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交联效应在抗IgE抗体诱导致敏嗜碱粒细胞脱颗粒实验中的应用
目的将二个IgE分子在靶细胞表面通过双价配体产生交联,这一诱导Ⅰ型变态反应的理论,运用到由抗IgE诱导致敏嗜碱粒细胞组胺释放试验(histamine release of basophils test,HRBT)中,以获得组胺(histamine,HA)的高释放率.方法将IgE的浓度与抗IgE的浓度按不同的比例进行组合,用微量HA荧光测定法观察各配对组对人血细胞中嗜碱粒细胞(basophils,BOS)释放HA的影响.结果交联组的HA释放率明显高于对照组,t=4.604,P<0.01.结论当IgE:抗IgE的浓度=2:1时,BOS的HA释放率随该比值的增高而增高;若该比值倒置,则HA释放受到抑制.
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饮用水中痕量硒的荧光测定改进法
目前我国主要采用2、3-二氨基萘分光光度法测定水中硒含量[1,2].该方法灵敏、准确、重现性好,能测定不同价态硒的含量.但是常量分析操作繁琐而且使用试剂量大,不单成本高还严重污染环境,危害操作者健康.我们针对上述问题进行了方法改进,使用管式消解器消化样品,使样品前处理全部在1根试管内完成,避免了硒在转移过程的损失和污染,简化了操作,减少了试剂用量,大大增加了试样分析量,而且灵敏度、精确度及准确度均有提高.
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灌流液镁浓度对测定谷氨酸引起的培养神经细胞内钙浓度的影响
Mg2+对谷氨酸(glu)受体亚型N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体通道的阻断作用,早在80年代就已由电生理实验证实,此后通过荧光测定细胞内游离钙浓度[Ca2+]i 得到进一步证实.令人困惑的是,在研究glu对离体神经细胞作用的文献中, 所用缓冲液的Mg2+浓度却是0、0.6、0.9、1.3、2.4mmol/L不等.因此,我们在研究glu对培养神经细胞[Ca2+]i影响的工作中,首先须了解应如何确定细胞外缓冲液中Mg2+的浓度.
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原子荧光法测定生活饮用水中汞
目的:探讨原子荧光法测定生活饮用水的汞。方法将水中汞在酸性介质中消解,以0.2%硝酸为载流,被20g/L硼氢化钠还原成为原子态,用氩气为载气将汞引入原子化器,经汞空心阴极灯光源激发跃迁到较高能级上,并在回到较低的能级时辐射出荧光,荧光的强度与水中汞浓度呈正比。结果方法的检出限为0.0013ug /L,线性范围为0.1-10.0ug/L,相对标准偏差为1.5%~3.1%,回收率为95.6%~104.2%。结论应用原子荧光测定生活饮用水中汞具有操作简便、毒性小、灵敏度高、精密度好,回收率高,适用于生活饮用水中汞的常规测定。
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氢化物发生—原子荧光测定水中的砷——AFS—230E原子荧光光度计的应用
AFS—230E型原子荧光光度计是江苏省政府财政转移支付项目给省内34个县配备的仪器.应对该仪器充分合理应用.砷化合物有毒性,成人摄入100mg即可中毒,砷可由工业废水排放或杀虫剂的使用而污染水体.砷通过饮食或皮肤暴露进入人体中.砷也有致癌作用.砷的检测方法主要有:砷斑法,但灵敏度低;银盐法,准确可靠,但操作烦琐,灵敏度低;原子吸收分光光度法,灵敏度低,干扰大;氢化物发生原子吸收分光光度法,检测范围窄.氢化物原子荧光法是近年来发展起来的分析砷的新方法,它具有灵敏度高,干扰少,操作简便快速的优点.本文就该仪器在水中砷的测定作了一些研究.
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常用乙型病毒性肝炎标志物的临床应用
血清乙型肝炎标志物[1](两对半定性测定)始于20世纪80年代中期,对乙型肝炎疾病的诊断、病情监测、疗效龆察起到了一定的作用.随着检验医学的发展,乙型肝炎血清HBV-DNA荧光定量测定已应用于临床,大大弥补了酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测的不足;同时乙型肝炎两对半的定量检测可与血清HBV-DNA荧光测定相互补充,综合评价患者病情与药物疗效.
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氢化物-原子荧光法测定人体血、尿、发中的痕量硒
硒是人体必须的微量元素,参与人体许多组织的重要代谢,硒的缺乏会引起人体免疫力下降而导致各种疾病[1].人体硒的检验技术比较复杂,只有少数单位采用分子荧光法测试,其所用仪器昂贵,试剂有致癌性,操作繁琐且需避光,因此限制了此项工作的开展.近年来,我们在查阅了国内外有关文献的基础上,建立了氢化物原子荧光测定人体血、尿、头发中痕量硒的检验方法.该方法全部采用国产仪器和试剂,操作简单、快速、精密度好,灵敏度高,该方法的小检出限达到0.42μg/L,较分子荧光法提高了数10倍,是痕量金属分析的一种理想方法,但目前该方法在我国卫生检验行业中的应用尚少.我们将其原理、仪器等有关技术指标介绍如下.
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磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响
目的测定磷酯酶C(phospholipase C, 简称PLC,下同)对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制.方法将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura-2/AM进行负载,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度[Ca2+]i.结果以健康成人血为样品时,经生理盐水、ASA 334 μ mol*L-1 、2.5、3.75、5、10和20 U PLC*ml-1处理后的血小板,在静息状态下测得的胞质游离[Ca2+]i浓度( nmol * L-1 )分别为152.55±15.07, 131.63±15.58, 140.27±12.03, 139.48±1.73, 121.11±9.58, 116.62±15.96和107.20±17.07, 而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离[Ca2+]i(nmol * L-1 )分别为902.62±94.74, 687.99±62.86, 810.99±72.37, 701.73±21.37, 429.67±71.59, 342.82±44.86和263.27±25.46.以生理盐水作为对照,ASA 334 μmol * L-1、2.5、3.75、5、10和20 U PLC*ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质[Ca2+]i的抑制率I(%)分别为25.83, 10.58, 25.04, 58.86, 69.84, 79.19.以5例高血压病人的血液为样品时,同样条件下,测得10 U PLC*ml-1对5例高血压病人血小板激活状态下胞质[Ca2+]i的抑制率IR(%)分别为74.25, 73.48, 61.32, 82.87, 70.60.结论无论是健康成人,还是高血压病人,PLC对静息状态下的血小板胞质[Ca2+]i均具有明显的影响(P<0.05),且对ADP激活后的血小板胞质游离[Ca2+]i的升高均具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性,表明PLC具有抑制血小板内钙释放作用.这可能是PLC抗血小板聚集作用的重要原因之一.
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水稻叶面喷硒提高大米中硒含量的防癌研究
目的:提高大米中的硒含量和生物转化无机硒为天然的有机硒并用于防癌保健.方法:一定浓度的无机硒溶液喷施于水稻叶面法和硒的2,3-二氨基萘荧光测定法.结果:喷硒田大米中的硒含量为2.701±0.569μg/g,显著性地高于对照田(0.054±0.011μg/g),P<0.001.绝大部分的无机硒已被生物转化为天然的有机硒,其含量(2.676±0.569μg/g)占总硒的99.07%.结论:在水稻吐穗扬花的初期,将一定浓度的无机硒溶液喷施于水稻叶面上,能显著地提高大米中的硒含量,无机硒能被转化为天然的有机硒,此有机硒可用于防癌保健.
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细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性测定方法进展
细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性测定是研究机体细胞免疫功能的重要方法之一.传统的51Cr释放法虽然有效,但也存在某些不足.随着荧光标记、流式细胞分析和报告基因等技术的广泛应用,促进了寻找灵敏可靠、简单易行的非同位素法测定CTL活性的方法学研究.本文概述近年来在CTL活性测定方法上的研究进展和各种方法的原理及应用特点.
关键词: 细胞毒T淋巴细胞(CTL) 活性测定 荧光测定 比色测定 -
金葡球菌对亲水或疏水性氟喹诺酮摄入的研究
本实验用荧光测定法研究金葡球菌对环丙沙星、托氟沙星的摄入及能量抑制剂对细菌摄入药物的影响.结果显示:耐药菌对环丙沙星摄入量低于敏感菌,两者对托氟沙星的摄入量没有显著性差异;加入能量抑制剂后,所有细菌对环丙沙星的摄入量均有不同程度增加,除2株敏感菌外,细菌对托氟沙星的摄入没有明显增加.诱导菌对两种药物的摄入量均低于母株:能量抑制剂对细菌摄入环丙沙星、托氟沙星的影响明显不同.表明摄入减少是细菌对两类氟喹诺酮耐药的机制之一,而泵出增加导致的摄入减少仅适合亲水性氟喹诺酮,对疏水性氟喹诺酮目前还难以定论.
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大肠杆菌体内氟喹诺酮类药物耐药机制的研究
目的研究临床分离的大肠杆菌敏感株和多重耐药菌株体内的氟喹诺酮类药物积聚情况与耐药性的关系.方法采用荧光测定法测定亲水性和疏水性氟喹诺酮类药物在临床分离的大肠杆菌敏感株及多重耐药株菌体内的蓄积量及葡萄糖与能量抑制剂氰氯苯腙(CCCP)对氟喹诺酮类药物在菌体内蓄积量的影响.结果大肠杆菌敏感株和多重耐药菌株内的氟喹诺酮类药物蓄积浓度呈能量依赖性降低,以多重耐药株菌内的蓄积浓度下降明显.加入能量抑制剂后,多重耐药株菌内的亲水性氟喹诺酮类药物蓄积浓度上升近3倍;而疏水性氟喹诺酮类药物妥舒沙星的稳态蓄积浓度明显低于亲水性氟喹诺酮类药物蓄积量的上升幅度.结论能量依赖的主动泵出可能是大肠杆菌对其耐药机制之一,蓄积量减少导致的耐药在亲水性氟喹诺酮类药物中更为重要.
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金黄色葡萄球菌对亲水性氟喹诺酮类药物摄入的研究
为了解金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮的耐药机理,作者用荧光测定法研究了细菌对洛美沙星、氧氟沙星的摄入以及能量抑制剂对两药摄入的影响.结果显示:耐药菌SAR、SA701、SA687对上述两种药物的摄入量均低于敏感菌SA2、SA3、SA4;加入能量抑制剂后上述细菌对药物的摄入量均有不同程度的增加.诱导菌对上述两药的摄入量均低于母株,加入能量抑制剂后,其摄入量增加非常明显,但仍未达母株稳态浓度.由此表明细菌对氟喹诺酮摄入减少是细菌对其耐药的机理之一,但泵出增加导致的细菌内药物浓度减少,在不同菌株的耐药机理中所占的地位不同.
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阿齐沙坦在大鼠血浆中的药动学研究
目的 建立简单、快速、灵敏的测定大鼠血浆中阿齐沙坦血药浓度的HPLC-荧光分析方法.方法 色谱柱为Aglient Epilent plus C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.1%磷酸水溶液-甲醇(35∶65),激发波长为265 nm,吸收波长为378nm.结果 血浆中内源性物质对待测物无干扰;线性范围为0.1~100 μg/mL,R2=0.999;定量下限为0.1 μg/mL;高中低浓度样品提取回收率在87.76%~95.65%,批内批间精密度RSD在0.86%~1.87%,相对误差RE均小于5%,符合相关生物样品检测标准.SD大鼠ig给予2.0 g/kg的阿齐沙坦酯钾后,阿齐沙坦在大鼠体内AUC0-t为(5451.94±297.96) μg/L.h,Cmax为(258.01±49.75) μg/mL.结论 建立了专属性强、灵敏度高、重复性好的HPLC-荧光分析方法,可用于阿齐沙坦在大鼠血浆中血药浓度测定.
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用荧光猝灭法测定苦参碱和氧化苦参碱
用丙二酸和醋酐缩合自制乙酸(β-二羧基α-甲基)乙烯酯荧光试剂,利用苦参碱、氧化苦参碱对其有定量猝灭作用,达到测定苦参碱、氧化苦参碱的目的.其线性范围为2×10-9~8×10-6 g/mL,低检测限苦参碱为1.4×10-11 g/mL,氧化苦参碱为4.5×10-12 g/mL,测得苦参和广豆根中苦参碱的含量分别为0.16 %和0.11 %,氧化苦参碱的含量分别为2.5 %和2.1 %.
关键词: 乙酸(β-二羧基α-甲基)乙烯酯荧光试剂 苦参碱 氧化苦参碱 荧光测定