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前列腺干细胞抗原
近年来前列腺癌在诊断、治疗等方面取得了很大进展,但仍缺乏特异性早期诊断并能预测患者前列腺癌危险度的指标.因此,寻找早期诊断和治疗前列腺癌的新指标及新方法,成为目前研究的焦点.前列腺干细胞抗原(PSCA)是Reiter等[1]于1998年利用特征性差异分析(RDA)法在前列腺癌细胞株中发现的一种前列腺癌相关肿瘤抗原,具有高度的前列腺特异性,在多数前列腺癌中均有高表达,尤其在前列腺癌骨转移肿瘤中呈100%强表达,其单克隆抗体在动物实验中能有效抑制雄激素依赖及非依赖性前列腺癌的生长.PSCA有可能成为新的有效诊断及治疗前列腺癌的瘤标.
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多沙唑嗪诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡机制的研究
我们采用体外实验方法观察α1受体阻断剂多沙唑嗪对人雄激素非依赖前列腺癌细胞株PC-3增殖的抑制作用,探讨其细胞凋亡的信号传导途径.
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环氧合酶-2抑制剂NS398对小鼠前列腺癌抑瘤作用的研究
为探讨环氧合酶(COX)-2选择性抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺( NS398)抗前列腺癌的作用,我们建立了前列腺癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察NS398在动物体内的抑瘤作用.材料与方法人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3由青岛大学医学院病理生理教研室惠赠.培养于DMEM培养液中,5% CO,、37℃孵箱中扩增,每2~3天换液传代.NS398(美国Sigma公司),鼠抗人血管内皮生长因子(VEGF,美国SANTA CRUZ公司),CD34鼠单克隆抗体、P-V6000免疫组化试剂盒、DAB显色剂、兔抗鼠二抗、ECL发光剂(北京中杉生物技术有限公司).
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RNAi表达载体对前列腺癌细胞CXCR4基因表达的抑制作用
趋化因子CXC受体4及其配体基质细胞衍生因子1(SDF-1)相互构成的反应轴与肿瘤的恶性表现密切相关[1].它们不仅在肿瘤细胞的迁移过程中起着一定作用,而且与肿瘤细胞发生、增殖和分化等有密切关系,并可能成为肿瘤基因治疗中的一个新靶点.我们利用可在细胞内自主生成siRNA的表达质粒转染激素依赖性和非依赖性人前列腺癌细胞株LNCaP和PC-3m,观察其对CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响.
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人类前列腺癌LNCaP细胞株荷瘤裸鼠模型的建立及紫杉醇治疗的实验研究
我们选用人类前列腺癌LNCaP细胞株建立了人类前列腺癌裸鼠动物模型,观察紫杉醇对雄激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-C4-2荷瘤裸鼠肿瘤的影响,探讨其可能的作用机理.材料与方法动物模型的建立:LNCaP人前列腺癌细胞株来源于北京市卫生局泌尿外科研究所实验室,包括雄激素依赖性LNCaP-C4细胞和雄激素非依赖LNCaP-C4-2细胞.
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去雄对雄激素依赖前列腺癌细胞中蛋白激酶活性的影响
临床去势治疗是前列腺癌治疗的重要手段.虽然已发现一些蛋白分子涉及雄激素的调节[1],但其分子机制尚欠清楚.通过活化有丝分裂激活蛋白激酶(MAPK),然后启动转录因子而使细胞生长和增生[2].已发现MAPK激活和人肿瘤发生及恶化相关.本研究采用雄激素依赖的人前列腺癌细胞株LNCaP, 检测去除雄激素后前列腺癌细胞MAPK活性改变,以探求去除雄激素抑制前列腺癌细胞生长的分子机制.
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应用凋亡和微核检测法预测细胞辐射敏感性的可行性研究
细胞辐射敏感性的预测一直是放射生物学和肿瘤治疗研究领域的重要内容,是肿瘤放射治疗方案尤其放疗个体化方案制定的关键。在动物实验和临床研究中,已提出了许多检测细胞内在放射敏感性的方法[1]。其中微核(MN)检测法是被广泛应用的方法之一[2,3]。但是人们仍对将其作为预测细胞辐射敏感性的可行性有争议。有作者报告,MN发生率与克隆形成率之间存在着内在联系,但也有报告认为并不存在这种相关性。影响这种相关性的因素一般认为有以下几个方面:细胞受照射时所处的细胞周期、双核细胞的百分比、DNA含量、细胞放射敏感性的不稳定性和照后凋亡细胞的发生[4,5]。细胞受照射后凋亡的形成率和细胞的辐射敏感性密切相关已有大量的报道。近有报道认为,一些因素引起的凋亡的发生与MN的形成之间有一定的相关性。并认为凋亡和MN的形成都是在第一次有丝分裂以后发生的,都和遗传物质受损有关。本研究采用3株人类细胞和两株啮齿动物细胞把辐照诱导的MN和凋亡与细胞存活率进行比较,对MN检测能否用来预测细胞放射敏感性的潜在可能性进行了评估。探讨了凋亡细胞对MN发生率的影响。 一、材料和方法 1.细胞和细胞培养:利用3株人体细胞和两株啮齿动物细胞:SHIN-3为人卵巢腺癌细胞株,DU-145为人体前列腺癌细胞株,COLO 320 DM为人结肠腺癌细胞株,CHO-K1为中国仓鼠卵细胞,F9细胞为鼠畸胎瘤细胞。将细胞在37℃条件下,含95%空气和5%CO2的潮湿环境中进行孵育。
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表皮生长因子受体2和3在22RV1前列腺癌细胞的表达
激素非依赖型前列腺癌发生机制不明,研究表明表皮生长因子(EGFR)信号系统在前列腺癌的激素非依赖状态的形成中可能起着重要的作用.EGFR家族由EGFR、HER-2、HER-3和HER-4组成.其中 ,HER-2 与HER-3在功能上密切关联.本研究对22RV1激素非依赖性前列腺癌细胞株HER-2和HER-3的表达进行定性和定量的检测.
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二羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7生长影响
大豆异黄酮是豆科植物的重要成分.近年来研究显示,其具有抗肿瘤作用,尤其对人类乳腺癌细胞株及前列腺癌细胞株均具有明显的体外抗肿瘤作用[1].文献表明,二羟异黄酮可以抑制细胞增殖及阻滞细胞周期[2].本实验初步探讨二羟异黄酮的抗肿瘤作用.
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抑制Akt通路对前列腺癌细胞株糖酵解影响的探讨
目的:探讨LY294002和氯化钴对PC3和DU145细胞糖酵解的影响及可能的机制.方法:不同浓度的LY294002、氯化钴和LY294002联合氯化钴处理PC3和DU145细胞,检测细胞的葡萄糖消耗、Akt的磷酸化、HIF-1α的蛋白表达和几个基因的mRNA表达.结果:LY294002减少PC3细胞Akt的磷酸化、HIF-1α的蛋白表达和LDH1及其他几个基因的mRNA表达,明显降低PC3细胞的葡萄糖消耗,对DU145细胞的葡萄糖消耗降低得较少.氯化钴增加PC3和DU145细胞HIF-1α的蛋白表达,升高细胞的葡萄糖消耗.与单独的LY294002相比,LY294002联合氯化钴回升细胞的葡萄糖消耗、HIF-1α的蛋白表达和几个基因的mRNA表达.结论:LY294002通过抑制Akt的磷酸化降低细胞的葡萄糖消耗,氯化钴通过诱导HIF-1α的蛋白表达升高细胞的葡萄糖消耗,Akt磷酸化抑制引起的葡萄糖消耗降低是部分由HIF-1α介导的.
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核酸适配体修饰的前列腺癌靶向载体的体内外评价
目的:构建具有前列腺癌靶向作用纳米基因载体聚酰氨胺-聚乙二醇-适配体(PAMAM-PEG-A10-3.2),考察靶向载体合成效果,携载基因能力,入细胞机制,体内外靶向等特性.方法:用核磁共振(NMR)鉴定PAMAM-PEG-A10-3.2结构;激光粒度仪测定复合物粒径和zeta电位;透射电镜(TEM)观察纳米复合物形态;竞争性抑制实验用于考察纳米复合物入细胞机制;pEGFP-N2-luc质粒(pDNA)考察纳米复合物体外靶向性;LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠,考察纳米复合物体内靶向性.结果:结果显示,PAMAM-PEG-A10-3.2合成成功,可以包裹NC-miRNA,形成稳定的纳米复合物.TEM见纳米复合物成球形.靶向载体主要通过受体介导内吞入胞.体外基因转染实验显示,靶向纳米复合物可以增加对前列腺癌细胞表面特异性膜抗原(PSMA)高表达细胞(LNCaP) 的转染效率,LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠活体成像显示,靶向载体具有良好的前列腺癌靶向性.结论:PAMAM-PEG-A10-3.2对PSMA高表达的前列腺癌细胞具有良好的体内外靶向性.
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姜黄素诱导人前列腺癌细胞株PC-3凋亡的研究
姜黄素是中药姜黄的主要成分,其性质稳定无毒,作为食物色素而被广泛使用,其药理作用包括抗炎、抗氧化和抗动脉粥样硬化等多种功能[1].近年来发现姜黄素具有显著的抗肿瘤作用,本研究旨在观察姜黄素对非激素依赖性前列腺癌PC-3细胞株的作用.
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非依赖雄激素的前列腺癌细胞株中雄激素受体的表达
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非依赖雄激素的前列腺癌细胞株中雄激素受体的表达