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热休克蛋白70 mRNA表达及蛋白水平对职业性锰接触者的神经保护作用
目的 研究热休克蛋白70(HSPs70)mRNA表达及蛋白水平对职业性锰接触者的神经保护作用.方法 于2008—2009年,采用横断面研究设计,应用分层随机抽样方法,在山东省某机车车辆厂选择接触锰浓度稳定、作业位置相对固定、工作1年以上的专职电焊作业人员作为暴露组,共180名;采用上述方法选择与暴露组民族、性别、年龄、出生地相似,近3年内无锰职业接触的同机车车辆厂非电焊工人员作为对照组,共100名.以SYBR Green I嵌合Real-time PCR检测HSPs70 mRNA含量表达;应用Western blot法检测HSPs70的蛋白含量;并应用火焰原子吸收法测定锰职业接触工人的空气锰个体接触剂量.用8 h时间加权平均浓度(8h-TWA)表示锰个体接触浓度,根据空气锰工作场所职业接触限值(8h-TWA=0.15 mg/m3) ,将暴露组分为高暴露组(>0.15 mg/m3)和低暴露组(<0.15 mg/m3)结果 暴露组个体锰接触剂量为(0.25±0.31)mg/m3,高于对照组[(0.06±0.02)mg/m3](t=6.15,P=0.001);高暴露组个体锰接触剂量为(0.42±0.34)mg/m3,高于低暴露组[(0.09±0.07)mg/m3](t=9.80,P=0.001).暴露组HSPs70 mRNA及蛋白表达量分别为5.65 ± 0.21、3.26 ± 0.15,均高于对照组(0.41±0.03和1.32±0.12)(t值分别为18.91、8.68,P值均为0.001);高暴露组的HSPs70 mRNA及蛋白表达水平分别为6.48 ± 0.37、3.67 ± 0.26,亦均高于低暴露组(5.15 ± 0.23和3.02 ± 0.19)(t值分别为3.24、2.04,P值分别为0.003、0.043).结论 锰接触者外周血淋巴细胞HSPs70水平及HSPs70 mRNA表达的增高与保护神经细胞免受锰刺激引起的脂质过氧化等损伤有关.
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密骨胶囊和健脾方对切卵大鼠小肠及腓肠肌中VDR mRNA表达的影响
目的:观察密骨胶囊、健脾方对大鼠小肠、腓肠肌中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)mRNA表达的影响,探讨补肾、健脾不同功效的中药复方,是否对机体不同组织器官VDRmRNA的表达存在一定选择性.方法:复制切卵大鼠骨质疏松模型,随机分为假切组、模型组、密骨胶囊组和健脾方组,术后12周开始灌胃,灌胃12周后取材.测定骨密度、子宫重量、腓肠肌重/体重,同时对大鼠小肠、腓肠肌中VDR mRNA进行半定量.结果:密骨胶囊能提高切卵大鼠骨密度(P<0.05),提高腓肠肌重/体重(P<0.05),上调小肠和腓肠肌中VDRmRNA的表达(P<0.01);健脾方能维持大鼠骨密度(P>0.05),上调腓肠肌中VDRmRNA的表达(P<0.01);密骨胶囊、健脾方均无增加子宫重量作用.结论:密骨胶囊和健脾方能通过上调切卵大鼠小肠和腓肠肌中VDR mRNA的表达,而起到治疗骨质疏松症的作用.
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大鼠马尾压迫后p75神经营养因子受体mRNA时序性表达及意义
目的:观察和探讨Spmgue Dawley(SD)大鼠马尾急性压迫后腰骶部脊髓p75神经营养因子受体(p75NTR)的mRNA表达和腰骶髓神经元细胞凋亡数量时间分布及关系,为马尾综合征(caudaequina syndrome,CES)发病机制提供一定理论依据.方法:成年雌性SD大鼠60只,按时间点随机分为正常对照组及压迫1、3、5、7、14、28 d组,共计12组(n=5),造模采用L3,4节段椎管放置硅胶棒压迫70%～80%椎管面积造成马尾急性压迫症状,于术后1、3、5、7、14、28 d处置,在L1,2椎体位置脊髓取材.分别采用Tunel方法检测神经元细胞凋亡,RT-PCR方法观察p75NTR的mRNA表达.结果:压迫组从术后1～28 d,p75 mRNA表达增加及腰骶髓神经元细胞凋亡明显,p75 mRNA表达和凋亡数目变化趋势存在先升高后降低同步趋势,均在7 d达到峰值,压迫组术后各时间点与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),压迫组与对照组总体差异有统计学意义(P＜0.05),p75NTR的mRNA表达与腰骶部神经元细胞的凋亡呈正相关.结论:马尾急性压迫后,p75NTR的mRNA与神经元细胞凋亡密切相关,在CES的分子发病机制中发挥重要作用.
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Cx43对针灸治疗原发性痛经大鼠效应的影响
目的:观察沉默穴位局部缝隙连接蛋白(connexin43,Cx43)的表达对针刺效应的影响,探讨针刺治疗原发性痛经的机制.方法:以催产素造成大鼠原发性痛经模型,应用RNA干扰(RNAi)技术沉默穴位局部Cx43的表达.将50只SD雌性大鼠分为正常组(N)、模型组(M)、针刺组(A)、针刺+干扰组(A+1)、针刺+干扰对照组(A+IC).应用RT-PCR方法检测大鼠子宫的催产素受体(oxytocin receptor,OTR)、加压素受体(vasopressin receptor,VPR)的mRNA表达情况;放免法和ELISA检测血浆中前列腺素E2(PGE2)和PGF2α.的舍量.结果:①A组和A+IC组的大鼠扭体次数(9.43±3.87,10.28±4.23)明显低于M组和A+I组(15.43±5.13,17.00±3.87),潜伏期(12.43±3.46,11.00±3.65)rain高于M组(7.57±1.99)min和A+I组(8.43±2.57)min(P<0.05).②A+I组穴位处的Cx43 mRNA和蛋白表达低于N组(P<0.05).③A组和A+IC组的OTR、VPR的mRNA表达较M组和A+I组降低,且差异有统计学意义(均P<0.05);M组和A+I组差异无统计学意义(P>0.05).④A组和A+IC组的PGE2升高,PGF2α降低,较M组差异有统计学意义(P<0.05).结论:沉默穴位局部Cx43能有效抑制针刺效应,通过降低痛经大鼠子宫内膜OTR、VPR及调节前列腺素合成系统,可能是针刺治疗原发性痛经的作用机制之一.
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大鼠在体心肌缺血再灌注损伤细胞膜钙转运通道蛋白mRNA的表达变化
目的 探讨大鼠心肌在体缺血再灌注(IR)损伤后细胞膜钙转运通道蛋白的mRNA变化对钙超载的作用。方法 12只SD大鼠按随机数字法分为IR组和对照组。IR组通过结扎（缺血20 min）后松解(再灌注60 min)前降支造成心肌IR,对照组则免除结扎松解前降支。应用生理记录仪连续监测两组大鼠缺血开始前及再灌注60 min后心率、平均动脉压等血流动力学指标。全自动生化仪检测缺血前及再灌注60 min后两组大鼠血钙及肌钙蛋白T(cTnT)的水平。荧光定量PCR检测再灌注60 min后两组大鼠左心室缺血区和右心室心肌细胞膜钙转运通道蛋白即心肌细胞膜钠钙交换器1(NCX1)，L型钙通道(LVDCC)α-1C和胞膜钙转运ATP酶1(PMCA1 )mRNA的表达。结果两组大鼠缺血前的心率、平均动脉压均高于再灌注60 min后，而两组间缺血前和再灌注60 min后的心率、平均动脉压差异则无统计学意义。两组血浆Ca2+浓度在缺血前与再灌注60 min后差异无统计学意义，同时间点两组之间的差异也没有统计学意义。缺血前IR组与对照组血浆cTnT浓度水平相近，缺血60 min后IR组血浆cTnT浓度较对照组升高[(4.29±2.22) μg/L比(1.62±0.60)μg/L，P=0.031]；两组血浆cTnT浓度在缺血前与再灌注60 min后差异也有统计学意义（均P＜0.05）。NCX1，LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达在再灌注60 min后同心室两组间和同组内左右心室之间的差异均无统计学意义（NCX1：对照组左心室为50±4，右心室为47±9；IR组左心室为55±6,右心室为53±11；LVDCCα-1C:对照组左心室为33±7，右心室为30±7；IR组左心室为28±3，右心室为37±5；PMCA1，对照组左心室为70±10,右心室为53±11；IR组左心室为66±12，右心室为78±8;均P＞0.05）。结论 大鼠在体心肌缺血20 min再灌注60 min后,NCX1、LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达水平均无显著改变，提示钙超载并非由细胞膜钙转运通道蛋白数量改变引起。
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张力刺激对关节软骨细胞β-肌动蛋白mRNA表达的影响
目的 观察张力刺激对关节软骨细胞β-肌动蛋白(β-aetin)mRNA表达的影响.方法 分别获取正常和骨关节炎关节软骨细胞,给予3%、6%和15%的张力刺激,运用实时定量PCR方法检测不同张力刺激强度下关节软骨细胞β-actin mRNA表达的变化.结果 6%和15%的张力刺激均可明显提高lE常关节软骨细胞β-actinmRNA表达(1.34±0.05,1.36±0.04,P＜0.05),而只有15%的张力刺激才能明显增加骨关节炎关节软骨细胞β-actin mRNA表达.结论 关节软骨细胞β-actin mRNA表达量随张力刺激强度不同而变化,不同内外环境使关节软骨细胞对张力刺激的反应不同,故在其相关生物力学研究中不能应用β-actin作为内参.
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IMP3在区分淋巴结转移性黑色素瘤和良性痣中的诊断价值
基于原发性黑色素瘤的 Breslow 深度,前哨淋巴活检被认为是皮肤黑色素瘤的分期标准,而且是重要的预后因素之一.但是当淋巴结内良性痣细胞与转移黑色素瘤细胞相似时,对标本的组织学分析就很困难.胰岛素样生长因子Ⅱ信使 RNA 结合蛋白3(IMP3),又名K同源决定域蛋白,在癌和 523S 细胞中呈过表达, IMP 家庭中的成员,而且已经发现它在区分皮肤黑色素瘤和良性痣方面具有诊断价值.
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乳腺癌血管内皮生长因子-(A、C、D)mRNA的表达及其预后意义
目的 探讨乳腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)-(A、C、D)mRNA表达在乳腺癌发生发展中的作用及其与预后的关系.方法 用TaqMan real-time逆转录聚合酶链反应检测61例乳腺癌和29例乳腺良性病变中VEGF-(A、C、D)mRNA的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理参数及生存状况间的关系.结果 (1)乳腺癌中VEGF-(A、C)mRNA表达量(2.79±1.31、3.33±0.88)高于良性乳腺病变(1.59±1.35、2.76±0.55),差异有统计学意义(P=0.000,P=0.002).乳腺癌中VEGF-D mRNA表达阳性率(73.77%)高于良性乳腺组织(51.72%,P=0.038),但表达量二者间无差异,P=0.683.(2)单因素和多因素分析均显示VEGF-D与VEGF-C mRNA比值在淋巴结转移阳性组低于阴性组,且与淋巴结转移有关(P单=0.046,P多=0.062).(3)乳腺癌VEGF-(A、C)mRNA高表达患者无病生存率分别低于低表达组(P=0.030,P=0.044).结论 VEGF-(A、C、D)mRNA表达异常可能与乳腺癌发生发展有关.VEGF-D与VEGF-C mRNA表达比值改变可能与乳腺癌淋巴结转移有关,VEGF-(A、C)是乳腺癌预后重要的影响因子.
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HER2免疫组织化学1+浸润性乳腺癌的基因扩增状态和mRNA表达分析
目的 探讨HER2 免疫组织化学( IHC) 1+乳腺癌患者的基因扩增状态和原位HER2 mRNA表达情况,为精准检测HER2及相关临床策略的修订提供初步参考数据.方法 抽取北京协和医院2011至2013年间手术获取的非特殊型浸润性乳腺癌HER2 IHC 1+存档蜡块标本65例,制作组织芯片,分别采用荧光原位杂交(FISH)和RNAscope方法检测其HER2基因状态和原位mRNA表达水平.如原发灶HER2的FISH结果不确定或阴性但mRNA高表达,再以FISH复检其淋巴结转移灶的HER2基因状态.结果 在65例标本中,FISH阳性4例( 6.2%),其中2例为HER2/CEP17＞2且平均HER2基因拷贝数＞4,另2例为HER2/CEP17＜2但平均HER2基因拷贝数＞6;在此4例FISH阳性标本中,2例为mRNA高表达(RNAscope 3分),另2例为中度表达(RNAscope 2分).另外,在全部标本中,3例HER2/CEP17＞2但平均HER2基因拷贝数＜4,其中2例mRNA高表达(RNAscope 3分和4分),另1例mRNA中度表达( RNAscope 2分).未见HER2基因状态及mRNA表达与临床病理特征(肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、脉管癌栓)之间存在明显相关性( P均＞0.05).结论 在本组HER2 IHC 1+乳腺癌中检出了部分FISH阳性的标本,其mRNA也有一定程度的表达,可判断为抗HER2治疗的潜在获益者.鉴于精准分子分型对于乳腺癌临床处理及相关诊疗策略制定具有重要意义,后续有必要进行大样本量的验证.
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乳腺癌发生模型MCF10各细胞系中APC基因启动子区甲基化及mRNA表达检测
目的探讨乳腺癌发生模型MCF10中抑癌基因APC启动子区甲基化状态及其对mRNA表达的影响.方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及双亚硫酸钠基因测序技术检测MCF10模型的乳腺增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCF10DCIS.com、浸润癌细胞系MCF10CA1a、MCF10CA1d、MCF10CA1h及经典乳腺癌细胞系MCF-7和正常乳腺组织中APC基因启动子1A甲基化状态,然后用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时PCR技术检测上述样品的mRNA表达水平.结果在MCF10模型的增生细胞系、癌前细胞系、导管内癌细胞系、浸润癌细胞系中,APC基因启动子1A处于低甲基化状态;与正常乳腺组织相比,各细胞系APC基因mRNA表达无明显减少,MCF10AT、MCF10CA1d、MCF10CA1h、MCF10DCIS.com的mRNA表达分别减少0.27、0.96、1.78、2.70、2.03倍,MCF10A和MCF-7分别增加0.02和0.33倍).结论 MCF10模型中乳腺癌的发生发展过程与APC基因启动子区异常甲基化无关.
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在翻译水平上提高人干扰素α1基因的原核表达
目的根据翻译起始调控的定量理论及利用翻译增强子序列,提高人干扰素α1型变种IFN-α1C基因的原核表达.方法采用"步移式"聚合酶链反应(PCR), 对IFN-α1C基因5′端核苷酸序列进行三种不同程度的碱基突变, 使IFN-α1C在 pBV220载体中形成的翻译起始区域(TIR)的二级结构自由能(△G)逐渐降低,同时,采用PCR技术,将翻译增强子cDNA序列引入pBV220中的SD序列上游,构建一种新型载体pBVE.结果三种IFN-α1C改造基因的表达量均有所提高,而且随△G从原有的-50 241.6 J/mol降至-22 190.0 J/mol (绝对值,下同),其表达量有逐渐升高趋势, 高可达2.43×108 U/L,约为IFN-α1C母体的13倍.选用IFN-α1C及其三种改造基因为报导基因,结果显示以pBVE为载体的抗病毒活性比在pBV220中增强了2～5倍.结论含有翻译增强子的pBVE为一种新型原核高效表达载体.翻译调控的定量关系理论,可有效地运用于提高IFN-α1C基因在大肠埃希菌中的表达.
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肝癌组织RUNX3mRNA和蛋白表达及其与临床病理的相关性研究
目的 探讨肝癌组织及其癌旁组织中RUNX3mRNA和蛋白表达情况,并分析其与临床病理因素的相关性.方法 采用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)和IHC(免疫组织化学)分别检测肝癌组织及其癌旁组织中RUNX3mRNA和蛋白表达水平,并分析与临床病理因素的相关性.结果在51例肝癌组织中RUNX3mRNA表达量相对值为:0.4509±0.0963；在51例相对应的癌旁组织中RUNX3mRNA表达量相对值为:0.9147 ±0.0222；两者间差异有统计学意义(t=33.6087,P＜0.001).在51例肝癌组织中RUNX3蛋白表达阳性率为49.02％( 25/51)；而在51例相对应的癌旁组织中RUNX3蛋白表达阳性率为82.35％ (42/51)；两者间差异有统计学意义(x2=12.5706,P＜0.005).RUNX3mRNA和蛋白表达水平均在分化程度、门静脉癌栓、肝内转移等病理因素差异有统计学意义(P＜0.05),而在性别、肿瘤直径、肿瘤部位、癌肿出血坏死、组织分型的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 RUNX3基因在肝癌组织中mRNA和蛋白表达水平均显著低于在癌旁组织中的表达水平,RUNX3mRNA和蛋白表达下调可能在肝癌的发生、发展过程中起着重要作用；RUNX3基因可能是肝癌的一种抑癌基因.
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巨细胞病毒感染后晚期mRNA表达与细胞病变相关性的研究
目的研究巨细胞病毒(HCMV)感染后晚期mRNA的表达与致细胞病变作用(CPE)及感染细胞的超微结构变化.方法用HCMV AD169株感染人胚肺成纤维细胞,通过半定量RT-PCR检测HCMV晚期mRNA的表达水平,同时动态观察CPE的改变,电镜观察细胞的超微结构变化.结果HCMV晚期mRNA在感染后12 h开始表达,随时间的延长水平逐渐升高;而CPE在48 h后才出现,并逐渐加重.电镜下可见内质网早期囊腔扩张,晚期呈空泡变,线粒体肿胀,线粒体嵴数目减少,甚至缺失,感染晚期细胞核中有大量成熟待出壳的病毒核衣壳.结论细胞超微结构变化与HCMV晚期mRNA表达密切相关,在病毒循环中起重要作用.晚期mRNA可作为观察治疗HCMV活动性感染的临床疗效指标.
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人巨细胞病毒临床分离株UL131A-128mRNA转录方式的研究
目的 研究人巨细胞病毒( human cytomegalovirns,HCMV) UL131 A-128序列在临床低传代分离株中的转录方式.方法 用3'RACE技术扩增HCMV不同临床株,不同时期的UL131A,UL128,UL130的mRNAs并测序分析；利用PCR技术在HCMV临床株cDNA文库中筛选分别含有UL13IA,UL130,UL128序列的阳性克隆,测序并分析结果.结果 成功在临床低传代分离株中得到UL13IA,UL128,UL130基因的转录结构,UL131A,UL130的转录方式和文献报道一致,UL131A含有两个外显子,UL130为此区域内唯一不含内含子的基因.而UL128基因的转录本呈现了两种转录方式,一种结构包含三个外显子,长度为519 bp；而另一种结构包含三个外显子和第一内含子结构,长度为642 bp,在不同病毒株的不同时期均显示了包含第一内含子结构转录本的含量明显高于仅有外显子结构的UL128转录本的含量.UL131A-128三个基因在病毒的即刻早期,早期,晚期均存在.3'RACE得到结果与HCMV cDNA文库筛选得到的结果相一致.结论 UL131A,UL130和UL128基因的mRNA结构的起始位点不同,但他们在3’末端拥有共同的终止位点.HCMV临床株UL 131A-128基因转录方式的复杂结构可能在HCMV感染的不同时期具有重要作用.
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风心病心房颤动患者心房肌肌浆网IP3-I受体mRNA表达变化的研究
目的:研究房颤患者肌浆网钙释放通道-IP3-I受体(IP3R1)mRNA表达的改变,探讨房颤时心肌细胞浆Ca2+超负荷的原因.方法:风心病二尖瓣狭窄接受外科手术38例,手术时取右心房及右心耳心肌各约100 mg.通过RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)技术,以GAPDH为内参照,测量IP3R1 mRNA的变化.结果:房颤者肌浆网IP3R1 mRNA较窦性心律者上调,心房不同部位无差别.结论:房颤患者IP3R1 mRNA上调,说明心肌细胞Ca2+超负荷与肌浆网钙库的排空有关.
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原发性肝癌患者PBMC AFP mRNA表达与其微转移的相关性研究
目的探讨PHC患者PBMC AFP mRNA表达与微转移的相关性.方法应用巢式RT-PCR检测102例PHC、22例转移性肝癌及其他恶性肿瘤,16例慢性乙型肝炎、22例肝硬化和40例献血员中PBMC AFP mRNA表达水平.结果 AFP mRNA在献血员、转移性肝癌及其他恶性肿瘤、慢性乙型肝炎患者PBMC中均为阴性;在PHC组PBMC中AFP mRNA的检出率(56.86%,58/102)明显高于肝硬化组(9.09%,2/22,P＜0.05).PBMC AFP mRNA的表达与临床分期、门静脉癌栓、肝内转移、远处转移明显相关(＜0.05),而与肿瘤直径、数目及血清AFP浓度无明显相关(＞0.05).结论巢式RT-PCR检测PHC患者 PBMC AFP mRNA是一种早期发现PHC血道播散的可靠而又敏感的实验方法.
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内毒素血症大鼠淋巴细胞中降钙素基因相关肽(CGRP)释放及mRNA表达的变化
目的测定大鼠内毒素血症期间淋巴细胞释放和合成降钙素基因相关肽(CGRP)的变化.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定大鼠淋巴细胞CGRP mRNA水平.用放射性标记法测定血浆CGRP水平.结果注射内毒素大鼠血浆和淋巴细胞释放CGRP均增高,淋巴细胞中CGRP mRNA表达也明显增高.结论提示内毒素不仅刺激淋巴细胞释放CGRP,而且能通过某些机制激活淋巴细胞CGRP mRNA的转录,使CGRP合成增加,以作为CGRP大量释放的重要补充来源.
关键词： 内毒素血症/代谢 淋巴细胞/代谢 降钙素基因相关肽/代谢 RNA 信使 -
结肠癌患者实时荧光定量RT-PCR检测门静脉血CK19 mRNA水平及其临床意义
目的:探讨细胞角蛋白19(Cytokeratin 19,CKl9)mRNA在结肠癌术中患者门脉血中的表达及临床意义.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测CKl9mRNA在结肠癌手术中患者门脉血中的表达,随访并记录术后24个月时患者的生存情况.结果:90例结肠癌患者门脉血CKl9 mRNA阳性者62例,阳性率为66.7%;结肠癌组织CKl9 mRNA的表达与分化程度、Dukes分期有相关性(分别rs=O.280,P=O.008;rs=0.367,P
关键词： 结肠肿瘤/病理学/血液 聚合酶链反应/方法 角蛋白/血液/遗传学 RNA 信使 门静脉 人类 -
TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测新型趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-2γmRNA表达水平
目的建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测新型趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-2γ(MIP-2γ)mRNA表达水平,并对方法进行评估.方法 TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测MIP-2γ mRNA的表达.结果线性检测范围达6个数量级,低检测下限为6×102拷贝,高检测上限为6×107拷贝,批间及批内变异<122%. 正常Balb/c小鼠心脏、肝脏、肾脏组织均可检测到MIP-2γ mRNA表达,以心脏表达水平高.结论采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测MIP-2γ mRNA表达水平准确、特异、灵敏、快速、操作简便,具有临床推广价值.
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人免疫缺陷病毒Ⅰ型gag、env、rev mRNA检测
目的动态检测人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)基因gag、env、rev mRNA水平.方法将插入有HIV-1竞争模板的pSPI质粒DNA转化入感受态菌STBL-2,进行扩增.以T7 RNA聚合酶体外转录出HIV-1 mRNA竞争模板.用3对引物对HIV-1 RNA标本进行定量竞争聚合酶链反应(QC-RT-PCR), 检测HIV-1 gag、env、rev mRNA 水平.结果 HIV-1 ⅢB感染的标本中,HIV-1 gag、env和rev mRNA的水平分别为36 000拷贝/μl,9 800拷贝/μl和9 100拷贝/μl.此方法可动态定量检测HIV-1 gag、env、rev mRNA水平.结论该方法简便易行,费用低廉,适用于实验室HIV致病机理、药物筛选和病毒复制状况的研究.
