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小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响
目的:观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢活性的影响,探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制.方法:采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞,用不同浓度的小檗碱(0,1,3,10,30,100 αmol·L-1)和1 mmol·L-1二甲双胍干预24 h后,采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达;采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达,同时检测GK的活性.结果:与阴性对照组相比,小檗碱在10,30,100 μmol ·L-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达,二者同时在30 μmol·L-1时达到大值(HNF4α mRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86,P<0.01);在10,30 μmol·L-1时明显上调GK活性,同时在30 μmol·L-1时达到大值(0.080±0.073,P<0.05);而二甲双胍对HNF4αmRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异.结论:小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关.
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小檗碱对肝细胞核因子6 mRNA表达及葡萄糖激酶活性的影响
目的:观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子6(HNF6)mRNA表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响,探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制.方法:采用改良两步灌流法培养原代肝细胞,用不同浓度的小檗碱(0,1,3,10,30,100μmol/L)和1 mmol/L二甲双胍干预24 h后,采用MTT比色法观察小檗碱对原代肝细胞增殖的影响;采用RT-PCR方法检测HNF6 mRNA表达,同时检测GK的活性.结果:与阴性对照组相比,1,3,10,30 μmol/L的小檗碱均能促进HNF6 mRNA的表达(1.00±0.21,1.11±0.06,1.37±0.10,1.40±0.09 vs0.68±0.02;P<0.01);当小檗碱为10,30μmo1/L时,均可上调GK的活性(0.069±0.082,0.080±0.073 vs 0.009±0.007;P<0.05);二者均在30μmol/L时达到大值.小檗碱为100 μmo1/L时HNF6 mRNA的表达、GK的活性与阴性对照组无差异,可能与其抑制肝细胞生长有关.结论:小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节HNF6的表达进而调节GK活性有关.
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2型糖尿病家系肝细胞核因子1β基因1968A/G的多态性
糖尿病组中肝细胞核因子1β基因的G等位基因携带者的空腹C肽、△I30/△G30均明显低于AA基因型纯合子.一级亲属组中G等位基因携带者的空腹及餐后3 h血糖,空腹、餐后2 h及3 h胰岛素明显高于AA基因型纯合子.
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非诺贝特对胰岛素抵抗大鼠肝脏肝细胞核因子mRNA表达的影响
目的探讨非诺贝特对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)-4α、HNF-1αmRNA表达的影响.方法对高脂饲料喂养诱导的IR大鼠,给予非诺贝特治疗(100mg·kg-1·d-1)2周.应用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术检测大鼠胰岛素敏感性.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测非诺贝特对IR大鼠肝脏HNF-4α及HNF-1α mRNA表达的影响. 结果非诺贝特治疗组大鼠的肝脏HNF-4α mRNA明显高于未治疗组(0.55±0.13vs 0.44±0.14,P<0.05),但仍低于正常对照组(0.69±0.12,P<0.05).而HNF-1α mRNA在治疗组与未治疗组间差异不显著.与未治疗组相比,治疗组大鼠体重增加较少,血浆甘油三酯明显降低,平均葡萄糖输注率则有所提高.结论非诺贝特可使高脂诱导的IR大鼠肝脏降低的HNF-4α mRNA表达水平得以部分恢复,这可能与非诺贝特的降脂效应有关.非诺贝特在降脂的同时还有胰岛素增敏作用,并能阻止高脂饮食引起的体重增加.
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肝细胞核因子-1β基因与MODY5
肝细胞核因子-1β(HNF-1β)又名变异型肝细胞核因子-1(VHNF-1)或肝细胞因子-B3(LFB3),是一种核蛋白.作为转录因子,HNF-1β能识别启动子、启动子近侧元件和增强子等顺式元件中的特异靶序列并与之结合,对靶基因的转录起到激活或阻遏的作用;也可与其它转录因子相互作用,协同调节靶基因的终活性状态.近来发现HNF-1β基因(TCF2)突变与青少年起病的成年型糖尿病(maturity-onset diabetes of the young, MODY)伴肾脏畸形有关,现就此作一介绍.
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肝组织中肝富集转录因子及其调控网络的研究进展
肝脏是机体重要的实质性器官,肝富集转录因子及其相互作用构成的复杂调控网络精确地控制着肝脏的早期发育及其各项功能的发挥.目前依据其结构特征将肝富集转录因子分为7大家族,这里着重介绍这7类肝富集转录因子的结构特征、在肝组织中的生理功能及其调控网络的新进展.
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青少年发病成年型糖尿病的基因与临床研究进展
青少年发病的成年型糖尿病(MODY)是一组高度异质性的单基因遗传病,其临床特征为发病年龄小于25岁,有3代以上家族遗传史,符合常染色体显性遗传规律.迄今已发现至少5种MODY亚型,它们分别是MODY1/肝细胞核因子4α,MODY2/葡萄糖激酶,MODY3/肝细胞核因子1α,MODY4/胰岛素启动子1,MODY5/肝细胞核因子1β.本文就MODY有关的这些基因的结构及功能特点,从基因与临床表现的角度,综述目前国外关于MODY的研究进展.
关键词: 青少年发病的成年型糖尿病 肝细胞核因子 葡萄糖激酶 胰岛素启动子因子1 异质性 -
肝细胞核因子的研究进展
肝细胞核因子是调节肝脏内基因特异性表达的一类转录因子,这些转录因子及其相互作用构成的复杂调控网络,精确地控制着肝脏的发育和肝细胞的功能.深入研究肝细胞核因子在胚胎发育和肝癌发生中的作用,可以为胚胎发育的基因调控和寻找更有效的肝癌诊断标志物、治疗靶点提供新思路.
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肝细胞核因子与2型糖尿病
肝细胞核因子(HNF)是一类转录因子,参与调节肝脏内葡萄糖代谢、脂代谢相关基因的表达.HNF在胰岛也有表达,对β细胞胰岛素基因转录的活化有重要作用 .其家族中各成员对维持胰岛β细胞正常功能及调节葡萄糖代谢都起着十分重要的作用.HN F基因突变可致其表达或功能异常,引起胰岛素基因表达下降或葡萄糖代谢异常,从而参与了2型糖尿病(2TDM)发病.目前HNF在2TDM发病机制中的作用已成为研究热点.
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MODY及其相关基因的研究进展
年轻的成年发病型糖尿病(MODY)是一种常染色体显性遗传的单基因遗传病,它的发生与一定的基因突变相关联.目前已发现至少6种MODY相关基因,即肝细胞核因子-4α(HNF-4α)/MODY1,葡萄糖激酶(GCK)/MODY2、肝细胞核因子-1α(HNF-1α)/MODY3、胰岛素启动因子-1(IPF-1)/MODY4、肝细胞核因子-1β(HNF-1β)/MODY5及MODY6/(BetaA2/NEUROD1),后5种基因均与胰岛素基因的转录调控有关.关建词:MODY;遗传学;基因,肝细胞核因子;基因,葡萄糖激酶
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10 肝细胞核因子-1α是胆汁酸与血浆胆固醇代谢的重要调节因子(ADA 2001年会,32-OR)
年轻的成年发病型糖尿病3(MODY3)是由单一肝细胞核因子-1α(HNF-1α)缺陷造成的.HNF-1α-/-小鼠表现为非胰岛素依赖型糖尿病、侏儒症、肾Fancoci综合征、肝功能紊乱及高胆固醇血症.为研究高胆固醇血症发病的分子机制,纽约的研究者对缺乏HNF-1α表达小鼠的肝脏进行了研究.HNF-1α-/-小鼠的肝脏基底外侧膜胆汁酸转运体Ntcp、Oatp1与Oatp2的表达明显降低,导致肝门胆汁酸摄入减少及血浆胆汁酸浓度升高.在肠道与肾脏,HNF-1α-/-小鼠回肠胆汁酸转运体(ASBT)不表达,导致粪便与尿胆汁酸排泄增加.同时,HNF-1α也转录调节farnesoid X受体-1(FX-R1),导致小杂二聚体伴侣 SHP-1表达降低并抑制CYP7A1(经典的胆汁酸生物合成途径的限速酶).另外,HNF-1α-/-小鼠缺乏肝细胞胆汁酸储存蛋白,血浆中增加的胆汁酸主要储存于HDL颗粒.因此,HNF-1α不仅是胰岛素分泌的重要调节因子,也是胆汁酸与HDL-胆固醇代谢中的重要转录调节因子. (ADA基金研究项目)
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线粒体基因突变糖尿病临床新进展
迄今己发现了mt基因、胰岛素基因、胰岛索受体基因、葡萄糖激酶基因、肝细胞核因子4α基因、肝细胞核因子1β基因及肝细胞核因子1α基因等单基因突变糖尿病.其中mt基因突变中唯mttRNAlett(UUR)(nt)3243A→G突变所致的糖尿病已为国内外学者所公认,能以简易的分子生物学技术检出,目前己成为首次进入日常临床基因诊断的一种糖尿病亚型.
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MODY与2型糖尿病间的异同及处理差异
其实,无论在中国,还是在全世界,人们对MODY的认识应该说仅仅是开始,肝细胞核因子4α(HNF4α)基因突变,是第一个被定义为MODY基因位点的[1],但真正确定下来是MODY3基因肝细胞核因子1 α~(HNF1α)的确定,故HNF4α先发现后确定,称MODY1.尽管从1991年至今对于MODY亚型,已经报告了14个(MODY14),但大部分是零星报告,或者从科研角度有过一定量的筛查报告,因此还谈不上流行病学资料,2011年Thanabalasingham等对欧洲的MODY的流行资料报导占总糖尿病人群的1%~2%[3],是欧洲人发病率高呢?还是我们视而不见?本篇文章的意图是:承认MODY是客观存在的,但由于总的原因我们尚缺乏识别能力,也包括他们间的复杂性,也包括基因检测尚未广泛应用于临床.
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绞股蓝皂甙对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞核因子-1α的影响
目的:观察绞股蓝皂甙(GPS)对2型糖尿病(T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织肝细胞核因子(HNF)-1α的影响。方法65只SPF级雄性SD大鼠,体质量220~250 g,随机分为空白对照组(7只,N组),NAFLD模型组(NM组,7只),T2DM并NAFLD模型组(模型组,51只)。 N组给予普通饲料喂养。 NM组给予高脂饲料喂养。模型组先给予高糖高脂饲料喂养4周;隔夜空腹腹腔注射链尿佐菌素( STZ)40 mg/kg,继续给予高糖高脂饲料喂养至8周,建立T2DM并NAFLD大鼠模型;将大鼠模型分为GPS大剂量干预组(9只,JH组),给予GPS 1g· kg-1· d-1灌胃;GPS小剂量干预组(9只,JL组),给予GPS 0.5g· kg-1· d-1灌胃;T2DM并NAFLD模型对照组(9只,M组),同等体积纯净水灌胃;继续给予高糖高脂饲料;治疗周期为6周。实验周期14周。定量PCR技术检测肝组织HNF-1α,肝脏病理学。结果①肝组织HNF-1α:以N组扩增倍数为1计算,NM组肝细胞核因子表达为0.85,与N组比较有显著差异(P<0.05);M组为0.62,与N组比较有显著差异(P<0.01);治疗后,JH组HNF-1α升至0.80,与M组比较有非常显著差异(P<0.01);JL 组 HNF 升至0.68,与 M 组比较有非常显著差异(P<0.05)。②肝脏病理学院NM 组、M 组重度NAFLD,JH组、JL组中度至重度NAFLD。结论 GPS能够抑制T2DM并NAFLD大鼠肝脏HNF-1α表达的下降。
关键词: 2型糖尿病(T2DM) 非酒精性脂肪性肝病 肝细胞核因子 绞股蓝 -
肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响
[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1α cDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,以HNF-1α转染CV-1细胞,应用Northern blot方法测定HNF-1α对mGLUT1 mRNA表达的影响.[结果]HNF-1α可提高mGLUT1 mRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.
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肝细胞核因子3对Ⅱ型葡萄糖载体启动子活性及蛋白表达的影响
[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子3(HNF3)对Ⅱ型葡萄糖载体(GLUT2)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术将HNF3 cDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,GLUT2 cDNA克隆到载体pGL3b上.通过CV-1细胞株的体外培养将HNF3转染CV-1培养细胞,应用荧光素酶活性测定和Western blot方法观察HNF3对GLUT2的启动子活性及蛋白质表达的影响.[结果]HNF3可增高GLUT2的荧光素酶活性及蛋白质表达水平.[结论]HNF3可能通过调节GLUT2的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.
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肝细胞核因子的调控作用研究新进展
肝细胞核因子(HNF,Hepatocyte nuclear factor)是调节肝脏基因特异性表达的一类转录因子,主要包括HNF1、HNF3、HNF4和HNF6等,这些转录因子相互作用构成复杂的调控网络.HNF在人体多个重要组织器官如肝、胰、肠、肾等都有不同程度的表达.研究发现,在多种疾病的患者体内,存在着编码这些因子基因的突变,提示HNF与维持及调节人体正常生理功能密不可分.本文旨在对HNF的研究进展作以系统性综述,为研究HNF相关疾病的发生机制并进行有效的干预提供新思路.
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肝细胞核因子在2型糖尿病发生中的作用研究新进展
肝细胞核因子(Hepatocyte nuclear factors,HNFs)是一类分布在肝、胰、肠、肾等多个组织器官,调节肝脏内基因特异性表达的一类转录因子.其主要亚型为HNF1、HNF3、HNF4和HNF6等,这些转录因子相互作用构成的复杂调控网络.2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的基本病理生理机制是胰岛素抵抗及胰岛β细胞损伤,终导致高血糖.近年来的研究表明,HNFs在胰岛素抵抗及胰岛β细胞损伤中发挥关键的调控作用.本文对HNFs在T2DM发生中的胰岛素抵抗及胰岛β细胞损伤作用研究新进展作以回顾性综述,旨在为认识T2DM发病机制及提出防治策略提供理论基础.
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HNF4α与肝细胞分化调节
肝脏基因表达受肝富集转录因子(LETFs)的调控,这类肝脏内优势表达的转录因子在调控肝细胞分化和维护肝细胞生物学功能发挥重要作用[1].肝细胞核因子(HNF)是LETFS的重要组成,HNF家族包括HNF1、HNF3、HNF4、HNF6、CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)、D结合蛋白(DBP),对肝脏基因特异性表达起着关键的调控作用.HNF4是一种细胞核激素受体超家族的转录因子[2],包括3个亚型:HNF4α,-4β,-4γ,其组织表达谱差异较大.HNF4α和HNF4γ具有70%同源性,DNA结合区的氨基酸序列非常类似.
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肝细胞核因子4在肝细胞分化和肝细胞癌中的作用
肝细胞核因子(HNFs)是肝脏优势表达的转录因子.HNFs家族不同成员之间互相网络调控,在转录水平调控肝脏重要功能基因表达,对肝脏发育,肝脏结构和功能维持起核心作用.其中肝细胞核因子4a(HNF4a)是细胞核激素受体家族的转录因子,处于转录因子"网络调控"上游,是肝细胞分化和功能维持为关键的转录因子[1].