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草苁蓉联合长春瑞滨化疗对VX2移植瘤的抑瘤作用乃机制研究
目的:探讨草苁蓉提取物(BRE)联合长春瑞滨(NVB)化疗对兔VX2移植瘤的治疗作用和抗氧化能力的影响.方法:建立兔VX2皮下移植瘤模型,将其分为模型组,BRE组,NVB组和BRE+NVB组(BRE和NVB联合组).于造模第8天开始给药,BRE组和BRE+NVB组分别ig给药100 mg·(kg·d)-1BRE共21 d,NVB组和BRE+NVB组于造模第15,22天静脉注射2.5 mg·kg-1·d-1 NVB共2次.观察各组荷瘤兔的肿瘤生长情况.实验结束后,称瘤重和计算抑瘤率.提取瘤体标本,免疫组化法检测移植瘤细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况.比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA)含量.结果:各治疗组对移植瘤生长和肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,其中BRE+NVB组肿瘤生长抑制率高、增殖指数小.同时,NVB虽明显增高血清CAT,GSH-Px 活性,但SOD活性和TAOC水平显著降低,MDA水平明显增高.而BRE组和BRE+NVB组均可明显升高血清SOD,CAT,GSH-Px活性和TAOC水平,降低MDA水平.结论:BRE对VX2移植瘤具有明显的抑制作用,且对长春瑞滨化疗有明显增强作用.其作用可能与其抑制细胞增殖和增高机体抗氧化能力有关.
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草苁蓉苯丙素苷对肺癌细胞周期分布和凋亡的影响
目的:探讨草从蓉苯丙素苷(PGBR)对肺癌细胞增殖的抑制作用及其可能机制.方法:采用MTT法观察PGBR对A549肺癌细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测对A549细胞周期分布和细胞凋亡的影响,采用TUNEL染色法检测对A549细胞凋亡的影响,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白p53,Fas,Bax,Be1-2蛋白的表达.结果:PGBR可时间和浓度依赖性地抑制肺癌细胞增殖,200 mg·L-1PGBR作用于A549细胞12,24,48 h时,抑制率分别为(20.4±2.1)%,(27.1±2.0)%,(30.712.2)%.PGBR改变肺癌细胞周期分布,使Gn/G1期细胞由(45.3±4.1)%增至(57.4±4.0)%,表现出Go/G1期阻滞;同时诱导肺癌细胞凋亡,凋亡率由(2.4±0.90)%增至(7.8±1.2) %.PGBR明显增加P953和Fas表达,增加Bax表达和降低Bc1-2表达.结论:PGBR可通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡而发挥抗肺癌作用.
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草苁蓉环烯醚萜苷对移植鳞癌VX2荷瘤兔的抑瘤作用
目的:探讨草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)对兔VX2移植瘤的生长抑制作用和血清抗氧化活性的影响.方法:建立兔皮下VX2移植瘤模型,将实验动物分为模型组、IGBR高、低剂量组和氟尿嘧啶(5-Fu)组,观察各组荷瘤兔的生存情况.另选一批实验动物,连续ig给药21 d后处死动物,剥离肿瘤组织,称瘤重和计算抑瘤率,并比色法检测血清谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MDA)含量.结果:与模型组相比,IGBR能显著延长VX2荷瘤兔生存时间,提高其生命延长度;显著减小移植瘤瘤重,提高抑瘤率.同时,IGBR可明显升高血清SOD,CAT和GSH-PX活性,降低MDA水平.结论:IGBR可提高VX2荷瘤兔生存时间,对VX2移植瘤具有明显的抑制作用,其作用可能与其增高机体抗氧化能力有关.
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草苁蓉水萃取物对四氯化碳致肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用
目的:研究草苁蓉水萃取物(BRAF)对四氯化碳(CCl4)诱发的急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激的干预作用.方法:将实验小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素阳性对照组(50 mg· kg-1)及BRAF高、低剂量组(200,100 mg·kg-1).每日给小鼠灌胃水飞蓟素或BRAF 1次,共7d.实验末期,腹腔注射CCl4建立小鼠急性肝损伤模型,苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2+-Mg2+-ATP酶(Ca2+-Mg2+-ATPase)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果:BRAF明显降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT,AST和ALP水平,减轻肝组织损伤,升高肝脏SOD,CAT,GPx和GSH水平,升高肝线粒体SOD,Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性,降低肝匀浆及线粒体MDA含量.结论:BRAF降低CCl4致急性肝损伤小鼠肝脏氧化应激,对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用.
关键词： 草苁蓉 四氯化碳(CCl4) 肝损伤 氧化应激 -
草苁蓉提取物抑制HSC-T6细胞体外增殖及胶原合成
肝纤维化是各种致病因子引起慢性肝病进而发展成肝硬化的病理学基础与必经之路.肝星状细胞( Hepatic stellite cell,HSC)是一种具有多潜能的幼稚间质细胞,经过激活刺激后其表型转换形成成纤维细胞并分泌大量细胞外基质,是肝纤维化发生的细胞学基础.近年来文献报道,草苁蓉( boschniakia rossica,BR)具有抗自由基、抗脂质过氧化、抗癌、抗炎等作用,且对肝脏急慢性损伤具有保护功能[1].本实验探讨了草苁蓉乙醇提取物对培养的大鼠HSC增殖及胶原合成的抑制作用.
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草苁蓉乙醇提取物对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的治疗作用
目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制.方法:将健康♂ Wistar大鼠35只随机分为空白对照组(A组)10只,模型组(B组)15只,草苁蓉组(C组)10只.B、C组每周1-3 d腹腔内注射1%DMN 1 mL/kg体质量,A组用相同剂量生理盐水代替DMN,4-7 d休息,共3 wk.造模结束后A纽及B组生理盐水10 mL/kg体质量,C组50 g/L草苁蓉乙醇提取物10 mL/kg体质量,每日一次灌胃,共4 wk(实验4-7 wk).实验第八周第一天从全部实验大鼠采血,取肝组织,分别检测血清SOD、GSH-PX活性、MDA、HA、PCⅢ、Ⅳ.C含量,肝组织SOD、GSH-PX活性及MDA含量,并做肝脏组织病理学检查及α-SMA的表达的检测.结果:模型组的血清及肝组织SOD(98.58±17.36kNU/L,9.99±1.69 kNU/L)、GSH-PX活性(117.37±45.24 U,12.43±2.99 U)显著低于对照组(129.05±18.55 kNU/L,19.94±5.87 kNU/L和173.79±25.76 U,22.66±6.99 U,P＜0.01),MDA含量(10.87±1.23 μmol/L,1.38±0.37 μmol/L)高于对照组(6.63±1.05 μmol/L,0.91±0.25 μmol/L,P＜0.01).模型组血清HA(394.83±103.28μg/L)、PCⅢ(13.30±1.88mg/L)、Ⅳ.C的含量(2.43±1.32 mg/L)也显著高于对照组(186.54±39.87 μg/L,6.99±1.55 mg/L,1.18±0.79 mg/L,P＜0.01).草苁蓉组的血清和肝组织SOD(134.29±21.93 kNU/L,18.99±6.86 kNU/L),GSH-PX活性(171.82±37.50 U,23.57±7.19 U)显著高于模型组(P＜0.01),MDA含量(8.68±2.32 μmol/L,0.97±0.22 μmol/L)则低于模型组(10.87±1.23,1.38±0.37 μmol/L)(P＜0.01).草苁蓉组血清HA(115.87±13.96μg/L)、PCⅢ(6.67±1.86μg/L)、Ⅳ.C的含量(1.62±0.50 mg/L)也低于模型组(P＜0.05).与模型组比较草苁蓉组的肝纤维化分期程度明显减轻(P＜0.01),肝组织αt-SMA的表达降低.结论:草苁蓉对DMN所致大鼠肝纤维化有治疗作用,其机制可能与抗脂质过氧化物作用和抑制肝星状细胞的激活有关.
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草苁蓉乙醇提取物对大鼠非酒精性脂肪性肝病的保护作用及机制
目的:探讨草苁蓉(boschniakia rossica,BR)乙醇提取物(boschniakia rossica ethanol extract,BREE)对大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的保护作用及其机制.方法:50只SD大鼠随机分为5组,每组10只.正常组普通饲料喂养,模型组和高中低剂量BR组均以改良氨基酸及胆碱缺乏(choline-deficient amino acid-defined,CDAA)的饲料喂养8 wk.实验第2周始高、中、低剂量BR组分别按大鼠体质量每日给予500、250、125 mg/kg的BREE灌胃.实验第8周末,全部大鼠经门静脉采血和取肝组织标本,常规方法检测血清生化指标,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),免疫组织化学染色观察肝组织细胞色素P4502El(CYP 2El)、α-平滑肌激动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及组织基质金属蛋白酶抑制剂-l(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达,HE染色观察肝组织病理变化.结果:高剂量BREE组血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)和总胆汁酸(total bile acids,TBA)的水平显著低于模型组(41.31±12.32 vs 67.92±1.28,42.12±6.32 vs 74.12±5.20,68.20±32.62 vs 129.56±23.12,均P＜0.01)；高剂量BREE血清TNF-α水平显著低于模型组(31.20±2.44 vs 70.04±12.62,P＜0.05)；高剂量BREE组肝组织CYP 2E1表达水平显著低于模型组(1.20±0.44 vs 5.30±2.62,P＜0.01)；高剂量BREE组血清ALT、AST、TBA、TNF-α和肝组织CYP 2E1表达水平均低于低剂量组(均P＜0.05)；模型组肝组织α-SMA、TGF-β1及TIMP-1均呈阳性,而BR组及正常组均呈阴性;模型组肝组织呈重度脂肪变性及坏死,汇管区大量炎症细胞浸润,而不同剂量BREE组的这些病理改变呈不同程度的改善.结论:BREE对改良CDAA诱导的大鼠NAFLD有明显的保护作用,其机制可能与下调肝组织CYP 2E1表达和血清TNF-α有关；BREE对大鼠NAFLD肝组织α-SMA、TGF-β1及TIMP-1的表达有抑制作用,提示具有抗非酒精性脂肪性肝病纤维化的作用.
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草苁蓉化学成分的研究
目的:研究我国民间草药草苁蓉[Boschniakia rossica (Cham.et Schltdl) Fedtsch.et Flerov.]的化学成分.方法:草苁蓉全草醇提取物的乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱和制备薄层分离,分得8个化合物.通过波谱和化学方法鉴定了它们的结构.结果:8个化合物的结构分别鉴定为4,5,6-三羟基噢酮(1)、β-谷甾醇(2)、β-谷甾醇3-O-β-D-葡糖苷(3)、7-去氧-8-表马钱子酸(4)、没食子酸(5)、肉桂酸(6)、咖啡酸(7)和草苁蓉纳拉苷(8).结论:4,5,6-三羟基噢酮(1)为新的噢酮化合物,4个已知化合物:7-去氧-8-表马钱子酸(4)、没食子酸(5)、肉桂酸(6)、咖啡酸(7)为首次从草苁蓉中分得.
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草苁蓉不同溶剂萃取物对对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用
目的 研究草苁蓉不同溶剂萃取物对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 将实验小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双脂组(阳性对照组)及草苁蓉不同溶剂萃取物组.每日给药1次,连续7d.实验末期,腹腔注射对乙酰氨基酚建立急性肝损伤模型,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)肝组织活性氧(ROS)、脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)、Ca2-Mg2+-ATP酶(Ca2-Mg2-ATPase)、一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平.结果 草苁蓉正丁醇萃取物和水萃取物显著降低对乙酰氨基酚诱发的急性肝损伤小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性,增高血清白蛋白水平,减少肝组织活性氧、脂质过氧化物和丙二醛水平,升高肝组织过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性谷胱甘肽水平,升高肝线粒体Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(P＜0.05),降低肝诱导型一氧化氮合酶活性和一氧化氮水平.结论 草苁蓉对对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化和抗炎作用有关.
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草苁蓉的质量标准研究
目的 建立草苁蓉的质量标准.方法 用薄层色谱(TLC)法鉴别草苁蓉药材;以高效液相色谱(HPLC)法测定药材中齐墩果酸的含量.结果 通过TLC,能有效的进行区别,易于识别.齐墩果酸进样量在0.1~2.5μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=1.000);平均回收率为99.0%,RSD=1.8%(n=6).结论 所建标准可有效控制草苁蓉的质量.
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草苁蓉正丁醇萃取物的抗氧化活性及物质基础初步研究
目的 考察草苁蓉Boschniakia rossica正丁醇萃取部位的体内外抗氧化活性,并初步确定其抗氧化作用的物质基础.方法 以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基能力、亚铁还原能力实验(FRAP法)为指标,检测草苁蓉不同极性萃取部位的体外抗氧化活性;以D-半乳糖诱导衰老大鼠为模型,考察草苁蓉正丁醇萃取部位对大鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响;采用高效液相色谱-质谱联用技术对草苁蓉正丁醇萃取部位化学成分进行初步分析.结果 草苁蓉正丁醇萃取部位对DPPH、ABTS自由基具有良好的清除作用,且在亚铁还原实验的FRAP测定中表现良好;与模型组比较,草苁蓉正丁醇萃取部位各剂量组大鼠肝脏组织中MDA、SOD、CAT指标均有显著改善(P＜0.01),表现为MDA水平降低,SOD、CAT活性升高,并回调到正常水平以上,其体内抗氧化作用呈现剂量依赖性.经液质联用分析从草苁蓉正丁醇萃取部位中共鉴定出19种化学成分,其中14个为苯丙素苷类(PPGs).结论 草苁蓉正丁醇萃取部位具有很好的抗氧化活性,其主要有效成分为PPGs.
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草苁蓉环烯醚萜苷对H22小鼠肝癌移植瘤的抑瘤作用
目的 探讨草苁蓉环烯醚萜苷对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用.方法 建立小鼠皮下H22移植瘤模型,将实验动物分为模型组、草苁蓉环烯醚萜苷高、中、低剂量(400、200、100 mg/kg)组和5-Fu(25 mg/kg)组,草苁蓉环烯醚萜苷组连续ig给药10 d;5-Fu组隔日ip给药,给药5次,计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数,并以ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2),比色法检测血清总抗氧化活力(T-AOC)和丙二醛(MDA)水平.结果 与模型组比较,草苁蓉环烯醚萜苷能显著减轻移植瘤瘤质量,高、中、低剂量组抑瘤率分别为38.05％、34.98％、26.95％.同时,明显升高荷瘤小鼠的脾脏指数,升高血清IL-2水平和降低TNF-α水平,升高血清T-AOC和降低MDA水平.结论 草苁蓉环烯醚萜苷对H22移植瘤具有明显的抑制作用,其作用机制可能与调节IL-2和TNF-α等细胞因子的表达以及增强荷瘤小鼠抗氧化能力有关.
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草苁蓉化学成分及药理活性研究进展
草苁蓉Boschniakia rossica为列当科珍稀药用植物,常作肉苁蓉的代用品,其化学成分主要为苯丙素苷类和环烯醚萜类化合物.现代研究表明其具有抗肿瘤、抗氧化及清除自由基、抗衰老、保肝和增强免疫等广泛的药理活性.通过对国内外有关草苁蓉的文献资料进行系统的整理,对其化学成分和药理活性进行总结,为相关的中蒙药研究、开发和利用提供参考.
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草苁蓉及氧化苦参碱治疗肝纤维化的实验研究
目的:观察草苁蓉(BR)、氧化苦参碱(OM)治疗大鼠肝纤维化的疗效,为临床治疗提供理论依据.方法:二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制作肝纤维化的大鼠模型,观察BR、OM治疗后大鼠血清ALT、PCⅢ和CⅣ的变化情况及肝组织的病理学改变.结果:BR、OM可明显提高肝纤维化模型大鼠血清ALT,降低模型大鼠血清PCⅢ和CⅣ(BR、OM组与模型组比较:P＜0.05);另外BR、OM组大鼠胶原纤维面密度和肝纤维化分级与模型组比明显减轻P＜0.05.结论:BR、OM对DMN造模的大鼠肝纤维化有治疗作用.
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紫外分光光度法测定蒙药草苁蓉中多糖的含量
目的:建立草苁蓉中多糖的含量测定方法.方法:采用紫外分光光度法测定不同产地草苁蓉中多糖的含量.结果:在大吸收波长490 nm处测吸光度,线性范围1.4μg/mL～13.0μg/mL内,r=0.9992,平均回收率为96.1%,RSD为0.2%(n=5).结论:该方法简单方便、准确可靠,可以用来测定草苁蓉中多糖的含量.
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草苁蓉多糖红细胞保护作用
目的 研究草苁蓉多糖( BRPS)的红细胞保护作用.方法 常规方法提取BRPS,以硫酸亚铁-水杨酸法测定BRPS对羟基自由基(·OH)的清除能力；以硫代巴比妥酸(TBA)法检测BRPS对红细胞抗脂质过氧化的影响,以分光光度法检测BRPS对红细胞溶血的影响.结果 BRPS具有清除羟基自由基能力,浓度小于0.25 mg/mL时,回归方程为y=170.8x+9.5645,R2=0.993；呈明显浓度依赖性,其对·OH的半数清除浓度为0.24 mg/mL；BRPS明显抑制红细胞脂质过氧化作用和减少红细胞溶血程度,其对·OH诱导的红细胞及纯化红细胞膜体系脂质过氧化作用的半数抑制浓度分别为0.047和0.112 mg/mL,对·OH诱导的红细胞溶血的半数抑制浓度分别为0.068 mg/mL.结论 BRPS具有抗脂质过氧化和红细胞保护作用.
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草苁蓉多糖对四氯化碳所致HepG2细胞损伤的保护作用
目的:研究草苁蓉多糖对四氯化碳所致HepG2细胞损伤的保护作用.方法:用四氯化碳诱导损伤HepG2细胞建立损伤模型,并以噻唑蓝法检测细胞存活率;以比色法检测细胞外液的乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及细胞还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的相对活性.结果:与模型组比较,草苁蓉多糖组HepG2细胞存活率升高;细胞外液中LDH、AST和ALT活性降低;细胞MDA含量降低,细胞GSH含量和SOD活性增高;细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9相对活性降低.结论:草苁蓉多糖对四氯化碳所致HepG2细胞损伤具有保护作用.
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草苁蓉苷A-E的分离与结构鉴定
目的:对草苁蓉的化学成分进行研究,为进一步开发利用该植物资源提供依据.方法:采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱法等手段进行分离纯化,并通过理化性质与光谱分析鉴定化合物的结构.结果:从草苁蓉的75％乙醇溶液提取物中分离鉴定了5个单体成分,分别为草苁蓉苷A(rossicaside A,1)、B(rossicaside B,2)、C(rossicaside C,3)、D(rossicaside D,4)以及E(rossicaside E,5).结论:首次对化合物3和4的1H-NMR谱数据进行了全归属,并通过2D-NMR谱对文献中报道的部分13C-NMR数据进行了更正.同时,首次报道了化合物5在氘代吡啶中的1H-NMR和13C-NMR数据.
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草苁蓉提取物抗衰老作用的研究
文献报道,草苁蓉具有抗炎、抗缺氧、抗疲劳、促进记忆及增强免疫功能,对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝脏化学致癌初期癌前病变灶的形成及S180肉瘤有抑制作用[1～3].本实验用D-半乳糖致大鼠衰老模型,通过生化指标检测、免疫组织化学及电子显微镜的观察,阐明草苁蓉对衰老大鼠的保护作用,探讨草苁蓉的抗衰老作用.
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草苁蓉的本草考证及药理研究
草苁蓉为列当科草苁蓉属植物，寄生草本，在我国主要分布于长白山地区，天然分布极少，此外在俄罗斯、日本和朝鲜等地亦有分布。具有补肾壮阳，润肠，止血的功效，被称为“不老草”。具有抗动脉硬化、促智和免疫调节等药理作用，在开发治疗老年疾病方面有一定的社会和经济价值。
