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影响肺炎克雷伯菌粘附上皮细胞作用的研究
目的:研究不同理化及生物因素对肺炎克雷伯菌粘附宿主细胞的影响,探讨其粘附宿主细胞的可能机制.方法:用肺炎克雷伯菌临床分离株K.pnueumoniae 03183(K.p03183)建立粘附宿主细胞模型,通过结晶紫染色及扫描电镜观察其粘附效率;以不同理化及生物因素预处理K.p 03183,平板菌落计数法观察上述因素对K.p03183粘附细胞的影响;用基因芯片技术,检测HMGN2蛋白预处理细菌对于其粘附相关基因表达的影响.结果:K.p03183可粘附至A549、T24、HeLa等3种上皮细胞系,其粘附率与E.coli25992接近;氯化锂和盐酸胍、高碘酸钠及热预处理可明显降低K.p 03183对于A549和T24的粘附率(P＜0.05);同时,胃蛋白酶及HMGN2蛋白预处理K.p03183,也可抑制其对A549和T24的粘附(P＜0.01);但胰蛋白酶预处理却能增加细菌对于A549细胞的粘附(P＜0.05);同时,HMGN2还可通过上调dksA基因表达,从而干扰细菌粘附细胞.结论:肺炎克雷伯菌可能借助细胞壁及其表面蛋白和碳水化合物等成分粘附至宿主上皮细胞,通过非共价键结合表面蛋白或消除碳水化合物成分,抑制细菌粘附至宿主细胞.
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HNP对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响
目的:探讨呼吸道抗感染防御机制,观察人中性粒细胞α￣防御素(HNP)对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响.方法:从人中性粒细胞分离纯化HNP.A549细胞与HNP(20μg·ml-1)及两株肺炎克雷伯杆菌临床分离株共同孵育4小时,用平板培养菌落计数法测定与细胞粘附的活菌数.结果:在HNP存在的情况下,Kp03'83株细菌对肺上皮细胞的粘附提高了12倍(P<0.01),Kp03116株细菌对上皮细胞的粘附提高了5倍(p<0.01)结论:HNP显著增强肺炎克雷伯杆菌粘附于呼吸道上皮细胞,可能有利于呼吸道清除细菌.
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哮喘大鼠血清刺激下内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达
近十五年人们才发现炎症是哮喘发病的病理基础。它以白细胞浸润为主要特征，过程由白细胞与内皮细胞表面粘附分子介导，ICAM-1就是其中之一。我们在前期活体动物实验中证实了哮喘动物肺组织中内皮细胞－白细胞粘附现象显著，并且肺组织ICAM-1高表达。这有可能是发病过程中ICAM-1大量表达于内皮细胞表面，导致内皮细胞－白细胞粘附增加的结果。本实验采用肺组织机械分离法体外培养大鼠肺内皮细胞，将哮喘病理血清与内皮细胞共同孵育，用于细胞粘附的体外研究。借助间接免疫荧光标记技术及流式细胞分离法，我们首先研究了受哮喘病理血清刺激后肺微血管内皮细胞表面ICAM-1表达的情况。结果发现：血清孵育的内皮细胞ICAM-1表达比用DMEM培养基培养的内皮细胞表达量高；哮喘血清刺激4 h后ICAM-1表达量达到峰值，长于4 h则很快降低；正常血清或培养基处理的内皮细胞表达量持续在一个低水平。
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肺癌细胞与胞外基质选择裱衬表面粘附力学的研究
肿瘤细胞与细胞外基质的粘附特性与肿瘤的侵袭转移密切相关，作者力图揭示人肺癌细胞相应的生物力学和生物流变学特征。采用微管吸吮技术定量测定体外培养的低转移人肺腺癌(PAa)细胞和高转移人肺巨细胞癌(PG)细胞与细胞外基质重要组份胶原蛋白Ⅳ和层粘连蛋白(LN)的粘附力学特性。结果表明：与胶原蛋白Ⅳ裱衬面的粘附力,在PAa、PG细胞均较裱衬前增加,但在较低胶原浓度(1.00μg/ml,2.00μg/ml)时PAa细胞的粘附力增加幅度大于PG细胞;与LN和固定浓度(2.00μg/ml)胶原蛋白Ⅳ的复合裱衬面的粘附力为PAa细胞大于PG细胞,在较低LN浓度,PAa(0.625μg/ml)、 PG(0.625μg /ml; 1.25μg /ml)细胞粘附力相对降低,尤以PG细胞中的降低程度和幅度为大。因此，癌细胞与细胞外基质的粘附和去粘附行为主要通过膜受体介导,从而影响癌细胞生物学特性及侵润转移能力。
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血小板功能测定
1 简介血小板在止血和血栓中的作用当血管损伤时,血小板会迅速粘附到损伤处,聚集形成由纤维蛋白固定的止血块.在微血管损伤处及破裂的动脉粥样硬化斑块处也会发生类似的过程,终形成血小板-纤维蛋白血栓,引发动脉硬化症的血栓性并发症.
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血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂在冠心病中的应用进展
富含脂质动脉粥样斑块破裂使内皮下斑块成分暴露于血液循环中,血小板在此部位粘附和聚集,导致血栓形成引起心肌缺血或心肌梗死(MI).
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心肌缺血再灌注损伤中一氧化氮与中性粒细胞之间的关系
血管内皮细胞(EC)为衬贴于心血管内腔表面的单层扁平细胞,在保持血管内环境的完整性,防止白细胞及血小板聚集与粘附,维持存在不形成血栓的血管内膜表面方面有十分重要的作用.血管内皮细胞以它独特的分布,与血液中的中性粒细胞(PMN)有着密切的联系.PMN表面有两个表面分子家族,即CD11/CD18复合物和淋巴细胞导向受体糖蛋白,它们参与了与EC粘附的过程.
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人核因子κBp65核定位信号缺失突变对A549细胞恶性表型的影响
目的 鉴定人核因子κB(NF-κB) p65核定位信号(NIs)缺失突变质粒即pcDNA3.1(+)-NF-κBp65△NLS(简称NF-κBp65△NLS)的表达功能,以及其对低表达NF-κBp65的A549细胞株即A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移和粘附能力的影响.方法 培养人A549/NF-κBp65 shRNA细胞株,分为对照组、转染pcDNA3.1(+)组、转染NF-κBp65△NLS组.应用间接免疫荧光、实时荧光定量-PCR和Western blot技术检测NF-κBp65的细胞内定位及mRNA、蛋白表达水平的变化;应用MTT、Transwell和细胞粘附实验分析转染NF-κBp65△NLS质粒对A549/NF-κBp65 shRNA细胞增殖、迁移、粘附能力的影响.结果 成功构建人NF-κBp65△NLS真核表达质粒.转染NF-κBp65△NLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞与对照组及转染pcDNA3.1(+)组比较,NF-κBp65 mRNA表达水平明显上调(10.63±0.84比1.04±0.21和1.23±0.22,P＜0.01),NF-κBp65蛋白表达水平明显升高(1.07 ±0.06比0.53±0.02和0.59±0.04,P＜0.01),且NF-κBp65蛋白主要位于细胞浆内,在肿瘤坏死因子α刺激后NF-κBp65蛋白并未明显进入细胞核.与对照组及转染pcDNA3.1(+)组比较,转染NF-κBp65 △NLS质粒的A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力均有不同程度增强.结论 通过基因突变技术构建无NLS的NF-κBp65真核表达质粒,可明显增强A549/NF-κBp65shRNA细胞株内NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达水平,并使NF-κBp65蛋白定位于细胞浆内;同时,细胞浆内过表达NF-κBp65△NLS蛋白可明显增强A549/NF-κBp65 shRNA细胞的增殖、迁移和粘附能力,提示滞留于细胞浆内的NF-κBp65仍可通过影响NF-κB信号通路相关蛋白参与调节肺癌细胞的生物学行为.
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子宫内膜异位症与胚胎着床
胚胎着床的过程极为复杂,包括定位、粘附和侵入3个阶段.着床仅发生在一个极其有限的时间与空间范围内(即所谓的"着床窗"),需要子宫内膜和胚胎发育的同步化、相互作用和配合.目前,胚胎着床机制尚未充分阐明,但胚胎成功着床的要素包括:高质量的胚胎、有接受性的子宫内膜和适宜的内分泌环境.
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粘着斑激酶--肿瘤治疗的新靶点
粘着斑激酶FAK(focal adhesion ki-nase)是一种非受体酪氨酸激酶,通过多种信号通路在细胞周期调控、细胞骨架组装、粘附、迁徙、运动能力、生长调节、生存、血管生成等多方面发挥了重要作用.研究发现FAK在多种上皮及血液肿瘤中高表达或过度激活,参与了肿瘤的发生、发展、侵袭转移、化疗耐药及放疗耐受.FAK已经成为新的肿瘤治疗靶点.本文将综述FAK在这方面的进展.
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人核因子-κBp65 shRNA慢病毒载体构建及对肺癌细胞恶性生物学行为的影响
背景与目的核因子-κB作为重要转录因子，与多种恶性肿瘤的发生发展有着密切联系，直接或间接抑制NF-κBp65的表达可逆转肿瘤细胞生物学行为。构建人核因子-κBp65基因shRNA重组质粒，感染A549细胞并筛选出稳定细胞株，对其迁移、粘附能力进行鉴定。方法设计并合成人核因子-κBp65的乱序对照序列（scramble）和干扰序列（shRNA）构建重组质粒，在5’端引入一个BamHI位点，3’端引入一个XhoI位点和EcoRI位点；感染A549细胞并由嘌呤霉素做稳转株的筛选；应用Western blot、qRT-PCR技术检测NF-κBp65的干扰效果及IκBα蛋白表达水平的变化；Transwell、MTT法分析其对A549细胞迁移、粘附能力的影响。结果成功构建重组质粒并筛选出A549/NF-κB p65 scramble稳转株和A549/NF-κB p65 shRNA稳转株；A549/NF-κB p65 shRNA稳转细胞株与A549/NF-κB p65 scramble稳转细胞株及A549细胞相比NF-κBp65的mRNA、蛋白表达水平均下调；IκBα蛋白水平明显下调；细胞迁移能力及粘附能力均降低。结论本实验通过RNA干扰技术构建的重组慢病毒可有效抑制NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达水平；抑制NF-κBp65可明显降低A549细胞的迁移和粘附能力。
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靶向MMP-9脱氧核酶抑制人肺腺癌细胞的粘附与迁移的实验研究
背景与目的 脱氧核酶(DNAzyme,Deoxyribozyme)具有高效的催化活性和特异的序列识别能力,可特异性切割靶RNA使其失去生物学活性,从而抑制靶RNA的基因表达.本实验通过探讨靶向MMP-9的脱氧核酶对人肺腺癌A549细胞的细胞粘附与迁移能力的影响,为使用脱氧核酶抑制肺癌的浸润转移提供理论依据.方法 设计靶向MMP-9的脱氧核酶,应用oligofectamine将脱氧核酶转染到A549细胞中,采用Western blot方法榆测细胞中MMP-9的表达,以及利用细胞粘附与迁移试验观察脱氧核酶干预后细胞粘附与迁移能力的变化.结果 在靶向MMP-9脱氧核酶干预后,细胞中MMP-9的表达较对照组与空白组显著减低(P<0.01),同时发现细胞的粘附率、迁移速度均显著降低(P<0.01).结论 靶向MMP-9的脱氧核酶能够抑制人肺腺癌A549细胞中MMP-9的表达,并且有效阻止细胞的粘附与迁移.
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兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体对牛视网膜血管内皮细胞粘附、移行的影响
目的探讨蛇毒制剂兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体23C6对血管内皮细胞粘附移行的影响. 方法以玻璃粘连蛋白 (Vn)、胶原包被培养皿,牛视网膜血管内皮细胞中加入不同浓度的兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体,孵育60 min 后进行细胞粘附分析和移行分析.应用透射电子显微镜,对兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体干预后的牛视网膜血管内皮细胞进行凋亡检测. 结果兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体均呈剂量依赖性抑制牛视网膜血管内皮细胞对Vn、胶原的粘附和移行.兆科降纤酶半数抑制浓度(IC50)小于0.05 μmol/L,而抗αvβ3整合素抗体的IC50高于2.5 μmol/L. 0.1 μmol/L的兆科降纤酶即可抑制81.8%的内皮细胞对Vn的粘附,10 μmol/L抗αvβ3整合素抗体则可抑制76.3%.经两者干预后的牛视网膜血管内皮细胞内均可见典型的凋亡小体. 结论兆科降纤酶和抗αvβ3整合素抗体能显著抑制牛视网膜血管内皮细胞对细胞外基质的粘附和移行,其机理可能在于诱导牛视网膜血管内皮细胞凋亡.
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牙周可疑致病菌对口腔黏膜上皮的粘附和侵入
牙周可疑致病菌可以通过细胞内途径、细胞旁途径以及细菌的某些表面蛋白侵入口腔黏膜上皮.侵入上皮组织后,细菌仍能适应环境的改变而生存,同时引起宿主细胞的一系列反应.本文对牙周可疑致病菌粘附、入侵口腔上皮的可能机制,以及入侵后引起的自身和上皮细胞改变作一综述.
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氢键在细菌粘附中作用的研究
氢键是一种分子间作用力,在无机物、有机物和生物体中广泛存在,它具有特定的结构特点和生物学功能,在细菌对牙齿及其他生物体表面非特异性粘附机制中起十分重要的作用.本文就氢键在粘附中的作用及在生物体内的检测方法作一综述.
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口腔中影响白色念珠菌粘附的因素
念珠菌粘附于宿主上皮细胞是其在宿主中集落形成及入侵体内的第一步。口腔内唾液、共生性细菌、细胞外基质及SIgA等均对白色念珠菌的粘附有影响。本文总结了这些影响因素的研究进展，提出了阻断白色念珠菌粘附口腔上皮细胞的措施。
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免疫牛乳清对变形链球菌粘附的影响
目的:研究免疫乳清对变形链球菌蔗糖依赖性粘附的影响。方法:用来源于葡糖基转移酶过表达株B-29-33免疫孕牛获得的免疫牛奶和从未免疫孕牛获得的对照牛奶,分别观察两种乳清在5种不同剂量条件下的细菌粘附率，并用扫描电镜观察粘附的形态学变化。结果:对照乳清在5种剂量条件下，变形链球菌的粘附率基本无变化。免疫乳清随着剂量的增加，细菌的粘附率呈下降趋势，从100μl时的84.37%，下降至900μl时的58.59%。扫描电镜下见免疫乳清组细菌的细胞清晰，基质少。对照乳清组细菌的细胞则被大量的胶冻状基质包裹。结论:免疫乳清可以抑制变形链球菌的蔗糖依赖性粘附。
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钙对变形链球菌MT6R(血清型c)表面蛋白P1粘附的影响
目的:测定变形链球菌MT6R菌株(血清型c)表面蛋白P1在钙溶液中对唾液包被的羟磷灰石(S-HA)的粘附量,探讨钙对蛋白P1粘附的影响.方法:将变形链球菌MT6R菌株(血清型c)表面蛋白P1经131碘标记,分别测定其在钙浓度为0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5以及2.0 mmol/L的溶液中标记物131碘-蛋白Pl对唾液包被的羟磷灰石(S-HA)的粘附量.结果:131碘-蛋白Pl在不同钙离子浓度的溶液中粘附量不同(P＜0.01),当钙浓度从0.1 mmol/L增加到1.0 mmol/L时,蛋白P1在S-HA上粘附量迅速提高;当钙浓度在1.0～2.0 mmol/L时,蛋白P1粘附量增加不明显.结论:钙参与了变形链球菌MT6R(血清型c)表面蛋白P1对S-HA的粘附,且钙离子介导的粘附能力具有饱和性.
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腹膜腔注射肝素对ACC-M细胞在裸鼠肺、肝组织分布的影响
目的通过观察腹膜腔注射肝素对ACC-M细胞在裸鼠肺、肝组织的分布特点,研究其对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用.方法实验裸鼠腹腔注射肝素后,经尾静脉注入氚标胸腺嘧啶核苷(3HTdR)标记ACC-M细胞,分别检测注射后2 h、6 h、18h肺、肝组织单位重量的每分钟同位素脉冲数(CPM).结果裸鼠单位重量肺组织3H-ACC-M在不同时间由高到低依次是空白对照组2 h、6 h、18 h,肝素组6 h、2 h、18 h.相同时段肝素组明显低于对照组,两组间有显著性差异(P＜0.001).单位重量肝组织3H-ACC-M在不同时间由高到低依次是空白对照组为2 h、6 h、18 h,肝素组为2 h、6 h、18 h,相同时段两组间无显著性差异(P＞0.05).结论肝素腹腔注射后可减少肺组织内ACC-M细胞数量,但对相同时段肝组织内ACC-M细胞数量无显著影响,肝素可能在抑制腺样囊性癌肺转移中发挥作用.
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茶多酚影响致龋菌在唾液获得性膜粘附的研究
目的:研究茶多酚对致龋菌在唾液获得性膜粘附的影响,进一步探讨茶多酚的防龋机制。方法:采用唾液包被羟磷灰石(S-HA)形成实验性膜的体外模式,以变形链球菌和粘性放线菌作为主要致龋菌,用茶多酚分别处理S-HA和细菌,观察细菌在S-HA粘附的情况。结果:两组实验中,茶多酚溶液浓度为1～4 mg/ml时都能显著抑制变形链球菌和粘性放线菌在S-HA上的粘附,且抑制作用随茶多酚溶液浓度的升高而逐渐增强。结论:茶多酚能有效抑制主要致龋菌对唾液获得性膜的粘附。
