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鼻咽癌组织18F-FDG摄取与Glut-1和VEGF表达关系研究
目的: 探讨鼻咽癌的18F-FDG摄取与肿瘤组织葡萄糖易化扩散转运蛋白及血管内皮细胞生长因子表达的关系.材料和方法:对40例鼻咽癌患者进行正电子发射体层显像(PET)检查,测定肿瘤大摄取值(SUVmax);应用标准链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶亲和(SP)免疫组化法检测40例患者肿瘤组织葡萄糖易化扩散转运蛋白1(Glut-1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达.结果:40例鼻咽癌组织的SUVmax为9.45±1.87;40例鼻咽癌组织Glut-1阳性细胞率为45.18%,VEGF染色阳性细胞率为60.8%;鼻咽癌组织18F-FDG摄取(SUVmax)与Glut-1表达阳性率分级相关(r=0.369,P=0.019),鼻咽癌组织18F-FDG摄取(SUVmax)与VEGF表达阳性率分级相关(r=0.460,P=0.03).结论:鼻咽癌组织18F-FDG摄取与Glut-1和VEGF过度表达相关.
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妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白表达的变化
目的 研究妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUTs)的表达变化,探讨其对母儿间葡萄糖转运功能的影响及其与新生儿体重的关系. 方法 于北京大学第一医院收集孕前糖尿病孕妇的胎盘组织标本7例、妊娠期糖尿病A110例、妊娠期糖尿病A214例,妊娠期糖耐量受损10例及正常孕妇胎盘组织标本15例,用免疫组织化学方法测定GLUT1和GLUT3的表达,并记录新生儿出生体重. 结果 免疫组化显示GLUT1主要表达于胎盘的细胞滋养细胞和合体滋养细胞,各组间GLUT1的表达强度差异具有统计学意义(P＜0.01);GLUT3在部分胎盘绒毛问质的血管内皮细胞中表达.各组间的表达差异也具有统计学意义(P＜0.01).GLUT1的表达强度与新生儿出生体重存在等级相关性(rs=0.532,P＜0.01),GLUT3表达强度则与新生儿出生体重无相关性(rs=0.178,P＞0.01). 结论 妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内GLUT1和GLUT3的表达增强,且GLUT1在胎儿对葡萄糖的摄取过程中可能发挥主要作用.
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妊娠期高血糖胎盘葡萄糖转运代谢的研究进展
妊娠期高血糖作为常见的妊娠合并症,对妊娠结局及母子双方的近远期健康具有重要影响.胎盘作为母胎间物质转运的重要场所,其葡萄糖转运代谢能力的异常是妊娠期高血糖影响母儿近远期健康的关键机制,而胎盘葡萄糖转运蛋白的分布表达及其调控是影响胎盘葡萄糖转运代谢功能的主要影响因素.本文对不同类型妊娠期高血糖孕妇胎盘中常见葡萄糖转运蛋白的分布表达改变及其与子代发育的关联,以及影响葡萄糖转运蛋白表达的主要调控机制进行概述,以期为妊娠期高血糖影响母儿健康的机制探讨提供依据.
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葡萄糖转运蛋白1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其意义
目的 探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其意义.方法 收集100例卵巢浆液性肿瘤患者手术标本,采用多克隆抗体的GLUT-1免疫组织化学SP法进行染色,分析其异常表达与肿瘤临床分期及分型之间的相关性.结果 正常组织中GLUT-1表达为阴性,GLUT-1在良性、交界性、恶性卵巢浆液性肿瘤中的表达呈增高趋势(P<0.001),GLUT-1的表达与卵巢浆液性囊腺癌临床分期呈正相关(P<0.001).结论 GLUT-1的过度表达与卵巢浆液性肿瘤的组织学和分期相关.GLUT-1有望成为检测卵巢浆液性肿瘤恶变的标志物.
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LRP16基因通过上调GLUT-2促进MIN6细胞胰岛素分泌
目的:探讨LRP16基因对MIN6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响及其可能机制.方法:用SuperFect脂质体转染法建立稳定过表达LRP16基因的MIN6细胞株,以转染空质粒的MIN6细胞株作为对照.检测两组细胞的增殖、胰岛素分泌及GLUT-2蛋白的表达情况.结果:过表达组的增殖与对照组相比无显著差别(P>0.05);在0mmol/L、 3mmol/L、 30mmol/L葡萄糖刺激下,过表达组的胰岛素分泌量分别为对照组的2.26倍、 2.19倍和2.16倍(P<0.05);western blot显示过表达组GLUT-2蛋白量比对照组显著上调(P<0.05).结论:过表达LRP16基因不能促进MIN6细胞增殖,但可以通过上调GLUT-2促进胰岛素分泌.表明LRP16基因促进胰岛素分泌的作用不依赖细胞增殖,而依赖细胞对葡萄糖摄取的增加.
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心肌细胞葡萄糖转运蛋白4的转运调控及与心肌活力关系的研究进展
葡萄糖是心肌能量代谢的主要底物之一,在心肌缺血时是心肌的主要能量来源.葡萄糖通过细胞膜进入细胞内是心肌细胞葡萄糖代谢的第一步,也是心肌细胞利用葡萄糖的主要限速步骤.葡萄糖是依靠细胞膜上的葡萄糖转运蛋白(GLUTs)而进入细胞内的,GLUT4是心肌细胞主要的葡萄糖转运载体.GLUT4的质和量对心肌葡萄糖的跨膜转运起着决定性作用.因此,明确心肌葡萄糖转运及心肌细胞GLUT4的基因表达调控机制、转位调控机制、内在活性调控机制,对临床诊断心肌能量代谢性疾病具有重要意义.该文对近年来有关心肌葡萄糖转运及GLUT4调控方面的研究进行综述.
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葡萄糖转运蛋白1缺陷综合征误诊剖析
目的：探讨葡萄糖转运蛋白1缺乏综合征( glucose transporter type 1 deficiency syndrome, GLUT1-DS)的临床特点,分析误诊原因并提出防范误诊的措施。方法对GLUT1-DS 1例的临床资料进行回顾性分析。结果本例以早发惊厥为主要临床表现,同时伴有精神发育迟滞、共济失调等,曾多次就诊外院,行脑脊液、脑电图、头颅MRI及染色体核型分析等诊断为不典型化脓性脑膜炎、癫痫,予相关治疗后不缓解。到我院后查脑脊液糖1.50 mmol/L,脑脊液糖与血糖比值为0.319；脑电图示：背景活动慢,以中高幅4~5 Hz θ波为主。疑诊存在基因突变,不除外GLUT1-DS,遂行SLC2A1基因检测示c.516+2T>G,明确诊断为GLUT1-DS,予生酮饮食治疗后症状缓解。结论 GLUT1-DS为可治疗的常染色体显性遗传病,脑细胞葡萄糖水平低下可造成不同程度的脑损伤。临床应提高对本病的认识,尽早诊断并治疗可显著改善患儿预后。
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肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响
[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1α cDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,以HNF-1α转染CV-1细胞,应用Northern blot方法测定HNF-1α对mGLUT1 mRNA表达的影响.[结果]HNF-1α可提高mGLUT1 mRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.
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罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体mRNA表达的影响
[目的]探讨罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)mRNA表达的影响.[方法]采用分子克隆技术将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)、维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT2 cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上.PPARγ,RXRα,mGLUT2克隆载体转染NIH 3T3细胞,处理或不处理罗格列酮,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹方法等测定罗格列酮对mGLUT2重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响.[结果]罗格列酮可激活mGLUT2重组体荧光素酶的活性,亦可增加mRNA的表达水平.[结论]罗格列酮可增强mGLUT2的表达,可能参与PPARγ对mGLUT2的调节过程.
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CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性及蛋白表达的影响
[目的]探讨在CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性和蛋白表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将SREBP-1c和其阴性表达体(ADDN) DNA序列重组到表达载体pSV-sport上.用SREBP-1c转染CV-1细胞,应用Northern Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA的表达及其稳定性的影响,应用Western Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体蛋白表达的影响.[结果] SREBP-1c可增加Ⅰ型葡萄糖载体的mRNA表达水平及稳定性,可提高Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达水平.[结论] SREBP-1c可增强Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达,可能通过调节Ⅰ型葡萄糖载体的表达水平而参与胰岛素对血糖的调节过程.
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海南蒲桃提取物对L6细胞砷中毒缓解作用的体外实验
目的:研究海南蒲桃提取物对砷酸盐引起的L6骨骼肌细胞葡萄糖内稳态破坏及线粒体功能异常的缓解作用.方法:通过测量多个指标如丙酮酸激酶活性、葡糖激酶、线粒体膜电位等衡量细胞内葡萄糖水平及线粒体功能,并测量相关标志物的蛋白质及mRNA表达情况,如葡萄糖转运体4、胰岛素受体基质1、胰岛素受体基质2、葡糖激酶等以分析可能有关的信号通路.结果:海南蒲桃提取物能够通过葡萄糖转运体4通路改善砷中毒的L6细胞内诸多标志物的表达,使其正常化,与模型组相比差异有统计学意义.结论:海南蒲桃提取物对细胞砷中毒有明显的缓解作用,未来可考虑将其用于治疗砷中毒相关疾病如高血糖症等.
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缺氧对肺腺癌细胞HIF-α1、GLUT-1、MMP-2表达影响的研究
目的:探讨人肺腺癌细胞株A549在缺氧条件下HIF-1α、GLUT-1、MMP-2的表达变化情况.方法:对肺腺癌细胞A549分别进行常规和氯化钴模拟缺氧培养,采用MTY法检测缺氧对A549细胞增殖的影响;Transwell侵袭小室测定法评价缺氧下A549细胞的侵袭力;分别采用RT-PCR法和western blot、免疫组化法测定缺氧不同时间HIF-1α和GLUT-1、MMP-2 mRNA和蛋白表达水平的变化.结果:A549细胞在缺氧条件下增殖能力和侵袭力较正常时增强.正常氧条件下的A549细胞即有一定水平的HIF-1α、GLUT-1、MMP-2的表达,随着缺氧时间的延长,HIF-1α和、GLUT-1、MMP-2 mRNA和蛋白水平呈升高趋势,与正常对照组比较,各缺氧组差异有统计学意义(P＜0.01).结论:氯化钴诱导缺氧可以上调HIF-1α、GLUT-1、MMP-2蛋白在肺腺癌细胞中的表达水平,加速肺癌细胞的生长和转移,使之进一步耐受缺氧.
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伊格列净治疗2型糖尿病的Meta分析
目的 系统评价伊格列净治疗2型糖尿病的疗效和安全性.方法 计算机检索PubMed、Cochrane Library、Embase、中国知网、万方医学网、维普全文数据库、中国生物医学文献数据库等,获取伊格列净治疗2型糖尿病的随机对照试验(RCT),检索时限均为建库至2017年2月,并追溯纳入文献的参考文献,由2位研究员根据纳入与排除标准筛选试验、提取资料、评价文献质量并交叉核对结果,采用RevMan5.20软件对各项指标进行Meta分析.结果 共纳入7篇RCT,1 267例2型糖尿病患者,Meta分析结果显示,伊格列净组在糖化血红蛋白(HbAlc)、HbAlc＜7％达标率及体重控制方面均优于对照组,差异有显著意义[MD=-0.98,95％CI(-1.20,-0.77),P＜0.01;0R=3.99,95％CI (2.69,5.91),P＜0.01;MD=-1.70,95％CI(-2.28,-1.12),P＜0.01].在安全性方面,伊格列净组严重不良反应、低血糖、尿路感染、生殖器感染的发生率与对照组相当,差异无显著意义[OR=0.48,95％CI (0.22,1.07),P=0.07;OR=1.57,95％CI (0.43,5.71),P=0.49;OR=1.22,95％CI (0.59,2.52),P=0.59;OR=1.14,95％CI (0.41,3.21),P=0.8].结论 伊格列净能较好控制2型糖尿病患者的HbAlc和体重,不良反应发生率低,安全性较高.
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非小细胞肺癌和肺炎性病变摄取18F-FDG与Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ表达的相关性
目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)和肺炎性组织中葡萄糖转运蛋白(Glut)-1、Glut-3、己糖激酶(HK)-Ⅱ的表达,探讨其与病变组织摄取18F-脱氧葡萄糖(FDG)的相关性.方法 回顾性分析2012年11月至2016年5月间于青岛大学附属医院行18F-FDG PET/CT显像并经手术病理证实的22例肺炎性病变患者和24例NSCLC患者(男25例、女21例,年龄37～ 81岁),测定其病灶大标准摄取值(SUVmax),采用免疫组织化学方法测定Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ表达,计算其染色总分并行半定量分析.采用单因素方差分析、小显著差异t检验、两样本t检验和Spearman相关分析处理数据.结果 24例NSCLC患者病灶SUVmax为8.71±7.62;Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ染色总分平均值分别为(3.75±0.99)、(4.04±1.00)和(4.00±0.78)分.22例肺炎性病变患者病变病灶SUVmax为3.29±2.16;Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ染色总分平均值分别为(2.32±0.65)、(2.89±0.83)和(2.41±0.50)分.肿瘤组织SUVmax高于炎性组织SUVmax(t=3.220,P＜0.05),肿瘤组织Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ表达亦高于炎性组织相应指标(t值:5.340、5.160和8.130,均P＜0.01).肿瘤组织Glut-1、HK-Ⅱ表达与SUVmax呈正相关(rs值:0.414和0.457,均P＜0.05);炎性组织Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ表达与SUVmax无相关性(rs值:0.392、0.070和-0.066,均P＞0.05),但炎性组织Glut-3表达高于Glut-1和HK-Ⅱ(F=4.123,t值:0.970和0.150,均P＜0.05).结论 Glut-1、Glut-3、HK-Ⅱ在NSCLC和肺炎性组织中均有表达,在NSCLC表达强度更高;Glut-1、HK-Ⅱ表达是NSCLC摄取18F-FDG的重要因素;Glut-3表达在肺炎性组织摄取18F-FDG中可能发挥更重要的作用.
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葡萄糖转运蛋白1和单羧酸转运蛋白1、单羧酸转运蛋白4在结肠癌组织中的表达和意义
目的 观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)、MCT4在结肠癌组织中的表达及其与临床特征之间的相关性.方法 收集杭州市第一人民医院2008年1月至2016年1月经手术切除的结肠癌组织标本84例和相应的癌旁正常结肠组织标本40例,采集患者的临床资料,采用免疫组化检测患者GLUT1、MCT1、MCT4的表达,进行统计分析.结果 结肠癌组织中GLUT1、MCT1、MCT4阳性表达率分别为54. 8% (46/84)、47. 6% (40/84)、58. 3% (49/84),均显著高于正常结肠组织的12. 5% (5/40)、7. 5% (3/40)、15.0%(6/40),两者差异均有统计学意义(χ2=19. 987、19. 253、20. 615,均 P ＜0. 01);GLUT1、MCT1、MCT4的表达与性别、年龄、肿瘤大小无关,与病变部位、分化程度、淋巴结转移、远处转移和临床分期有相关性(GLUT1:χ2=6. 227、11. 629、10. 029、14. 817、4. 709;MCT1:χ2=6. 891、8. 615、9. 185、5. 337、16. 131;MCT4:χ2=8. 641、7. 077、12. 131、6. 917、7. 077;均P＜0. 05).结论 结肠癌组织高表达GLUT1、MCT1、MCT4,GLUT1、MCT1、MCT4可能通过能量代谢途径影响结肠癌的发生、发展.
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妊娠期糖尿病患者肌肉组织中胰岛素信号转导和GLUT-4表达的变化
目的 研究妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇肌肉组织中胰岛素信号通路及葡萄糖转运蛋白表达的变化,探讨其在GDM发病过程中的作用.方法 将40例孕妇分为糖耐量正常(NGT)组和GDM组,每组20例,分离少量腹直肌,分别置于含和不含胰岛素的培养液中温育30 min.用Real-time PCR法检测胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)、葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,GLUT-2)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)mRNA的表达,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)的磷酸化程度、GLUT-4蛋白水平的变化.结果 ①基础状态时,GDM组IRS-1、IRS-2和GLUT-2 mRNA表达较NGT组降低(P<0.05); GLUT-4 mRNA表达2组无统计学差异(P>0.05);经胰岛素刺激后,NGT组中GLUT-4 mRNA较基础状态升高(P<0.05),而GDM组则无明显变化(P>0.05).②NGT组经胰岛素刺激后,Akt蛋白的磷酸化程度明显增高(P<0.05),GDM组无明显变化(P>0.05);基础状态时,GDM组与NGT组相比,GLUT-4蛋白表达明显降低(P<0.05);经胰岛素刺激后,GLUT-4蛋白的表达水平均增高,NGT组增加的幅度明显高于GDM组(P<0.05).结论 GDM患者胰岛素信号通路中的关键效应分子存在转录或翻译水平的缺陷,对胰岛素的反应降低,导致胰岛素抵抗.
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GLUT9基因启动子区荧光素酶表达重组体的构建
目的 构建人葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)rs13124007位点不同单倍型(GG/CC)荧光素酶表达重组体.方法 采用PCR方法扩增目的片段,产物经双酶切后克隆至表达载体pGL3-basic,并通过双酶切及测序进行验证.结果 经验证,所构建质粒含有pGL3-basic全序列及GLUT9基因启动子区包含rs13124007的序列,且插入方向正确.结论 GLUT9基因启动子区荧光素酶表达重组体构建成功,为后续研究SNP rs13124007位点是否影响启动子活性奠定了基础.
