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低温机械灌注对大鼠供肝代谢作用的影响
目的 探索缺血30 min后肝细胞代谢变化及低温机械灌注对肝细胞代谢的影响.方法 将40只SD雄性大鼠随机均分为A、B、C、D四组.A组供肝热缺血0 min+冷保存5h;B组热缺血0 min+冷保存4h+机械灌注1h;C组供肝热缺血30 min+冷保存5h;D组供肝热缺血30 min+冷保存4h+机械灌注1h.在机械灌注过程中每隔10 min记录阻力指数值.完成灌注后切取0.2g肝组织检测肝糖原含量及丙二醛(MDA)值.结果 经机械灌注处理后肝糖原含量较冷保存有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05);A、B两组MDA含量无差异(P＞0.05);D组MDA含量明显高于C组(P＜0.05);经机械灌注处理后,肝脏阻力指数值均有明显降低.结论 肝脏遭受30 min热缺血损伤后,再行机械灌注,可降低其阻力指数,增加肝细胞内细胞代谢,使得脂质过氧化物生成增多.
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LifePort阻力指数对肾移植术后移植肾功能延迟恢复预测的研究进展
肾移植是目前治疗终末期肾功能衰竭为有效的手段,边缘供肾使用增加导致肾移植受者术后移植肾功能延迟恢复(DGF)发生率增高.LifePort作为一款肾脏机械灌注转运器,以其对供肾的显著保护作用而在临床上得到广泛应用.LifePort阻力指数可作为有效评估供肾灌注程度的指标,对于判断肾移植受者术后是否发生DGF具有重要参考价值.本文就LifePort阻力指数对肾移植术后DGF预测研究进展作一综述.
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单纯冷藏与低温机械灌注保存对肝移植前后CD68、C-反应蛋白和存活情况的影响
目的：：考察单纯冷藏与低温机械灌注保存对肝移植前后CD 68、C反应蛋白( C-Reactive protein, CRP)、Fibulin-1、不良反应和存活情况的影响。方法：将犬随机分为单纯冷冻保存组20只和低温机械灌注保存组20只,单纯冷冻保存组取出的肝移植给低温机械灌注保存组,低温机械灌注保存组取出的肝移植给单纯冷冻保存组。结果：取肝时,两个组别的CD 68和CRP无显著差异(P>0.05)；移植前,两个组别的CD 68和Fibulin-1无显著差异(P>0.05),与单纯冷冻保存组比,低温机械灌注保存组移植前C-反应蛋白和Fibulin-1显著降低(P<0.01),低温机械灌注保存组移植60 min,CD 68,CRP和Fibulin-1显著降低(P<0.01)；两个组别取肝的肝病理切片正常,肝移植60 min,单纯冷冻保存组的肝脏出现较大面积的嗜中性粒细胞浸润,大面积坏死,低温机械灌注保存组正常。单纯冷冻保存组和低温机械灌注保存组术后6 h内死亡、存活≥5 d的犬例数无显著差异(P>0.05),与单纯冷冻保存组比,术后3 d内出现死亡例数显著降低(P<0.05),死亡犬均伴有不同程度的黄疸。结论：低温机械灌注保存可显著降低CD 68和CRP,改善病理坏死,提高成活率。
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单纯冷藏与低温机械灌注保存肝移植前后炎症因子和凋亡因子的变化
背景：单纯冷藏是自肝移植开展40年来临床采用的主要保存方法，虽然采用机械灌注行肝移植在国外有成功案例，在国内并没有规模性开展。目的：考察单纯冷藏与低温机械灌注保存对肝移植前后的炎症因子和凋亡因子的影响。方法：将犬随机分为供体组、单纯冷冻保存组和低温机械灌注保存组，每组30只。供体犬取出的肝经单纯冷冻保存移植给单纯冷冻保存组犬；单纯冷冻保存组犬取出的肝经低温机械灌注保存移植给低温机械灌注组犬；供体犬行安乐死弃去；低温机械灌注保存组犬取出的肝用于其他实验。随机选择单纯冷冻保存组和低温机械灌注保存组肝移植成功犬各20只进入结果分析。结果与结论：取肝时，单纯冷冻保存组和低温机械灌注保存组犬的炎症因子和凋亡因子差异无显著性意义(P>0.05)；两组P53在取肝、移植前和移植后差异均无显著意义(P>0.05)；移植前，两组白细胞介素1和白细胞介素8无显著差异(P>0.05)，与单纯冷冻保存组比，低温机械灌注保存组的肿瘤坏死因子α、巨噬细胞炎性蛋白1α、巨噬细胞炎性蛋白1β、CC趋化因子配体20和FASR显著降低(P <0.01)；移植60 min，与单纯冷冻保存组比，低温机械灌注保存组的白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、巨噬细胞炎性蛋白1α、巨噬细胞炎性蛋白1β、CC趋化因子配体20、FASR和核转录因子κB显著降低(P <0.01)。结果说明低温机械灌注保存比单纯冷冻保存明显降低炎症因子和凋亡因子，有利于肝移植。
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低温机械灌注与单纯冷保存供肾对肾移植预后影响的Meta分析
背景：目前，国内外低温机械灌注与冷保存对肾移植预后影响的文章比较多，但结论各异，且由于大多单个研究样本量存在局限，对低温机械灌注的优缺点缺乏客观评价。目的：比较低温机械灌注与冷保存对肾移植预后的影响。方法：计算机检索PubMed、sinoMed、EMbase、Web of Science、the Cochrane Central Register of Controled Trials (CENTRAL)、万方数据库及中国知网，查找并筛选出所有比较低温机械灌注与冷保存对肾移植预后影响的随机对照试验(Randomized Controled Trial，RCT)，同时手检纳入文献的参考文献，检索时限均为建库至2015年3月4日。按纳入排除标准由2位评价者独立进行RCT的筛选、资料提取和质量评价后，采用RevMan(5.3.0版)软件进行Meta分析，并采用GRADEpro3.6软件进行证据质量评价。结果与结论：共纳入文献6篇，低温机械灌注保存供肾共619例，冷保存保存供肾共620例。结果显示：低温机械灌注组原发性移植物无功能发生率、功能性移植肾功能延迟恢复发生率、移植肾功能延迟恢复发生率均显著低于冷保存组(P <0.05或0.01)。患者1年生存率、移植物1年存活率差异均无显著性意义(P >0.05)。结果表明低温机械灌注保存供体只能降低肾移植后近期并发症的发生率，维护肾脏功能，但无法提高患者1年生存率和移植物1年存活率，相比较冷保存的保存方式，低温机械灌注对供体器官的保护无长期优势。
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五味子提取物对肝移植模型犬Th17细胞和调节性T细胞失衡的调控
背景:五味子提取物的功效有很多,但五味子提取物在肝移植后的免疫改变方面所起的作用研究甚少.目的:探讨五味子提取物对肝移植模型犬的Th17细胞和Treg细胞失衡的影响.方法:建立肝移植犬模型,随后随机分成对照组10只和五味子组10只,肝移植后对照组给予葡萄糖,五味子组给予五味子水提取物.检测肝移植后1,3,6和9 d的存活率、肝功能、外周血Th17细胞和Treg细胞、外周血白细胞介素17、23、10和转化生长因子β1水平;比较2组犬的肝病理变化.结果与结论:①与对照组比,五味子组肝移植模型犬的生存期明显延长(P<0.05);②肝移植后3,6和9 d五味子组谷丙转氨酶、谷草转氨酶及总胆红素水平显著低于对照组(P<0.05);③肝移植后3,6及9 d,对照组的Treg显著降低,Th17显著增高(P<0.05),与对照组比,五味子组的Th17增高不明显,Treg无显著变化,但有增高趋势;④肝移植后3,6及9 d,与对照组相比,五味子组白细胞介素17和白细胞介素23水平显著降低,白细胞介素10和转化生长因子β1水平显著升高(P<0.05);⑤与对照组比较,五味子组可降低炎症因子浸润,改善肝的病变程度;⑥结果提示,五味子提取物可明显改善肝移植模型犬的生存状况,肝功能和供体肝存活,可能与改善Th17细胞和Treg细胞失衡有关.
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不同时间低温机械灌注对猪 DCD 模型胰岛提取质量影响研究
目的：研究不同时间低温机械灌注对提取胰岛质量的作用。方法本研究于2010-2013年在中国医科大学附属第一医院器官移植研究所进行。制备 DCD 猪模型并切取胰腺，检测并分析不同时间(0、120、180、240 min)低温机械灌注后提取胰岛的各评估指标(胰岛当量、纯度、活性及胰岛素释放指数)的变化。结果在胰岛当量、活性及纯度方面，低温机械灌注组(120 min 组、180 min 组、240 min 组)均高于非灌注组(0 min 组)，其中机械灌注180 min 组与0 min 组间比较各指标差异均有统计学意义(P <0.05)；在胰岛素释放方面呈现与其他指标相同趋势，机械灌注180 min 组胰岛素释放指数为高，且与0 min 组比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论机械灌注后提取胰岛质量明显提高，且在机械灌注180 min 时胰岛质量达佳。
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低温持续机械灌注系统在扩大标准供肾移植中早期效果分析
目的 探讨低温持续机械灌注系统(LifePort)在扩大标准供者(ECD)肾早期保存与评估中的作用.方法 回顾性分析沈阳军区总医院泌尿外科自2014年4月至2018年3月完成的64例器官捐献ECD供肾资料及实施肾移植后受者的临床资料.其中,40例供肾应用LifePort低温机械灌注系统保存(LifePort组);24例供肾应用常规静态低温保存(常规组).比较LifePort组、常规组的受者肾功能恢复情况、移植肾功能延迟恢复(DGF)的发生率、移植肾原发性无功能(PNF)发生率、急性排斥反应(AR)发生率.结果 所有患者均顺利完成手术,术中无明显手术并发症.Lifeport组术后1、4、12周的血肌酐水平低于常规组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者排斥反应均经抗排斥反应治疗后转为正常.LifePort组术后DGF发生率5.0％(2/40),AR发生率5.0％(2/40),无PNF发生.常规组术后DGF发生率25.0％(6/24),AR发生率29.2％(7/24),PNF发生率4.2％(1/24).两组DGF发生率、AR发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 低温机械灌注系统在肾移植ECD肾早期的维护及评估中具有重要作用,可降低术后DGF、AR等发生率,提高移植肾质量.
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低温机械灌注通过上调Kruppel样因子2减轻肝脏复灌后炎症反应
目的 观察低温机械灌注(HMP)中Kruppel样因子2(KLF2)与核因子κB(NF-κB) P65的表达及其对无心跳大鼠肝脏复灌后炎症反应的作用.方法 采用随机数字表法将12只成年雄性SD大鼠分为HMP组(实验组),冷保存组(CS组,对照组),每组6只.剪开膈肌,待大鼠心脏停跳30min后获取肝脏,两组肝脏分别行HMP或CS3h,后采用大鼠离体常温复灌系统模拟肝移植复灌的过程.复灌过程中,计算肝脏的灌注阻力指数,监测肝酶活性和氧耗量,记录胆汁生成量.复灌结束(2 h)后,取两组肝组织样本进行病理学检查,采用免疫印迹法检测肝组织中KLF2、NF-κB P65的相对表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的表达水平.结果 复灌0、60和120 min时,HMP组肝脏灌注液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量均显著低于CS组(P＜0.05),氧耗量均显著高于CS组(P＜0.05);HMP组肝脏的胆汁生成量高于CS组,但两组差异无统计学意义(P＞0.05).病理检查结果显示,HMP组大鼠肝脏的肝窦略扩张,有少量细胞出现水肿;CS组肝组织广泛水肿,胞浆疏松、淡染,肝窦淤血并伴有炎症细胞点状浸润.HMP组大鼠肝组织的KLF2相对表达量明显高于CS组(P＜0.05),CS组大鼠肝组织的NF-κcB P65、TNF-α和IL-1β的表达量明显高于HMP组(P＜0.05).结论 无心跳大鼠肝脏应用HMP保存可通过上调KLF2表达、抑制NF-κBP65的表达,从而减轻无心跳大鼠肝脏复灌后的炎症反应.
关键词： 大鼠 肝脏 低温机械灌注 冷保存 Krüppel样因子2 -
低温机械灌注对大鼠心脏死亡器官捐献供肝移植的保护作用
目的 建立稳定的大鼠心脏死亡器官捐献(DCD)供肝低温机械灌注后肝移植模型,探讨低温机械灌注(HMP)对大鼠DCD供肝移植的保护作用.方法 雄性SD大鼠90只,分为3组,HMP组DCD 30min后的肝脏用4℃ HTK液冷保存(SCS)2h、低温机械灌注2h后行同种异体肝移植,SCS组DCD 30min后的肝脏用4℃ HTK液冷保存4h后行同种异体肝移植,正常对照组供肝不经过热缺血经灌洗后用4℃ HTK液保存45min后行同种异体肝移植,观察低温机械灌注与冷保存对大鼠DCD供肝移植的影响.结果 HMP组肝移植术后16h血清ALT含量为(2.04±0.41)IU/g liver,低于SCS组(4.51±1.07)IU/g liver,差异有统计学意义(P=0.001);HMP组肝移植术后16h血清AST含量为(2.61±0.59)IU/g liver,低于SCS组(6.35±1.21)IU/g liver,差异有统计学意义(P=0.001);HMP组低温机械灌注2h后Krüpple样转录因子2(KLF2)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达较灌注前明显增多,SCS组在后2h冷保存前后KLF2和eNOS蛋白表达无明显变化.结论 低温机械灌注可使KLF2和eNOS蛋白表达增加,保护大鼠肝细胞,有利于提高供肝质量.
关键词： 大鼠 心脏死亡器官捐献供肝 低温机械灌注 冷保存 肝移植 -
低温机械灌注对肝脏热缺血损伤修复作用
目的 观察低温机械灌注(MP)对不同热缺血时间下心脏死亡大鼠供肝保存及修复的影响.方法 100只雄性SD大鼠随机均分为冷保存(CS)组及低温机械灌注(MP)组,每组50只;各组实验鼠肝脏分别行0、15、30、45、60 min的热缺血损伤.将MP组的阻力指数值、肝糖原及丙二醛(MDA)值纳入研究.结果 (1)热缺血30 min阻力指数(RI)为(0.14 ±0.06) mmHg/(ml·min)(1 mmHg =0.133 kPa),经机械灌注后可与缺血0 min组差异无统计学意义(P＞0.05),热缺血45 min时RI为(0.29±0.09) mmHg/(ml· min),不能经机械灌注降低阻力(P＜0.05);(2)缺血30 min以内,肝脏宏观形态及微观形态上未见明显改变,缺血45 min后肝细胞坏死明显;(3)MP组肝糖原含量低于CS组,但差异无统计学意义(P＞0.05);(4)随着热缺血时间延长,MP组丙二醛(MDA)逐渐增高,在缺血30 min时,CS组MDA为(0.17±0.02) nmol/mg蛋白,MP组MDA为(0.22±0.03) nmol/mg蛋白,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 MP对热缺血30 min以内的肝损伤具有较好的修复作用,热缺血30 min造成的肝损伤行MP时,可加重组织内氧化损伤,但能减轻炎性损伤.
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肾脏低温机械灌注的历史与现状
肾移植是治疗终末期肾病的佳手段.目前限制全世界肾移植发展的一个重要原因是供肾短缺.为扩大供体来源,越来越多的边缘供肾应用于临床,这对供体保存提出更高要求.低温机械灌注(HMP)对边缘供体的保存优于冷保存(CS),重新受到重视,现就肾脏HMP的历史与现状作一综述.
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低温机械灌注在心脏死亡供体中的应用
心脏死亡供体是未来缓解器官供需矛盾的一个重要途径,如何评价与修复心脏死亡供体器官的质量至关重要,而器官移植前对供体器官保存的主要方式是机械灌注与静态冷保存,本文围绕低温机械灌注在临床应用与基础研究方面的新进展进行综述.
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低温机械灌注对脏器保存机制的研究进展
目前国际上普遍使用的脏器保存技术分为冷保存和机械灌注两种,而低温机械灌注是未来器官保存的一个重要途径,可以缓解器官供需矛盾和提高供体质量.本文围绕低温机械灌注和低温携氧机械灌注在脏器保存方面的研究进展进行综述.
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肝脏机械灌注的研究进展
肝移植是目前治疗终末期肝病唯一的有效手段,而供肝严重短缺与等待移植名单的不断增长间的矛盾在持续扩大.肝移植的供肝保存技术中,机械灌注可降低缺血-再灌注损伤,能评估供肝质量并且较好地保存离体肝脏,甚至拯救部分边缘供肝.虽然机械灌注技术给供肝保存带来了新的希望,但其仍存在包括主要技术参数设置未达成统一化,针对肝移植的机械灌注技术尚处于临床实验阶段,广泛应用还需大样本量、多中心的临床验证等问题.本文就机械灌注的发展以及不同类型的肝脏机械灌注技术展开综述.
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机械灌注在肝移植中的应用
自20世纪60年代以来，单纯冷保存一直是临床肝脏保存的主要模式。但供肝短缺，扩大标准供肝应用增加，对供肝保存也提出了更高的要求。近年来，肝脏机械灌注相关研究日益成熟，相关设备开发也越加完善，有望成为供肝保存与修复的有效手段。目前研究较多的机械灌注主要包括低温机械灌注、低温氧合机械灌注和常温机械灌注。经动物实验证明，机械灌注可以有效地挽救部分边缘供肝，减轻缺血-再灌注损伤，促进移植肝功能恢复，且灌注液中生化指标、胆汁量等均可为供肝质量评估提供客观指标。近两三年，在欧美地区也开展了临床应用，结果令人振奋，机械灌注对“不理想”的边缘供肝的确有修复作用。目前临床应用的病例还较少，欧洲数个移植中心已经拟开展相关的多中心研究。尽管机械灌注的前景乐观，但仍存在一些问题，包括应用指征、灌注参数设置、灌注液的选择等仍未达成统一，尚需大量的临床实践进行探索，其效果也需长期观察进一步验证。机械灌注不仅是一种理想的保存和修复手段，同时为药物治疗、基因干预等手段提供了平台。理想的机械灌注可以实现“个体化”保存，大程度地保存、修复供肝。期待这一技术尽早成熟，真正服务于临床。
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Lifeport 与静态低温保存应用于器官捐献供肾保存效果的 Meta 分析
目的：系统评价 Lifeport 与静态低温保存（CS）在器官捐献供肾的保存效果。方法计算机检索Medline 数据库、Embase 数据库、考克兰图书馆（Cochrane library）、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库和维普数据库，搜集 Lifeport 与 CS 在移植肾保存效果的相关临床研究，检索时限均从建库至2015年12月31日。按照纳入与排除标准选择文献，评价质量并提取资料，并评价纳入研究的偏倚风险后，采用 Stata 12软件进行 Meta 分析。结果共纳入16个研究，包括5个随机对照试验（RCT）和11个回顾性队列研究（RCS）。Meta 分析结果显示：与 CS 组比较，（1）总体捐献供肾（TDD），Lifeport 组移植术后移植肾功能延迟恢复（DGF）发生率降低，DGF 持续时间减少、平均住院日减少以及术后1年肾存活率增加，两组术后急性排斥反应（AR）发生率与1年人存活率相当；（2）心脏死亡器官捐献供肾（DCD）：Lifeport 组术后 DGF 发生率降低，术后平均住院日减少，两组术后移植肾原发性无功能（PNF）与 AR 发生率，术后1年人、肾存活率比较，差异无统计学意义；（3）扩展标准供肾（ECD）：Lifeport 组术后 PNF 发生率降低并改善术后1年肾存活率，两组术后DGF 发生率、AR 发生率与术后1年人存活率比较，差异无统计学意义。结论Lifeport 应用于器官捐献供肾保存具有一定的优势，但受纳入研究数量及质量所限，上述研究结论尚需开展更多高质量研究予以验证。
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经改良灌注液的低温机械灌注在肝移植的临床应用
目的 探索改良后的灌注液经机械灌注对供肝质量改善的影响以及在评估供肝质量方面的价值.方法在低温机械灌注(hypothermic machine perfusion,HMP)过程中添加重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物(reteplase,rPA),记录灌注过程中肝动脉和门静脉压力、流量的变化,对灌注前后的肝脏进行穿刺活检,观察灌注后供肝肝移植后的肝功能恢复情况.结果肝动脉、门静脉压力、流量随着灌注的进行分别呈现下降和上升的趋势,一段时间后维持在稳定水平,添加rPA后动脉压力继续下降,流量继续增加.灌注供肝移植后肝功能恢复较好.结论使用改良后的灌注液对供肝机械灌注,在临床上有明确的安全性和有效性,可以降低灌注过程中血管阻力,有助于供肝的修复,同时也可以用于初步评估供肝质量.
关键词： 改良灌注液 重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物 低温机械灌注 肝移植
