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他汀类药物通过抑制Akt通路调控急性T淋巴细胞白血病细胞增殖与凋亡
目的:探讨他汀类药物对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:Jurkat及CCRF-CEM细胞经不同浓度的氟伐他汀和辛伐他汀药物处理24 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;EdU法检测细胞DNA复制情况;AnnexinV/7-AAD双染法分析细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期的变化;免疫印迹法检测Cyclin D1、p21、p27、BAX、BCL-2及p-Akt蛋白的表达.结果:氟伐他汀、辛伐他汀均可抑制Jurkat及CCRF-CEM细胞增殖,且抑制效应呈一定的剂量依赖性.氟伐他汀浓度为0.2mmol/L时,Jurkat和CCRF-CEM细胞抑制率分别达41.14％和57.08％;而辛伐他汀浓度为0.2 mmol/L时,Jurkat和CCRF-CEM细胞抑制率分别达68.42％和77.10％,均接近或超过半数抑制,与溶剂对照组比较有显著差异(P＜0.05).不同浓度的氟伐他汀及辛伐他汀分别作用于Jurkat和CCRF-CEM细胞24h,其早期凋亡和晚期凋亡的细胞比例均升高,且于0.2 mmol/L和0.3 mmol/L药物浓度时,其总凋亡比例显著升高,与溶剂对照组相比有显著差异(P＜0.05).细胞周期检测结果显示,氟伐他汀及辛伐他汀诱导Jurkat和CCRF-CEM细胞G1期阻滞.Western blot检测结果显示,Jurkat和CCRF-CEM细胞经氟伐他汀或辛伐他汀处理后,BAX、p21和p27表达量逐渐升高,Cyclin D1、BCL-2和p-Akt表达量逐渐减低.结论:他汀类药物可通过抑制Akt信号通路抑制T-ALL细胞的增殖,并诱导其凋亡.
关键词： 他汀类药物 急性T淋巴细胞白血病 Akt通路 细胞增殖 细胞凋亡 -
大黄素可能通过抑制Akt信号通路诱导HL-60细胞凋亡
为研究大黄素(emodin)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、凋亡的影响及Akt信号通路在其中的作用,应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;细胞周期分析、线粒体细胞凋亡流式检测法分析细胞周期变化及细胞凋亡;Western blotting检测Akt信号通路蛋白表达水平的变化.结果显示,大黄素能有效抑制HL-60细胞的增殖,作用48 h的IC50约为20 μmol·L-1,并能诱导其凋亡,随药物作用浓度的增加,凋亡率也逐渐上升;大黄素作用后,HL-60细胞G0/G1期细胞增多,而S期及G2期的细胞减少;Western blotting检测结果显示,大黄素下调HL-60细胞Akt、p-Akt、IκB-α、p-IκB-α、p65、p-p65、mTOR及p-mTOR蛋白的表达.因此,大黄素能有效抑制HL-60细胞增殖,将细胞阻滞于G0/G1期,诱导其凋亡;Akt信号通路可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖、诱导凋亡的过程.
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探讨EGCG对人肝癌细胞体外增殖和凋亡的影响及机制
目的:探讨茶多酚主要成分没石子儿茶素没石子酸酯(EGCG)诱导人肝癌细胞株SMMC27721体外增殖和凋亡过程中的影响,预测其对人肝癌的抗癌作用及机制.方法:体外培养人肝癌SMMC27721细胞,采用不同浓度的EGCG对其进行干预,用MTT法观测其对肝癌细胞增殖能力的影响;用流式细胞仪检测其对肝癌细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学法检测肝癌细胞中p-Akt(se1473)蛋白的的表达变化;用流式细胞仪检测其对肝癌细胞凋亡的影响.结果:在EGCG的作用下,SMMC27721细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.05),p-Akt(se1473)细胞凋亡明显增加(P<0.05).结论:EGCG可通过抑制Akt信号通路而诱导肝癌细胞凋亡.
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SIRT1通过AKT通路和ERK1/2通路共同调节退变髓核细胞细胞外基质的合成
目的 研究沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1/sirtuin 1)对已退变的人椎间盘髓核细胞(DNPCs)合成细胞外基质的影响.方法 对人DNPCs进行分离、培养及其细胞鉴定,第一部分取P2代细胞用白藜芦醇(RES,SIRT1激动剂)、二甲双胍(MET,SIRT1激动剂)、尼克酰胺(NAM,S1RT1抑制剂)、SIRT1-siRNA进行相应处理,采用Western印迹检测Ⅱ型胶原(COLLA2α1)、聚蛋白多糖(Aggrecan)及其p-AKT、t-AKT、p-ERK1/2、t-EKR1/2.第二部分先RES与P2代细胞共培养后分别加入PI3K与ERK的特异性抑制剂LY294002PD98059,观察COLLA2α1、Aggrecan的表达情况.结果 用SIRT1激动剂刺激以后COLLA2α1、Aggrecan的表达显著提高,AKT及其ERK1/2的磷酸化水平也相应提高,用NAM及其SIRT1-siRNA处理后COLLA2α1、Aggrecan的表达显著降低,AKT及其ERK1/2的磷酸化水平也显著降低.用LY294002和PD98059分别处理后观察到COLLA2α1、Aggrecan的表达亦显著降低.结论 SIRT1可通过AKT及其ERK1/2两条通路上调人DNPCs细胞外基质的表达,抑制椎间盘的变性,为进一步研究椎间盘退变的机制、组织工程学、基因治疗等奠定了基础.
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抑制Akt通路对前列腺癌细胞株糖酵解影响的探讨
目的:探讨LY294002和氯化钴对PC3和DU145细胞糖酵解的影响及可能的机制.方法:不同浓度的LY294002、氯化钴和LY294002联合氯化钴处理PC3和DU145细胞,检测细胞的葡萄糖消耗、Akt的磷酸化、HIF-1α的蛋白表达和几个基因的mRNA表达.结果:LY294002减少PC3细胞Akt的磷酸化、HIF-1α的蛋白表达和LDH1及其他几个基因的mRNA表达,明显降低PC3细胞的葡萄糖消耗,对DU145细胞的葡萄糖消耗降低得较少.氯化钴增加PC3和DU145细胞HIF-1α的蛋白表达,升高细胞的葡萄糖消耗.与单独的LY294002相比,LY294002联合氯化钴回升细胞的葡萄糖消耗、HIF-1α的蛋白表达和几个基因的mRNA表达.结论:LY294002通过抑制Akt的磷酸化降低细胞的葡萄糖消耗,氯化钴通过诱导HIF-1α的蛋白表达升高细胞的葡萄糖消耗,Akt磷酸化抑制引起的葡萄糖消耗降低是部分由HIF-1α介导的.
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利拉鲁肽激活Akt通路改善乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤
目的:研究利拉鲁肽对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响及机制.方法:分离乳鼠心肌细胞,分为对照组、缺氧/复氧组和利拉鲁肽组,体外构建缺氧/复氧损伤模型,使用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、Akt以及Akt磷酸化水平.结果:对乳鼠心肌细胞进行缺氧/复氧损伤处理后,流式细胞术检测发现,与对照组相比,缺氧/复氧损伤能明显诱导细胞凋亡,而利拉鲁肽则有抗凋亡作用;Western blot结果提示,缺氧/复氧损伤可诱导caspase-3表达,激活凋亡相关信号通路,促进细胞凋亡,而利拉鲁肽组细胞Akt磷酸化水平明显增加,caspase-3表达减少、活性降低.结论:利拉鲁肽可以通过增加Akt磷酸化以激活Akt通路,抑制caspase-3的表达,发挥抗凋亡作用,改善缺氧/复氧损伤.
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选择性环氧合酶抑制剂celecoxib对血管平滑肌细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用和分子机制
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞莱昔布(celecoxib)对血管平滑肌细胞的增殖抑制作用及分子机制.方法:给予原代培养的大鼠平滑肌细胞不同浓度的celecoxib处理,WST-1细胞增殖实验观察细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测凋亡;Western blot方法检测血管平滑肌细胞COX-2的表达、caspase-3蛋白的裂解激活、磷酸化Akt的表达.结果:WST-1实验结果显示.经0、6.25、12.50、25.00、50.00 μmol/Lcelecoxib作用24 h后,细胞的增殖率分别为100%、81.15%、66.72%、54.93%和11.41%:50 μmol/L celecoxib作用24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率为30.72%;Western blot实验显示,血管平滑肌细胞中COX-2有表达,celecoxib作用于细胞后caspase-3蛋白裂解片段激活,磷酸化Akt的表达减弱或消失.结论:celecoxib对血管平滑肌细胞有增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能部分涉及到Akt/caspase途径.
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CD44中和抗体对黑色素瘤B16细胞生长及细胞糖酵解的影响
目的 CD44在肿瘤的生长及糖酵解代谢中起重要作用.文中旨在探讨CD44中和性抗体对鼠黑色素瘤B16细胞生长及糖酵解代谢的影响. 方法 首先设置对照抗体(50μg/mL)和不同浓度CD44抗体(2、10、50μg/mL)处理B16细胞,24h后通过免疫印迹检测AKT通路活化情况.随后设置对照抗体(50μg/mL)和CD44抗体(50μg/mL)平行试验使用4μmol/L API-2预处理细胞,处理细胞48h后通过免疫荧光观察乳酸脱氢酶A(LDHA)表达,比色法检测细胞上清乳酸含量.后设置对照抗体(50μg/mL)组、API-2(4μmol/L)处理组、CD44抗体(50μg/mL)组和联合处理组(API-2+CD44抗体),作用B16细胞96h后,通过MTT法检测细胞增殖,AO/EB和AnnexinV染色检测细胞死亡及凋亡. 结果 与对照抗体B16细胞p-AKT水平(1.00±0.25)相比,2、10、50μg/mL CD44抗体呈浓度依赖性增强[2.51±0.32,3.89±0.46,4.07±0.42,P<0.01],与对照抗体相比,50μg/mL CD44抗体作用后LDHA表达增强(2.13±0.24)倍.中和CD44后B16细胞LDHA荧光表达增强,且细胞上清乳酸含量升高,与对照抗体相比,CD44抗体(50μg/mL)96h后细胞上清乳酸含量升高[(35.32±3.24) mmol/L vs (56.34±8.19)mmol/L,P<0.01].联合使用AKT通路抑制剂API-2处理后,CD44抗体所致LDHA表达增强现象明显受到抑制,且对照抗体和CD44抗体组乳酸含量均下降;与对照组相比,CD44抗体细胞上清乳酸含量差异无统计学意义[(20.12±4.35) mmol/L vs (22.65±5.16) mmol/L,P>0.05].MTT检测结果显示,与对照组细胞增殖率[(103±12.91)%]比较, API-2组[(84.87±19.35)%]、CD44抗体组[(71.35±16.23)%]和联合处理组[(41.16±9.15)%]均明显降低(P<0.05).细胞凋亡检测显示,与对照抗体组凋亡率[(5.23±0.96)%]相比, API-2组[(13.65±4.27)%]、CD44抗体组[(19.21±3.53)%]和联合处理组[(43.21±7.87)%]均显著升高(P<0.01). 结论 体外中和B16细胞CD44功能抑制细胞生长但促进AKT通路介导的糖酵解代谢,抑制AKT通路可增强CD44抗体对肿瘤细胞的杀伤作用.
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毛蕊花糖苷通过激活PI3 K／AKT通路促进成年小鼠神经干细胞增殖
目的观察毛蕊花糖苷对原代成年小鼠神经干细胞增殖的影响，并探讨其可能的作用机制。方法从成年C57BL／6小鼠脑室下区分离、培养原代神经干细胞，并通过神经干细胞标志蛋白Nestin免疫荧光染色，对分离得到的神经干细胞进行鉴定。不同浓度毛蕊花糖苷（5、10、20、40μmol·L－1）在无有丝分裂原（EGF／bFGF）的条件下处理细胞24 h。采用CCK-8法检测细胞活力，免疫组化法计数BrdU阳性细胞率，检测细胞增殖能力，Western blot方法检测给药后神经干细胞Akt的磷酸化水平。结果毛蕊花糖苷在无有丝分裂原存在的条件下，能明显促进神经干细胞的增殖，并明显提高p-Akt的表达。而在加入PI3 K／AKT信号通路阻断剂LY294002后，这一作用被明显抑制。结论毛蕊花糖苷对体外培养的神经干细胞具有明显促增殖作用，该作用机制可能与化合物激活Akt通路有关。
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人类脐带间充质干细胞抑制肝内胆管癌细胞生长的机制
目的 探讨人类脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对肝内胆管癌细胞生长的影响,深入了解其分子机制.方法 采用hUC-MSCs条件培养基作用于肝内胆管癌HCCC-9810细胞,通过Transwell共培养实验、MTT比色实验、DNA断裂实验等方法检测细胞增殖和细胞凋亡,通过Western blotting及免疫荧光染色方法检测相关凋亡通路中蛋白质表达水平.结果 间充质干细胞条件培养基对HCCC-9810细胞的增殖抑制表现出时间和剂量依赖性,且抑制作用是通过诱导细胞凋亡介导,增殖抑制率由12.87％升至50.98％,凋亡率由10.1％升至49.67％.p-Akt、p-GSK-3β表达下调.结论 人类脐带间充质干细胞条件培养基可抑制肝内胆管癌细胞的生长,其分子机制与抑制PI3K/Akt信号通路有关.
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EGCG经PI3K-AKT信号通路诱导人胃癌BGC-823细胞G1期阻滞
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)通过P13KAKT通路对人胃癌BGC-823细胞周期调控的分子机制.方法 采用噻唑蓝比色法(MTT)检测BGC-823细胞的存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(flow eytometry,FCM)检测EGCG处理前后BGC823细胞周期的变化;Westem blot检测PI3K-AKT信号传导通路相关蛋白的表达.结果 EGCG能够抑制BGC823细胞的生长,且这种抑制作用与诱导BGC823细胞G1期阻滞有关.EGCG可以下调PI3K-AKT信号通路蛋白Akt的磷酸化表达,对通路下游周期相关蛋白cyclinD1的表达也有抑制作用.结论 EGCG能够通过活化PI3K-AKT信号通路发挥诱导人胃癌BGC823细胞G1期阻滞的作用.
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Akt通路在热化疗联合诱导人小细胞肺癌细胞凋亡中的作用
背景与目的:Akt通路是细胞内一条重要的信号通路,与细胞生长、凋亡密切相关,本研究旨在探讨Akt通路在热化疗诱导人小细胞肺癌细胞凋亡中的作用,进而探讨热疗抑制肺部肿瘤细胞增殖可能的机制.方法:参考临床常用剂量,采用43℃加热联合120μg/L紫杉醇(热化联合组)、43℃加热联合120μg/L紫杉醇并加入1 μmol/L Akt特异抑制剂Wortmannin(Wortmannin组)、43%加热联合120μg/L紫杉醇并加入30 μmol/L活性氧(reactive oxygen species,ROS)特异抑制剂NAC(NAC组)、单纯使用120μg/L紫杉醇(单纯化疗组)处理H446细胞,以未处理的H446细胞作为对照组,应用噻唑蓝比色法(MTT法)检测各处理方式下细胞增殖率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,荧光法检测细胞内ROS,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt磷酸化水平和caspase-3的表达,采用SPSS 13.0统计软件对数据进行统计分析.结果:热化联合组细胞增殖率(59.83±3.36)%低于对照组(100.00±0.00)%和单纯化疗组(69.16±2.95)%(P<0.05);热化联合组的细胞凋亡率高(27.59±5.47)%(P<0.05);热化联合组的ROS表达增高(102.14±18.34)(P<0.05),NAC可抑制其表达(28.01±1.19),Wortmannin对其无影响(99.87±8.35);Akt磷酸化水平在热化联合组降低(0.69±0.03)(P<0.05),Wortmannin可抑制其磷酸化(0.00±0.00),NAC使其磷酸化水平升高(1.05±0.29)(P<0.05);热化联合组的caspase-3表达(1.07±0.08)高于其他各组(P<0.05).结论:热化疗联合应用可以明显抑制H446细胞的生长,这种抑制作用可能是通过诱导ROS的产生,继而抑制Akt通路活化,并通过caspase途径导致细胞凋亡.
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异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖的抑制作用及分子机制
目的 探讨异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖的影响及分子机制.方法 应用MTT法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L)异泽兰黄素对肾癌786-O细胞活力的影响,流式细胞仪检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞凋亡的影响,Transwell检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞侵袭的影响,荧光定量PCR检测异泽兰黄素对肾癌786-O细胞miR-21表达的影响.转染病毒构建miR-21稳定表达细胞株,MTT、流式细胞仪和Transwell分别检测miR-21和异泽兰黄素对肾癌786-O细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,Western blot法检测miR-21和异泽兰黄素对细胞内p-AKT、AKT、Bax和Bcl2蛋白表达的影响.结果 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mmol/L异泽兰黄素作用肾癌786-O细胞,细胞活力显著降低,且呈现浓度依赖性.与正常对照组相比,异泽兰黄素作用细胞24 h能显著促进细胞凋亡(P＜0.01),抑制细胞侵袭(P＜0.01),抑制miR-21的表达(P＜0.01),且作用均具有浓度依赖性;Western blot结果显示,异泽兰黄素抑制AKT磷酸化水平和Bcl2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,与正常对照组相比意义具有显著统计学差异.过表达miR-21能显著抑制异泽兰黄素诱导的细胞凋亡和侵袭,并抑制异泽兰黄素调控的p-AKT、Bax和Bcl2的表达.结论 异泽兰黄素可抑制肾癌786-O细胞miR-21的表达,通过激活AKT通路诱导细胞凋亡.
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CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌患者术前血清中的水平及其临床意义
目的:探讨CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)患者术前血清中的水平及其与患者临床病理特征的关系.方法:选取2014年9月至2015年4月在广西壮族自治区人民医院接受治疗的60例NSCLC患者作为观察组,另选取同期于本院行正常体检的60例健康志愿者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9的水平,分析CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白与NSCLC患者临床病理特征的关系.结果:NSCLC患者术前血清中CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白的水平均显著高于对照组(均P＜o.001).CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白水平与NSCLC患者原发肿瘤大小、淋巴结转移、病理类型和TNM分期等存在相关性(均P＜0.05),与患者性别、年龄无明显相关关系(P＞0.05).ROC曲线分析结果显示,以血清CCL25水平334 ng/L为临界值,诊断淋巴结转移的敏感度为74.2％,特异度为86.2％;以AKT蛋白水平345 ng/L为临界值,其敏感度为71.0％,特异度为96.6％;以VEGF-D蛋白水平362 ng/L为临界值,其敏感度为90.3％,特异度为96.6％;以MMP-9蛋白水平374 μg/L为临界值,其敏感度为71.0％,特异度为89.7％.NSCLC患者术前血清CCL25蛋白水平与AKT、VEGF-D、MMP-9蛋白水平均呈正相关关系(r =0.863、0.785、0.881,均P＜0.001).结论:NSCLC患者术前血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白水平升高,且与肺癌的发生、发展和淋巴结转移有密切联系;AKT通路及其效应细胞因子VEGF-D和MMP-9有可能受CCR9/CCL25生物轴调节.
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差异表达的miR-20a对胃癌细胞恶性转化的影响及其机制研究
目的 探讨微小分子非编码RNA-20a(miR-20a)在胃癌中的表达及其对胃癌细胞恶性转化的影响,并对其作用机制进行研究.方法 选取2014年9月至2017年9月经江苏大学附属昆山医院病理确诊的45例患者的新鲜胃癌及癌旁组织标本,提取总RNA,qRT-PCR检测胃癌及癌旁组织中miR-20a的表达,脂质体转染寡核苷酸片段NC-inhibitor及miR-20a-inhibitor至MGC-803细胞,qRT-PCR检测转染后MGC-803细胞中miR-20a的表达水平,平板克隆实验和Transwell迁移实验分别检测转染miR-20a-inhibitor后MGC-803细胞增殖能力和迁移能力的改变,Western blot法检测转染前后MGC-803细胞AKT通路活性的改变及对上皮间质转化(EMT)蛋白表达情况的影响.结果 癌组织中miR-20a/U6的表达水平为1.12±0.10,显著高于癌旁组织的0.30±0.04,差异具有显著统计学意义(P<0.01);miR-20a-inhibitor转染组miR-20a/U6的表达水平为0.65±0.04,明显低于NC-inhibitor转染组的1.01±0.14,差异具有显著统计学意义(P<0.01);miR-20a-inhibitor转染组克隆细胞数量为(70±3)个,明显低于NC-inhibitor转染组的(110±4)个,差异有统计学意义(P<0.05);miR-20a-inhibitor转染组Transwell细胞迁移数量为(35±4)个,明显低于NC-inhibitor转染组的(53±6)个,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-20a-inhibitor转染组比较,NC-inhibitor组AKT通路活化减弱,同时上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱,神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强.结论 与癌旁组织相比,癌组织中miR-20a的表达水平显著增高,miR-20a通过促进胃癌细胞增殖和迁移途径引起胃癌细胞恶性转化.
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Akt信号通路参与并介导了虎杖苷对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响
目的:探讨虎杖苷通过Akt通路调节2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢的作用机制.方法:本研究采用高脂高糖饮食加小剂量链脲菌素(STZ)联合诱导的2型糖尿病大鼠模型,观察灌胃给予虎杖苷(75 mg/kg、150 mg/kg)后对糖尿病大鼠血糖血脂、肝脏病理形态以及肝脏组织Akt、GSK3β、GCK、LDLR的影响.结果:虎杖苷在75 mg/kg给药剂量时就能有效调节2型糖尿病大鼠的糖脂紊乱,降低模型动物空腹血糖(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;减轻肝脏组织病理损伤,明显激活模型动物肝脏组织的Akt蛋白表达,进而促进下游GSK-3β的磷酸化,上调GCK,LDLR的蛋白表达,与150 mg/kg剂量组没有明显差异.结论:虎杖苷可以有效调节糖脂代谢且该作用与其影响Akt信号通路密切相关.
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β-榄香烯对胃癌细胞Akt通路活化和凋亡相关蛋白表达的影响
目的:旨在探讨β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞Akt通路的活化和凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2和PARP 表达的影响.方法:实验分为对照组和β-榄香烯处理组,采用 四甲基偶氮唑盐(MTT)试验法检 测β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞的药物敏感性,采用Western blot检测蛋白表达,应用SPSS(13.0软件包)进行统计学分析.结果:β-榄香烯处理胃癌BGC823细胞24h的IC50为46.56μg/ml,选用50μg/ml和200μg/ml的β-榄香烯处理24h,BGC823细胞凋亡率分别为12.33%和42.59%,与对照组相比有统计学差异(P<0.05).与对照组相比,β-榄香烯处理组Bcl-2与Bax的比值显著下调、伴有PARP裂解.进一步检测发现β-榄香烯处理组明显下调了Akt的磷酸化水平,从而有效抑制Akt信号转导通路.结论:β-榄香烯可以通过抑制Akt信号通路的活化、下调Bcl-2与Bax的比值和诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡.
关键词： β-榄香烯 人胃癌BGC823细胞 Akt通路 细胞凋亡 -
肉桂多酚对链脲佐菌素致糖尿病小鼠的保护作用
目的 探讨肉桂多酚对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)致糖尿病小鼠的保护作用及其分子机制.方法 建立单剂量STZ 240 mg/kg诱导糖尿病小鼠模型,随机分成5组:STZ模型对照组、二甲双胍阳性组(0.3 g/kg)及肉桂多酚低、中、高剂量组(0.3、0.6、1.2 g/kg),持续每天灌胃,共14 d.并设置正常对照组.末次给药后,血糖试纸测定空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG),生化法测定血清胰淀粉酶含量,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清胰岛素和胰高血糖素浓度,免疫组化法检测胰岛细胞中胰岛素阳性细胞数量,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平.结果 与STZ模型对照组小鼠比较,肉桂多酚干预组小鼠的血糖明显降低(P<0.05),血清胰岛素增加而胰高血糖素降低(P<0.05),胰岛细胞中胰岛素阳性细胞显著增加(P<0.05),胰脏细胞中蛋白激酶B(AKT)及其磷酸化水平同时增加(P<0.05),且表现为一定的剂量依赖性.结论 肉桂多酚对STZ所致糖尿病小鼠胰脏损害表现出有效的细胞保护作用,其分子机制可能通过调节胰岛细胞AKT信号通路促进胰岛β细胞分泌胰岛,从而发挥降血糖药理活性.
