首页 > 文献资料
-
LC-MS/MS技术及其在天然产物分析中的应用
目的:研究LC-MS/MS技术及其在天然产物分析中的应用;方法:通过分析Lc-MS接口的基本原理详细研究LC-MS/MS技术,并分别介绍其在天然产物分析中微量天然物质分析、天然产物异构体的分离和鉴定、天然产物筛选和中药指纹图谱四个方面的应用.结果和结论:LC-MS/MS在技术及应用方面取得了很大进展,相信在天然产物分析中必将发挥越来越重要的作用.
-
同位素稀释-固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱技术同时测定畜禽肉中四类兽药残留
本次研究,主要利用同位素稀释-固相革取-超高效液相色谱-串联质谱检测方法对畜禽肉中4类兽药残留进行检测.4类兽药主要指青霉素类、喹诺酮类、磺胺类和硝基咪唑类,把此技术有效应用到实际的样品检测中,经多级质谱准确质量数值的测定,可对目标化合物进行准确分析.
-
2009年检测新品推介:POSI±IVE SystemTM高通量快速筛查检测系统解决方案
目前对于目标化合物的定量检测,国内外的食品法规均是采用三重四极串联质谱.三重四极串联质谱不仅具有多样性的功能和先进的定量分析能力,而且在灵敏度和选择性方面也非常出色,但是它只能检测设定的目标化合物,对非目标化合物的检测和未知物的定性分析则不能完全胜任,并且无法对样品进行筛查检测存档.
-
串联质谱法检测妊娠疾病的氨基酸与酰基肉碱结果分析
目的 检测临床孕妇外周血标本中49种常见氨基酸与酰基肉碱的浓度,分析主要妊娠疾病的氨基酸、酰基肉碱的表达水平.方法 选取2015～2016年广州医科大学附属第三医院产科收治的78例孕妇病例资料作为研究对象,按照是否合并妊娠期疾病分为正常对照组31例、妊娠疾病组47例.妊娠疾病组又分为妊娠期糖尿病组(GDM组,16例)、妊娠期高血压疾病(HDP组,20例)和GDM+ HDP组11例,利用液相串联质谱技术检测分析18种氨基酸与31种酰基肉碱表达水平,并进行统计学分析.结果 各组检测的氨基酸及酰基肉碱水平比较,有12项指标组间有显著性差异(P＜0.05),包括甘氨酸(Gly)、谷氨酰胺(Gin)、色氨酸(Trp)、丙酰基肉碱(C3)、丙二酰基肉碱/3-羟基丁酰肉碱(C3DC/C4OH)、丁酰基肉碱(C4)、异戊酰基肉碱(C5)、己酰基肉碱(C6)、己二酰基肉碱(C6DC)、辛烯酰基肉碱(C8∶1)、十四烷酰基肉碱(C14)、3-羟基十六烯酰基肉碱(C16∶1OH).其中Gly、Trp、C3、C3DC/C4OH、C4、C5、C6、C6DC在正常对照组的表达水平显著低于妊娠疾病组(P＜0.05).结论 妊娠疾病可以导致体内多种氨基酸和酰基肉碱的代谢水平表达差异,可能与其影响氨基酸与酰基肉碱的代谢通路有关.相关分子机制有待于进一步深入研究探讨.
-
HPLC-MS/MS多反应监测法测定榆黄蘑中甘露醇的含量
用MS/MS作为HPLC的检测器,采用多反应检测(MRM)扫描方式,建立了HPLC-MS/MS测定榆黄蘑中甘露醇含量的方法.该方法的线性范围为O.208-1.04mg·mL-1.通过样品的加标试验,回收率为97.12%,精密度RSD(n=5)为0.94%.实际样品分析表明,榆黄蘑中甘露醇的含量为38.9mg/g.本方法选择性高、灵敏、快速.也适用于其他复杂体系中甘露醇含量的快速测定.
-
亲水作用色谱串联质谱法分析三七药材中游离氨基酸类成分
目的:建立三七药材中游离氨基酸类成分的分析方法.方法:采用亲水作用色谱串联质谱测定三七药材中22种游离氨基酸,ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相A含5 mmol· L-1甲酸胺、5 mmol· L-1乙酸铵和0.15％甲酸水溶液,B含1 mmol·L-1甲酸铵、1 mmol·L-1乙酸铵和0.05％甲酸乙腈溶液,梯度洗脱(0 ～6 min,15％～20％A;6 ～ 10 min,20％ ～30％A;10 ～ 11 min,30％ ～ 46％ A),流速0.4 mL· min-1,柱温35 ℃;串联质谱正离子多反应模式检测(MRM).结果:在12 min内22种氨基酸得到较好分离,22种氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数0.991 7～0.999 9,回收率93.7％～104.7％,日内精密1.13％ ～4.95％,日间精密度1.84％ ～ 5.62％,10批三七药材样品中22种游离氨基酸总含量在4.72 ～ 5.96 mg·g-1.结论:该方法简便、快速、灵敏,适用于三七药材中氨基酸类成分的测定,为三七药材全面质量控制方法的建立提供依据.
-
串联质谱技术在中药化学成分分析中的应用研究进展
分析了串联质谱在生物碱类、黄酮类、甾体及三萜类、香豆素和木脂素类、酚酸类等中药单味药化学成分中的应用及在无机物、小分子有机化合物(如挥发油、生物碱、黄酮、皂苷等)及生物大分子(如肽、蛋白、糖肽、多糖等)三大类中药复方化学成分分析中的应用.结果显示利用串联质谱方法考察特征裂解反应,及其在结构差异上反映程度,可以发现一些独特的或新颖的裂解方式,从而了解和掌握同类化合物的特征裂解和结构上细微差别带来的质谱行为差异,并成功地用于分子鉴制.串联质谱已经发展成为中药各类成分分析的一种重要手段,其所提供的大量结构信息不仅对中药中成分的分析鉴定提供了依据,也为串联质谱对中药化学成分的体内成分分析奠定了基础,对中药物质基础和作用机制的研究发挥着越来越重要的作用.
-
实时直接分析-串联质谱法(DART-MS/MS)快速检测吐根中生物碱
目的:在未经前处理和色谱分离的情况下应用实时直接分析-串联质谱法检测吐根生物碱.方法:在优化的条件下全扫描采集药材,茎及叶的DART-MS( direct analysis in real time,DART)特征图谱,并对生物碱进行二级质谱确证,采用多反应监测模式通过测定样品表面待测物的质谱峰强度来计算其在样品中的平均含量.结果:药材和茎的图谱中均有明显的吐根碱和吐根酚碱的质子化离子峰m/z481,467,叶中m/z479,465为其他生物碱的质子化离子峰,定量方法的重复性和线性良好.结论:该模式或在药材、饮片的快速鉴别及实时对中间体或成品的快速定量分析中发挥作用.
关键词： 实时直接分析 串联质谱 吐根 生物碱 直接离子化(常压离子化) -
小鼠小脑前叶后叶和旁绒球叶的蛋白组学比较分析
目的 研究小脑不同区域所含蛋白质表达的差异.方法 提取小脑前叶、后叶和旁绒球叶的蛋白质,通过二维凝胶电泳分离蛋白,用PDQuest图像分析软件寻找电泳图谱中的差异蛋白,MALDI TOF/TOF串联质谱分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS软件在Mascot数据库中检索并鉴定蛋白质.结果 在小脑3个不同区域鉴定了5种差异蛋白,丙酮酸激酶同工酶M2在小脑前叶和后叶的表达量比旁绒球叶的高;核不均一核糖核蛋白L和真核翻译延伸因子2在小脑后叶的表达量少,在小脑前叶和旁绒球叶未检测到;表达序列蛋白AI429145在小脑后叶的表达量高,但在小脑前叶和旁绒球叶未检测到;三磷酸腺苷酶氢离子转运体V0亚单位D异构体1在旁绒球叶的表达量比小脑前叶和后叶的高.结论 这些蛋白质在小脑不同区域表达量上的差异可能有助于理解小脑不同区域的特殊功能和疾病.
-
营养不良患儿酰基肉碱谱变化
目的 探讨营养不良患儿血酰基肉碱谱特点及用于代谢病的鉴别.方法 收集营养不良患儿13例,同期同年龄段非代谢病患儿214例作为对照组.入院时空腹采集末梢血制成千血片,串联质谱非衍生化法检测其肉碱和多种酰基肉碱浓度.结果 脂肪酸氧化分解相关的脂酰基肉碱,营养不良组从十八碳脂酰基肉碱至乙酰基肉碱,包括酮体酰基肉碱,即丙二酰基肉碱和羟基丁酰基肉碱都有不同程度增高,以中链酰基肉碱增高明显,其中营养不良组癸酰基肉碱为(0.203 ±0.105) μmol/L,超出正常参考值范围(0～0.200 μmol/L),显著高于对照组[0.054±0.030)μmol/L,P＜0.001].氨基酸分解相关的丙酰基肉碱、戊酰基肉碱、羟基戊酰基肉碱和戊二酰基肉碱等,营养不良组和对照组比较差异均无统计学意义(均P＞O.05).结论 营养不良患儿血中脂肪酸代谢相关的酰基肉碱增高,以中链酰基肉碱增高明显,癸酰基肉碱略超出正常值等特点,可与中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症和多种酰基肉碱辅酶A脱氢酶缺乏症等疾病鉴别.
-
0～15岁儿童血中氨基酸浓度变化调查
目的 调查0～15岁儿童血中氨基酸浓度的变化情况,为评价氨基酸营养状态和诊断氨基酸代谢病提供帮助.方法 以1900名0～15岁儿童为研究对象,采用非衍生法前处理滤纸血片,串联质谱测定11种氨基酸浓度.结果 血缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸、脯氨酸、鸟氨酸和丙氨酸浓度在出生后开始逐渐降低,4～6个月时低,此后逐渐升高,7个月～1岁后相对稳定;血蛋氨酸、精氨酸浓度在出生后低,1～3个月时高,此后开始下降,4～6个月后水平稳定;血丙氨酸和甘氨酸浓度分别在9岁女孩和11岁男孩中达到第2高峰.鸟氨酸/精氨酸、瓜氨酸/精氨酸和鸟氨酸/瓜氨酸的比值出生时较高,此后逐渐降低,3个月～1岁后维持稳定;苯丙氨酸/酪氨酸比值在出生时低,以后逐渐升高,6个月～1岁后维持稳定.7个月～15岁年龄组的血氨基酸水平与1 d～1个月年龄组和/或2～6个月年龄组间差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).1 d～1个月年龄组和全年龄组女性氨基酸浓度均明显高于男性(P＜0.05或P＜0.01).结论 1岁以内血中氨基酸浓度和构成比变化较大,在评价氨基酸营养状态和诊断氨基酸代谢病时要考虑年龄因素.
-
串联质谱分析干血滤纸片酰基肉碱方法的建立
目的建立串联质谱方法进行干血滤纸片酰基肉碱(acylcarnitine)分析,以便应用于临床相关疾病诊治和新生儿遗传代谢病筛查.方法取含不同浓度的8种酰基肉碱的干血滤纸片(直径3 mm),包括乙酰肉碱(C2)、丙酰肉碱(C3)、丁酰肉碱(C4)、异戊酰肉碱(C5)、己酰肉碱(C6)、辛酰肉碱(C8)、肉豆蔻酰肉碱(C14)和棕榈酰肉碱(C16).用含已知量相应酰基肉碱内标的甲醇萃取、盐酸正丁醇衍生后,用串联质谱仪检测酰基肉碱及其浓度.分析该方法的精确性、样品回收率及实测值与加入浓度之间的相关性.结果酰基肉碱批内变异系数为6.3 %～9.9 %,批间变异为10.3 %～13.3 %.低浓度酰基肉碱回收率为98 %～106 %,中等浓度酰基肉碱回收率为97 %～109%,高浓度酰基肉碱回收率为94 %～108 %.实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0.998 6 ～ 0.999 9.结论串联质谱技术进行血滤纸片酰基肉碱分析,有较高的回收率,能够达到较高的精确性和准确性,为临床进行酰基肉碱分析提供了一项新技术.
-
串联质谱在新生儿遗传性代谢疾病筛查中的应用
串联质谱(MS/MS)法自1990年用于新生儿苯丙酮酸尿症(PKU)筛查以来,目前已发展成为能在2～3 min内对某干血样(DBS)标本经单次测试,同时进行数10种代谢物分析,检测出包括氨基酸、有机酸、脂肪酸氧化代谢紊乱在内的20～30多种遗传性代谢疾病(IMD)的新生儿筛查(NBS)技术.
-
有机酸血(尿)症及其临床处理
有机酸血(尿)症是临床常见的一类遗传代谢病,目前已经发现约50余种,多数在新生儿期或婴幼儿期发病.临床上多表现为顽固性代谢性酸中毒、发作性呕吐、喂养困难、肌张力低下、惊厥和意识障碍等.由于本类疾病临床没有特异性,若不能早期诊断和治疗,易出现猝死或不可逆转的神经系统损伤.利用气相色谱-质谱联用技术和(或)串联质谱技术对疑似有机酸血(尿)症患儿进行早期生化诊断是改善患儿预后和挽救患儿生命的关键.
-
荧光双向电泳和串联质谱技术检测卵巢上皮癌血清标志物的研究
目的 通过差异蛋白质组学的方法寻找卵巢上皮癌血清标志物,以提高卵巢癌诊断的灵敏度和特异度.方法 收集103例卵巢上皮癌、60例正常对照、63例卵巢良性肿瘤和63例盆腔良性病变患者的血清.按照患者年龄匹配,选取卵巢上皮癌、盆腔良性病变、卵巢良性肿瘤和正常对照者血清各20例,等容积混合,去除高丰度白蛋白和IgC后,进行荧光双向电泳(2-DE DIGE),实验重复3次.以OyCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点,以基质辅助激光解吸离子飞行时间串联质谱(MALDI TOF/TOF)鉴定差异蛋白质,分别采用Western blot和酶联免疫吸附实验(ELISA)验证获选的血清标志物.结果 2-DE DIGE得出有显著差异的蛋白质点41个,MALDI TOF/TOF成功鉴定出其中的28个蛋白质.上调显著的蛋白质为结合珠蛋白(Hp),下调显著的蛋白质为转铁蛋白(Tf).Western blot和ELISA验证结果显示,Hp和Tf在卵巢上皮癌与正常对照、卵巢上皮癌与卵巢良性肿瘤、卵巢上皮癌与盆腔良性病变之间的差异有统计学意义(均P=0.000).CAl25+Hp+Tf联合检测诊断卵巢上皮癌的灵敏度(81.6%)和特异度(76.9%)高于CA125(78.6%和70.4%)、Hp(69.9%和70.4%)和Tf(66.0%和70.4%)单独检测.结论 Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质,可作为卵巢上皮癌的血清标志物,CAl25+Hp+Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度.
-
色谱保留时间预测模型在肽段鉴定结果验证中的应用
目的:解决肽段色谱保留时间预测模型在肽段鉴定结果验证中应用的实际问题.方法:本文基于Krokhin等提出的改进模型,利用3次样条平滑的方法估计肽段的实验色谱保留时间;然后利用迭代算法同时完成参数估计和异常值排除;后利用迭代得到的模型和残差范围进行肽段鉴定结果的过滤.结果:对两批不同物种的实验数据,本文方法与直接进行线性回归的方法相比,可以在保证几乎不损失阳性肽段鉴定结果的情况下排除更多的假阳性结果.结论:本文对肽段色谱保留时间模型在肽段鉴定结果中应用的实际问题提出了系统的解决方法.
-
肽序列从头测序算法
从头测序为蛋白质组研究提供了一种不用借助于任何蛋白质序列数据库信息,直接解读串联质谱数据的方法.其基本算法主要由4个部分组成:质谱图的构建,离子类型的确定,测序算法以及打分算法.质谱图的构建和离子类型的确定是从头测序算法的基础.测序算法是从头测序算法的
-
生物质谱技术应用及进展
生物质谱因其高灵敏度、高准确度、快速、易于自动化等特点,在生命科学领域的应用和研究日益广泛.该文综述了近年来生物质谱在蛋白质、核酸、糖类、药物代谢以及微生物检验等方面的应用及进展.
-
LC/MS/MS的多反应监测方法定量测定灯盏乙素
目的:建立一种可靠的灯盏乙素定量分析方法.方法:用三级四极串联质谱(MS/MS)作为HPLC的检测器,其中MS/MS使用了多反应监测(MRM)扫描方式.选择母→子离子对m/z -461→m/z -285作为MRM监测的离子对;HPLC流动相为100%甲醇,流速0.9 mL·min-1,色谱柱Beckman ODS-1.以测定短葶飞蓬提取物的灯盏乙素含量为例,对此方法进行了应用.结果:灯盏乙素在短葶飞蓬提取物中含量为6.98%.方法线性范围20～160 ng·mL-1 (γ=0.999);加入灯盏乙素标准品20,60和160 ng的加样回收率分别为:96.5%,97.4%和97.3%.检测限为1 ng,每个样品的分析时间为4 min.结论:此法灵敏、快速、准确,可应用于灯盏乙素的各种药剂、药代的研究.
-
FAB-MS/MS法研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征
目的研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征,以及取代基种类及位置对质谱裂解的影响,探讨该类化合物的质谱裂解规律.方法利用FAB技术测定该类型3种化合物的[M+H]+和[M+Na]+等不同加合离子,以及由其产生的特征碎片离子的CID-MS/MS谱,并对有关特征离子进行了高分辨测定.结果 C-10位为BzO取代的化合物1和2主要以[M+Na]+离子形式存在,该离子主要进行失去HOBz的裂解反应,而C-10位为OH基的化合物3主要以[M+H]+离子形式存在,该离子以失去1个和2个H2O的裂解反应为主导.另外,化合物1和3终裂解产生m/z 237离子,而化合物2产生m/z 253离子.结论 MS/MS技术可以有效地进行结构差异甚微的相关化合物的结构解析.
关键词： 5/7/6型紫杉烷类二萜化合物 串联质谱 裂解特征
