首页 > 文献资料
-
清热化瘀方对缺氧损伤神经干细胞BDNF、GDNF表达的影响
目的:观察大鼠缺氧损伤神经干细胞内BDNF、GDNF蛋白表达的变化以及清热化瘀方对其表达的影响.方法:建立缺氧损伤神经干细胞模型并制备清热化瘀方血清,应用免疫细胞化学技术检测BDNF、GDNF蛋白在缺氧损伤神经干细胞中的表达变化.结果:缺氧损伤后神经干细胞内出现BDNF、GDNF表达,清热化瘀方血清干预后能够促进二者的表达(P＜O.05或0.01).结论:清热化瘀方血清可上调GDNF、BDNF在缺氧损伤神经干细胞内的表达.
关键词： 神经干细胞 缺氧损伤 清热化瘀方:GDNF BDNF -
脑微血管内皮细胞缺氧模型转化生长因子β1表达与脑溢安的干预
背景:临床及动物实验证实脑溢安能促进脑出血急性期血肿吸收及神经功能恢复,提高生活质量.目的:观察脑溢安血清对体外缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞转化生长因子β1 mRNA 表达的影响.方法:用分离培养的大鼠脑微血管内皮细胞移入厌氧培养箱培养18h 建立缺氧损伤模型,并随机分为正常组、模型组、正常血清组及含脑溢安血清组.正常组为同一批正常培养的脑微血管内皮细胞;模型组将正常培养的细胞放入厌氧培养箱内培养18 h ;正常血清对照组细胞在培养液中加5%正常血清后,放入厌氧培养箱中培养18 h ;脑溢安血清组细胞在培养液中加5%脑溢安血清后,放入厌氧培养箱内培养18 h.结果与结论:缺氧培养使脑微血管内皮细胞存活数量减少,其表达的转化生长因子β1 mRNA 增强,而脑溢安血清能明显增加脑微血管内皮细胞存活数量,降低转化生长因子β1 mRNA 表达水平(P < 0.05).说明脑溢安血清下调转化生长因子β1mRNA 的表达可能是其抑制脑微血管内皮细胞的凋亡对缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用机制之一.
-
重复高压氧预处理对大鼠皮质神经元缺氧损伤的影响
目的 观察重复高压氧预处理对大鼠皮质神经元缺氧损伤的影响.方法 将对数生长期皮质神经元分为四组:正常对照组(C组),细胞置常规培养箱内培养；高压氧预处理组(P组),培养细胞行0.35 MPa、2h高压氧预处理,1次/d,连续3d；缺氧处理组(H组),细胞置三气培养箱内培养4h,设置培养条件为95％N2、5％ CO2；高压氧预处理加缺氧处理组(PH组),高压氧预处理后行缺氧处理,条件设置同上.四组细胞均在缺氧处理4h后行MTT和彗星(单细胞凝胶电泳)试验.结果 C组与H组之间细胞活力和尾矩的差异有统计学意义(P＜0.05)；与H组相比,PH组细胞活力明显增高(P＜0.05),尾矩明显降低(P＜0.05).结论 重复高压氧预处理提高皮质神经元活力,降低细胞的DNA损伤程度,对缺氧损伤的皮质神经元具有保护作用.
-
枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞保护作用
目的:研究枸杞多糖对缺氧损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12的保护作用.方法:采用氯化钴(CoCl2)建立PC12细胞,通过测定受损细胞给药后的活力、受损细胞LDH泄露量和受损细胞ROS生成量及线粒体膜电位,研究枸杞多糖对受损细胞的保护作用.结果:枸杞多糖能显著增加缺氧模型细胞的活力;降低细胞LDH泄漏量;增强缺氧损害细胞的SOD活性;并增加缺氧损害细胞线粒体膜电位.结论:枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞具有明显的保护作用.
-
心肺复苏后脑缺血—再灌注损伤
心跳呼吸骤停后血粘滞度增高,微血栓形成是影响心肺复苏(CPR)后脑组织再灌注的重要原因.缺血时的组织低氧可使细胞内外环境发生重大变化,细胞反应可表现为坏死和凋亡,同时细胞也启动修复机制对缺氧损伤进行自我修复[1].持续缺血可使脑组织损害加重,及时恢复血流有助于逆转损害的神经元,但也可导致脑微血管损害,出现血管源性脑水肿、出血,加重脑损害.笔者就CPR后脑微循环障碍及其缺血-再灌注损伤可能发生的机制作以下综述.
-
缺血性结肠炎102例临床分析
缺血性结肠炎(ischemic colitis,IC)是由于肠道血液供应不足或回流受阻致肠壁缺氧损伤引起的急性或慢性炎性病变.临床表现有腹痛、便血及腹泻,严重者可致肠坏死、穿孔、腹膜炎及感染中毒性休克,是下消化道出血的原因之一.现将2003年1月至2010年12月102例诊断为IC患者的临床特点及内镜表现报道如下.
-
心脏不停跳心内直视手术的现状与进展
1 概述传统的心脏停跳心内直视手术存在缺血-再灌注损伤的缺点,影响术后心功能的恢复.尽管体外循环的设备和灌注技术取得了巨大进步,但体外循环仍然是一种非生理性灌注:血液有形成分的损伤破碎,血浆蛋白质的变性,补体和白细胞的激活以及氧自由基参与的炎症反应,血细胞的沉积和微血栓的形成,都可以造成微循环的灌注不良,导致组织的缺血、缺氧损伤;血液稀释、电解质失衡等有害因素均对心肌及机体造成损伤[1].
-
心肌酶测定对窒息新生儿缺氧损伤的评价
新生儿窒息易致多脏器损害,为观察窒息程度与窒息时间对心肌酶(SE)的影响,并探讨SE改变与心、脑等重要脏器损伤的关系,本文对1997年1月～1999年12月收住本院产科的105例窒息新生儿进行回顾分析,现将结果报告如下.对象与方法
-
PTD-SOD对Na2S2O4诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护和修复作用研究
目的 研究PTD-SOD对Na2S2O4诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护和修复作用.方法 建立Na2S2O4诱导的SH-SY5Y细胞缺氧损伤模型,采用MTT法检测融合蛋白PTD-SOD对细胞存活率的影响,LDH释放分析检测PTD-SOD对细胞损伤后的保护作用及损伤后细胞内氧化与抗氧化水平的变化.结果 对Na2S2O4诱导的SH-SY5Y细胞缺氧损伤,MTT活性检测、LDH分析及氧化与抗氧化水平分析都表明PTD-SOD能明显提高细胞存活率和细胞内抗氧化能力.结论 PTD-SOD融合蛋白能保护Na2S2O4诱导缺氧损伤的SH-SY5Y细胞,具有抑制细胞死亡,改善损伤细胞内抗氧化能力.
-
新型非免疫活性的FKBP12配基N308促神经生长和神经损伤保护作用的体外评价
目的 评价新型非免疫抑制的FKBP12 配基N308在体外促神经生长和神经损伤的保护作用.方法 采用鸡胚背根神经生长实验评价N308体外促神经生长作用;在原代培养的大鼠中脑多巴胺神经元损伤和大脑皮层神经细胞缺氧损伤的模型上观察N308的保护作用.结果 N308能够协同神经生长因子(NGF)对鸡胚背根神经节的神经纤维生长,具有明确的促进作用,在10～1000 pmol·L-1浓度范围内表现出良好的剂量依赖关系.在0.3～30 nmol·L-1 浓度范围内N308明显提高缺氧诱导的大脑皮层神经细胞的存活率;0.5 μmol·L-1 N308对6-OHDA诱导的大鼠中脑多巴胺神经元细胞损伤具有明确的保护作用,使细胞突起明显增长.结论 N308在体外具有明确的促神经生长及神经损伤的保护作用.
-
葛根素对二氯化钴造成PC12细胞缺氧损伤的保护作用
目的 研究葛根素对PC12细胞缺置损伤的影响.方法 使用氯化钴对PC12细胞制备缺氧损伤模型,通过测定受损细胞给药后的活力、受损细胞LDH泄漏量和受损细胞SOD活力,研究葛根素对受损细胞的保护作用.结果 在5×10-4～2×10-11mg·mL-1范围内,葛根素显著地增加模型受损细胞的活力;降低细胞LDH的泄露量;并增强受损细胞的SOD活性.结论 葛根素对二氯化钴造成PC12细胞缺氧损伤具有修复作用.
-
异丙酚对胚胎大鼠中脑神经细胞缺氧复氧损伤的影响
目的 观察不同浓度异丙酚(Propofol)对大鼠胚胎中脑神经细胞缺氧损伤的保护作用.方法建立原代培养神经细胞缺氧损伤模型,形态学观察以及细胞存活率,测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性、丙二醛(MDA)含量.结果异丙酚能明显改善缺氧损伤神经细胞的形态改变,提高细胞存活率,减少细胞内LDH的漏出,并可显著提高细胞内SOD活性,减少脂质过氧化产物MDA的产生.结论异丙酚对神经元缺氧损伤具有明显的保护作用.
-
VEGF-B通过ERK1/2信号通路对RGC-5细胞缺氧损伤的保护作用
目的：探讨血管内皮生长因子B（ vascular endothelial growth factor-B，VEGF-B）对氯化钴（ cobalt chloride hexahydrate，CoCl2）诱导的大鼠视网膜神经节细胞株（retinal ganglion cells-5，RGC-5）缺氧损伤的保护作用及其机制。方法 CoCl2孵育RGC-5细胞24h诱导缺氧模型。将RGC-5细胞分为正常组、缺氧组、VEGF-B+缺氧组、PD98059（ ERK1/2阻滞剂，PD）+VEGF-B+缺氧组。倒置显微镜观察细胞的形态变化；CCK-8法检测细胞存活率；流式细胞仪 Annexin V-APC/7-AAD 双染色法检测细胞凋亡率；Western Blot 检测蛋白 Bcl-2、Bax 及 ERK1/2、p-ERK1/2表达水平。结果①缺氧使细胞皱缩变小变圆，正常组及药物组细胞体积大有突起。②与正常组相比，缺氧使细胞存活率减低；与缺氧组相比，药物组细胞存活率均升高。③与正常组相比，缺氧组正常细胞率下降、细胞凋亡率升高；与缺氧组相比，药物组正常细胞率升高、细胞凋亡率下降。④与正常组相比，缺氧组Bcl-2、Bcl-2/Bax比值降低，Bax增多；与缺氧组相比，药物组Bcl-2、Bcl-2/Bax比值增高，Bax减少。四组总ERK1/2表达量不变，p-ERK1/2表达量缺氧组较正常组增多，VEGF-B+缺氧组较缺氧组表达量高，PD+VEGF-B+缺氧组较VEGF-B+缺氧组减少。结论 VEGF-B部分通过ERK1/2信号通路增加Bcl-2表达，降低Bax表达从而抑制CoCl2诱导的RGC-5细胞凋亡。
关键词： VEGF-B RGC-5细胞株 缺氧损伤 凋亡 ERK1/2信号通路 -
蕨麻多糖对缺氧损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制
目的 探讨蕨麻多糖对缺氧损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制.方法 将培养好的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926随机分为常氧对照组、缺氧模型组、复方丹参对照组及蕨麻多糖高、中、低浓度组,除常氧对照组外,其余5组构建缺氧损伤模型,同时复方丹参对照组加复方丹参片提取物(终浓度0.1 mg/mL),蕨麻多糖高、中、低浓度组加终浓度分别为0.1、0.05、0.025 mg/mL的蕨麻多糖,均培养2 h.采用MTT法检测细胞活力,采用台盼蓝染色法测算细胞存活率,光学显微镜下观察细胞形态变化,用比色法测定细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定培养基中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)水平,比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,RT-PCR技术测定细胞内iNOS、eNOS mRNA表达.结果 蕨麻多糖各浓度组、复方丹参组与缺氧模型组比较细胞形态均有不同程度改善.与缺氧模型组比较,蕨麻多糖各浓度组、复方丹参组细胞活力及存活率升高,细胞LDH外漏量下降,iNOS和ET-1水平降低,eNOS和NO水平升高,SOD水平升高,MDA水平降低,细胞eNOS mRNA表达升高,iNOS mRNA表达降低(P均<0.05).结论 蕨麻多糖可能通过提高缺氧损伤EA.hy926细胞的抗氧化活性、调控ET-1与NO的动态平衡发挥保护作用.
-
血栓通改善脑血管内皮细胞缺氧损伤的作用机制
目的：探讨血栓通在改善脑血管内皮细胞缺氧损伤的作用机制。方法选择在体外培养的人脐静脉血管内皮细胞为研究对象，分为对照组（正常内皮细胞组）、血栓通组（血栓通＋正常内皮细胞组）、缺氧组（模拟缺氧内皮细胞）和缺氧血栓通组（血栓通＋模拟缺氧内皮细胞）。采用 CCK‐8试剂盒观察各组内皮细胞的活性，通过流式细胞仪分析内皮细胞的凋亡情况。结果与对照组比较，应用血栓通培育内皮细胞后，随着时间的推移，内皮细胞活性呈明显上升趋势；而与血栓通组比较，缺氧组内皮细胞活性明显下降；在血栓通干预后各个时间点的细胞活性逐渐增加，以24 h 效果显著。与常规缺氧对照组比较，缺氧血栓通组内皮细胞的凋亡率显著降低，而缺氧诱导因子抑制 HIF 的表达后，缺氧内皮细胞的凋亡率显著升高，后在血栓通处理后，其内皮细胞的凋亡率显著较血栓通未处理的缺氧诱导因子抑制组明显降低。结论血栓通可以明显提高缺氧血管内皮细胞活性，当内皮细胞处于持续缺氧状态时，还可以抑制内皮细胞的凋亡，具体的分子机制有待进一步研究。
-
原代培养神经元细胞缺氧损伤后脑红蛋白表达研究
目的 探讨皮层神经元细胞缺氧损伤后脑红蛋白的表达.方法 构建C57 BL/6胎鼠皮层神经元原代培养的细胞缺氧模型,联合MTT微量酶反应比色法、Real-Time PCR、免疫荧光染色及Western Blot等方法,观察缺氧后细胞形态学、细胞生存率、Ngb mRNA及蛋白表达情况.结果 原代培养皮层神经元缺氧4h后细胞生存率明显下降,NgbmRNA及蛋白表达升高,8h达高峰,此后逐渐稳步下降,至缺氧24 h仍高于对照组.结论 缺氧损伤可诱导原代培养皮层神经元NgbmRNA及蛋白的表达.
-
红景天苷对体外培养大鼠海马神经元化学缺氧损伤ATP敏感性钾通道亚基表达的影响
目的 研究红景天苷对大鼠海马神经元化学缺氧损伤的保护作用及机制.方法 体外原代培养新生SD大鼠海马神经元并鉴定.以二氮嗪为阳性对照药,通过苏木精-伊红染色观察各实验组神经元形态,通过实时定量聚合酶链反应检测各实验组内向整流性钾通道受体6.2(Kir6.2)、磺酰脲类受体1(SUR1) mRNA的表达差异,免疫细胞化学染色法检测各实验组Kir 6.2、SUR1蛋白质的表达差异.结果 化学缺氧1h,红景大苷各剂量组均可提高缺氧神经元存活率.与模型组比较,红景天苷各剂量组神经元Kir 6.2与SUR1 mRNA的表达量显著升高(P＜0.01或P＜0.05),Kir6.2与SUR1蛋白表达也显著升高(P＜0.01或P＜0.05).结论 红景天苷通过上调化学缺氧神经元ATP敏感性钾通道亚基Kir 6.2、SURI的表达对神经元起保护作用.
-
红景天苷对大鼠体外培养海马神经元物理缺氧损伤钙离子含量、钙激活中性蛋白酶及钙通道蛋白表达的影响
目的 研究红景天苷对大鼠海马神经元物理缺氧损伤的保护作用及机制.方法 体外原代培养新生SD大鼠海马神经元并鉴定.以尼莫地平为阳性对照药,通过苏木素-伊红染色、激光共聚焦显微镜技术观察各实验组神经元形态,通过荧光分光光度法检测各实验组神经元细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),实时定量聚合酶链反应检测各实验组钙通道蛋白NMDAR1、Cav1.3 mRNA的表达差异,免疫细胞化学染色法检测各实验组钙激活中性蛋白酶Calpain 1蛋白质的表达差异,分析红景天苷对大鼠海马神经元物理缺氧损伤的保护作用.结果 红景天苷各剂量组均可提高缺氧神经元存活率.与模型组比较,红景天苷各剂量组神经元[Ca2+]i显著降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05)；NMDAR1和Cav1.3 mRNA的表达率均显著降低(P＜0.05或P＜0.01)；Calpain 1阳性细胞百分率均显著降低(P ＜0.01或P＜0.05).结论 红景天苷通过下调物理缺氧神经元L-型钙通道和NMDAR亚基的表达抑制钙超载,对神经元起保护作用.
-
白术内酯Ⅲ对神经细胞损伤的影响
目的 观察白术内酯Ⅲ对神经细胞损伤的影响.方法 选用PC12细胞株,建立缺氧损伤,兴奋性氨基酸损伤,高钙损伤3种损伤模型,采用噻唑蓝(MTT)法观察白术内酯Ⅲ对PC12细胞存活力的影响.结果 与各模型组比较,白术内酯Ⅲ在一定浓度范围内可显著升高PC12细胞A570值(P＜0.05或P＜0.01).结论 白术内酯Ⅲ对PC12细胞缺氧损伤、兴奋性氨基酸损伤、高钙损伤均有不同程度的保护作用.
-
基于肝窦内皮细胞损伤评价黄芪来源成分的防护作用
目的:观察黄芪来源成分对氯化钴诱导SK-HEP-1细胞缺氧损伤的防护作用.方法:800μM氯化钴作用于SK-HEP-1细胞24小时,诱导细胞缺氧损伤,不同浓度的药物成分作用于SK-HEP-1细胞,MTT法检测细胞活力,免疫荧光染色检测细胞vWF表达,高内涵图像分析系统观察细胞膜通透性、细胞核形态及溶酶体变化,荧光探针法检测NO、NOS水平.结果:与正常组比较,模型组细胞活力显著下降,vWF表达明显增加,细胞溶酶体平均荧光强度明显减弱,NO、NOS水平显著下降(P＜0.05或P＜0.01);药物处理后,细胞活力明显改善(P＜0.01),其中黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ组vWF表达显著下降,溶酶体和NO水平显著提高(P＜0.05);毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮-7-O-b-D-葡萄糖苷组vWF表达、溶酶体显著改善(P＜0.05);芒柄花素和芒柄花素-7-0-b-D-葡萄糖苷组细胞NO、NOS水平显著提高,芒柄花素组细胞溶酶体荧光显著增强(P＜0.05).结论:黄芪来源的7种成分均有防护氯化钴诱导的SK-HEP-1细胞缺氧损伤的作用,但其作用基础存在细胞生物学差异.
