乳癌组织中nm23、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达

目的:探讨乳癌组织中nm23、MMP-2和TIMP-2蛋白的表达情况.方法:采用免疫组织化学SP法,对20例乳腺纤维腺瘤、24例乳腺导管内原位癌、58例乳腺浸润性导管癌(26例无淋巴结转移,32例有淋巴结转移)组织中上述3个指标进行检测.结果:乳腺浸润癌组织中nm23和TIMP-2蛋白阳性率低于乳腺纤维腺瘤和导管内原位癌组织(P＜0.05);乳癌组织中MMP-2蛋白阳性率高于乳腺纤维腺瘤组织(P＜0.05).伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织nm23阳性率低于无淋巴结转移者.结论:联合检测上述3种指标将有助于乳癌的早期诊断和预后判断.

经颅多普勒对颅内压和脑灌注压的预测价值

目的:观察经颅多普勒(TCD)频谱参数在初期颅高压患者不同颅内压(pIC)水平的相关变化,进而预测pIC、脑灌注压(pCP).方法:对200例颅脑病变患者393次腰椎穿刺测压前均行TCD检查并记录血压,同时选择30例健康人作正常对照.结果:随着pIC升高,TCD表现出高阻力血流频谱,收缩期血流(vs)无变化,舒张期血流(vd)减慢,血管搏动指数(PI)升高(P＜0.05或0.01).依TCD血流动力学参数及平均动脉压(pMA)所得预测颅内压(pICe)及预测脑灌注压(pCPe)的回归方程分别为:pICe＝-1.496+2.807×PI+0.088×pMA;pCPe＝1.496-2.807×PI+0.912×pMA.预测和实测的pIC、pCP均呈正相关(r=0.757、0.961,P均＜0.01),预测差值在0.667 kPa内阳性预测率均为78.63%.结论:根据特征性TCD频谱和参数改变可较准确预测pIC、pCP,在颅高压初期对2者的预测准确性完全一致,且不受动脉血压的影响.

河南省1985年至2004年宫颈癌死亡率趋势分析

目的:探讨时期和(或)出生队列效应对河南省宫颈癌死亡率变化趋势的影响.方法:利用线性回归及联结点模型对1985年至2004年河南省宫颈癌死亡数据进行趋势分析,运用对数线性模型中的负二项回归进行年龄-时期-队列分析,估计各项参数.结果:1985年至2004年河南省宫颈癌年均粗死亡率为5.33/10万.1985年至1999年河南省宫颈癌年均中国人口年龄调整死亡率为5.28/10万,2000年至2004年下降为4.41/10万.标化死亡率(Y)与年份(X)的线性模型为Y=-0.048X+200(t=2.15,P=0.045),提示宫颈癌死亡率总体呈下降趋势.联结点模型显示1998年为联结点,1998年以前河南省宫颈癌死亡率呈下降趋势(P＜0.05),1998年以后呈上升趋势,但上升趋势无统计学意义(P＞0.05).年龄-时期-队列模型显示非线性时期效应有统计学意义(P＜0.01),而非线性队列效应无统计学意义(P＞0.2).结论:河南省宫颈癌死亡率1985年至1998年呈下降趋势,1998年至2004年呈上升趋势.

胃癌螺旋CT诊断与癌组织中环氧合酶-2蛋白的测定

目的:探讨螺旋CT 对胃癌的诊断价值及螺旋CT征象与癌组织中环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达间的关系.方法:胃癌患者55例(男39例,女16例;TNM分期:Ⅰ期5例,Ⅱ期13例,Ⅲ期20例,Ⅳ期17例;浸润深度:T2 9例,T3 29例,T4 17例;淋巴结转移:N0 18例,N1 11例,N2 26例)行低张力水充盈螺旋CT三期增强扫描,术后采用免疫组织化学SP法检测肿瘤组织中COX-2的表达,并将螺旋CT结果与病理、COX-2表达进行对比分析.结果:螺旋CT三期增强扫描对55例胃癌患者T分期诊断的准确性为83.6%(46/55),N分期的准确性为78.2%(43/55),TNM分期的准确性为80.0%(44/55).55例胃癌组织中COX-2阳性表达率为63.7%(35/55),与螺旋CT征象的浆膜浸润、淋巴结转移及TNM分期均相关(χ2＝4.243,P＝0.039;χ2＝10.228,P＝0.001;χ2＝14.556,P＝0.000).结论:螺旋CT可较准确反映胃癌的浸润、转移及TNM分期,螺旋CT与COX-2测定相结合,可以提高对胃癌浸润、转移的诊断准确性.

宫颈癌组织中Survivin和Caspase-3蛋白的表达

目的:探讨宫颈癌组织中Survivin、Caspase-3蛋白表达的变化.方法:用免疫组织化学SP法检测42例宫颈癌、13例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和8例正常宫颈组织中Survivin、Caspase-3蛋白的表达.结果:正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中Survivin蛋白的阳性表达率依次增高(P＜0.05),Caspase-3蛋白阳性表达率依次降低(P＜0.05).宫颈癌组织中Survivin的表达与病理分级及淋巴结转移有关,与临床分期及组织学类型无关.宫颈癌组织中Survivin的表达与Caspase-3相关(P=0.019 7).结论:Survivin可能通过阻抑Caspase-3的表达在宫颈癌发生过程中发挥重要作用.

心肌特异性自身细胞毒反应中单核细胞趋化蛋白-1的作用

目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在介导心肌特异性自身细胞毒反应中的作用.方法:腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立病毒性心肌炎小鼠模型,正常对照组腹腔注射生理盐水.在腹腔注射后7 d和9 d分离外周血单个核细胞(PMNCs)和心肌组织浸润的单个核细胞(IMNCs),用10 μg/L MCP-1与PMNCs进行趋化试验,并用1 mg/L、2.5 mg/L和5 mg/L的抗MCP-1多抗做抗体阻断趋化试验,计算趋化指数.差异贴壁法体外分离BALB/c小鼠心肌细胞,以其作靶细胞,用经MCP-1趋化的PMNCs或分离的IMNCs作效应细胞,进行细胞介导的细胞毒试验,计算效应细胞的特异性杀伤率.结果:CVB3感染后7 d小鼠IMNCs对正常心肌细胞的特异性杀伤率是(41.3±7.3)%,高于对照组的(18.3±2.9)%(P＜0.01);与感染后7 d相比,感染后9 d的小鼠心肌IMNCs对心肌细胞的特异性杀伤率增强至(59.2±4.7)%(P＜0.05).MCP-1对CVB3感染9 d小鼠PMNCs的趋化指数为4.3±0.4,2.5 mg/L和5 mg/L的抗MCP-1抗体均可完全阻断此趋化活性.经MCP-1趋化的PMNCs对正常心肌细胞的特异性杀伤率为(43.7±4.7)%,高于对照的(12.2±2.8)%(P＜0.01).结论:病毒性心肌炎心肌组织中的IMNCs对正常心肌细胞有自身细胞毒活性.MCP-1可能是介导心肌特异性自身细胞毒性单个核细胞迁移的一个重要因素.

五种急性髓细胞白血病细胞株FAM样酪氨酸激酶3表达及其短状串联重复突变检测

目的:探讨不同急性髓细胞白血病细胞(AML)FAM样酪氨酸激酶3(FLT3)表达状况,筛选FLT3过表达细胞,并检测其编码FLT3近膜(JM)区的基因是否存在短状串联重复(ITD)突变.方法:选择THP-1、K562、HL-60、Dami、Meg-01细胞,以含内参GAPDH对照的半定量RT-PCR检测其FLT3 mRNA的表达,以流式细胞仪检测细胞膜表面FLT3蛋白的表达;提基因组DNA,PCR扩增其JM区,对有FLT3过表达的细胞,PCR扩增产物连T-载体后测序.结果:5种AML细胞中仅有THP-1、HL-60存在FLT3基因的表达,其mRNA表达相对于GAPDH的含量分别是0.83±0.07、0.48±0.05,2者比较差异有统计学意义(t=7.047,P＜0.01);细胞膜表面FLT3蛋白表达率分别是(43.55±4.44)%、(27.57±3.42)%,2者比较差异有统计学意义(t=8.029,P＜0.001).2种细胞经FLT3-JM区PCR产物测序均不存在ITD突变.结论:THP-1、HL-60是FLT3野生型过表达的AML细胞株.

乳酸司帕沙星对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的影响

目的:观察乳酸司帕沙星(SPX)对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)的影响.方法:采用酶消化方法分离单个豚鼠心室肌细胞,利用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IK,观察不同浓度SPX(0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L、100 μmol/L和1 000 μmol/L)对IK的影响.结果:除0.1 μmol/L外,SPX浓度分别为1 μmol/L、10 μmol/L、100 μmol/L、1 000 μmol/L时IK的脉冲电流和尾电流较正常心室肌细胞脉冲电流和尾电流均减少(P＜0.05或0.01).SPX明显抑制了IK的脉冲电流和尾电流(P＜0.05),SPX的量效关系曲线显示SPX的IC50为14.89 μmol/L. 结论:SPX能浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞IK,提示高浓度SPX有引发心律失常的潜在不良反应.

间接白蛋白钴结合试验测定血清缺血修饰白蛋白

目的:采用国产试剂盒,利用间接白蛋白钴结合试验对血清缺血修饰白蛋白(IMA)进行自动分析测定.方法:用HITACHI公司7600-020全自动生化分析仪和国产试剂盒,用间接白蛋白钴结合试验测定100名正常人血清IMA含量.结果与结论:本法批内变异1.31%,批间变异3.30%,低检出限10～18 ku/L,线性范围14～200 ku/L,白蛋白质量浓度在20～50 g/L范围内时与IMA浓度呈线性关系,Y=4.58X-30.8(r=0.999,P＜0.01).本法测定血清IMA正常值范围＜70.0 ku/L.

EC9706和Eca109细胞中雷帕霉素靶蛋白信号通路激活状态观察

目的:观察低分化的食管鳞癌细胞EC9706和高分化的食管鳞癌细胞Eca109中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的激活状态.方法:采用细胞免疫组织化学方法检测EC9706和Eca109细胞中mTOR及其下游靶分子p70S6K的表达和定位,并采用RT-PCR和Western blot方法分别从mRNA及蛋白水平检测此通路的活性.结果:在2种细胞中mTOR均有表达,且在EC9706细胞中的表达水平高于Eca109(P＜0.05);EC9706细胞中mTOR下游靶点的磷酸化水平高于Eca109细胞(P＜0.05).结论:在2种食管鳞癌细胞中,mTOR信号通路均特异性激活;但激活状态与细胞的分化程度有关,细胞分化程度低者通路的激活水平较高.

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马结构白细胞介素-6表达的影响

目的:探讨戊四氮(PTZ)点燃大鼠海马结构白细胞介素-6 (IL-6) 表达的特征及托吡酯(TPM)对其表达的影响.方法:将30只成年健康雄性SD大鼠随机分为3组,每组10只. Ⅰ组大鼠灌胃生理盐水1 h后,腹腔注射10 g/L PTZ生理盐水溶液(35 mg/kg);Ⅱ组大鼠按40 mg/kg灌胃10 g/L TPM生理盐水溶液1 h后,腹腔注射PTZ(剂量同Ⅰ组);Ⅲ组大鼠按10 ml/kg和3.5 ml/kg分别胃灌注和腹腔注射生理盐水.各组每d给药1次.当Ⅰ组大鼠疒间性发作行为达到点燃标准时,观察各组大鼠的行为,记录脑电图(EEG),采用免疫组织化学SABC法检测海马结构IL-6的表达.结果:给药4周,Ⅰ组大鼠点燃成功,而Ⅱ组大鼠高发作级别较I组低,对照组大鼠行为正常.Ⅰ、Ⅱ组大鼠海马结构IL-6表达较Ⅲ组增加(P＜0.05),且Ⅰ组的表达高于Ⅱ组(P＜0.05).结论:癫疒间大鼠免疫系统处于活化状态;TPM能降低PTZ点燃大鼠海马结构IL-6的表达而对癫疒间具有一定的免疫抑制作用.

喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子和环氧化酶-2 mRNA检测

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化酶(COX-2) mRNA的表达情况及与癌组织生长、浸润及转移的关系.方法:应用RT-PCR方法检测62例喉鳞状细胞癌、54例癌旁和9例正常喉黏膜组织中VEGF mRNA及COX-2 mRNA的表达.结果:喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达量高于癌旁和正常喉黏膜组织(P＜0.01),Ⅰ、Ⅱ期喉鳞癌组织2者的表达量低于Ⅲ、Ⅳ期(P＜0.01).喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达呈正相关(r＝0.756,P＜0.01).结论:VEGF和COX-2与喉鳞癌的生长、浸润及转移有密切关系,2者有协同作用.

中国青壮年人群眼压分布特征

目的:探讨中国青壮年人群眼压分布的特征及与近视的关系. 方法:按照右眼屈光状态将1 669例受检者(17～50岁)分为正视组、低度近视组、中度近视组、高度近视组、超高度近视组,分别用Goldmann眼压计和超声角膜测厚仪测量眼压和角膜中央厚度,建立多元回归线性模型,计算出排除年龄和角膜中央厚度因素后的调整眼压. 结果:本组眼压为1.064～3.724(2.020±0.302) kPa,男性眼压为(2.022±0.310) kPa,女性眼压为(2.018±0.294) kPa,男女眼压差异无统计学意义(t=0.231,P＝0.818).以角膜中央厚度(X1)、年龄(X2)作为自变量,眼压(Y)作为因变量,多元线性回归方程为Y=0.133×(5.926 1+0.015X1+0.032X2)(F=53.099,P＜0.001).正视组调整眼压高于其他近视组(P＜0.05),但其余4组眼压差异无统计学意义(P＞0.05).结论:中国青壮年人群眼压有随年龄增长而升高的趋势;近视发生发展与眼压无关.

术前急性高容量血液稀释对老年开胸手术患者肾功能的影响

目的:观察术前轻度急性高容量血液稀释(AHH)对老年开胸手术患者肾功能的影响.方法:选择择期开胸手术的老年患者36例,年龄60～72岁,随机均分为A、B、C组.麻醉诱导前15 min开始行AHH,A、B、C 3组分别输注万汶、贺斯和乳酸钠林格液,均以15 ml·kg-1、25～35 ml·min-1,30 min内完成.术中监测心电图、无创动脉压、平均动脉压、心率及脉搏血氧饱和度,并于AHH前、AHH后(即刻)、30 min、60 min、3 h采血及尿样检测红细胞压积(HCT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿α1-微球蛋白(α1-MG).结果:3组血BUN、Cr在各时间点比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).各时间点3组尿α1-MG水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),但AHH后3 h,3组尿α1-MG水平高于其他时间点(P＜0.05).结论:用万汶或贺斯行术前轻度AHH对老年人肾功能无明显影响.

子宫颈癌组织中高危型人乳头状瘤病毒感染和P16INK4A蛋白表达的检测

目的:检测宫颈上皮癌变过程中高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染和P16INK4A蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学方法检测30例正常宫颈组织、23例宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)、26例CINⅡ、31例CINⅢ和22例浸润癌组织中P16INK4A蛋白的表达;用第二代杂交捕获法(HC-2)检测13种HR-HPV DNA.结果:正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、浸润癌组织中,P16INK4A蛋白阳性表达率分别为6.67%、39.10%、88.50%、87.10%、90.90%,HR-HPV阳性率分别为30.00%、82.60%、80.80%、90.30%、95.50%,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ和浸润癌组织与正常宫颈组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01).等级相关分析结果显示,宫颈组织中HR-HPV阳性率与P16INK4A蛋白阳性表达率呈正相关(rs=0.564, P＜0.01).结论:HR-HPV致宫颈上皮恶性转化可能与P16INK4A蛋白过表达有关, P16INK4A和HR-HPV联合检测可提高对子宫颈癌及CIN的阳性预测值.

恒河猴脊髓半横断损伤后脊髓腹角及对侧皮质前运动区胶质细胞源性神经营养因子的表达

目的:探讨恒河猴脊髓损伤后脊髓腹角及对侧大脑皮质前运动区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法:18只成年恒河猴随机分为假手术组和脊髓半横断损伤(hSCI)后7 d、14 d、1个月、2个月和3个月组,每组3只.假手术组术后24 h取材;各损伤组于第11胸髓节段切断左侧半脊髓,在相应时间点取材.取脊髓损伤处近、远段5 mm组织及损伤对侧大脑皮质前运动区组织,制作冰冻切片,采用免疫组织化学SP法检测GDNF,计数阳性神经元数目.结果:恒河猴hSCI后3个月内,损伤处脊髓近、远段损伤侧与未损伤侧腹角GDNF阳性神经元数均较假手术组减少(P＜0.05),并且表现为先降低后增加,晚期逐渐减少;hSCI 1个月以后损伤侧GDNF阳性神经元数目多于未损伤侧;对侧皮质前运动区GDNF阳性神经元在损伤早期急剧减少,此后增加,至hSCI后3个月时恢复至正常数量.结论:损伤局部GDNF的缺乏是影响脊髓损伤后再生修复的原因之一;适时补充外源性GDNF可能会促进神经修复;应用GDNF治疗SCI的佳时机在损伤早期.

大肠癌细胞线粒体DNA与NIH3T3细胞核基因组整合的荧光原位杂交分析

目的:观察大肠癌细胞突变的线粒体DNA(mtDNA)转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,mtDNA与转染细胞核内基因组的整合情况.方法:将携带大肠癌细胞突变mtDNA的重组质粒pcDNA3.1(+)-Sw480 mtDNA、pcDNA3.1(+)-NHWBC mtDNA及空质粒pcDNA3.1(+)通过脂质体法转染NIH3T3细胞.同时用PCR法制备3条相应的绿色荧光蛋白标记的mtDNA探针.分离转染的NIH3T3细胞核内染色体,用荧光原位杂交(FISH)法检测mtDNA探针与核内基因组的整合情况.结果与结论:瞬时转染的NIH3T3细胞核基因组上存在mtDNA的同源序列.外源肿瘤细胞mtDNA与NIH3T3细胞核内基因组发生整合.

被动吸烟对青年人血管内皮舒张功能和血清白细胞介素-6水平的影响

目的:探讨被动吸烟对健康青年人血管内皮舒张功能和血清白细胞介素-6(IL-6)水平的影响.方法:采用超声肱动脉内径测量法,观察被动吸烟、主动吸烟及正常对照组各30例血流介导和硝酸甘油介导的肱动脉内径变化;同时测定血清IL-6含量.结果:3组肱动脉内径基础值及硝酸甘油介导的肱动脉舒张,差异均无统计学意义(P均＞0.05);而血流介导的血管扩张,主、被动吸烟组与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.01),而2个吸烟组间差异无统计学意义(P＞0.05).主、被动吸烟组血清IL-6含量均高于正常对照组(P均＜0.01),而2个吸烟组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:被动吸烟导致健康青年人群血管内皮舒张功能损伤可能与血清IL-6增加有关.

中国河南汉族人群D19S253、D12S391和D18S535位点基因多态性检测

目的:探讨中国河南汉族人群中D19S253、D12S391和D18S535等3个STR位点的遗传多态性.方法:对80份河南汉族无关个体的EDTA抗凝血样,采用PCR和PAGE技术进行检测,并构建等位基因梯阶.结果:3个位点的等位基因分布均符合Hardy-Weinberg平衡,杂合度均大于0.763,个体识别力均大于0.904,非父排除率均高于0.531,多态信息含量均高于0.730.结论:中国河南汉族人群中此3个STR位点具有很高的遗传多态性,可用于法医学个体识别和亲权鉴定.

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1 pRNAT-U6.2 小干扰RNA表达载体的构建

目的:构建大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)小干扰RNA的真核表达质粒pRNAT-U6.2 siRNA.方法: 依据siRNA设计原则确定以序列447～465 nt、522～540 nt、142～160 nt为TIMP-1 siRNA靶序列, 体外分别合成两端含BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点的编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火后克隆于pGEM-T载体, T7和SP6为引物进行PCR鉴定;双酶切pGEM-T将其定向克隆到siRNA表达载体pRNAT-U6.2,用pRNAT-U6.2的插入鉴定引物进行PCR鉴定,阳性重组质粒测序.结果:DNA测序证实合成的并被克隆入真核表达载体pRNAT-U6.2的siRNA插入序列与设计完全符合.结论:TIMP-1 siRNA表达载体构建成功, 为后期研究TIMP-1 pRNAT-U6.2 siRNA作用、意义及效果奠定了实验基础.

酪氨酸激酶抑制剂STI571对K562细胞生长和凋亡的影响

目的:探讨酪氨酸激酶(TPK)抑制剂STI571对K562细胞生长和凋亡的影响. 方法:取对数生长期K562细胞,分4组培养.Ⅰ组不加任何药物,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别加0.5 μmol/L、1 μmol/L和2 μmol/L 的STI571,继续培养5 d.每d行细胞计数,台盼蓝拒染法检测细胞活力,连测5 d.培养36 h时,取细胞,双缩脲法检测细胞蛋白含量,采取蛋白免疫印迹法进行Procaspase-3及Bcl-xL检测.结果:Ⅱ组、Ⅲ组细胞数低于同-时间段Ⅰ组细胞数(P＜0.05),但高于Ⅳ组细胞数(P＜0.05).与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组Procaspase-3和Bcl-xL蛋白表达降低(P＜0.01);与Ⅱ组和Ⅲ组比,Ⅳ组2者表达量更低(P＜0.01).结论:STI571通过下调Bcl-xL,激活Procaspase-3,诱导K562细胞凋亡,从而抑制K562细胞的生长.

Ⅰ～Ⅲ期中度侵袭性非何杰金淋巴瘤序贯化疗观察

目的:探讨初治的Ⅰ～Ⅲ期中度侵袭性非何杰金淋巴瘤有效的化疗方案.方法:选择Ⅰ～Ⅲ期中度侵袭性非何杰金淋巴瘤患者182例,随机等分为A、B 2组.A组采用CHOP方案化疗8个周期,实际完成73例;B组前4个周期采用CHOP方案,后4个周期采用DICE方案化疗,实际完成69例.2组患者化疗结束后均根据具体情况给予放疗.比较2组完全缓解(CR)率及1 a、2 a、3 a、4 a总生存率.结果:A组化疗结束后CR率为57.5%,1 a总生存率86.3%,2 a总生存率61.0%,3 a总生存率48.8%,4 a总生存率31.0%.B组化疗结束后CR率为66.7%, 1 a总生存率87.0%,2 a总生存率69.8%,3 a总生存率64.3%,4 a总生存率56.3%.2组比较,CR率及1 a、2 a、3 a总生存率差异均无统计学意义(P均＞0.05),4 a总生存率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Ⅰ～Ⅲ期中度侵袭性非何杰金淋巴瘤患者采用CHOP方案4个周期、DICE方案4个周期序贯化疗较单用CHOP方案8个周期化疗的4 a总生存率有明显提高.

山羊心房不同部位有效不应期与心房颤动诱发的关系

目的:测定心房不同部位的有效不应期(ERP),并探讨其与心房颤动(AF)发生的相互关系.方法:山羊15只,运用程序刺激(S1S2程序刺激,基础起搏周长(PCL)分别为400 ms、350 ms、300 ms、250 ms、200 ms;S2为200 ms,以5 ms的步长递减)测定正常左心耳、右心耳、左上肺静脉口、左下肺静脉口、右上肺静脉口及右下肺静脉口的ERP.程序刺激结合Burst刺激对上述心房部位进行AF诱发,记录AF的发生率.结果:左心耳、左上肺静脉口、左下肺静脉口、右上肺静脉口及右下肺静脉口的ERP差异无统计学意义(P＞0.05);上述部位的ERP较右心耳ERP短(P＜0.05),AF发生率较右心耳高(P＜0.05).结论:左心房及肺静脉固有的电生理特点可能是AF主要来源于左心房的一个重要因素.

HIV/AIDS患者274例中医证候流行病学分布

艾滋病是一种目前尚无有效治愈办法、病死率极高的传染病.到目前为止,国际上通用的鸡尾酒疗法,取得了令人振奋的效果,但其价格昂贵,且不能完全清除体内的艾滋病病毒.中医药具有独特的理论体系,在改善艾滋病临床症状和提高患者生存质量及防治艾滋病的并发症等方面有明显的优势[1].

Notch1基因C端特征结构域pcDNA3.1-AN真核表达载体的构建

目的:扩增人胎盘组织Notch1基因C端特征性结构域ANK和NLS(简称AN),并构建pcDNA3.1-AN真核表达载体.方法:按照GenBank中Notch1序列,设计-对引物,利用RT-PCR方法从人胎盘组织中获取AN cDNA片段,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-AN.结果:所获得的序列是Notch1特征性的AN结构域.结论:成功构建了pcDNA3.1-AN真核表达载体.

志贺菌全菌蛋白质双向电泳技术的建立

目的:建立针对志贺菌全菌蛋白质组学研究的双向电泳及其相关技术体系.方法:采用超声兼尿素-3-[(3-胆酰胺丙基)-乙二胺]-1-丙磺酸(CHAPS)-二硫苏糖醇(DTT)裂解法提取临床分离志贺菌全菌蛋白,利用固相pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳,银染后获得的双向电泳图谱进行Image Master 2D Platinum软件分析,并对实验条件进行调整优化. 结果:成功构建了高重复性的志贺菌全菌蛋白质双向电泳图谱,共获得946±37个蛋白质斑点, pI值主要集中在4.94～7.23之间.结论:通过相关条件的调整优化提高了双向电泳的分辨率,为后续志贺菌蛋白质组学研究奠定了基础.

胃泌素拮抗剂和活化T淋巴细胞联合应用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD28/CD80单克隆抗体共刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用.方法:分离与体外培养外周血PBLs,并用CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含活化的PBLs和(或)胃泌素拮抗剂CI-988的RPMI 1640培养基培养HT-29细胞.MTT法检测2者对HT-29细胞的杀伤率,并用电镜观察效应细胞杀伤结肠癌细胞株HT-29的超微结构及HT-29细胞的凋亡情况.结果:胃泌素拮抗剂与活化PBLs合用,对结肠癌细胞株HT-29的杀伤率((95.81±1.99)%)大于单用胃泌素拮抗剂((66.36±1.31)%)(P＜0.05).电镜结果显示,效应细胞作用12 h肿瘤细胞就发生部分坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡.结论:联合应用活化的PBLs和胃泌素拮抗剂CI-988可以提高对结肠癌细胞株HT-29 杀伤作用.活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞可能是通过诱导肿瘤细胞坏死及凋亡2条途径来实现.

国际糖尿病联盟和中华医学会糖尿病学会代谢综合征诊断标准比较

目的:评价、分析国际糖尿病联盟(IDF)和中华医学会糖尿病学会(CDS)的代谢综合征(MS)诊断标准的一致性.方法:对体检科年龄≥40岁的中老年人1 130例及多种体检资料进行分析,按IDF和CDS标准分别计算MS患病情况.结果:①2种MS诊断标准的符合率为72.39%,将CDS标准中的空腹血糖调整至≥5.6 mmol/L后,2者符合率增至78.32%.②体质量指数≥25 kg/m2 与男性腰围≥90 cm(女性腰围≥80 cm)时符合率较好,女性符合率高达91.03%.③IDF与CDS诊断MS者心肌梗死和(或)脑卒中患病率分别为20.34%和21.26%,均高于无MS者的患病率(14.52%和15.13%).④CDS诊断MS者中有39例并不存在肥胖或中心性肥胖,这些患者可能并不属于典型的代谢综合征.结论:CDS MS诊断标准与IDF标准的一致性较好,2个标准都可用于中国人群.

大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白的表达

目的:探讨大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白表达的变化.方法:采用免疫组织化学SP法对外科手术切除的126例大肠癌标本及35例癌旁正常黏膜组织进行Caveolin-1和EGFR蛋白检测.结果:大肠癌组织与癌旁正常黏膜组织中Caveolin-1蛋白阳性表达率分别为30.16%(38/126)和85.71%(30/35),EGFR蛋白阳性表达率分别为61.11%(77/126)和8.57%(3/35),2组间差异均有统计学意义(P＜0.01 ).大肠癌组织中Caveolin-1和EGFR蛋白的表达均与组织学类型无关(P＞0.05 ),但与分化程度、淋巴结转移以及临床分期有关(P＜0.05).大肠癌组织中Caveolin-1与EGFR蛋白的表达呈负相关(rs=-0.327,P＜0.05). 结论:大肠癌的发生发展过程中Caveolin-1和EGFR可能发挥重要作用.

宫颈癌组织蛋白质组图谱分析

目的:检测宫颈癌组织与正常宫颈上皮组织中差异蛋白质的表达,寻找与宫颈癌相关的肿瘤标记物.方法:采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,应用铜离子结合芯片(IMAC-Cu)以及配套软件,对33例宫颈癌组织、29例正常宫颈上皮组织进行检测分析,筛选出有分类意义的差异蛋白,构建决策树分类模型.结果:宫颈癌与正常对照共有72种蛋白质质谱峰强度差异有统计学意义(P＜0.01),有分类意义的蛋白质有8种,其中质/核比为M5929.87、M3630.52、M10335.39、M6793.00、M7365.78、M4498.06的蛋白质在宫颈癌组织中低表达,质/核比为M8856.45、M9586.27的蛋白质在宫颈癌组织中高表达.用质/核比为M5929.87、M3630.52和M10335.39的蛋白质建立的决策树分类模型的分类正确率为95.16%(59/62),宫颈癌诊断敏感性为93.94%(31/33),特异性为96.55%(28/29).结论:利用SELDI-TOF-MS技术筛选出的具有分类意义的8种蛋白质,有可能成为宫颈癌诊断及预后判断的-组生物学指标.

大肠癌肿瘤抗原修饰的树突状细胞活性检测

目的:测定经大肠癌肿瘤抗原修饰的树突状细胞(DC)的活性. 方法:分离结肠癌患者的外周血单个核细胞,应用粒细胞/ 巨噬细胞集落刺激因子联合白细胞介素-4进行体外诱导,获取DC,以流式细胞仪进行表型鉴定;用Lovo细胞制备大肠癌肿瘤抗原并用以修饰DC,以肿瘤抗原修饰后的DC为刺激细胞,以自体淋巴细胞为效应细胞,采用MTT法检测刺激细胞与效应细胞在不同比例(1:10,1:100,1:1 000)以及不同共孵时间(24 h,48 h,72 h)下,效应细胞对大肠癌细胞的排斥杀伤率.结果:从大肠癌患者外周血单个核细胞中成功诱导出表达CD11c、CD80和HLA-DR的DC,经肿瘤抗原修饰后,上述分子表达上调.肿瘤抗原修饰后的DC与淋巴细胞以1:100共孵48 h时,淋巴细胞的肿瘤细胞排斥杀伤率较高.结论:从大肠癌患者外周血中分离诱导出的DC,被肿瘤抗原修饰后,在体外可激活自体淋巴细胞,提高淋巴细胞的杀瘤活性.

皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及CD105标记的微血管密度(MVD),并探讨其与血管生成的关系及临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测28例皮肤SCC及23例BCC组织中HIF-1α、VEGF的表达及CD105标记的MVD,并取20例正常皮肤组织标本做对照.结果:皮肤SCC、BCC和正常皮肤组织中HIF-1α的阳性表达率分别为82.14%、47.83%和0,VEGF 的阳性表达率分别为67.86%、30.43%和20.00%,BCC组织与正常皮肤组织中VEGF阳性表达率比较差异无统计学意义(P＞0.05),SCC、BCC与正常皮肤组织HIF-1α阳性表达率比较,SCC与BCC组织VEGF阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05);且HIF-1α表达与VEGF表达呈正相关(rs=0.555,P＜0.05);皮肤SCC、BCC和正常组织MVD分别为13.35±7.33、9.69±3.65和0.65±0.73,3组相互之间差异均有统计学意义(P均＜0.05).HIF-1α阳性表达SCC和BCC组织较阴性表达组织MVD值升高(P＜0.05),VEGF阳性表达SCC和BCC组织较阴性表达组织MVD值升高(P＜0.05).结论:HIF-1α、VEGF的表达可能通过增加皮肤癌组织的血管形成在肿瘤的发生和发展中起重要作用.

原发及转移性卵巢癌组织中绒毛蛋白、细胞角蛋白7及20的表达

目的:检测原发及转移性卵巢癌组织中绒毛蛋白(Villin)、细胞角蛋白7及20(CK7、CK20)的表达.方法:采用免疫组织化学方法检测卵巢原发性腺癌45例(浆液性腺癌18例、黏液性腺癌15例、内膜样腺癌12例)、结肠转移性卵巢癌15例、原发结肠腺癌20例、正常卵巢组织10例中Villin、CK7和CK20的表达. 结果:正常卵巢、原发性卵巢腺癌、结肠转移性卵巢癌及原发性结肠腺癌组织间比较,Villin、CK7和CK20的阳性表达率差异均有统计学意义(P＜0.001);且原发卵巢癌组织中Villin的阳性表达率低于CK20(P＜0.005).结论:Villin、CK7和CK20的测定对鉴别原发及转移性卵巢癌有重要意义,Villin在特异性方面强于CK20 .

B细胞淋巴瘤患者外周血免疫球蛋白重链基因重排检测

目的:评价B细胞淋巴瘤(B-NHL)患者外周血免疫球蛋白重链(IgH)基因重排检测的应用价值.方法:收集慢性淋巴结炎患者(10例)、健康体检者(16例)和病理活检确诊为B-NHL的患者(28例)外周血,PCR法检测IgH基因重排,观察B-NHL患者治疗前后IgH基因重排的变化.结果:B-NHL患者IgH基因重排阳性率为67.9%(19/28),高于骨髓涂片细胞形态学检查阳性率32.1%(9/28),差异有统计学意义(P＜0.05),健康体检者及慢性淋巴结炎患者均为阴性.15例外周血单克隆IgH基因重排阳性者,治疗后10例完全缓解(CR).10例CR中,9例IgH基因重排转阴.结论:外周血IgH基因重排在B-NHL辅助诊断和预后评估等方面具有重要的临床价值.

口腔颌面部肉瘤组织中端粒酶逆转录酶mRNA和C-myc蛋白的表达

目的:探讨口腔颌面部肉瘤(OMFS)组织中hTERT mRNA和C-myc蛋白的表达.方法:应用原位杂交和免疫组织化学SP法检测37例OMFS、14例良性间叶组织肿瘤及3例口腔正常肌肉或脂肪组织中hTERT mRNA和C-myc蛋白的表达.结果:OMFS组织中hTERT mRNA和C-myc的阳性表达率均高于良性肿瘤和正常组织,低度恶性OMFS组织中2者的阳性表达率低于高度恶性组织(P＜0.05).OMFS中hTERT mRNA和C-myc的表达呈正相关关系(r=0.417,P＜0.05). 结论:C-myc的过表达使hTERT基因得以激活,可能与OMFS的恶性演进有关.

卵巢上皮性肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平测定

目的:探讨卵巢上皮性肿瘤患者血浆溶血磷脂酸(LPA)水平及其潜在的临床应用价值.方法:采用生化法对70例卵巢上皮性肿瘤患者(恶性50例、良性20例)、20例正常妇女进行血浆LPA水平检测,同时测定血浆肿瘤相关抗原CA125水平.结果:正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA分别为(1.81±0.45) μmol/L、(2.23±0.37) μmol/L,恶性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA水平高于正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者(P＜0.05).血浆LPA水平对恶性卵巢上皮性肿瘤诊断的敏感性(96.0%)和特异性(87.5%)优于肿瘤相关抗原CA125.结论:恶性卵巢上皮性肿瘤患者血浆LPA水平明显升高,LPA有望成为卵巢上皮性肿瘤诊断的敏感指标.

消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平测定

目的:检测消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3),并探讨2者与肿瘤化疗疗效的关系.方法:应用ELISA方法检测27例化疗有效的消化道肿瘤患者及20例化疗无效肿瘤患者化疗前后血IGF-1、IGFBP-3水平,并选择42例正常人作为对照.结果:化疗有效组及无效组化疗前血IGF-1、IGFBP-3水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05);2组2个指标化疗后水平与化疗前比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).有效组与无效组化疗后2个指标比较,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论:血IGF-1、IGFBP-3水平与消化道肿瘤化疗疗效有关,可作为预测化疗疗效的指标之一.

原发性胆汁性肝硬化患者自身抗体、抗线粒体谱检测

目的:分析自身抗体、血清酶谱、免疫球蛋白在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断和鉴别诊断中的价值.方法:对48例PBC患者应用间接免疫荧光法(IIF)检测自身免疫性肝病9项指标,用免疫印迹法进行抗线粒体分型,应用生化法检测血清生化指标和免疫球蛋白.以40例肝炎肝硬化失代偿患者作对照.结果:48例PBC患者ANA、AMA和AMA-M2阳性率均明显高于对照组.血清ALP、γ-GT异常率高于对照组(P＜0. 05).PBC患者免疫球蛋白增高以IgM为主.结论:PBC患者有胆汁淤积表现(血清ALP和γ-GT异常升高),有高滴度的ANA、AMA和AMA-M2抗体,这些表现有助于PBC的诊断和鉴别诊断.

Tet-on调控TAp63γ基因表达EC9706细胞系的建立及对细胞增殖的影响

目的:利用Tet-on 基因表达调控系统建立由强力霉素(Dox)诱导TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究TAp63γ基因的功能奠定基础.方法:将调控质粒pTet-on 转入EC9706细胞,经G418筛选后的细胞再次转染反应质粒pTRE-TAp63γ-HA,再用潮霉素筛选出阳性细胞克隆,RT-PCR法选择对Dox敏感的细胞克隆.后用不同浓度Dox诱导,Western blot法确定Dox的佳诱导浓度.采用此浓度的Dox分别诱导EC9706、EC9706/Tet/pTRE、EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ 3组细胞,细胞增殖分析试剂盒(CCK-8试剂盒)检测细胞生长抑制率.结果:Dox浓度为3 mg/L时可诱导TAp63γ基因高表达,EC9706/Tet/pTRE-TAp63γ细胞的生长抑制率均高于EC9706和EC9706/Tet/pTRE细胞(P＜0.05或0.01).结论:成功构建了Tet-on 调控TAp63γ基因表达的EC9706 细胞系,为进一步研究食管鳞癌细胞内P63蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台.TAp63γ基因表达可使EC9706细胞增殖受到抑制.

非诺贝特对2型糖尿病大鼠骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶表达的影响

目的:动态观察2型糖尿病进展过程中骨骼肌丙酮酸脱氢酶激酶(PDK4)和丙酮酸脱氢酶1α亚单位(E1α)水平的变化和非诺贝特的干预作用.方法:4周龄自发性2型糖尿病动物模型雄性OLETF大鼠20只随机分为治疗组和未治组,每组10只,另设正常LETO大鼠10只为对照.治疗组每d灌胃非诺贝特20 mg/kg,未治组和对照组每d灌胃等量蒸馏水.分别于第8周、17周和30周龄称体质量,行标准葡萄糖耐量试验(OGTT),测定空腹血糖和胰岛素、2 h血糖、甘油三酯和胆固醇.17周龄时每组随机抽取4只动物杀检,至30周龄全部杀检,取下肢骨骼肌,Western blot测定骨骼肌PDK4和E1α的表达.结果:8周龄时3组生化指标差异无统计学意义(P＞0.05).随鼠龄的增加,未治组2 h血糖、PDK4和E1α的表达高于同期对照组;与未治组比较,治疗组上述指标改善不明显(P＞0.05).结论:胰岛素抵抗大鼠骨骼肌PDK4和E1α的表达随病程增加持续增强,这可能与胰岛素在骨骼肌的作用下降有关.

类风湿性关节炎患者治疗前后血清骨钙素及肿瘤坏死因子α水平的变化

目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者治疗前后血清骨钙素(BGP)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化特点.方法:45例RA活动期患者经抗风湿治疗达缓解,治疗前后收集患者血液,分别采用放免法和酶免法测定血清BGP和TNF-α水平.以30例健康体检者为对照. 结果:与对照组比较,RA患者治疗前血清BGP水平较低,TNF-α水平较高(P＜0.05);治疗后RA患者血清BGP及TNF-α水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:RA活动期有骨质破坏及骨吸收现象;TNF-α分泌增加,可能与RA的发生及进展有关.

杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5'上游序列的克隆与序列分析

目的:克隆杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5'上游序列,并对其进行测序和序列分析.方法:提取杜氏盐藻基因组DNA,经过BamH I、EcoR I、Hind Ⅲ、Pst I、Sal Ⅰ及Xbal Ⅰ限制性内切酶分别酶切后,再与相应接头连接,分别构建盐藻步行基因组文库BL、EL、HL、PL、SL和XL.采用巢式(LA)-PCR方法,从上述步行基因组文库中扩增杜氏盐藻NR基因5'上游序列,克隆至pMD18-T,对酶切鉴定正确的克隆进行测序.结果:从HL里扩出约1 200 bp特异性片断,回收此片段并进行T载体克隆,对阳性克隆测序.该序列的3'端与已知NR基因cDNA 5'端序列完全一致.该序列含有多个与转录调控有关的保守序列(如CAAT-box和GAGA-box),含有与EBP、EFII、NF-E1、LV 等转录因子以及广谱激活剂Oct-1结合位点相似的核苷酸序列.结论:采用LA-PCR基因组步行方法,从已知cDNA 周围未知启动子或其他调控区域中克隆得到的NR基因的5'上游区序列,可能是一种新的杜氏盐藻启动子区序列.

硼酸对去卵巢大鼠雌激素样作用的观察

目的:评价硼酸的体内雌激素样效应.方法:40只SD大鼠行双侧去卵巢后,随机分为5组,阴性对照组(蒸馏水),低、中、高剂量硼酸组(4 mg/kg、25 mg/kg及75 mg/kg)及阳性对照组(0.10 mg/kg 雌二醇),连续给药3 d后处死大鼠,测定子宫脏器系数及血清总雌二醇水平.结果:阳性对照组子宫脏器系数及血清雌二醇水平均高于阴性对照组(P均＜0.05).高剂量硼酸组大鼠子宫脏器系数高于阴性对照组(P＜0.05);硼酸各剂量组血清雌二醇水平与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论:硼酸能够诱导去卵巢大鼠子宫增重,具有雌激素样效应.

丁酸钠对Hep-2细胞生长、凋亡及细胞周期的影响

目的:观察丁酸钠(SB)对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制作用,探讨其对细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:以MTT法检测0.625～10.000 mmol/L SB对Hep-2细胞生长的抑制作用;以TUNEL法检测1.250～5.000 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞凋亡情况;以琼脂糖凝胶电泳法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后的细胞DNA片段;应用流式细胞仪分析1.250 mmol/L、2.500 mmol/L、5.000 mmol/L SB作用24 h后细胞凋亡率和细胞周期变化;采用免疫组织化学SP法检测2.500 mmol/L SB作用24 h、48 h、72 h后细胞抗凋亡蛋白Survivin表达的变化.结果:SB对Hep-2细胞的生长抑制作用具有时间和剂量关系(不同时间组、不同剂量组间比较,P均＜0.01);细胞凋亡指数随SB剂量升高、作用时间延长而增加(P均＜0.01);琼脂糖凝胶电泳可见特征性的凋亡细胞DNA梯状条带;流式细胞术显示细胞凋亡率随SB剂量升高而增加(P＜0.01),细胞周期阻滞于G0/G1期;2.500 mmol/L SB作用72 h,Survivin表达阳性细胞的光密度值由作用前的0.164±0.009下降至0.045±0.006(P＜0.01).结论:SB能有效抑制 Hep-2细胞的生长,其机制可能与抑制细胞Survivin蛋白表达进而诱导细胞凋亡以及参与细胞周期调控有关.

河南汉族胃癌患者IL-1B和IL-1RN基因多态性分布特征

目的:研究河南汉族胃癌患者白细胞介素(IL)-1B和IL-1RN基因多态性的分布特点.方法:以PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法对河南汉族65例胃癌患者和130例非胃癌患者的IL-1B-31、IL-1B-511及IL-1RN基因位点的多态性进行分析.结果:胃癌患者IL-1B-31 C/C和IL-1B-511 T/T位点基因型频率高于对照人群(OR分别为6.6(95%CI=1.2～3.5)和3.3(95%CI=1.1～10.1));但IL-1RN各基因型频率2组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:IL-1B-31 C/C和IL-1B-511位点T/T基因多态性可能与河南地区胃癌的发生有关.

血液透析滤过联合血浆置换治疗妊娠并重度高脂血症性胰腺炎效果观察

目的:观察血液透析滤过联合血浆置换治疗妊娠并重度高脂血症性胰腺炎的效果.方法:选择12例妊娠并重度高脂血症性胰腺炎患者,随机分为2组.A组(n=7)行传统的胰腺炎治疗,B组(n=5)同时行血液透析滤过联合血浆置换治疗,比较2组患者住院(透析)后48 h急性生理和慢性健康评价指标Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、禁食时间、住院时间、血尿淀粉酶恢复正常时间及住院(透析)6 d后血清肿瘤坏死因子α(TNFα)水平.结果:B组患者APACHE Ⅱ评分、禁食时间、住院时间、血尿淀粉酶恢复正常时间均小于A组(P均＜0.05).A、B 2组治疗后血清TNFα水平较治疗前均降低(P均＜0.05),且B组较A组下降明显(P＜0.05).结论:血液透析滤过联合血浆置换是治疗妊娠并重度高脂血症性胰腺炎较好的方法.

磷脂酰肌醇3激酶抑制剂对17β-雌二醇作用下Ishikawa、HEC-1A细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002 对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断PI3K/Akt通路治疗子宫内膜癌的可能性. 方法:应用MTT法(10-10 mol/L、10-8 mol/L、10-6 mol/L、10-4 mol/L的E2或10-6 mol/L E2及0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L的LY294002)、流式细胞技术(0 mol/L、10-8 mol/L、10-6 mol/L E2或10-6 mol/L E2及0 μmol/L、1 μmol/L、50 μmol/L LY294002)观察LY294002对E2作用下子宫内膜癌细胞Ishikawa、HEC-1A增殖、凋亡和细胞周期的影响.结果:随着E2浓度的增加,Ishikawa细胞A(570 nm)值逐渐升高并呈时间依赖性(F=3.915,P=0.043),G0-G1期比例下降(F=50.926,P≤0.001),S期比例升高(F=17.836,P=0.001);而HEC-1A细胞周期各期比例无变化(P＞0.05).随着 LY294002浓度的增加,2种细胞A(570 nm)值逐渐下降并呈现时间依赖性(F=10.398,P=0.001;F=5.542,P=0.043),而且G0-G1期比例(F=32.024, P≤0.005;F=14.725,P≤0.017)升高,S期(F=30.132, P≤0.001;F=24.72,P≤0.01)比例下降.50 μmol/L和100 μmol/L LY294002作用2种细胞48 h后,凋亡细胞百分比均增加(P＜0.001).结论:LY294002可以抑制E2对子宫内膜癌细胞的增殖,促使其发生凋亡,抑制细胞周期进展,使细胞周期停滞在G1期.PI3K/Akt信号传导通路可作为治疗子宫内膜癌的新靶点.

粒细胞集落刺激因子对家兔后肢缺血治疗作用观察

目的:观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对缺血性疾病的治疗作用.方法:25只家兔均切断左侧股动脉及其分支,制作实验兔左后肢缺血模型后,随机分2组:实验组(n=15)皮下注射重组人G-CSF(rhG-CSF)动员兔自体干细胞释放和迁移至缺血组织,对照组(n=10)给予等体积生理盐水.连续监测血常规;术后4周,2组均行腹主动脉造影观察侧支循环血管形成情况,取内收肌和腓肠肌组织行HE染色并计数微血管密度,应用免疫组织化学方法检测内收肌和腓肠肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达的血管数.结果:实验组家兔侧支循环血管条数、微血管密度及VEGF阳性表达的血管数均大于对照组(P均＜0.05),缺血状态得到改善.结论:应用G-CSF使骨髓干细胞动员后,可促进缺血组织血管新生,增加缺血组织血液灌注,改善肢体缺血状态.

人血管内皮生长因子mRNA靶向siRNA表达载体的构建和表达

目的:构建人血管内皮生长因子(VEGF)mRNA靶向siRNA表达载体,观察其表达情况.方法:设计人VEGF靶向的发夹样siRNA,依据设计,合成2条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSUPERneo-GFP载体,转化扩增后得到重组载体pSUPERneo-GFP-siVEGF,进行序列测定.用脂质体转染法将重组载体转染食管癌细胞株Eca109,采用RT-PCR检测转染细胞VEGF mRNA的表达水平. 结果:经过酶切鉴定与测序,pSUPERneo-GFP-siVEGF构建成功.稳定转染该重组体的Eca109细胞VEGF mRNA表达水平明显降低.结论:成功构建了针对VEGF mRNA的siRNA载体, 转染细胞后可显著抑制VEGF mRNA的表达.

子宫内膜异位症患者内膜组织中转化生长因子β1与 P27kip1蛋白测定

目的:检测子宫内膜异位症患者内膜组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、P27kip1蛋白的表达,并探讨2者在子宫内膜异位症发病中的作用.方法:应用免疫组织化学SP法检测36例子宫内膜异位症(EMs)患者的异位内膜和在位内膜及23例正常子宫内膜组织中TGF-β1、P27kip1蛋白的表达.结果:正常子宫内膜组织中TGF-β1蛋白的阳性表达率低于EMs患者的在位内膜及异位内膜组织,差异均有统计学意义(P均＜0.05);正常子宫内膜组织中P27kip1蛋白阳性表达率均高于异位内膜及在位内膜组织(P均＜0.05).异位内膜组织中TGF-β1与P27kip1蛋白表达呈负相关(rs＝-0.783,P＜0.05).结论:子宫内膜组织中TGF-β1蛋白过度表达和P27kip1蛋白表达下降可能在EMs的发生发展中起促进作用.

不同肝病患者血清自体荧光光谱分析

目的:探讨肝病患者血清自体荧光光谱的特征表现.方法:应用荧光分光光度计,在301 nm的激发光激发下,对38例乙型肝炎患者、32例肝硬化患者、28例肝癌患者和91例正常人的血清进行荧光光谱测定.结果:与正常人血清自体荧光光谱比较,乙型肝炎组在448 nm附近发生紫移(P＜0.05),在605 nm附近峰强度和峰面积增大(P＜0.05);肝硬化组在302 nm附近峰强度和峰面积增大(P＜0.05);肝癌组在650 nm附近发生红移(P＜0.05).结论:不同肝病患者血清自体荧光光谱表现不同,测定血清自体荧光光谱有望对肝病进行鉴别诊断.

头部药物注射疗法对大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆的影响

目的:探讨头部药物位点注射对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习和记忆的影响.方法:选择40 d龄Wistar大鼠27只构建HIBD模型,20 d后随机分为A、B、C 3组(n=9),同时设D组(不构建模型)为正常对照(n=9).A组采用维生素B1及维生素B12固定于额顶叶处注射,1次/d,共25 d;B组采用功能训练(鲍巴斯法);C组不给予处理.50 d后4组动物开始水迷宫实验,观察4组动物搜索站台的潜伏期,评价学习记忆情况.结果:A组训练2 d后搜索站台的潜伏期短,游泳有规律,路线清晰.B组和C组训练2 d后搜索站台的潜伏期长,游泳轨迹杂乱.D组游泳轨迹清晰,潜伏期短.4组大鼠第1～5 d水迷宫试验的潜伏期,B、C组均大于A、D组(P均＜0.05),A、D组间及B、C组间差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论:药物注射疗法可改善脑损伤后的脑功能,提高学习记忆能力.

郑州市某生活饮用水水源水体富营养化状况分析

目的:了解郑州市某生活饮用水备用水源春夏两季水体富营养化状态,及其与环境理化因子的关系.方法:2004年3月到8月期间,在该水源水面设2个采样点,采用标准方法监测总氮(TN)、总磷(TP)、高锰酸盐指数(CODMn)、透明度、水温、水深、pH值、光照和叶绿素a(Chla)等指标.采用综合营养状态指数法评价其营养状态;应用直线相关分析和多元回归方法探讨Chla与各理化因子之间的关系,并初步建立Chla预测模型.结果:随着夏季的到来,该水源水质逐步由中营养状态演变为富营养状态.水温、透明度、CODMn、水深和TP与Chla有相关关系(P＜0.05).多元逐步回归分析结果显示,水温、、CODMn和TN对该水源水质状况影响较大,回归方程为:Chla=3.205×水温-3.58×CODMn-4.153×TN-15.208(R2=0.979,P＜0.001);应用该方程计算出来的预测值能够较好地与实测值吻合.结论:郑州市某备用水源富营养状态严重,并且呈现持续恶化的趋势;建立的多元回归方程能够较好的预测Chla含量的变化趋势.控制该水源中的总氮含量和CODMn对于控制其中Chla的增长有重要意义.

幽门螺杆菌Omp22-HpaA融合基因工程菌蛋白的表达

目的:优化幽门螺杆菌Omp22-HpaA基因工程菌pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达条件,并对其表达产物进行纯化和鉴定.方法:在不同诱导时机、不同诱导剂(IPTG)浓度和不同诱导时间条件下诱导pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,采用Amyloss树脂预装柱对可溶性Omp22-HpaA蛋白进行分离、纯化,对纯化后的蛋白行Western blot分析.结果:工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.4 mmol/L)诱导7 h,目的蛋白Omp22-HpaA表达量达到菌体总蛋白的20%以上.经纯化得到了较高纯度(＞90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性.结论:建立了从pMAL-c2X-Omp22-HpaA-TB1可溶性表达产物中纯化较高纯度Omp22-HpaA融合蛋白的方法.

主动脉根部瘤38例外科治疗体会

主动脉根部瘤是指主动脉窦及升主动脉根部的瘤样扩张,伴或不伴有瓣环扩张、主动脉瓣关闭不全,如不及时治疗预后较差,病死率极高[1].2001年8月至2005年12月,作者对38例主动脉根部瘤患者行外科手术治疗,效果良好,报道如下.

青少年首发精神分裂症偏执型患者30例治疗体会

在精神分裂症的治疗中,抗精神病药物起着重要作用.自氯丙嗪应用以来,精神分裂症的阳性症状得到了有效控制,但阴性症状、生活质量及认知功能尚未得到有效改善[1-2].作者将舍曲林与舒必利合用治疗青少年首发精神分裂症偏执型患者30例,效果良好,报道如下.

抗凝血酶-Ⅲ治疗急性早幼粒细胞白血病并发DIC 5例分析

急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者的出血倾向通常是因为白血病细胞释放的促凝活性物质引起的弥散性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)所致.

女性盆腔肉瘤4例临床分析

卵巢和宫颈来源的肉瘤十分罕见,迄今文献报道的病例仍很有限,而肉瘤的临床特征、治疗方案及预后,与常见的卵巢和宫颈恶性肿瘤既有相似之处又存在差异,明确诊断需依赖病理学检查[1].2000年至2005年,作者收治女性生殖系统非宫体来源的肉瘤患者4例,均采取手术联合化疗治疗,效果满意,报道如下.

局部湿热敷治疗静脉炎25例

2003年7月至2006年1月,采取局部湿热敷的方法治疗经外周静脉穿刺中心静脉导管(PICC)所致静脉炎25例,效果较好,现报道如下.

脊柱畸形11例16层螺旋CT扫描及后处理评价

多层螺旋CT (MSCT)具有很高的时间及空间分辨率,并且可以实现重建图像的各向同性,在全身各系统疾病的诊断中均具有极高的优越性[1-2].目前,MSCT扫描能准确地显示脊柱畸形节段的变异和分布情况,有助于区分各类畸形,且可以判断畸形发展的趋势,为制订手术方案提供影像学基础[3].

洛汀新联合代文治疗糖尿病肾病80例效果观察

近年来糖尿病(DM)发病率在我国呈增长趋势,而糖尿病肾病(DN)是DM的严重并发症之一,也是导致死亡的重要原因之一,因此,预防和治疗DN显得尤为重要.血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)是目前临床常用药物,2者可从不同层次阻断肾素-血管紧张素系统,对DN有保护作用[1-2].

经纤维支气管镜氩离子束凝固术治疗气管狭窄4例

氩离子束凝固术(argon plasma coagulation,APC) 又称氩气刀,是一种新的非接触性电凝固技术,其原理是应用高频电流将氩气流(等离子体) 电离使组织凝固[1].近年来,将氩等离子体经纤维支气管镜(纤支镜)导入气管对病灶进行治疗的优势逐渐显现出来,并受到临床的关注[2].

急性胰腺炎65例CT诊断体会

急性胰腺炎为较常见而严重的急腹症,临床表现复杂,仅根据临床症状和实验室检查30%～40%的患者可能漏诊[1].CT检查是急性胰腺炎准确的影像学检查手段,不但能明确诊断,还能评估其严重程度,发现并发症,对预后进行判断[2-3].

上消化道异物176例内镜钳取体会

1998年至2005年,作者经内镜取出上消化道异物176例,成功171例,失败5例,报道如下.1 临床资料1. 1 一般资料 176例患者中,男107例,女69例,中位年龄27(1～81)岁;其中～10岁63例,～20岁14例,～30岁26例,～40岁18例,～50岁11例,～60岁15例,＞60岁29例.

癫(疒间)持续状态37例临床分析

癫(疒间)持续状态(status epilepticus, SE)是神经内科急症,其致残率和病死率均很高[1].本科自1999年5月至2006年4月共收治37例SE患者,现对其临床资料总结报道如下.

股骨骨折微创治疗32例体会

2003年6月至2006年3月,采用经大转子顶点进钉应用微创髓内钉插钉技术治疗股骨骨折32例,经6个月至3 a的随访,效果满意,报道如下.

静脉推注和静脉冲入阿霉素对静脉血管的影响

化疗药物有一定的毒副作用,静脉给药,特别是注射方法选择不当,易引发静脉炎和渗漏损伤,据报道,静脉推注化疗药物致静脉炎发生率为57.6%[1].外周静脉化疗药物外渗的发生率国内报道是0.1%～6.0%[2].作者观察了阿霉素静脉冲入和静脉推注给药方法对静脉血管的影响,为临床护理提供依据.

心理因素对乙肝相关性肾病患者生存质量的影响

乙肝相关性肾病病程长,并发症多,治疗效果不明显,疾病后期生存质量差[1].作者对在本院治疗的乙肝相关性肾病患者的心理状况进行了调查,现报道如下.

额叶脑挫伤合并额骨粉碎性骨折17例手术治疗体会

交通事故中,以前额着力所致的颅脑损伤常常导致双侧额叶的脑挫裂伤、额叶脑内血肿、额骨及前颅底的粉碎性骨折,后者容易引起脑脊液鼻漏及部分患者视力障碍[1].2000年6月至2006年6月,作者共收治额叶脑挫伤合并额骨粉碎性骨折患者17例,经手术治疗效果满意,报道如下.

斯氏针内固定治疗锁骨骨折39例观察

锁骨骨折是骨科常见的疾病,切开复位斯氏针内固定花费少、创伤小,但常可见斯氏针滑动,造成手术失败[1].1996年至2004年,作者采用斯氏针内固定治疗锁骨骨折39例,效果良好,报道如下.

羊心室心肌细胞动力学观察

目的:探讨成体羊心室心肌细胞增殖与死亡的方式及规律.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室心肌细胞,包括工作心肌细胞和传导心肌细胞,均可见明显的无丝分裂相和细胞死亡特征.结论:正常成体羊心室心肌细胞存在增生和死亡的动力学过程,且羊心室心肌细胞增殖的主要方式是无丝分裂.

成人和成体羊心脏组织动力学比较

目的:比较正常成人和成体羊心脏的组织动力学过程,探讨心脏组织演化的规律.方法:取12只山羊和6例人尸检心脏组织标本及羊心脏传导系统标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成人与成体羊心脏组织演化均包括心内膜-心肌演化体系、房室间区-心肌演化体系和肌层内心肌演化体系,但在羊心内膜-心肌演化体系中的优势演化途径是心内膜细胞-心肌生成单位-心肌细胞演化系,人的优势演化途径是心内膜细胞-非心肌生成单位-心肌细胞演化系;在肌层内心肌演化体系中有细胞重建的重要演化方式.结论:正常成人和成体羊心肌演化总体模式基本相似,但各自具有不同优势演化途径.

成人和3种成体哺乳动物血管组织动力学研究

目的:观察正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁组织结构及其演化关系,探讨血管的组织动力学过程.方法:5例成人尸检大动脉和中动脉标本、5只家犬主动脉和股动脉标本、12只大鼠大动脉至髂动脉标本、3只家兔大动脉标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成人与成体犬、大鼠、家兔大中血管壁一般包括内膜、中膜、外膜和鞘膜4层.血管内膜内皮表面可见成血-血管干细胞归巢和内化与血液沉积物及其表面内皮化;内膜与中膜之间可见内膜细胞与膜平滑肌细胞演化序列;中膜与外膜之间可见平滑肌退变序列;外膜外有神经源的鞘膜.植物神经末端可演化形成滋养血管.结论:正常成人、犬、大鼠和家兔大中血管壁主要由归巢和沉积方式来源于成血-血管干细胞形成的内膜细胞演化而成,内膜细胞演化形成中膜平滑肌,平滑肌退化而成外膜.

心肌肥大成人心脏组织动力学观察

目的:观察心肌肥大成人心脏组织动力学特点.方法:4例心肌肥大患者尸检心脏组织标本常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:心肌肥大心脏心肌细胞可见无丝分裂相,细胞核纵裂所占比例比正常心脏增加,细胞死亡征象明显,心肌层内血管形成受阻.结论:心肌肥大心脏组织动力学的基本特征是由于血源性生心肌干细胞来源不足,导致心肌老龄化.

羊心脏蒲肯野纤维和蒲肯野纤维-心肌束连接观察

目的:观察羊心脏蒲肯野纤维的演化过程和蒲肯野纤维与心肌束连接及其演化关系.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室肌层内蒲肯野纤维,按组成细胞的演化程度不同分为6级.蒲肯野纤维-心肌束的连接方式随连接所在部位、蒲肯野纤维的演化程度而不同.结论:正常成体羊心室肌层内的蒲肯野纤维为束细胞和(或)心肌细胞组成的动态结构.蒲肯野纤维与心肌束有多种连接方式,但均反映2者存在演化关系.

成人和成体羊心脏心内膜的组织动力学观察

目的:观察并比较正常成体羊和人心脏心内膜细胞,探讨心内膜的一般组织动力学过程.方法:取12只山羊和6例人尸检心脏组织标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊与成人心脏均发现内皮细胞无丝分裂相.内膜细胞来自成血-血管内皮干细胞归巢和内化及内皮细胞增生迁移.内膜细胞可以演化形成心肌细胞.结论:正常成体心脏一般组织动力学特征是内膜细胞以多种方式来源于成血-血管干细胞,内膜细胞可通过多种途径演化为心肌细胞.

羊心脏束细胞-心肌细胞演化系观察

目的:观察羊心室内膜下层束细胞演化形成心肌细胞的动态过程.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室内膜下Ⅰ型束细胞分裂增生为Ⅱ型束细胞团或心肌生成单位.生成单位经横向与纵向2种方式,演化形成蒲肯野纤维和工作心肌细胞;部分Ⅰ型束细胞经Ⅱ型束细胞直接演化为工作心肌.结论:正常成体羊心室传导心肌和工作心肌属同-细胞演化系,羊心室心肌主要来源于束细胞-心肌细胞演化系.

本刊参考文献著录要求

脑胶质瘤不同位点肿瘤干细胞的特性分析

目的:随着对肿瘤细胞研究的不断深入,人们提出了"肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)学说"[1-2],认为肿瘤细胞具有异质性,在肿瘤组织中存在数量极少的瘤细胞,具有无限增殖的潜能,在肿瘤的发生、发展中充当着干细胞的角色,起着决定性作用,而其余大多数细胞为肿瘤干细胞的分化细胞,不具有成瘤能力,经过短暂的分化,终死亡.