机分成3个剂量组(69.75、139.5、279 mg/kg)和1个对照组(0 mg/kg),皮下注射染毒,各组在给药后3、6、12、24、48、72 h共6个时间点收集大鼠血液和大脑皮质样本,在0 ~ 24、0~ 48和0~72h连续收集尿液样本.测定指标包括血清CPF浓度,血清和尿液3,5,6-三氯-2-吡啶(TCP)浓度以及血清和大脑皮质乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果:经皮染毒CPF剂量越大,大鼠血清CPF和TCP浓度越高,尿TCP排出量越大,血和皮质AChE活性抑制越大;血清CPF浓度在6h达峰值,血清TCP浓度在12~24h达峰值,血AChE活性在24 h低,大脑皮质AChE活性在24 ~ 48 h低.各剂量组血清CPF的半衰期为29 ~ 48 h,0~72 h曲线下面积(AUC)为31~ 110h ·μmol/L;血清TCP的半衰期为28~54 h,0~ 72 h AUC值为897~3 450 h·μmol/L.血AChE活性和大脑皮质AChE活性呈正相关(P<0.01),且血中的抑制率大于大脑皮质(P<0.01).用DoseResp函数拟合血清CPF和AChE活性,呈现出剂量反应关系.结论:CPF外暴露剂量与大鼠体内CPF、TCP和AChE活性相关,内暴露水平和血AChE活性存在剂量效应关系;尿TCP排出量可作为机体暴露水平的生物标志;血AChE活性是大脑皮质AChE活性的有效生物标志.

  • 4,5,7-三羟基异黄酮对子宫内膜癌细胞株shikawa细胞增殖的影响

    作者:孙兵;周莉

    背景与目的:探讨4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对子宫内膜癌细胞增殖的影响.材料与方法:采用5-溴-2'-脱氧尿苷细胞增殖酶联免疫测定法,检测浓度为12.5、25、50、100μmol/L的Genistein对体外培养子宫内膜癌细胞的增殖和生长抑制作用.结果:12.5~25μmol/L浓度的Genistein对Ishikawa细胞有增殖作用,当Genistein的浓度达到100μmol/L时则为抑制作用.结论:随着Genistein浓度的变化而对子宫内膜癌细胞起着增殖或生长抑制作用.

  • 延龄长春片质量标准研究

    作者:李长惠;于秀华;逄焕杰;孙桂梅

    目的:制订延龄长春片的质量标准,寻找控制产品质量方法.方法:采用高效液相色谱法对制剂中制何首乌的有效成分二苯乙烯苷进行含量测定.结果:二苯乙烯苷在0.278-1.390μg间线性关系良好,r=0.9999;回收率为97.60%,RSD=1.41%.结论:本方法准确可靠、重现性好,可用于该制剂的质量控制.

  • 藏族女性MTHFR基因多态性与原发性不孕症相关性分析研究

    作者:李君;鲁衍强;王宏;王亚玲;尼泳涛;任德娟;杨琦

    目的通过对研究对象5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T,A1298C位点多态性分析,了解其在藏族不孕症女性中的分布多态性特征.方法选择2017年间在医院进行孕期检查的育龄藏族女性,其中经诊断确定为原发性不孕症患者214人(不孕症组),正常受孕且无不良孕产史者257人(对照组).采集口腔黏膜脱落细胞并提取基因组DNA,利用荧光定量PCR方法检测受检者MTHFR(C677T,A1298C)位点基因型与等基因频率,通过两组比较,获得不孕症组人群上述位点多态性特征.结果不孕症组MTHFR A1298C位点基因型和等位基因频率高于对照组,差异具有统计学意义.结论藏族女性原发性不孕症的发生,与MTHFR A1298C位点基因多态性具有一定相关性,可为不孕症的临床诊断与治疗提供一定的支持依据.

  • 浅析胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ应用在非小细胞肺癌组织中的临床价值及表达

    作者:秦建林

    目的 分析胞浆-5,-核苷酸酶-Ⅱ在非小细胞肺癌组织中的表达.方法 随机抽取2012年4月——2014年11月诊治的120例NSCLC患者肿瘤组织样本,其目的观察核苷酸酶-Ⅱ的表达情况,其中有60例患者参加含Gem方案的化疗,通过对数秩和检验对比不同CN-Ⅱ表达情况之间的差异.结果 在NSCLC组织中存在的CN-Ⅱ的阳性表达率是52.5%(63/120).CN-Ⅱ蛋白在的NSCLC患者的肿瘤组织学分型、临床分期、ECOG评分、性别、年龄等方面没有明显的相关性.其中NSCLC的原发病灶组织为61例,表现出的CN-Ⅱ阳性表达率为50.8%,同时转移病灶组织为60例,转移灶中CN-Ⅱ的表达和原发灶没有明显的差异.CN-Ⅱ阴性和阳性的患者中位生存期分别为11个月、9个月,其中CN-Ⅱ阳性组明显低于阴性组,但是两者没有明显的差异.结论 CN-Ⅱ异常表达与患者的生存期有明显的相关性,有极大的可能成为影响疗效的预测因素.

  • 驱动蛋白Eg5与肝细胞癌新研究进展

    作者:于泳;任粉玉

    肝细胞癌在我国发病率较高,大多数患者确诊时即处于晚期,主要治疗方法包括手术、放疗、全身化疗、靶向治疗和微创介入治疗,寻找肝癌潜在治疗靶点为肝癌新研究进展.驱动蛋白Eg5是kines5家族中的一员,在有丝分裂的过程中,对双极轴的形成和维持起着至关重要的作用,阻断Eg5表达会损害复制的中心体的分离,导致细胞周期在有丝分裂的微管阵列中出现细胞分裂,并在肿瘤细胞中引发凋亡细胞死亡.研究表明肝细胞癌较正常组织中Eg5呈高表达,且与肝癌TNM分期,肿瘤直径大小,Edmondson分级,有无门脉癌栓组密切相关.

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