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反复自然流产患者外周血Th17和Treg细胞相关细胞因子的测定
目的 通过检测反复自然流产(RSA)患者外周血Th17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达及IL-6、IL-17、TGF-β1的水平,探讨Th17和Treg细胞在RSA发病中的作用.方法 选取2011-12/2012-04郑州大学第三附属医院50例RSA患者为研究对象,同期选取50名健康早孕女性作为对照组.采用实时荧光定量PCR检测外周血RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平,并分析二者之间的相关性；采用ELISA测定血清中IL-6、IL-17、TGF-β1的含量.结果 RSA组RORγt mRNA水平(25.358 ±9.236)显著高于正常对照组(10.611±5.792)；Foxp3 mRNA水平(6.851±2.875)显著低于正常对照组(32.218±5.023).RSA患者RORγt和Foxp3 mRNA表达呈显著负相关(r=-0.530,P=0.018).RSA组IL-6、TGF-β1含量分别为(82.7±23.2)、(269.3±29.6) pg/mL,明显低于正常对照组(210.4±40.6)、(497.8±54.6)pg/mL；IL-17含量(172.8±33.9) pg/mL明显高于正常对照组(53.4±10.8) pg/mL.结论 RORγtmRNA表达上调与Foxp3mRNA表达下调所致的Th17和Treg细胞免疫失衡可能是RSA的原因之一；IL-6、IL-17、TGF-β1含量变化的异常在RSA的发生发展中可能起一定作用.
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Treg/Th17平衡在巨细胞病毒感染发病机制中的作用
目的:研究调节性T细胞(Treg/Th17)细胞失衡在巨细胞病毒感染(CMV)免疫调节机制中的作用.方法:将CMV感染患儿按诊断标准分为激活感染组与潜伏感染组,同时设立正常对照组,采用流式细胞术(FCM)分析各组外周血Treg、Th17的百分比,并计算Treg/Th17比值；同时采用ELISA和RT-PCR法检测Treg主要相关因子(IL-10、Foxp3)和Th17主要相关因子(TGF-β、IL-17、IL-6、IL-23及ROR-γt)表达水平.结果:与对照组比较,CMV感染后Treg细胞百分率降低,Th17细胞升高,致Treg/Th17比值下降(P＜0.05)；CMV感染后两组间比较,激活感染组Trg、Th17比值和Treg主要相关因子表达水平下降更明显,而Th17主要相关因子表达水平显著上调,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:Treg/Th17平衡参与了CMV感染发病免疫机制,并可能与病毒潜伏-激活状态相关.
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严重烧伤大鼠脾脏Toll样受体4表达及其与CD4+ CD25+调节性T细胞的关系
目的: 观察严重烧伤早期大鼠脾脏Toll样受体4(TLR4)、TNF-α mRNA的表达变化及外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)和内毒素(ET)的变化规律, 探讨烧伤后肠源性感染时机体的防御反应机制.方法: 将大鼠随机分成正常对照组和烧伤组, 在其背部造成30%体表面积Ⅲ度烧伤模型, 在烧伤前及烧伤后2、5、8、12、24、48及72 h等不同时间点留取脾脏组织和外周血, RT-PCR方法测脾脏TLR4、TNF-α mRNA表达, Western blot法测脾脏TLR4蛋白表达, 流式细胞术检测血浆Treg百分数, 鲎试剂法测血浆内毒素含量.结果: 各观测指标值较伤前显著升高, TLR4 mRNA、TLR4蛋白、Treg和ET均在烧伤后8 h达高峰, 其峰值分别为3.66±0.51、2.27±0.19、(63.19±12.65)%和11.68±1.71 Eu/mL; TNF-α表达高峰在烧伤后12 h, 峰值为1.65±0.23; 各观测指标峰值与正常对照组比较, 差异有统计学意义(P＜0.01).烧伤后TLR4 mRNA的表达与Treg、ET及TNF-α mRNA之间均呈正相关, 相关系数分别为0.898、0.811和0.462(P＜0.01).结论: Treg在严重烧伤早期的免疫调节过程中发挥了重要作用, 其机制与烧伤后肠源性内毒素上调的LPS-TLR4信号转导系统有关.
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感染免疫中ICOS和PD-1在调节性T细胞上的表达及平衡
调节性T细胞(Treg)是一个具有免疫调节作用的T细胞亚群,在机体免疫防御、识别并清除外来抗原、维持免疫耐受和免疫应答稳态中具有非常重要的作用.可诱导共刺激分子(ICOS)和程序性死亡分子l(PD-1)主要表达于已活化的T淋巴细胞,对免疫应答分别发挥正向、负向调控作用,辅助维持机体免疫的自稳状态,确保宿主获得佳的适应性免疫有重要作用,在感染性疾病的发生发展中有重要意义.且两个分子在Treg上均有上调表达,可调节Treg在免疫应答中的作用,将有希望成为对临床疾病进行免疫干预的靶位之一.现就感染免疫中ICOS/PD-1在Treg上的表达及平衡进行简要综述.
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芳香烃受体: Treg和Th17细胞分化的"调节器"
芳香烃受体(AhR)不仅可介导芳香烃类化合物的毒性反应,还参与一些重要的生物学过程,其中AhR在免疫系统中的作用日益被关注Treg和Th17的分化相互抑制,并且在功能上负性调节Treg能够抑制自身免疫性疾病的发生,而Th17则诱导以慢性炎症为损失机制的自身免疫病现今发现,AhR以配体依赖的方式调节Treg和Th17细胞分化AhR的特殊作用使其已然成为免疫治疗中的新靶点
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免疫性血小板减少患者外周血Treg及Th1,Th2细胞检测及其临床意义
目的 研究免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+细胞(Treg细胞)及Th1/Th2细胞水平并探讨其临床意义.方法 选取27例临床确诊ITP患者作为实验组,采用流式细胞术检测患者外周血Treg细胞及Th1/Th2细胞的比例,并与25例健康志愿者检测结果进行比较.结果 ITP患者外周血中Treg细胞比例为(2.20±0.93)％,健康对照组为(2.99±0.45)％,ITP患者组Treg细胞低于健康对照组(t=3.820,P＜0.01);ITP患者组和健康对照组Th1/Th2细胞水平差异无统计学意义(tTh1=0.655,tTh2=0.467,均P＞0.05).结论 ITP患者外周血Treg细胞减少,其对ITP疾病发生发展的重要作用值得深入研究.
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银屑病性关节炎患者Th17/Treg相关细胞因子的检测
目的 探讨Th17/Treg细胞相关细胞因子IL-17,IL-6,IL-23和TGF-β在银屑病性关节炎(PsA)发病机制中的作用.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定31例PsA患者和30例正常对照者血清中IL-17,IL-6,IL-23和TGF-β的水平.结果 PsA患者血清中IL-17,IL-6和IL-23水平明显高于健康对照组,TGF-β的水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 外周血中Th17/Treg细胞相关的细胞因子IL-17,IL-6,IL-23和TGF-β表达异常参与了PsA的发病过程.
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Th1/Th2/Th17/Treg平衡在特应性皮炎中的变化规律
目的 探讨Th1/Th2/Th17/Treg平衡在特应性皮炎中的变化规律.方法 收集2014年2月-2017年1月在本院收治的56例确诊的特应性皮炎患儿,其中轻症11例、中症29例和重症16例.选择同期的健康儿童26例为对照组.检测外周血中IFN-!、IL-4、IL-17、IL-21、IL-23、IL-10和转化生长因子(TGF-")水平.结果与对照组相比,特应性皮炎组的IL-4、IL-17、IL-21、IL-23均明显增高,差异有统计学意义(P<0. 05),且呈严重程度依赖性增高,其余指标IFN-γ有降低趋势,IL-10和TGF-"有增高趋势,且呈严重程度依赖性变化,但差异无统计学意义(P >0. 05) .与对照组相比,特应性皮炎组的IFN-!/IL-4、IFN-!/IL-17、IFN-!/IL-21、IFN-!/IL-23、IL-10/IL-17和TGF-"/IL-17均明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05),且呈严重程度依赖性降低.结论Th1、Th2、Th17和Treg细胞均参与了特应性皮炎的发生发展过程,Th2和Th17细胞处于主导地位.
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麻风治愈患者外周血IL-2和Treg的观察
目的 检测麻风治愈者外周血IL-2与Treg的水平,研究它们相互间的关系,探讨麻风患者治愈后机体免疫失衡的原因.方法 采用流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)及流式细胞仪分别检测26例麻风治愈者及25例正常对照组血清IL-2及外周血Treg细胞的水平.结果 麻风治愈者血清IL-2[(545.95±229.76) pg/mL]高于对照组[(45.03±29.05) pg/mL],外周血Treg细胞[(38.442 ±4.7 618)％]高于正常对照组[(9.881±1.616 6)％],差异均有统计学意义(P均＜0.05);麻风治愈者血清IL-2浓度与外周血Treg细胞水平呈负相关线性关系.结论 麻风患者治愈后,机体的免疫功能仍未恢复正常,其免疫失衡可能与IL-2及Treg细胞之间的异常调控有关.
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龈沟液及血清中Th17、Treg相关细胞因子在慢性牙周炎中的作用
目的:探讨Th17、Treg相关细胞因子在慢性牙周炎中的作用.方法:选择轻、中重度慢性牙周炎患者120例以及牙周健康者60例,分为正常对照组、轻度牙周炎组、中重度牙周炎组(n=60).比较各组患者的探诊深度(PD)、菌斑指数(PLI)、出血指数(BI)、附着丧失(AL);ELISA法检测各组患者血清及龈沟液中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)、白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)的水平.Pearson直线相关分析法对血清及龈沟液中相关细胞因子与牙周临床指标进行相关性分析.结果:慢性牙周炎患者各项牙周指标(PD、PLI、BI、AL)相比,轻度组、中重度组明显高于对照组(P<0.05);中重度组明显高于轻度组(P<0.05).龈沟液及血清中IL-17、IL-23水平轻度组、中重度组均明显高于对照组(P<0.05),中重度组明显高于轻度组(P<0.05).龈沟液及血清中IL-10、TGF-β水平在轻度组高,中重度组低(P<0.05).血清及龈沟液中IL-17、IL-23水平与PD、AL、PLI、BI值均呈显著正相关.结论:慢性牙周炎患者存在Th17/Treg相关细胞因子失衡现象;IL-17、IL-23与慢性牙周炎发生发展关系密切.
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Treg/Th17失衡与ITP的发生相关性研究
目的通过医学实验探究Treg/Th17失衡与ITP的关系。方法选取2010年1月~2012年2月在我院进行治疗的ITP患者28例作为实验组，再另选在我院进行体检的健康者28例作为对照组，均用流式细胞术和酶联免疫吸附法进行检测。结果实验组外周血中的Treg比例较对照组低，Th17百分率较对照组高，血浆IL-17水平两组差异不大。结论研究表明，Treg与Th17所占细胞的百分率失衡与ITP的发病机制有关，并且可能研究出新治疗方法。
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宫颈癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达
目的：观察宫颈癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达。方法：选取甘肃省人民医院妇科2014年4月至2015年4月的宫颈癌术前患者22例，宫颈癌术后患者24例和健康者29例（对照组）。通过流式细胞仪检测患者外周血中的Treg细胞，通过对Treg细胞表面标记物CD4+、CD25+及转录因子Foxp3+的标记以及对宫颈癌患者外周血中Treg细胞的分布情况进行分析。结果：宫颈癌术前、宫颈癌术后及健康人患者血中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分比分别为(4.012±0.784)%、（1.915±0.508）%、(0.643±0.375)%，差异有统计学意义( P<0.05)。结论：CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的增加可能影响机体对肿瘤的免疫效应，发生免疫逃逸而致瘤。
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类风湿关节炎患者血小板参数变化可能与BTLA、Treg表达失衡有关
目的：观察类风湿关节炎（RA）患者血小板参数和B、T淋巴细胞衰减因子（BTLA）和调节性T细胞（Treg）的变化，并初步探讨其机制。方法：选取604例RA患者及60例健康者分别为RA组和正常对照组。采用全血细胞计数仪测定患者血小板计数（PLT）、血小板比容（PCT）、血小板分布宽度（PDW）、血小板平均容积（MPW）；采用流式细胞术检测外周血BTLA、Treg表达频率；采用魏氏法测定红细胞沉降率（ESR），全自动生化仪测定免疫球蛋白（Ig）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）等炎症指标，并计算关节疾病活动度评分（DAS28）。结果：①604例RA患者血小板参数至少一项异常者367例（60.96%），2项同时异常者181例（29.97%），3项同时异常者55例（9.11%），4项全部异常者12例（1.99%）。②与正常对照组比较，RA患者ESR、hs-CRP、类风湿因子（RF）、抗CCP抗体、DAS28、IgM、IgG明显升高，外周血BTLA、Treg表达频率显著降低（P <0.01或P <0.05）；③与血小板参数正常组比较，血小板参数异常组病程、PLT、PCT、MPV、ESR、RF、hs-CRP、抗CCP抗体、IgG明显升高，BTLA、Treg明显降低（P <0.01或P <0.05）；④相关性分析显示，RA患者PLT与DAS28、ESR、hs-CRP、抗CCP抗体、IgG、Treg呈正相关，与BTLA呈负相关；PCT与ESR、hs-CRP、RF、IgM呈正相关，与BTLA、Treg呈负相关；PDW与ESR、CCP呈正相关，与BTLA呈负相关；MPV与RF呈正相关，与BTLA、Treg呈负相关（P <0.01或P <0.05）。结论：RA患者普遍存在血小板参数的异常，且与疾病的活动度显著相关，伴有血小板参数升高的RA患者病情更重，疾病活动度较高，其机制可能与BTLA或Treg表达减少，导致机体免疫紊乱，炎症因子表达失衡，造成血液系统损伤有关。
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调节性T淋巴细胞在烧创伤及脓毒症中的免疫调节作用研究进展
过去30年里,医学界对烧(创)伤和脓毒症的细胞免疫研究主要集中在巨噬细胞、中性粒细胞以及T、B淋巴细胞等.调节性T淋巴细胞(regulatory T lymphocyte,Treg)也在免疫调节中扮演重要角色,这类细胞主要包括CD4~+CD25~+Treg、自然杀伤(NK)T淋巴细胞及γδT淋巴细胞等.它们数量相对较少,但可有效调节巨噬细胞、树突状细胞及T淋巴细胞的免疫功能,进而有效调节天然免疫和适应性免疫.
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供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞对B淋巴细胞反应的影响
目的 研究供体抗原特异性CD4+CD25+调节性T细胞对受体B细胞反应的影响.方法 用尼龙毛柱法分离B细胞,用MACS磁珠分选法从Lewis大鼠脾脏淋巴细胞中分离CD4+CD25+Treg细胞,然后将分离纯化的Lewis大鼠Treg细胞负载F344大鼠抗原,以RT-PCR检测分选细胞中Foxp3基因表达水平.然后以MTT法证实获得对供体抗原的特异性.将受体Treg细胞与B淋巴细胞组成共培养反应体系,然后向共培养体系中加或不加入Anti-TGF-β1、Anti-CTLA4的阻断方法,培养5天后用ELISA发检测不同组上清中的IgA和IgG分泌水平.结果 负载供体抗原后,CD4+CD25+调节性T细胞对供体抗原的抑制率(IR)为80.5%.Treg与B细胞共培养组与阳性对照组相比较,上清中的IgG和IgA水平明显降低(P＜0.01),分别达到了(2.4±0.7)μg/ml和(6.0±1.0)μg/ml.在体系中加入Anti-TGF-β1后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.3±0.5)μg/ml和(7.1±0.9)μg/ml;加入Anti-CTLA4后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.4±0.5)μg/ml和(7.3±0.9)μg/ml;两种阻断剂同时加入后上清中的IgG和IgA的分泌水平分别达到(3.7±0.6)μg/ml和(7.5±0.7)μg/ml,三组分泌水平都较共培养组明显升高(P＜0.05),但仍明显低于阳性对照组的水平((P＜0.05).结论 负载供体抗原的CD4+CD25+Treg能够有效抑制供体抗原刺激下的B淋巴细胞反应,在这一过程中TGF-β1和CTLA4都发挥了一定作用.
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Th17/Treg失衡在急性肺损伤中的研究进展
急性肺损伤(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的发病机制十分复杂,其中失控的炎症反应是发病机制的核心.以往的研究较多集中在固有免疫细胞(如中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞),它们是急性肺损伤时主要的炎症细胞,但是不能完全解释ALI/ARDS的发病机制.研究发现机体存在的Th17和Treg两种细胞,虽功能不同,但是二者之间有着复杂的相关关系,可能存在Th17/Treg平衡.炎症反应可打破Th17/Treg平衡,这一平衡的打破作为ALI/ARDS发病的机制之一近年来引起了较多关注和研究,本文就此作一简要综述.
关键词： Th17 Treg Th17/Treg平衡 急性肺损伤 -
强直性脊柱炎患者外周血 Treg/Th17相关细胞因子检测及其意义
目的：通过观察强直性脊柱炎（AS）患者外周血 Treg、Th17相关细胞因子的变化，探讨淋巴细胞亚群 Treg 和 Th17细胞在 AS 发病机制中的作用及其与 AS 临床特征的相关性。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测42例患者和19例健康对照者外周血血清中 IL-10、TGF-β、IL-17及 IL-23水平。结果：AS 组外周血中细胞因子 IL-17、IL-23水平明显高于健康对照组（P＜0.05），但 TGF-β、IL-10升高不明显（P＞0.05）。AS 患者血清各细胞因子与疾病活动度（BASDAI）、C 反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率(ESR)无相关性。结论：AS 患者外周血中存在 Treg/Th17失衡，Treg/Th17失衡可能参与了 AS 的发生发展。
