新疆葡萄中3种生物活性物质的含量分析

为开发利用新疆葡萄,分析了新疆葡萄中生物活性物质的构成及其含量.采用超声法和回流法分别提取葡萄皮、籽中的齐墩果酸、白藜芦醇和原花青素,用高效液相色谱法和比色法分别测定葡萄皮、籽中齐墩果酸、白藜芦醇和原花青素的含量.葡萄中齐墩果酸主要存在于葡萄皮中,含量可高达1%左右,符合工业化提取要求;地产葡萄品种的齐墩果酸含量相时高于欧洲引进品种;齐墩果酸含量比较:人工发酵葡萄皮＞自然发酵葡萄皮＞新鲜葡萄皮.葡萄皮白藜芦醇的含量高于葡萄籽;欧洲引进葡萄品种白藜芦醇含量相对高于地产葡萄;白藜芦醇含量比较:人工发酵葡萄皮＞自然发酵葡萄皮＞新鲜葡萄皮＞陈旧葡萄皮.葡萄籽原花青素含量高于葡萄皮;地产与欧洲引进葡萄品种的原花青素含量比较接近;原花青素含量比较:新鲜葡萄籽＞自然发酵葡萄籽＞人工发酵葡萄籽.由结果可以看出新疆葡萄富含齐墩果酸、白藜芦醇及原花青素等多种具有营养保健功能的生物活性物质.

白藜芦醇的临床应用前景分析

近年来,白藜芦醇成为科学界关于抗氧化抗衰老研究的热点之一.本文就白藜芦醇的自然界分布、理化性质、生产工艺、在机体内代谢途径以及在不同疾病中的作用机制进行简要阐述.鉴于白藜芦醇的广泛作用机制,其有望成为预防和治疗衰老相关疾病的有效化合物.

葡萄干巧搭配营养又健康

酸酸甜甜的葡萄干,营养丰富、味道甜美,是零食中上好的选择.葡萄干中含有大量的铁和钙,有利于儿童生长发育及贫血患者的日常调理.其含有白藜芦醇、酒石酸、膳食纤维等,有利于改善肠道健康、抗氧化、防衰老、预防心血管疾病等.深色的葡萄干含抗氧化物质比较多,绿色、白色的葡萄干含糖分比较多.葡萄干含糖量比较高,不适合糖尿病人,其他人群也不要一次性大量食用.那么如何吃葡萄干更加健康营养呢?

HPLC法测定山葡萄藤中白藜芦醇含量

目的 建立采用超声提取,高效液相色谱法(HPLC)测定山葡萄藤中白藜芦醇的含量.方法 采用色谱柱:Inertsil ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05％磷酸溶液(40:60);流速:1.0 mg/mL;柱温:30℃;检测波长:306 nm;进样量:10μL.结果 白藜芦醇在0.504～75.6 mg/mL范围内呈良好的线性关系.测定10批山葡萄藤中白藜芦醇平均含量为0.48％,平均回收率95.16％(RSD=1.94％,n=9).结论 该实验采用超声提取,并对提取条件进行探讨,得出佳条件为超声时间45 min、超声功率300 W、固液比1:250(g/mL)、溶剂为甲醇.该研究表明该方法简便、快速、经济、可靠,专属性强,可用于山葡萄藤的质量控制.

白藜芦醇对阿尔茨海默病大鼠海马组织中小胶质细胞及白细胞介素-1β表达抑制作用的实验研究

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马组织中小胶质细胞的增殖活化以及白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法 采用去卵巢合并D-半乳糖(100mg/kg)注射制备AD大鼠模型,60只雌性Wistar大鼠随机分为模型组、Res低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg)、戊酸雌二醇组(0.8 mg/kg)及假手术组(蒸馏水),连续灌胃12周,采用在体心脏灌流法,固定大鼠海马脑组织,利用免疫组化法分别检测大鼠海马组织小胶质细胞离子钙接头蛋白(Iba-1)以及IL-1β的表达.采用SPSS 16.0软件进行统计分析,免疫组化结果采用单因素方差分析,检验水准α=0.05.结果 经单因素方差分析,6个组Iba-1的表达量总体均数差异有统计学意义[F(5,66)=30.632,P＜0.01].多重比较结果显示:模型组Iba-1表达量明显高于假手术组(P＜0.05);Res低剂量组Iba-1表达量低于模型组(P＜0.05);Res中、高剂量组以及戊酸雌二醇组Iba-1表达量低于模型组(P＜0.01);Res中剂量组Iba-1表达量低于戊酸雌二醇组(P＜0.01).6个组IL-1β的表达量总体均数差异有统计学意义[F(5,66) =11.553,P＜0.01].多重比较结果显示:模型组IL-1β表达量高于假手术组(P＜0.01);Res低、中、高剂量组以及戊酸雌二醇组IL-1β表达量低于模型组(P＜0.01).结论 Res可以抑制AD大鼠海马中过度增殖活化的小胶质细胞并且减少脑组织中IL-1β的表达,从而对AD大鼠神经系统起到保护作用.

白藜芦醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织CaMKⅡ及PKA C-β基因表达的实验研究

目的 探讨白藜芦醇对阿尔茨海默病(Alzheimer' s disease,AD)模型大鼠海马组织中CaMKⅡ及PKA C-β基因表达的影响.方法 鼠龄4～5个月健康雌性Wistar大鼠60只,按体质量随机分为假手术对照组(Sham control)、AD模型组(Model)、白藜芦醇低剂量(Res 20 mg/kg)、中剂量(Res 40 mg/kg)、高剂量(Res 80 mg/kg)干预组及戊酸雌二醇组(ERT).每组10只大鼠,对后5组大鼠行双侧卵巢摘除术,假手术组大鼠只切除双侧卵巢附近等体积的脂肪.术后一周开始给予干预,干预持续12周,取3只大鼠海马组织石蜡包埋切片进行HE染色检测海马组织神经细胞数量.利用Real-time PCR方法进行其余大鼠海马组织中CaMKⅡ及PKA C-β基因表达的检测.结果 (1)海马组织锥体细胞形态的改变:与假手术对照组比较,AD模型组大鼠海马锥体细胞排列稀疏、紊乱,细胞体积缩小,胞核固缩,胞浆浓缩、深染;白藜芦醇干预后细胞排列较整齐、均匀,结构清晰.(2)海马组织中CaMKⅡ及PKAC-β基因表达的改变:与对照组比较,模型组大鼠海马中CaMKⅡ及PKA C-β基因表达显著降低(P＜0.05);与模型组比较,白藜芦醇干预组及ERT组大鼠海马中上述两个基因表达显著升高(P＜0.05).结论 白藜芦醇可以升高AD模型大鼠海马组织中CaMKⅡ及PKA C-β基因的表达,可能是其改善AD模型大鼠记忆的机制之一.

大蒜油和白藜芦醇联合应用诱导胃癌细胞凋亡及对Fas、bcl-2和bax基因表达的影响

目的 观察大蒜油和白藜芦醇联合用药对人胃癌MGC-803细胞凋亡及对Fas抗原表达、bcl-2基因、bax基因mRNA表达的影响.方法 实验设大蒜油和白藜芦醇联合用药组1(各25μg/ml)、联合用药组2(各50 μg/ml)和空白对照组,应用DNA梯度电泳及流式细胞术检测药物作用24 h后细胞凋亡情况及Fas抗原表达情况;应用RT-PCR方法检测用药24 h和48 h后胃癌细胞bcl-2、bax基因mRNA表达水平.结果 DNA梯度电泳可见联合用药组出现明显的"Ladder"带;流式细胞术显示各用药组annexin v阳性细胞数比对照组明显增多;联合用药组1和联合用药组2细胞Fas抗原表达阳性率分别为10.59%和14.16%,比对照组(5.27%)明显增高并有显著的统计学意义;各联合用药组Bcl-2基因mRN&表达水平比对照组下降而Bax基因mRNA表达升高.结论 大蒜油和白藜芦醇联合用药诱导胃癌细胞凋亡可能与其促进胃癌细胞Fas抗原Bax基因表达增加并抑制bcl-2基因的表达有关.

白藜芦醇对氧化型低密度脂蛋白所致细胞损伤的防护作用

目的探讨白藜芦醇对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)所致PC12细胞损伤的保护作用.方法白藜芦醇预处理细胞,再加入不同浓度oxLDL,通过噻唑蓝(MTT)实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、TUNEL实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)活性测定,观察白藜芦醇对细胞存活率、细胞膜通透性、细胞核及Caspase-3活性的影响.结果 10 mg/L oxLDL组细胞存活率、LDH释放率、TUNEL阳性细胞数、Caspase-3活性分别为(62±3)%、(23±3)%、(26±5)%和(0.811±0.049)mol·min-1·μg-1;10 mg/L oxLDL + 50 μmol/L白藜芦醇组分别为(84±7)%、(13±4)%、(12±4)%和(0.553±0.048)mol·min-1·μg-1,两组比较差异有统计学意义.结论白藜芦醇具有减轻oxLDL致PC12细胞的毒性作用;对PC12细胞具有神经保护作用.

白藜芦醇对三氧化二砷诱导H9c2细胞毒性的影响及机制研究

目的：观察白藜芦醇对三氧化二砷诱导H9c2细胞毒性的保护作用并探讨其作用机制。方法体外培养H9c2细胞，采用MTT法测定三氧化二砷对H9c2细胞活力的影响及白藜芦醇对三氧化二砷所致H9c2细胞毒性的影响；采用微量酶标法测定细胞乳酸脱氢酶、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)活性；采用化学荧光法测定活性氧含量及细胞内游离Ca2＋浓度。结果与三氧化二砷组比较，白藜芦醇40、50、90、100μg/ml组细胞增殖抑制率[(10.7±3.0)%、(12.3±5.1)%、(14.4±6.3)%、(10.4±6.1)%比(23.1±2.5)%]降低(P＜0.05)；白藜芦醇90、100μg/ml 组细胞乳酸脱氢酶活性[(36.082±39.176)U/L、(46.392±17.526)U/L比(124.742±37.114)U/L]降低(P＜0.05)；白藜芦醇50、60、70、80、90、100μg/ml组活性氧含量[(4.785±0.601)、(3.472±0.513)、(2.579±0.341)、(2.734±0.117)、(2.431±0.314)、(1.197±0.272)比(9.580±2.391)]降低(P＜0.05)。白藜芦醇40、50、60、70、80、90、100μg/ml组细胞caspase-3活性及白藜芦醇100μg/ml组细胞游离Ca2＋浓度与三氧化二砷组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论体外培养条件下白藜芦醇可改善三氧化二砷诱导的 H9c2细胞毒性，其作用机制可能与减少活性氧生成有关。

093葡萄皮中的白藜芦醇可有效抑制癌细胞生长

抗痛风性关节炎中草药小叶菝葜中白藜芦醇含量测定方法

目的：小叶菝葜是抗痛风性关节炎的中草药，探讨行质量评价方法很有必要。菝葜科植物中的标志性化合物-白藜芦醇是公认的具有明确疗效的化合物。方法：高效液相色谱（HPLC），流动相乙腈-水（25：75）；检测波长320 nm。结果：该方法可以用于小叶菝葜中白藜芦醇的含量测定。结论：本研究可建立小叶菝葜中白藜芦醇的测定含量方法，为进一步制定该中草药的质量标准奠定基础。

白藜芦醇对内皮细胞的保护作用及机制研究

目的：研究白藜芦醇（Res）对动脉粥样硬化（AS）内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法：应用溶血性磷脂酰胆碱（LPC）诱导的内皮细胞损伤模型，用双染流式细胞技术测定细胞凋亡率，TUNEL染色实验测定细胞凋亡数，MTT比色实验测定细胞活力，自动生化仪测定细胞培养基乳酸脱氢酶（LDH）水平，ELISA法测定TNF-琢含量，RT-PCR测定CGRP mRNA水平。结果：20滋mol·L-1浓度Res可有效地减弱由LPC诱导的细胞活力下降、培养基LDH水平升高及TNF-琢含量升高（P<0.01），Res可促进CGRP mRNA表达。结论：Res具有抗AS内皮损伤作用，其机制可能与通过激活VR1促进CGRP的合成和释放有关。

白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠血糖及氧化应激影响的研究＊

目的：研究白藜芦醇（Resveratrol）对妊娠期糖尿病大鼠血糖及氧化应激水平的影响。方法：取100只妊娠5天的SD大鼠，通过一次性腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）35 mg?kg-1制备大鼠糖尿病模型，随机分为6组：妊娠糖尿病模型对照组4组，各组白藜芦醇的注射量分别为30、60、120和240 mg?kg-1，每组20只；正常妊娠对照组为20只妊娠5天SD大鼠；正常非妊娠对照组为20只非妊娠雌性大鼠。分别检测各组在第0、7、14天的空腹血浆血糖和胰岛素水平；治疗满2周后，检测各组大鼠血清中丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）的水平或活性。结果：与正常非妊娠对照组相比，正常妊娠对照组的大鼠空腹血浆血糖和胰岛素水平、血清中MDA含量和SOD、GSH-Px、CAT活性均无显著性差异（P>0.05）；与妊娠期糖尿病模型组相比，白藜芦醇（30、60、120和240 mg?kg-1）治疗组大鼠血清中MDA含量显著降低（P<0.05，P<0.01）；白藜芦醇（120和240 mg?kg-1）治疗组大鼠血糖水平显著降低、胰岛素水平显著升高（P<0.05，P<0.01），大鼠血清中SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高（P<0.05， P<0.01）。结论：白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠有降低血糖、提高抗氧化能力的作用，且具有剂量依赖性，该作用可能与其能够有效提高胰岛素水平和改善抗氧化酶系统的活性有关。

以抑制小胶质细胞活化为靶标的抗神经退行性疾病的天然产物及衍生物的筛选与机制研究

脑内小胶质细胞的活化贯穿了神经退行性疾病的发生、发展全过程.抑制小胶质细胞活化已经成为防治此类疾病的重要策略.本文对近年来本课题组在白藜芦醇及其衍生物、姜黄素及其衍生物、人参皂苷等抑制小胶质细胞活化方面的研究进展进行综述,为防治神经退行性疾病药物的深入研究提供参考.

白藜芦醇在植物中的分布及其生物活性研究进展

白藜芦醇广泛存在于多种植物中,具有重要的生物活性.本文综述了白藜芦醇在植物中的分布以及抗肿瘤、治疗心血管疾病等多方面有益于人类健康的生物活性研究进展,为进一步开发和利用提供了科学依据.

白藜芦醇诱导肿瘤细胞凋亡研究进展

白藜芦醇是一种具有抗氧化、抗肿瘤、诱导细胞凋亡等生物活性的天然多酚类化合物.本文对近年来白藜芦醇诱导人宫颈癌HeLa细胞、白血病细胞、肝癌细胞和胃癌细胞等细胞凋亡方面的研究进展进行了分析和总结,并重点探讨了白藜芦醇诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制,总结了白藜芦醇通过阻滞细胞周期、调节相关基因及蛋白表达和线粒体诱导细胞凋亡途径的研究现状,以及白藜芦醇作为肿瘤药物在临床研究中的潜在应用前景.

星点设计-效应面法优化虎杖中白藜芦醇的提取工艺

目的：在单因素实验结果的基础上，采用星点设计-效应面法优选白藜芦醇的提取工艺条件。方法：用有机溶剂水浴浸提法提取虎杖中白藜芦醇，以白藜芦醇含量为评价指标，采用星点设计考察溶剂浓度、提取时间和溶剂用量对提取工艺的影响，效应面法优化提取工艺条件。结果：佳工艺条件：乙醇浓度72.0%，提取温度50℃，提取2次，每次1.1 h，溶剂用量12.7倍，白藜芦醇含量理论大值与实测值平均偏差为0.83%。结论：该优选工艺预测性良好，可为白藜芦醇提取的工业生产提供实验依据。

抗氧化成分白藜芦醇的树脂分离工艺研究

目的：研究大孔吸附树脂分离纯化虎杖中白藜芦醇的工艺条件及参数。方法：利用白藜芦醇显酸性的特点，采用碱液洗脱树脂法分离纯化白藜芦醇。考察6种树脂、碱的浓度以及洗脱流速等因素对白藜芦醇分离纯化的影响。结果：选择NKA－Ⅱ树脂，NaOH洗脱液浓度0．5％，流速为1 BV/h，经过去盐后，白藜芦醇纯度达到70％以上。结论：该工艺适用于对白藜芦醇有吸附的树脂，经过一次上柱就可以与原料中其他干扰成分分离，适合大规模生产。

白藜芦醇调节STIM1抗动脉粥样硬化的机制

目的:实验利用apoE-/-小鼠高脂喂养建立动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型,观察基质相互作用因子1(stromal interaction molecule l,STIMl)在白藜芦醇抗AS中的具体机制.方法:雌性apoE-/-小鼠卵巢切除后高脂喂养建立AS模型,实验分为正常组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量(50,100,150 mg·kg-1)组及补充雌激素组(0.3 mg·kg.).分别检测各组小鼠血清中血脂4项,油红0染色观察胸主动脉形态改变,蛋白质免疫印迹(Western blot)分析各组小鼠血管组织中STIM1,钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)及雌激素受体α(ERα)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分析各组小鼠血管组织中STIM1及Orai1 mRNA表达情况.结果:与正常组比较,模型组血清中总胆固醇(CHOL),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量明显下降(P＜0.05),给予白藜芦醇及雌激素后可明显降低高脂饮食所致的CHOL,TG及LDL-C明显升高,并可明显增加HDL-C含量(P＜0.05).油红0染色显示:正常组血管结构完整、清晰、内膜连续;模型组内膜增厚、可见明显脂质斑块;而加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后,内膜增厚减轻且内膜下脂质斑块显著减少.Western blot及Real-time PCR结果显示:与正常组比较,模型组STIM1,Orai1蛋白及mRNA表达明显升高(P＜0.05),而加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后STIM1,Orai1蛋白及mRNA表达较模型组均明显下降(P＜0.05);同时Western blot结果还显示,与模型组比较,加入不同剂量白藜芦醇或雌激素后均可增加血管组织中ERα表达.结论:白藜芦醇可通过增加ERα表达,下调STIM1及Orai1表达,抑制钙池操纵性钙通道(SOCC)介导的钙内流,延缓AS发生.

白藜芦醇对MGC803细胞凋亡因子Bad,p-Bad,Caspase-3的影响

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对人胃癌细胞MGC803细胞凋亡因子及其磷酸化的影响,研究白藜芦醇抗胃癌的作用机制.方法:采用0,50,100,200μmol·L-1Res处理MGC803细胞后,采用台盼蓝法测定MGC803细胞生长抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;免疫组化法检测促凋亡蛋白(Bad),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测Bad,磷酸化Bcl-x1/Bcl-2相关死亡启动子(p-Bad),Caspase-3蛋白的表达.结果:随着浓度增加Res抑制胃癌MGC803细胞生长作用明显增强(P＜ 0.01);Res(100 μmol·L-1)能明显下调MGC803细胞中Bad,p-Bad蛋白表达,同时可上调Caspase-3蛋白表达.结论:Res可以诱导MGC803细胞凋亡,其凋亡与浓度、时间有一定的依赖性;Res诱导MGC803细胞凋亡可能与其下调Bad,p-Bad蛋白和上调Caspase-3蛋白表达有关.