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重症急性胰腺炎大鼠Treg及内毒素的变化
目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及肠源性内毒素(ET)在重症急性胰腺炎中的作用.方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(SO)和SAP组,成功造模后3、6、12h取大鼠胰腺行病理学检查；流式细胞术检测外周血Treg水平；鲎试剂法测血浆内毒素水平.结果 SAP组胰腺病理学评分随病程进展升高,血浆ET,外周血Treg水平逐渐明显升高(P＜0.05).结论 Treg和ET在重症急性胰腺炎发生发展中可能发挥重要作用.
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免疫调节细胞FoxP3+Treg及免疫蛋白PD-L1在宫颈病变微环境中的表达
目的 检测免疫抑制细胞FoxP3+ Treg和免疫蛋白PD-L1在宫颈微环境中的表达情况.方法 采用免疫组织化学法检测FoxP3和PD-L1在20例正常宫颈组织及45例不同程度宫颈病变组织中的表达情况.结果 宫颈病变组织中的FoxP3+ Treg(H=43.211,P=0.000)和PD-L1蛋白(t=213.00,P=0.001)表达均明显高于正常组织;随着病理级别升高,FoxP3+ Treg的侵袭性(H=28.307,P=0.000)和PD-L1蛋白在异常分化细胞中的表达增加(t=239.000,P=0.028);FoxP3+ Treg与异常分化细胞中PD-L1的表达呈显著正相关(rs=0.364,P=0.003).结论 在宫颈癌进展的不同病理阶段,局部微环境中FoxP3+Treg数目随官颈细胞恶性转化的进程而增多,异常分化细胞中PD-L1的表达增强.
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调节性免疫细胞网络在移植免疫中的作用
近年来,调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的基础和临床研究方兴未艾,从Treg的鉴定、分选、体外扩增到临床应用研究取得了许多突破性进展,激发了人们对调节性B细胞(regulatory B cell,B reg)和调节性树突细胞(regulatory DC,DCreg)的极大兴趣[1-2].我们把这些具有负性调节功能的免疫细胞及其相互之间的复杂联系称为“调节性免疫细胞网络”.该网络在有效地启动免疫应答、调控应答的强度与平衡并适时终止的过程中发挥精确的负性调节作用.本文对调节性免疫细胞在移植免疫学领域的研究进展做一阐述.
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雷公藤多苷片治疗支气管哮喘的临床研究
目的 观察雷公藤多苷片治疗支气管哮喘的临床疗效,并探讨其对Th 17/Treg失衡的影响.方法 选取深圳市第二人民医院2014年3月-2015年3月收治的中重度支气管哮喘患者100例,随机分为对照组和治疗组,每组各50例.对照组给予常规治疗,治疗组在对照组的基础上口服雷公藤多苷片20 mg/次,3次m,两组患者均连续治疗14d.治疗后,观察两组的临床疗效,同时比较两组外周血Th 17/Treg细胞比例,Th17和Treg细胞因子白介素-17 (IL-17)、白介素-23(IL-23)、白介素-10(IL-10)、转化生长因子-1β1 (TGF-β1),肺功能指标第1秒时间肺活量(FEV1)、第1秒时间肺活量/用力肺活量(FEV/FVC).结果 治疗后,治疗组的总有效率(92.0％)明显高于对照组(76.0％),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组外周血Th17细胞比例显著降低,Treg细胞比例显著升高,同组治疗前后差异具有统计学意义(P＜0.05);且治疗组治疗后的改善程度优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).两组患者血浆中IL-17、IL-23显著降低,TGF-β1、IL-10显著升高,同组治疗前后差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗组治疗后的IL-17、IL-23显著降低,TGF-β1、IL-10显著升高,与对照组治疗后比较差异具有统计学意义(P＜0.05).两组的FEV1、FEV1/FVC较治疗前显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组治疗后的FEV1、FEV1/FVC较对照组治疗后显著升高,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 雷公藤多苷片治疗支气管哮喘疗效较好,可显著改善肺功能,调节Th 17/Treg免疫平衡可能是其作用机制.
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CD4+T细胞的分化调节及其在再生障碍性贫血中 作用的研究进展
CD4+T细胞接受抗原的刺激后能够分化为多种辅助性T细胞(Th细胞)和调节性T细胞(Treg),是人体免疫系统重要的组成部分.随着对再生障碍性贫血和CD4+T细胞研究的不断深入,发现CD4+T细胞各亚群平衡失衡、功能亢进及细胞因子的异常活化造成的骨髓损伤是诱导再生障碍性贫血发病的重要原因.因此,研究CD4+T细胞各个亚群的细胞分化调节,分析CD4+T细胞在再生障碍性贫血中的作用机制,可为再生障碍性贫血患者细胞亚群平衡的恢复提供治疗思路.本文拟从CD4+T细胞、相关细胞因子等方面阐述CD4+T细胞免疫异常对再障机制及治疗的影响.
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Th17/Treg失衡在呼吸道合胞病毒致支气管哮喘发病机制中的作用
支气管哮喘(简称哮喘)是一种免疫介导的气道反应性增高的疾病,呼吸道合胞病毒(RSV)是成人及婴幼儿下呼吸道感染常见的病原体之一.近许多研究发现婴幼儿时期的急性RSV感染可以显著增加成年后发生哮喘的几率,其机制相当复杂,是多因素作用的结果.本文阐述Th17/Treg失衡在RSV致哮喘发病机制中的作用.
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非霍奇金淋巴瘤患者外周血Th17/Treg细胞及相关细胞因子水平的研究
目的 探讨非霍奇金淋巴瘤患者外周血Th17/Treg细胞及相关细胞因子表达水平.方法 选取50例非霍奇金淋巴瘤患者(非霍奇金淋巴瘤组)、50例慢性淋巴腺炎患者(慢性淋巴腺炎组),50例健康体检者(对照组),比较3组外周血Th17/Treg细胞及相关细胞因子表达水平.结果 非霍奇金淋巴瘤组患者外周血Treg细胞百分率显著升高,Th17细胞百分率显著降低,与慢性淋巴腺炎组及对照组比较差异有统计学意义(P<0 V.05).非霍奇金淋巴瘤患者中,复发组患者外周血Treg细胞百分率显著升高,Th17细胞百分率显著降低,与慢性淋巴腺炎组及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).非霍奇金淋巴瘤组患者血清TGF-β1显著升高,IL-6水平显著降低,与慢性淋巴腺炎组及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).非霍奇金淋巴瘤患者中,复发组患者血清TGF-β1显著升高,IL-6水平显著降低,与慢性淋巴腺炎组及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 非霍奇金淋巴瘤患者外周血Treg、Th17细胞比例及相关细胞因子表达水平异常,监测外周血Th17/Treg免疫平衡对NHL预后判定可能有重要意义.
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环磷酰胺对肿瘤微环境调节作用的研究
目的：观察环磷酰胺（ CTX）对黑色素瘤小鼠动物模型肿瘤微环境的干预及抗瘤作用。方法应用黑色素瘤细胞B16细胞株皮下接种制备荷黑色素瘤的小鼠动物模型。将不同剂量的CTX分别对不同组的小鼠模型进行腹腔注射，流式细胞术检测小鼠脾淋巴悬液中中Treg 的含量，筛选CTX佳剂量。应用流式细胞术检测佳剂量CTX腹腔注射后Treg水平的动态变化。应用ELISA 法检测小鼠血清中IL-10、TGF-β水平的动态变化。定期测量肿瘤大小绘制出肿瘤的生长曲线。结果 CTX腹腔注射的佳剂量为100 mg/kg，腹腔注射 CTX后Treg水平及IL-10、TGF-β水平均出现下降后再缓慢升高的波动趋势，低剂量CTX腹腔注射后不影响肿瘤的生长。结论低剂量CTX腹腔注射可以有效的调节肿瘤微环境，同时不影响荷瘤小鼠肿瘤的生长。
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宫颈鳞癌及CIN中FOXP3的表达及其意义
目的:研究宫颈鳞癌及癌前病变中F O X P3的表达及其意义.方法:应用免疫组织化学方法检测检测26例宫颈鳞癌、21例癌前病变(分别为CINⅠ2例、CINⅡ3例、CINⅠ～Ⅱ4例、CINⅢ并累及腺体6例、CINⅡ～Ⅲ6例)及20例慢性宫颈炎中FOXP3的表达情况.结果:FOXP3表达于淋巴细胞,定位于细胞核,宫颈癌细胞中无表达.26例宫颈癌中19例表达FOXP3;21例癌前病变中12例表达F O X P3;20例慢性宫颈炎中3例微弱表达F0X P3.宫颈鳞癌组织中F0X P3的表达均明显高于癌前病变及慢性宫颈炎中FOXP3的表达(P<0.05),癌前病变组织中FOXP3的表达稍高于慢性宫颈炎组织中FOXP3的表达,但差异无统计学意义(P>0.05).结论:FOXP3在宫颈鳞癌组织中表达增强.
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扶正培本方对CIK细胞免疫治疗的影响
目的:癌症是全球发病和死亡的主要原因,已逐步成为我国居民的主要慢性疾病之一,对个人与社会均造成巨大负担.肿瘤治疗除了常规手术、放化疗之外,免疫治疗(CIK)逐渐成为肿瘤治疗的新手段之一.探讨扶正培本方联合CIK治疗能否产生协同增效的作用.方法:纳入病人44例随机分为CIK组(对照组,n=22)和扶正培本方联合CIK组(治疗组,n=22),抽血观察患者外周血淋巴细胞亚群,NK细胞和T辅助细胞分型(Th1,Th2,Th17及Treg)的变化.结果:淋巴细胞亚群分析显示,对照组及治疗组中对淋巴细胞,NK细胞均无显著性差异,但中药联合CIK治疗后,患者CD4+CD25+Foxp3+Treg显著降低(P<0.05).结论:扶正培本方联合CIK可能有助于减轻免疫抑制,活化免疫反应.
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再生障碍性贫血患者治疗前后外周血中单个核细胞FOXP3水平的检测及其意义
CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在维持自身免疫耐受及阻止自身免疫反应的发生中所起的重要作用被日益关注.转录因子(forkhead box P3,FOXP3)特异性表达于CD4+CD25+Treg,与CD4+CD25+Treg的生长发育和功能维持密切相关[1].有研究报道,重度再生障碍性贫血(SAA)患者外周血中CD4+CD25+ Treg减少,不能抑制自身反应性T细胞的活化增殖,导致免疫耐受被打破,骨髓造血功能衰竭[2].本研究利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,分析再障患者FOXP3的水平,以期从免疫耐受方面探索FOXP3在再障患者发病机制中的作用.
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从维生素D对Th17/Treg的调节探讨肺纤维化与肾不纳气的相关性
肾脏与维生素D关系密切,影响着活性维生素D的生成.在肺纤维化的发生发展中,Th17和Th17/Treg起着至关重要的作用.而维生素D对Th17和Treg有调节作用,可维持体内Th17/Treg的平衡,从而阻止肺纤维化的发生发展.肺纤维化的病位在肺,与肾气虚损紧密相关,日久导致肾不纳气.使用补益肺肾的药物可以明显地改善肺纤维化的症状.为此,从维生素D对Th17/Treg的调节探讨肾不纳气与肺纤维化的关系,为肺纤维化的治疗提供了新的思路.
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龙胆泻肝汤对变应性接触性皮炎模型小鼠Treg/Th17细胞平衡调节作用的实验研究
目的:观察变应性接触性皮炎Treg/Th17细胞平衡的变化,探讨龙胆泻肝汤治疗变应性接触性皮炎的部分干预机制.方法:将40只小白鼠随机分为4组:空白组、模型组、龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组,每组10只.采用DNCB皮肤涂抹方法制备小鼠背部ACD模型.模型复制成功后,龙胆泻肝汤组、氢化可的松琥珀酸钠组小鼠均按照成人2倍等效剂量灌胃,连续给药21 d,空白组、模型组给予等量蒸馏水灌胃.实验结束后,取小鼠致敏部位皮肤,对皮肤组织中Foxp3、RORγt、IL-17 mRNA及蛋白的表达水平进行检测.结果:与空白对照组比较,模型对照组、西药组、龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).与模型对照组比较,西药组和龙胆泻肝汤组小鼠皮肤组织中Foxp3 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);而IL-17、RORγt mRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论:Treg/Th 17细胞失衡可能是变应性接触性皮炎的发病机制之一,而龙胆泻肝汤可能就是通过作用于该靶点,调节Treg/Th17细胞平衡,而实现其对变应性接触性皮炎的治疗作用.
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脐带间充质干细胞移植治疗类风湿性关节炎患者Th1/Th2、Treg的变化
背景：类风湿性关节炎是自身免疫性疾病，传统治疗方法很难有效解决患者免疫耐受机制缺失的问题。随着干细胞再生医学的发展，应用干细胞治疗免疫性疾病成为热点。目前国内外对于细胞移植治疗类风湿性关节炎少有报道。
目的：探讨脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎患者Th1/Th2、Treg变化的影响，为类风湿性关节炎寻找新的治疗方法。
方法：180例类风湿性关节炎患者，其中27例为对照组，给予非类固醇抗炎药和抗风湿药，153例为治疗组，静脉输注细胞数为4×107的脐带间充质干细胞40 mL，用药方案与对照组相同，76例患者在第1次细胞治疗的三四个月后接受了2次脐带间充质干细胞治疗。随访治疗后3，6个月进行临床有效性评估(DAS28、HAQ、ACR20)、类风湿因子、抗CCP抗体、T细胞亚群、Th细胞因子检测。部分2次细胞治疗患者随访至8个月检测Treg、T细胞亚群。
结果与结论：①随访3个月时，细胞治疗组DAS28评分、HAQ评分、ACR20较对照组下降明显，差异有非常显著性意义(P <0.01)。②脐带间充质干细胞治疗3，6个月的DAS28评分、HAQ评分较治疗前明显下降(P<0.01)，2次治疗较1次治疗继续下降(P<0.01)。③治疗后3，6个月γ-干扰素水平较治疗前变化不明显，治疗后6个月白细胞介素4水平较治疗前逐渐上升(P<0.05)。④治疗后3，6个月Treg较治疗前明显上升(P<0.01)，同时治疗后Treg升高与ACR明显相关，尤其是ACR70百分率(P<0.05)；治疗后3个月CD4+Treg比率明显升高(P<0.05)，6，8个月时与治疗前相比也是升高趋势，但差异无显著性意义(P>0.05)。⑤治疗后6个月B细胞水平明显下降(P<0.05)；治疗后3，6个月类风湿因子较治疗前均明显下降(P<0.05)。⑥治疗后3，6个月抗CCP抗体和白细胞介素17水平变化不大。结果表明类风湿性关节炎患者给予脐带间充质干细胞治疗后Th1/Th2趋于平衡、Treg升高与临床实验指标及症状的缓解直接相关。因此按风湿病指南用药的同时，协同使用脐带间充质干细胞可改善类风湿性关节炎患者免疫网络效应、调整免疫耐受、改善病情。 -
五味子提取物对肝移植模型犬Th17细胞和调节性T细胞失衡的调控
背景:五味子提取物的功效有很多,但五味子提取物在肝移植后的免疫改变方面所起的作用研究甚少.目的:探讨五味子提取物对肝移植模型犬的Th17细胞和Treg细胞失衡的影响.方法:建立肝移植犬模型,随后随机分成对照组10只和五味子组10只,肝移植后对照组给予葡萄糖,五味子组给予五味子水提取物.检测肝移植后1,3,6和9 d的存活率、肝功能、外周血Th17细胞和Treg细胞、外周血白细胞介素17、23、10和转化生长因子β1水平;比较2组犬的肝病理变化.结果与结论:①与对照组比,五味子组肝移植模型犬的生存期明显延长(P<0.05);②肝移植后3,6和9 d五味子组谷丙转氨酶、谷草转氨酶及总胆红素水平显著低于对照组(P<0.05);③肝移植后3,6及9 d,对照组的Treg显著降低,Th17显著增高(P<0.05),与对照组比,五味子组的Th17增高不明显,Treg无显著变化,但有增高趋势;④肝移植后3,6及9 d,与对照组相比,五味子组白细胞介素17和白细胞介素23水平显著降低,白细胞介素10和转化生长因子β1水平显著升高(P<0.05);⑤与对照组比较,五味子组可降低炎症因子浸润,改善肝的病变程度;⑥结果提示,五味子提取物可明显改善肝移植模型犬的生存状况,肝功能和供体肝存活,可能与改善Th17细胞和Treg细胞失衡有关.
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粒细胞刺激因子对白血病细胞趋化因子受体4表达及趋化能力和骨髓微环境的影响
背景:骨髓微环境可通过细胞黏附分子介导白血病细胞耐药和免疫逃逸.这些黏附分子可作为新的作用靶点,通过降低其表达水平和功能,有望打破白血病耐药机制.目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony stimulating factor,rhG-CSF)对急性白血病WEHI-3细胞趋化因子受体4表达水平和趋化性的影响,以及在小鼠体内对骨髓基质细胞衍生因子1和外周血Treg细胞的作用.方法:①将急性白血病细胞株WEHI-3与rhG-CSF共同孵育6,12,18,24h后,用流式细胞术检测趋化因子受体4表达水平,微孔细胞转移实验检测其迁移能力;②健康Balb/C小鼠给予rhG-CSF皮下注射,ELISA法检测骨髓及外周血中基质细胞衍生因子1水平,流式细胞术检测脾脏及外周血Treg细胞比例.结果与结论:①rhG-CSF作用后WEHI-3细胞表面趋化因子受体4的表达水平明显下降(P＜0.05),细胞对基质细胞衍生因子1的趋化性显著降低(P＜0.05);②健康小鼠应用rhG-CSF处理后,骨髓中基质细胞衍生因子1水平较生理盐水组明显降低(P＜0.05),外周血及骨髓Treg细胞比例显著升高(P＜0.05);③结果表明,rhG-CSF可以下调白血病细胞表面趋化因子受体4的表达,降低骨髓中基质细胞衍生因子1水平,并可动员Treg细胞进入外周血,从而打破骨髓微环境介导的免疫逃逸和耐药,改善白血病的免疫治疗效果.
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喘息样支气管炎患儿肠道微生态变化与免疫耐受关系的研究
目的 观察喘息样支气管炎患儿肠道菌群变化,探讨肠菌群变化与免疫耐受间关系.方法 采用16S rDNA荧光定量PCR法、流式细胞术和ELISA方法对47例喘息样支气管炎患儿、40例急性支气管炎患儿和30例健康儿童进行粪便双歧杆菌与大肠埃希菌的定量检测,外周血单个核细胞CD4+ CD25+T细胞(Treg)和血浆细胞因子TGF-β1的测定.结果 喘息样支气管炎、急性支气管炎患儿粪便中双歧杆菌数量和双歧杆菌/大肠埃希菌比值(B/E值)较健康对照组减少(P＜0.05),且喘息样支气管炎患儿粪便双歧杆菌数量和B/E值均低于急性支气管炎患儿(P＜0.05).喘息样支气管炎患儿的外周血Treg百分数、血浆TGF-β1浓度均低于急性支气管炎患儿和健康对照组(P均＜0.05)；且外周血Treg百分数和血浆TGF-β1水平与肠道B/E值呈直线正相关关系.结论 喘息样支气管患儿发病初期即发生肠道菌群紊乱,肠道有益菌数量下降,且诱导免疫耐受失败.肠道菌群紊乱与免疫功能失衡间存在相互影响与制约关系,免疫耐受被打破贯穿疾病的整个病理过程.
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小儿喘息型支气管炎肠道微生态学变化与Treg/Th17作用关系的研究
目的 观察喘息型支气管炎患儿肠道微生态学变化,探讨肠道菌群变化与Treg/Th17的作用关系.方法 2011年10月至2012年3月在河北医科大学第三医院采用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)、流式细胞技术和酶联免疫吸附法(ELISA法)对47例喘息型支气管炎患儿(A组),40例急性支气管炎患儿(B组)和43例同期健康查体儿童(C组)定量测定粪便中双歧杆菌和大肠杆菌数量、外周血单个核细胞CD3+CD8-IL-17+(Th17)、CD4+CD25+T(Treg)细胞百分数和血浆IL-17、TGF-β1浓度.结果 (1)A组、B组患儿粪便中双歧杆菌教量和双歧杆菌/大肠杆菌比值(B/E值)低于C组(P＜0.05),A组患儿粪便中双歧杆菌数量和B/E值低于B组(P＜ 0.05).(2)A组、B组患儿外周血单个核细胞Th17百分数和血浆IL-17浓度高于C组(P均＜0.05);A组患儿外周血单个核细胞Treg百分数和血浆TGF-β1浓度低于B组和C组(P均＜0.05).(3)A组患儿外周血Treg/Th 17低于B组和C组.(4)A组患儿粪便B/E值与Treg/Th17值呈直线正相关关系.结论 喘息型支气管炎患儿发病初期即发生肠道菌群紊乱,表现在双歧杆菌数量减少和B/E值降低;Th17参与喘息型支气管炎的急性炎症反应,肠道菌群失调可能是造成Treg/Th17失衡的因素之一,并参与了疾病的病理过程.
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Th17与Treg在支气管哮喘发病机制中的作用
支气管哮喘(以下称哮喘)是一种复杂的多因素气道疾病,因其复杂性,发病机制目前尚不明确.此前广为接受的Th2占优势的Th1/Th2失衡并不能完全解释哮喘的发病机制.后有研究发现机体存在的Th17和Treg两种细胞,虽功能不同,但是之间有着复杂的相关关系,甚至有可能存在Th17/Treg平衡.炎症反应可打破Th17/Treg平衡,当两者失衡则可能引发诸如哮喘之类的自身免疫性疾病.这一平衡的打破作为哮喘发病的机制之一引起了诸多学者的关注和研究,文章试图就此做综述如下.
关键词： Th17 Treg Th17/Treg平衡 哮喘 -
CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与肺癌的临床分期及化疗关系的研究
为了研究Treg与肺癌的临床分期及化疗的关系,分离52例初治肺癌患者化疗前后PBMC,以12例正常者为对照,荧光标记的单抗染色,流式细胞仪检测Treg占CD4+T细胞的比值.结果显示肺癌患者该比值高于对照组,Ⅲ+Ⅳ期的高于Ⅰ+Ⅱ期.化疗疗效(SD+PD)高于PR.因此,肺癌患者Treg比例较正常人升高,且分期越高该比值增加越明显;疗效差的该比值高于化疗有效病例.推测Treg升高与肺癌的发生、发展有关.
