K-ras 基因突变相关的肿瘤靶向治疗进展

焦磷酸测序法检测结直肠癌患者k-ras基因突变

研究证明,k-ras癌基因的激活在CRC发生发展过程中起重要作用[1].k-ras基因常见的激活方式为点突变,其中90%以上的突变发生在1号外显子第12位密码子(野生型:GGT)和第13位密码子(野生型:GGC)[2],突变率约30%～49%[3].近年来,k-ras基因是否突变已成为西妥昔单抗能否用于CRC分子靶向治疗的用药评判标准[4].因此,如何快速准确检出k-ras 基因突变对这类药物的应用及疗效预测显得尤为重要.焦磷酸测序法是一种酶促级联测序技术,特别适用于SNP常规检测[5].

顺序特异性引物法快速检测胰腺癌K-ras基因点突变

目的研究简捷、特异、敏感的检测胰腺癌K ras基因点突变的方法及其在胰腺疾病中定性诊断的价值.方法采用针对K ras基因点突变方式(CGT、GAT、GTT)设计的顺序特异性引物(SSP),先后对胰腺癌石蜡包埋组织、冰冻新鲜组织、细针穿刺组织及胰液进行多聚酶链反应(PCR),扩增产物借助常规电泳和染色检测有无K-ras基因突变及突变方式.结果胰腺癌石蜡包埋组织、冰冻新鲜组织、细针穿刺组织及胰液中K-ras基因点突变率分别为74.2%、95.1%、91.4%及94.1%,而所有被检测的慢性胰腺炎、胰岛素瘤、壶腹癌、胆管癌、十二指肠乳头癌及外伤胰腺的组织标本和胰液标本均无K ras基因突变发生.结论该检测法简便、快速、特异、敏感,具有临床实用性,可以作为鉴别胰腺肿块良恶性和诊断胰腺癌的一种方法.

抗EGFR治疗与结直肠癌K-ras基因突变状态的研究进展

结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,严重威胁着人类的健康.目前全球结直肠癌新发病例占全部癌症的9.4%,发病率排位男性居第4位,女性居第3位,现有的结直肠癌患者数量仅次于乳腺癌[1].结直肠癌在全球的发病率和死亡率仍呈上升趋势,2007年全球结直肠癌新病例接近120万,死亡63万,分别比2000年增加27%和28%,平均年增长3.9%和4.0%[2].

国人结直肠癌k-ras基因突变状态及其对抗EGFR单抗联合化疗的反应

目的 观察国人结直肠癌k-ras基因突变情况,及抗表皮生长因子受体(EGFR)单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌的近期疗效和患者不良反应.方法 收集139例结直肠癌手术或肠镜标本,采用焦磷酸测序法检测k-ras突变状态.应用抗EGFR单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌23例,初治3例,复治20例.23例患者中西妥昔单抗联合化疗者18例,尼妥珠单抗联合化疗者5例.西妥昔单抗首次给予负荷剂量400 mg/m2,而后每周维持量为250 mg/m2.尼妥珠单抗首剂400 mg,以后200 mg/周维持治疗.23例中有8例联合依立替康单药;12例为联合FOLFIRI方案;3例联合FOLFOX4方案.结果 全组139例患者检测k-ras的突变状态,其中突变型55例(39.6%);野生型84例(60.4%).全组22例可评价疗效,其中PR 5例,SD 9例,RR率22.7%,DCR率63.6%.中位疾病进展时间(TTP)为124 d.共有13例患者送检k-ras检测.11例k-ras野生型的患者中,4例获得PR;4例SD;3例PD.2例k-ras突变型的患者治疗2个周期后PD.18例应用西妥昔单抗中,15例(83.3%)出现痤疮样皮疹,3例出现甲沟炎.尼妥珠单抗应用者未出现皮疹和甲沟炎.2例应用西妥昔单抗患者出现Ⅲ度超敏反应.1例第2周期换用尼妥珠单抗后未出现过敏反应.结论 国人结直肠癌k-ras基因突变率与西方人相似.西妥昔单抗与化疗联合在晚期结直肠癌的治疗上疗效确切,尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期结直肠癌苗头喜人,并且不良反应轻微,值得进一步研究.

直肠癌肝转移患者接受西妥昔单抗治疗后出现K-RAS基因突变的检测与治疗探讨

目的：探讨K-RAS基因突变的出现与西妥昔单抗获得性耐药的关系以及后续治疗策略。方法回顾性分析2014年11月15日于解放军总医院肿瘤内二科日间病房经治疗的1例K-RAS野生型直肠癌肝转移患者接受西妥昔单抗治疗后出现K-RAS基因突变的临床资料，并进行文献复习。结果患者女性，70岁，在接受西妥昔单抗治疗43个月后出现K-RAS基因突变，给予更换贝伐珠单抗+奥沙利铂方案治疗，目前复查病情无进展。结论早期使用MEK抑制剂可能逆转K-RAS突变导致的西妥昔单抗继发耐药。

胰腺癌行CA19-9与K-ras基因突变联合检测的诊断意义

目的：探讨分析胰腺癌行CA19‐9与K‐ras基因突变联合检测的诊断意义。方法：选取2012年9月－2014年10月到本院实施诊治的24例胰腺癌患者作为研究组，基于此，选择同时期到我院实施诊治的22例非胰腺癌患者作为对照组。两组受检对象入院时采集外周静脉血，经血浆分离提取DNA ，检测CA19‐9和K‐ras基因突变，比较分析两组受检对象的检测结果。结果：研究组有18例患者K‐ras基因突变为阳性，阳性率为75．0％；对照组K‐ras 基因突变为阳性3例，阳性率为13．6％，差异具有统计学意义（ P＜0．05）。研究组患者单个指标检测所获敏感性明显低于联合K‐ras基因突变与CA19‐9诊断的敏感性。结论：胰腺癌患者K‐ras基因突变发生率较高，联合实施K‐ras 基因突变与CA19‐9检测，检出率高，诊断结果更为正确且合理。

慢性胰腺炎 K- ras 基因突变的临床病理学意义

目的:探讨慢性胰腺炎K-ras基因突变的临床病理学意义. 方法: 9例手术切除的慢性胰腺炎的石蜡标本,用微解剖法分离慢性胰腺炎的胰导管上皮粘液细胞增生灶,提取、扩增DNA,用ASO斑点杂交检测K-ras基因第12密码子的碱基序列.对9例接受手术治疗的病人进行长期随访.结果: 9例慢性胰腺炎中4例有明显的胰导管上皮粘液细胞增生,其中2例被检出GAT型突变,分别占全组和有胰管上皮粘液细胞增生的22%和50%.两个突变病例分别是接受了胰体尾切除和胰头十二指肠切除手术,术后分别随访17年和10年,没有发现任何恶变迹象.结论:慢性胰腺炎可以检出K-ras基因突变;发生了K-ras基因突变的慢性胰腺炎上皮粘液细胞增生灶,未必一定发生为胰腺癌;胰液、粪便、末梢血液和尿液的检测,以及胰腺组织细针穿刺液检出 K-ras 基因突变,对胰腺癌的诊断有重要参考价值,但不应视为胰腺癌的确诊依据.

结直肠癌K-ras基因突变两种检测方法的比较及临床相关性分析

目的 比较ARMS法和Sanger测序法在检测K-ras基因突变时的敏感性、一致性和特异性,并且探讨结直肠癌患者K-ras基因突变与临床病理特性的相关性.方法 采用ARMS法和Sanger测序法对200例结直肠癌患者进行K-ras基因突变检测.结果 ARMS法检出K-ras基因突变75例,阳性率为37.50％.Sanger测序法检出K-ras基因突变72例,阳性率为36.00％.两种方法的符合率为96％.同时,K-ras基因突变与淋巴结转移具有相关性(P＜0.05),与患者年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、肝转移和肿瘤类型均无相关性(P＞0.05).结论 K-ras基因突变检测有助于筛选靶向治疗有效的结直肠癌患者.ARMS法更适用于临床检测.

K-Ras基因突变在胰腺癌诊断、进展和预后中的作用研究进展

K-Ras基因突变是胰腺癌中常见的基因改变类型之一,与胰腺癌的发生发展密切相关,并可能与胰腺癌的预后具有相关性.针对K-Ras基因突变在胰腺癌临床中作用的深入研究,将有助于胰腺癌的诊断与治疗.本文综述K-Ras基因突变在胰腺癌早期诊断、疾病进展及预后预测中的作用研究.

肺腺癌中PD-1、PD-L1蛋白表达与K-RAS基因突变状态的相关性分析

目的 探讨肺腺癌程序性死亡分子-1 (programmed death 1,PD-1)、程序性死亡分子配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)蛋白的表达与K-RAS基因突变的相关性.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测PD-1、PD-L1蛋白的表达,应用实时荧光定量PCR技术检测K-RAS基因的突变类型.结果 肺腺癌组织中PD-1、PD-L1的阳性率均高于良性病变肺组织(P＜0.01),PD-1、PD-L1蛋白表达与患者性别、年龄、吸烟史、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无相关性(P＞0.05).36例肺腺癌样本中发生K-RAS基因突变者8例(22.2％),K-RAS基因突变与患者性别、年龄、吸烟史、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无关(P＞0.05).相关分析显示PD-1、PD-L1蛋白表达与K-RAS突变无关(P＞0.05).结论 PD-1、PD-L1蛋白在肺腺癌中的表达明显高于良性病变肺组织,但两者表达程度与肺腺癌的临床病理特征及K-RAS基因突变无关.

p53与K-ras基因在大肠癌组织中的表达及临床意义

大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤.随着基因生物技术的发展,人们认识到大肠癌的发生及发展是多基因、多步骤相互作用的过程,包括原癌基因激活、抑癌基因失活及DNA损伤修复系统缺陷等.本研究探讨抑癌基因p53与癌基因k-ras基因突变在大肠癌中的表达及其意义,报告如下.

血清糖链抗原、粘附分子及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨血清糖链抗原、粘附分子及K-ras基因突变联合检测在胰腺癌诊断中的应用价值,及其在胰腺癌中的表达意义.方法 收集109例胰腺癌患者(Ⅰ期14例、Ⅱ期33例、Ⅲ期39例、Ⅳ期23例;淋巴结转移56例,无淋巴结转移53例)、78例胰腺炎患者和98例健康体检者血清.采用化学发光法检测血清CA50、CA125、CA199、CA242水平,采用双抗夹心法酶联免疫吸附试验法检测ICAM、VCAM、ALCAM、CEACAM水平,采用聚合酶链反应法检测K-ras基因突变情况.结果 胰腺癌组CA50、CA125、CA199、CA242、VCAM、ALCAM、CEACAM水平和K-ras突变率明显高于胰腺炎组和健康对照组(P＜0.05);胰腺炎组VCAM、ALCAM、CEACAM水平明显高于健康对照组(P＜0.05),而胰腺炎组和健康对照组CA50、CA125、CA199、CA242水平和K-ras突变率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).联合检测[logit (P)=0.114×CA199+0.235×CEACAM+ 0.082×K-ras]对胰腺癌的诊断价值大,AUC达0.931,显著高于各个指标单独检测,其敏感性和特异性分别达94.5％和86.9％.VCAM、ALCAM、CEACAM水平随胰腺癌分期的增加,水平不断升高(P＜0.05);有淋巴结转移的胰腺癌患者粘附分子VCAM、ALCAM、CEACAM水平均明显高于无淋巴结转移胰腺癌患者(P＜0.05).结论 糖链抗原、粘附分子和K-ras基因突变联合检测能够大大提高胰腺癌的诊断效能,其中粘附分子表达水平与胰腺癌的分期和淋巴结转移密切相关.

K-ras基因突变对非小细胞肺癌患者预后的影响

目的：探讨K-ras基因突变对非小细胞肺癌（ NSCLC）患者预后的影响。方法回顾分析2006年3月－2008年7月收治的92例NSCLC患者的临床资料，所有患者均采用蝎形探针扩增阻遏突变系统（ ARMS）法行K-ras基因突变检测。结果92例NSCLC患者中11例患者K-ras基因突变阳性，阳性率为11．96％。 K-ras基因突变类型分别为Gly12Cys（GGT＞TGT）突变3例，Gly12Val（GGT＞GTT）突变2例，Gly12Ala（GGT ＞GCT）突变2例，Gly12Arg（GGT＞CGT）突变2例，Gly12Cys（GGT ＞TGT）突变与 Gly12Val（GGT ＞GTT）突变并存1例，Gly12Cys（GGT ＞TGT）突变与Gly12Ala（GGT＞GCT）突变并存1例。 K-ras基因突变阳性组Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期显著低于K-ras基因突变阴性组Ⅲa～Ⅳ期患者，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 NSCLC患者K-ras基因突变阳性率较低，但是它可能在一定程度上对NSCLC患者预后产生负性影响。

PCR-SSCP检测大肠癌组织中p53、K-ras基因的突变

目的探讨p53、K-ras基因突变与大肠癌发生、发展的关系.方法应用PCR-SSCP方法检测68例大肠癌和癌旁组织以及20例正常组织中p53、K-ras基因突变情况.结果大肠癌组织中p53、K-ras基因突变率分别为47.1%(32/68)和44.1%(30/68),明显高于癌旁组织(13.2%,9/68;7.4%,5/68),20例正常组织中未检出p53、K-ras基因突变.伴有淋巴结及远处转移的大肠癌者,其p53、K-ras基因突变率明显高于无淋巴结及远处转移者;p53、K-rag基因突变与大肠癌组织学类型无关.结论p53、K-ras基因突变与大肠癌发生、发展有密切关系,其在细胞癌变中起重要作用,可作为评估大肠癌转移的分子生物学指标之一.

K-ras基因突变检测对胰腺癌的诊断作用

目前在胰液、外周血、粪便和胰腺细针穿刺等多种标本中,已开展了K-ras基因第12密码子点突变诊断胰腺癌的早期实验研究.我们对相关研究结果进行分析,为临床早期诊断胰腺癌提供依据.

CT纹理分析对鉴别直肠癌患者K-ras基因突变的可行性研究

目的:探讨CT纹理分析(CTTA)技术对鉴别直肠癌患者K-ras基因突变的可行性研究.方法:回顾性分析33例经病理证实的直肠癌患者的CT图像,其中K-ras突变型18例、野生型15例.使用TexRad软件对病灶大层面的平扫及门静脉期图像进行分析,获得基于不同空间缩放因子(SSF=0和2～6)的6个特征性纹理参数值,包括均值(mean)、标准差(standard deviation,SD)、熵值(entropy)、偏度值(skewness)、峰值(kurtosis)及正像素均值(mean of positive pixels,MPP).比较两组间各参数值的差异.结果:平扫CT图像:当SSF取2～4时,野生型组中病灶的熵值(分别为4.3、4.2、4.3)高于突变型(分别为4.1、4.0和4.0),差异均有统计学意义(P＜0.05);当SSF=2、熵取界值4.245时,诊断敏感度及特异度均为73.3％;当SSF=3、熵取界值4.095时,诊断敏感度及特异度分别为80.0％、61.1％;当SSF=4、熵取界值4.205时,诊断敏感度为73.3％、特异度为72.2％.增强CT图像上各纹理参数值在两组间的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:CT纹理分析能够对预测直肠癌患者有无K-ras基因突变提供一定的诊断信息.

K-Ras基因突变检测方法进展

近年来,靶向药物的问世,使肿瘤治疗进步明显.靶向药物单药或联合化疗药物的使用,不仅可以延长患者的生存期,更可明显提高患者的生活质量.西妥昔单抗(Cetuximab)是一种靶向作用于表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体,通过与EGFR细胞外位点结合,竞争性地抑制其与自然配体的结合,从而阻断下游信号转导,起到抑制肿瘤生长及转移的作用.

结直肠癌k-ras基因与多药耐药相关蛋白相关性研究

目的：探讨结直肠癌（CRC）中K-ras基因突变和多药耐药相关蛋白的表达及两者的关系。方法：利用免疫组织化学、实时荧光定量PCR技术检测K-ras基因及多药耐药相关蛋白在CRC中的表达。结果：结直肠癌中Pgp、Topo-II、CerbB-2、GST-π和Ki-67的阳性率分别为15.8％，84.21％，26.13％，71.42％，32.67％。 Pgp、Topo-II的表达和K-ras突变率与肿瘤发病的性别、类型、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移无关（P＞0.05），CerbB-2、GST-π的阳性率与肿瘤淋巴结转移相关（P＜0.05），Ki-67的阳性率与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P＜0.05）。 K-ras基因突变率为28.94％，与CerbB-2的表达呈正相关（P＜0.05）。结论：联合检测多药耐药相关蛋白及K-ras突变有助于临床判定CRC对化疗药物的敏感性、制定个性化化疗方案提供依据。

血清糖链抗原、粘附分子及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究与分析血清糖链抗原、粘附分子及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及其临床意义.方法:随机选取自2016年9月-2017年9月来我院进行检查的患有胰腺癌的患者81例,随后选取同时期的患有胰腺炎的患者71例以及健康患者72例,随后采取双抗夹心法酶以及同时采取免疫吸附试验法检测患者体内的ALCAM、CEACAM、CAM以及VCAM等水平,同时采取化学发光法检测患者血清内的CAl25、CAl99、CA242以及CA50水平,且采取聚合酶链反应法检测患者的K-ras基因突变等情况.结果:胰腺癌组患者的CAl25、CAl99、CA242、CA50水平、ALCAM、CEACAM、VCAM以及K-ras基因突变率等情况显著高于胰腺炎组以及健康组,具有统计学意义(p<0.05).且胰腺炎组患者的ALCAM、CEACAM以及VCAM等水平显著高于健康组,具有统计学意义(p<0.05).对于胰腺癌患者采取联合检测检查比单项指标检测检查的诊断价值要高,联合检测的敏感性高达94.5%且特异性为86.9%,具有统计学意义(p<0.05).ALCAM、CEACAM以及VCAM等水平会随着胰腺癌的分期的增长而出现增高的情况,且有淋巴转移的胰腺癌患者的ALCAM、CEACAM以及VCAM等水平会显著高于无淋巴转移的胰腺癌患者,具有统计学意义(p<0.05).结论:血清糖链抗原、粘附分子及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及其临床意义较高,具有统计学意义(p<0.05).