郑州大学学报(医学版)杂志
Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) 정주대학학보(의학판)
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MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用
目的:探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制.方法:将12只6~8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×106个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17AmRNA的相对表达量.结果:MBP能抑制肿瘤的生长(P<0.05).与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γ mRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降(P<0.05).结论:MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应.
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miR-200c对三阴性乳腺癌细胞系上皮间质转化的影响
目的:探讨miR-200c对三阴性乳腺癌细胞系上皮间质转化的影响.方法:选取三阴性人乳腺癌细胞系BT549、MDA-MB-231和非三阴性人乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3为研究对象,各细胞系按转染情况分为A组(miR-200c模拟物/Lipo2000组)、B组(miR-200c阴性对照物/Lipo2000组)、C组(miR阴性对照物/Lipo2000组)、D组(Lipo2000组)、E组(空白对照组).分别提取各组细胞的总RNA和蛋白,通过RT-PCR检测Slug和E-cadherinmRNA表达水平,通过Western blot检测Slug和E-cadherin蛋白表达水平.采用划痕实验检测BT549和MDA-MB-231的迁移能力.结果:三阴性细胞系与非三阴性细胞系相比,E组Slug、E-cadherin在mRNA与蛋白水平的表达量,差异有统计学意义(P<0.05).转染miR-200c后,三阴性细胞系BT549、MDA-MB-231 Slug在mRNA和蛋白水平表达量均降低(P<0.05),E-cadherin在mRNA和蛋白水平表达量均增高(P<0.05),细胞迁移能力下降(P<0.05).结论:miR-200c可通过下调三阴性乳腺癌细胞系Slug的表达,进而抑制上皮间质转化,降低细胞迁移能力.
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靶向HIF-1α基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒的构建与鉴定
目的:构建靶向低氧诱导因子(HIF)-1α基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒,并体外鉴定其敲除效果.方法:设计靶向HIF-1α基因的gRNA序列,将其插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体pCAG-T7中,转化后挑取克隆,进行测序验证.将构建好的重组质粒体外转染人肝癌细胞HepG2和SK-Hep-I,利用嘌呤霉素进行筛选并扩大培养获得HIF-1α基因敲除混合克隆细胞,应用Western blot技术检测未转染细胞和混合克隆细胞中HIF-1α蛋白的表达情况.结果:经测序验证,成功构建了靶向HIF-1α的重组质粒pCAG-T7-HIF-1α-gRNA,经Western blot验证,转染该重组质粒后人肝癌细胞株HepG2和SK-Hep-1经CoCl2诱导HIF-1α蛋白表达明显减弱.结论:成功构建了靶向HIF-1α基因的CRISPR/Cas9基因敲除质粒载体.
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肌萎缩侧索硬化患者脑脊液对U251细胞隧道纳米管形成的影响
目的:探讨肌萎缩侧索硬化(ALS)患者脑脊液对神经胶质细胞隧道纳米管(TNTs)形成的影响.方法:收集16例ALS患者的脑脊液(ALS-CSF)及10例功能性头痛患者的脑脊液(对照),分别用于培养U251细胞0、3、7、10、14 d,采用免疫荧光显微镜观察TNTs的形成,记录表达TNTs结构的U251细胞百分比,采用Western blot法检测ALS-CSF培养0、3、7、10、14d后U251细胞中F-actin蛋白的表达.结果:在ALS-CSF培养条件下,表达TNTs结构的U251细胞百分比较对照组增加(P<0.05),且表达TNTs结构的U251细胞百分比在3d时开始增加,7d时达到高峰,10d时开始逐渐下降;ALS-CSF培养的U251细胞F-actin表达量在3d时升高,在7d时表达量高,在10d时开始下降.结论:ALS-CSF培养的U251细胞在早期可诱导TNTs的形成,可能促使ALS相关致病蛋白通过TNTs在中枢神经系统中播散.
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Nrf2对肝纤维化过程中炎症细胞的影响
目的:探索在四氯化碳诱导小鼠肝纤维化形成过程中,核因子相关因子2(Nrf2)对炎症细胞浸润的影响.方法:野生鼠和Nrf2基因敲除鼠各24只,分别随机平均分成对照组和模型组.HE染色、Masson三色染色观察肝组织病理学变化及肝脏纤维化程度;天狼星红染色观察胶原沉积情况;免疫组化方法检测肝组织中中性粒细胞浸润(Ly6-G阳性)情况;免疫荧光方法检测巨噬细胞浸润及活化(ER-MP23阳性)情况.结果:两个对照组均未有肝纤维化表现;基因敲除模型组小鼠肝组织坏死及纤维化程度重于野生模型组,胶原含量更多(P<0.05).四氯化碳诱导可增强肝组织中中性粒细胞的浸润,但基因敲除鼠中性粒细胞浸润轻于野生模型鼠(P<0.05).Nrf2基因敲除和四氯化碳诱导均增强肝组织中巨噬细胞的活化,两者具有协同效应(P<0.05).结论:Nr2可以通过抑制巨噬细胞活化抑制四氯化碳诱导的肝纤维化发展.
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稳定感染HPV-16E6-E7的人喉咽鳞癌FaDu细胞生物学特性观察
目的:观察稳定感染HPV-16 E6-E7对FaDu细胞生物学行为的影响和调控.方法:全基因合成HPV-16E6-E7基因,将其与慢病毒载体pLV-EGFP-C在T4连接酶作用下连接.制备重组HPV-16 E6-E7慢病毒并感染FaDu细胞.将细胞分3组:实验组(重组HPV-16 E6-E7慢病毒稳定感染的FaDu细胞)、载体对照组(慢病毒空载体稳定感染的FaDu细胞)和空白对照组(未感染慢病毒的FaDu细胞).分别用CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,Transwell侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力.结果:获得稳定感染重组HPV-16 E6-E7慢病毒的FaDu细胞,荧光显微镜下可见明亮的绿色荧光蛋白 EGFP表达.整合HPV-16 E6-E7基因的FaDu细胞增殖能力和侵袭力均增强,细胞凋亡率降低,S期和G2/M期细胞增加,G0/G1期细胞减少(P<0.05).结论:成功建立了HPV-16 E6-E7基因整合的FaDu细胞.
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5个五核苷酸Y-STR基因座在河南汉族群体中的遗传多态性
目的:调查Y染色体上5个五核苷酸Y-STR基因座DYS446、DYS447、DYS463、DYS588和DYS643在河南汉族群体中的遗传多态性,评价其法医学应用价值.方法:收集403名河南汉族无关男性个体血样,检测上述5个基因座,进行等位基因分型及遗传统计分析.结果:5个Y-STR基因座分别检出了11、9、7、9和6个等位基因,其中DYS446和DYS447基因多样性(GD)达0.815 14和0.843 96,DYS463和DYS643的GD达0.777 18和0.720 60.共检测到311种单体型,其中261种单体型仅出现1次,个体识别力(DP)和单体型多样性(HD)分别为0.995 45和0.99793,单体型辨别能力(DC)为0.771 71.结论:5个基因座组成的单体型在河南汉族群体中具有较高的遗传多态性,对于法医学实践应用和人类遗传学研究具有重要意义.
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低能激光照射对大鼠心肌梗死后miRNA-21表达的影响
目的:观察低能激光照射(LLLI)对大鼠心肌梗死区及其边缘组织中miRNA(简称miR)-21表达的影响.方法:将110只SD大鼠分为假手术组(30只)、对照组(40只)和治疗组(40只).对照组和治疗组通过结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,假手术组同部位只穿线不结扎,3周后治疗组采用LLLI处理梗死区域,对照组和假手术组照射同一区域但治疗仪不接通电源,各组分别于照射后1h、24 h、48 h、72 h、7d取梗死及边缘组织,采用RT-PCR法检测miR-21的表达.结果:梗死中心和边缘区比较,不同组别之间miR-21表达量比较差异有统计学意义(P <0.001),处理后不同时间miR-21表达量比较差异有统计学意义(P<0.001);治疗组梗死区miR-21的表达在LLLI处理后各时间点的表达量均高于对照组(P<0.05);治疗组梗死边缘miR-21的表达量在48 h达到峰值,且不同时间点的表达量均高于对照组和假手术组(P<0.05).结论:LLLI处理梗死心肌能有效上调梗死及边缘区域miR-21的表达,有较好的心肌保护作用.
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基于RNA-seq的杜氏盐藻全转录组测序与分析
目的:利用RNA-seq技术对杜氏盐藻细胞的全部转录本进行测序、功能分析.方法:提取杜氏盐藻总RNA,反转录得cDNA,在Illumina平台上进行测序,经拼接、组装、聚类后获得全部unigene,并将所得unigene与数据库比对,对其进行功能注释和分类.结果与结论:共得到197 295个unigene,将获得的unigene与NR、SWISS-PROT、CDD、KEGG和TREMBI数据库进行比对,有89 800个unigene获得注释.其中95 767个unigene映射到GO的不同功能节点;5 710个unigene获得COG注释,并分为22个功能分类;9 497个unigene获得了KEGG注释,映射到282条信号通路.所得杜氏盐藻的转录组信息为今后相关研究与应用提供了丰富的资源和线索.
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干扰素联合利巴韦林对慢性丙型肝炎患者CD8+T细胞亚群功能的影响
目的:探讨干扰素联合利巴韦林对慢性丙型肝炎患者外周血中CD8+T细胞亚群功能的影响.方法:密度梯度离心法从慢性丙型肝炎患者外周血中获取外周血单个核细胞,体外给予干扰素和(或)利巴韦林处理.用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD8+T细胞分泌干扰素γ和穿孔素(Perforin)的水平;用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞中干扰素相关基因IRF7和IFIT1的表达.结果:细胞内因子检测发现干扰素联合利巴韦林处理能增加CD8+T细胞中效应性T细胞分泌干扰素γ和Perforin的水平(P<0.05),同时能增加中心记忆性T细胞和效应记忆性T细胞分泌Perforin的水平(P<0.05);基因转录水平的检测发现干扰素联合利巴韦林处理后干扰素调节基因IFIT1的表达增加(P<0.05).结论:慢性丙型肝炎患者的外周血单个核细胞体外经干扰素联合利巴韦林处理后,CD8+T细胞的杀伤功能增强.
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脂肪源间充质干细胞移植对D-半乳糖衰老模型大鼠肾、肺组织中衰老相关蛋白表达的影响
目的:探讨脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)静脉移植对D-半乳糖衰老模型大鼠的抗衰老效果.方法:18只SD大鼠随机平均分为3组,模型组与移植组大鼠连续8周腹腔注射D-半乳糖[100 mg/(kg·d)],对照组腹腔注射生理盐水.然后移植组尾静脉注射ADMSCs(4×106个),模型组和对照组尾静脉注射生理盐水.4周后,采用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,并测定大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用Westernblot法检测大鼠肾与肺组织中衰老相关蛋白沉默信息调节因子1(Sitr1)、P16、P21及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠空间学习记忆能力降低(P<0.05);与模型组相比,移植组大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05).与对照组相比,模型组大鼠血清中SOD活性降低,肾与肺组织中Sirt1、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),P21、P16蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,移植组大鼠血清中SOD活性增加(P<0.05),肾与肺组织中Sirt1、PCNA蛋白表达水平升高(P<0.05),P21、P16蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:ADMSCs静脉移植治疗抗衰老作用明显,其可能通过调节衰老相关蛋白表达发挥作用.
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沉默NOX1表达对A549细胞增殖的影响
目的:探讨NOX1对肺癌A549细胞凋亡和增殖的影响.方法:通过瞬时转染技术转染特异性的NOX1小干扰RNA(siRNA),按转染情况分为Mock组、NC组、FAM-NC-NOX1 siRNA组,转染12 h后采用Western blot检测NOX1蛋白的表达,通过荧光探针DCFH-DA检测细胞ROS水平,流式细胞仪检测细胞增殖活性和凋亡率.结果:siRNA转染12h以上,转染率稳定在80%以上,NOX1蛋白的表达量与Mock组相比下降(P<0.05);与Mock组相比,FAM-NC-NOX1 siRNA组细胞在24、36、48 h的增殖活性均下降,ROS水平也下降(P<0.05).结论:NOX1siRNA转染A549细胞能有效抑制细胞的增殖.
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河南农村地区汉族2型糖尿病人群VDR基因ApaⅠ和TaqⅠ位点基因多态性检测
目的:探讨河南农村地区汉族人群维生素D受体(VDR)基因Apa Ⅰ和Taq Ⅰ位点基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法:采用RCR-RFLP技术检测河南省汉族人群中286例T2DM患者、286例健康对照VDR基因Apa Ⅰ和Taq Ⅰ位点的多态性.分析2组间Apa Ⅰ和Taq Ⅰ等位基因、基因型和单倍体型分布与T2DM的关系.结果:2组间Apa Ⅰ等位基因频率差异有统计学意义(P=0.036),T等位基因携带者患T2DM的风险是未携带者的1.328倍(95% CI=1.018~1.733).2组间Taq Ⅰ等位基因和基因型分布差异均无统计学意义(P>0.05).Apa Ⅰ和Taq Ⅰ之间存在连锁不平衡(D '=0.744),其中,单倍体型Apa Ⅰ-Taq Ⅰ TT在病例组的分布频率高于对照组[x2 =7.313,OR(95%CI) =1.485(1.114~1.981),P<0.05].结论:在河南农村汉族人群中,VDR基因ApaⅠ位点的等位基因T和单倍体型TT可能是T2DM的遗传易感因素.
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河南某工厂附近农田土壤中抗生素抗性基因与可移动遗传元件的分布
目的:观察河南某工厂附近农田土壤中抗生素抗性基因和可移动遗传元件的分布.方法:分别于不同时间点采集河南某工厂主导风向下风向上距离为700~2 500 m不等的7块农田土壤的土样,提取总DNA,采用PCR法检测15种抗生素抗性基因(包括四环素类药物抗性基因tetA、tetC、tetE、tetM、tetQ、tetW,磺胺类药物抗性基因sul Ⅰ、sulⅡ,β内酰胺类药物抗性基因bla-TEM、SHV、CTX-M-1,喹诺酮类药物的抗性基因qnrA、qnrB、qnrS,链霉素类药物抗性基因strA)和4种可移动遗传元件(包括整合酶基因intI1、intI2,插入序列共同区基因orf513、ISCR2),PCR阳性产物送测序,通过BLAST与GenBank数据库进行同源性比对.结果:共检出8种抗生素抗性基因,分别是sulⅡ、tetC、bla-TEM、sul Ⅰ 、tetA、strA、tetM和tetW;3种可移动遗传元件intI1、intI2、ISCR2.各PCR扩增阳性产物经测序比对后,与GenBank已有序列识别度为95%~ 100%.各基因在不同距离土样中的阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05),sulⅡ、tetC、bla-TEM和intI1在不同时间点的土样中阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:该工厂附近农田土壤中常见抗生素抗性基因及可移动基因元件为sulⅡ、tetC、bla-TEM、sul Ⅰ和intI1,除sul Ⅰ外,sulⅡ、tetC、bla-TEM和intI1的分布均具有时间差异,但在不同距离农田土壤中分布稳定.
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重组人促红细胞生成素对短暂性缺氧新生大鼠的神经保护作用
目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)的神经保护作用.方法:将7日龄雄性SD大鼠随机分为对照组、单纯缺氧组和治疗组.对照组不做缺氧处理,治疗组先建立短暂性脑缺氧大鼠模型,后经腹腔注射法给予rhEPO治疗,对照组和单纯缺氧组于相同时间点腹腔注射等量生理盐水.采用于-湿重法测量脑组织含水量,尼氏染色观察海马CA1区神经元形态学变化,Western bolt检测海马组织中凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达情况.Morris水迷宫检测大鼠的神经行为学变化.结果:与对照组相比,单纯缺氧组大鼠脑组织含水量增加,海马CA1区退行变性神经元数目增多(P <0.001),细胞核固缩、深染明显;cleaved-Caspase-3、Bcl-2及Bax表达增加(P <0.001).治疗组与单纯缺氧组相比,脑组织含水量及海马CA1区变性神经元数目明显减少,cleaved-Caspase-3、Bax表达减少而Bcl-2表达增加(P<0.05).单纯缺氧组大鼠的学习记忆能力较对照组明显下降,而治疗组的学习记忆能力较单纯缺氧组有显著改善(P<0.001).结论:rhEPO对HIE新生大鼠具有神经保护作用,能够减轻急性期脑水肿及海马神经元损伤,改善大鼠学习记忆能力.
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河南省居民住院卫生服务未利用情况及影响因素分析
目的:了解河南省居民应住院未住院的卫生服务未利用情况及影响因素.方法:采用多阶段分层、整群抽样的方法抽取河南省18个地区共33 426人,调查其基本情况及2013年应住院未住院原因、次数等卫生服务未利用情况并进行分析.结果:河南省居民2013年的应住院未住院率为19.57%.应住院未住院的主要原因为经济困难(50.47%)、没有必要(22.79%).单因素分析结果显示年龄、是否患有慢性病、是否贫困、行动方面、从事日常活动和身体是否疼痛或不舒服有统计学意义(P<0.05).多因素logistic回归分析显示影响居民应住院未住院情况的因素有年龄、身体疼痛或不舒服和是否贫困(P<0.05).结论:是否贫困和身体疼痛或不舒服是影响河南省居民应住院未住院的重要因素,要加强对贫困人口的医疗救助力度及对居民自身健康状况的关注力度,提高卫生服务的利用率.
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下颌前牙区牙槽骨骨壁厚度及牙根长轴的测量
目的:应用锥形束CT(CBCT)测量下颌前牙唇舌侧骨壁厚度,以及牙根长轴相对牙槽突长轴的位置关系,为即刻种植提供临床指导.方法:选取54例中国汉族正常(牙合)个体的CBCT图像,测量下颌前牙釉牙骨质界(CEJ)下1、3、5、7 mm处唇、舌侧骨壁厚度,以及牙根长轴相对牙槽突长轴的位置关系,比较左右侧同名牙、每个牙位唇舌侧骨壁厚度的差异以及不同性别之间唇舌侧骨壁厚度及牙根长轴与牙槽突长轴夹角的差异.结果:下颌前牙左右侧同名牙相应骨壁厚度差异无统计学意义,除下尖牙CEJ下1 mm处的唇舌侧骨壁厚度差异无统计学意义外,下中切牙和下侧切牙CEJ下1 mm处唇侧比舌侧骨壁厚,其余部位舌侧比唇侧骨壁厚(P<0.05).不同性别间唇舌侧骨壁厚度的差异无统计学意义(P>0.05),但下颌尖牙处男性牙根长轴与牙槽突长轴的夹角小于女性(P=0.018).结论:测定了中国人汉族正常牙人群下颌前牙区不同高度水平唇舌侧骨壁厚度,为成人即刻种植提供了参考和依据.
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胎膜早破孕妇胎膜不同区域及胎盘组织中孕酮膜受体组件1的表达
目的:探讨胎膜早破(PROM)患者胎膜破裂(RS)区、远离破膜(DS)区胎膜组织及胎盘组织中孕酮膜受体组件1(PGRMC1)的表达及意义.方法:选择20例PROM孕妇作为病例组、20例无宫缩择期剖宫产孕妇作为对照组.采用免疫组化法对PGRMC1蛋白的表达进行定位,采用Western blot方法检测两组孕妇胎膜RS区、DS区及胎盘组织中PGRMC1蛋白的表达.结果:PGRMC1主要在绒毛膜和蜕膜中表达.与对照组相比,PROM组胎膜RS区和胎盘组织中PGRMC1蛋白表达降低(P<0.05);PROM组胎膜RS区和胎盘组织中PGRMC1蛋白表达低于DS区(P<0.05).结论:孕妇胎膜RS区和胎盘组织中PGRMC1蛋白的低表达可能参与了PROM的发生.
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螺内酯对心肌肥厚大鼠心肌组织中可溶性ST2表达的影响
目的:研究螺内酯对心肌肥厚大鼠IL-33/ST2通路中可溶性ST2(sST2)的影响.方法:选取健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组(n=10)、模型组(n=10)、药物干预组(n=10).对照组皮下注射生理盐水,模型组皮下注射异丙肾上腺素(ISO),药物干预组皮下注射ISO+螺内酯20 mg/(kg·d)灌胃,余各组用等量生理盐水灌胃.14 d后处死大鼠,测量心脏质量指数、左心室质量指数及心肌细胞直径;免疫组化法及RT-PCR法检测心肌组织中sST2的表达.结果:模型组与药物干预组心脏质量指数、左心室质量指数及心肌细胞直径均高于对照组(P<0.05);模型组sST2的表达高于对照组和药物干预组(P<0.05).结论:螺内酯可能通过调节IL-33/ST2通路中sST2的表达,抑制ISO诱导的心肌肥厚.
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冠状位头部标本切削冷冻包埋及图像采集技术
目的:构建人头部结构冠状切面图像数据系统.方法:遴选合适捐献的新鲜遗体尸头,采用数字人标本铣切技术,冠状位由前向后对尸头逐层切片、采集图像,图像经后期处理构建数字头部图像数据集.筛骨部分切片间隔为0.03 mm,其他部位间隔为0.06 mm.利用佳能5DⅢ照相机采集图像,采取RAW和JPEG两种格式存储照片.结果:采集RAW格式和JPEG格式图像各3 854幅,其中切片间隔0.03 mm的图像有1 437幅,间隔0.06 mm的图像有2 417幅,形成的RAW格式图像平均每幅24.5 MB,形成的JPEG格式图像平均每幅5.9 MB.图像分辨率为2 210万像素(5760×3 840).RAW格式和JPEG格式图像总计117.162 G.结论:建立了世界上切削厚度薄的人类头部切面图像数据集,同时也是世界上第一套冠状位人类头部切面图像数据集.
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胃巨大毛石症腹腔镜治疗一例
胃石是外源性物质未被消化或未完全消化而在胃内凝结成的团块,胃毛石是临床较少见的一种,多见于精神或行为异常的年轻长发女性.郑州大学第一附属医院消化内科收治胃巨大毛石症患者一例,现报道如下.
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卵巢上皮性癌组织中IGF-1、E-cad蛋白的表达以及IGF-1对卵巢癌SKOV3细胞E-cad表达和侵袭力的影响
目的:检测卵巢上皮性癌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和上皮性钙黏连蛋白(E-cad)的表达以及IGF-1作用于卵巢癌SKOV3细胞后E-cad蛋白的表达和细胞侵袭力的改变,探讨IGF-1在上皮间质转化中的作用.方法:采用免疫组化SP法检测30例卵巢上皮性癌、10例卵巢上皮性交界性肿瘤、10例卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢组织中IGF-1及E-cad蛋白的表达.以不同质量浓度(0、25、50、100、200 μg/L)的IGF-1刺激SKOV3细胞,应用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测E-cad mRNA和蛋白的表达,Transwell法检测细胞侵袭力的变化.结果:卵巢上皮性癌、卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中IGF-1的阳性表达率分别为73.3%、30.0%、20.0%和10.0%,E-cad的阳性表达率分别为36.7%、60.0%、70.0%和90.0%;与其他3种组织比较,卵巢上皮性癌组织中IGF-1蛋白的阳性表达率升高,E-cad蛋白的阳性表达率降低(P均<0.05);卵巢上皮性癌组织中IGF-1和E-cad的表达均与临床分期、组织学分级、两级分级系统有关(P均<0.05),而与年龄、组织学类型无关(P均>0.05),且在卵巢上皮性癌组织中IGF-1与E-cad蛋白的表达呈负相关(rP=-0.396,P=0.018).不同质量浓度的IGF-1作用于SKOV3细胞后,E-cad的表达逐渐降低,SKOV3细胞侵袭力增强,且呈剂量依赖性(P<0.05).结论:IGF-1、E-cad可能与上皮性卵巢癌的上皮间质转化、侵袭转移有关.
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Morisky问卷测量AIDS患者服药依从性的信度和效度
严格规范的抗病毒治疗能够有效延长AIDS患者生命和降低病毒的耐药性[1-2],因而良好的治疗依从性成为AIDS治疗的关键.然而,目前国内判别AIDS患者服用抗病毒药物的依从性主要采用定性标准评价,缺乏专用定量评价工具.Morisky等[3]1986年发布了用于测量高血压患者服药依从性的问卷(Morisky Medication Adherence Scale,MMAS),它后来也被许多研究者用于测量抑郁、糖尿病、结核病等多种慢性病患者的服药依从性.国内亦有部分研究[4-5]应用该问卷评测AIDS患者服药情况,但均未进行信度和效度分析,无法把握该问卷在AIDS患者群中的适用性.该研究以河南省AIDS患者为样本,评价Morisky问卷的信度和效度,分析该问卷是否适用于AIDS患者服药依从性的评估.
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卵泡液中游离DNA含量与卵母细胞成熟度及胚胎质量的关系
目的:探讨卵泡液中游离DNA含量与卵母细胞成熟度及胚胎质量的关系.方法:共收集了87位患者的成熟与未成熟卵泡液.以年龄30岁为界,定义年龄<30岁的为A组,年龄≥30岁的为B组.使用DNA手工提取法(改良酚-氯仿-异丙醇法)进行卵泡液中游离DNA的提取并检测.结果:成熟卵泡液组中游离DNA含量[(1 168.4±81.1) μg/L]低于未成熟卵泡液组[(1 875.6±95.7)μg/L],差异有统计学意义(P <0.001).A组可移植胚胎数目[(5.6±2.7)个]、优质胚胎数目[(3.9±1.8)个]高于B组[(4.1 ±2.5)和(2.5±1.6)个],A组成熟卵泡液中游离DNA含量[(1 129.4±78.6)μg/L]低于B组[(1 214.2±56.8) μg/L],差异均有统计学意义(P<0.001).结论:游离DNA含量可能是评价卵泡细胞成熟度以及预测胚胎质量的指标.
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卵巢早衰与非早衰者受卵IVF-ET治疗结局分析
目的:探讨卵巢早衰(POF)、非POF患者受卵IVF-ET的治疗结局及影响因素.方法:回顾性分析2012年11月至2015年1月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行受卵冻融胚胎移植助孕的267例POF、非POF患者和267例同期行赠卵IVF/ICSI患者的治疗情况及妊娠结局.结果:POF、非POF受卵者每个IVF周期的受卵数分别为3.98、4.13个.赠卵者新鲜移植胚胎周期和解冻移植胚胎周期的临床妊娠率分别为52.50%、63.53%,受卵POF组、非POF组解冻移植胚胎周期的临床妊娠率分别为62.96% 、51.59%,4组间差异无统计学意义(P=0.099).受卵非POF解冻移植胚胎周期的单胎活产率低于赠卵新鲜移植胚胎周期和解冻移植胚胎周期(P<0.05).赠、受双方IVF/ICSI周期的受精率、胚胎形成率、优质胚胎形成率及胚胎移植周期的胚胎种植率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:赠卵IVF-ET治疗中适当减少赠卵数并不影响赠、受卵者的治疗结局.
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HDAC2siRNA转染对卵巢癌ovcar3细胞中p53和乙酰化p53k320表达的影响
目的:探讨靶向沉默组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)对人卵巢癌ovcar3细胞中p53乙酰化位点k320表达的影响.方法:将ovcar3细胞随机分为空白组、对照组和实验组3组,实验组以HDAC2 siRNA转染细胞,对照组转染对照siRNA,空白组不处理,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测3组细胞中HDAC2 mRNA和蛋白的表达,Western blot检测3组细胞中p53、乙酰化p53k320蛋白的表达.结果:与空白组及对照组相比,实验组HDAC2 mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),p53蛋白和乙酰化p53 k320蛋白表达均升高(P<0.05).结论:下调HDAC2的表达可使p53和乙酰化p53k320表达增加.
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宫颈原位腺癌的常用病理学诊断
近50 a来,随着宫颈脱落细胞学的发展及普及,宫颈鳞癌及其前驱病变的发病率逐年降低,而宫颈腺癌的发病率则逐年上升[1-2].宫颈腺癌5 a总生存率为75.5%,而宫颈原位腺癌(AIS)治疗后的5 a年生存率几乎可达100%[3].因此对宫颈腺癌的早期发现、早期诊断和早期治疗,可明显延长患者的生存时间和提高其生存质量.寻找切实可行的宫颈腺癌前驱病变的诊断方法十分必要.根据2014年版女性生殖系统肿瘤WHO分类,AIS即高级别腺上皮内病变(high grade-endocervical glandular intraepithelial neoplasia,HG-CGIN)的同义词,为目前惟一明确定义的宫颈腺性肿瘤的前驱病变[4].为提高AIS诊断的准确率,作者回顾性分析郑州大学第一附属医院3 052例宫颈病变患者,以终诊断结果为金标准,对宫颈液基细胞学(TCT)、病理组织学和免疫组化3种诊断方法在AIS的诊断方面进行比较.
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含硼替佐米方案治疗POEMS综合征4例
POEMS综合征是一种以浆细胞异常增殖为基础,可伴多发性周围神经病变、脏器肿大、内分泌异常、皮肤病变等多系统损伤的少见疾病[1].由于病因不明确,目前尚无标准的治疗方案.硼替佐米作为一种生物蛋白酶体抑制剂,在治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的疗效已被大量文献[2-4]报道,其用于POEMS综合征的治疗仅见个案报道[5-8].作者对应用含硼替佐米化疗方案治疗的POEMS综合征患者4例进行临床观察及分析,旨在探讨应用硼替佐米治疗POEMS综合征的疗效及不良反应.
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运动诱发电位对2型糖尿病马尾神经近端损害的诊断价值
目的:探讨运动诱发电位对2型糖尿病马尾神经近端损害的诊断价值.方法:107例2型糖尿病患者分为无周围神经病变组(NDPN组)60例、有周围神经病变组(DPN组)47例,另选正常对照33例,检测指标包括腘窝、S1、T12三点刺激的踇展肌运动诱发电位潜时及波幅,S1-腘窝、T12-腘窝、T12-S1的运动传导速度;并采用logistic回归分析DPN的危险因素.结果:DPN组较NDPN组及对照组的运动诱发电位腘窝刺激的潜时延长,波幅降低;S1刺激的潜时延长,波幅降低;T12刺激的潜时延长,波幅降低;T12-S1传导速度减慢,S1-腘窝传导速度减慢,T12-腘窝传导速度减慢(P<0.05).与NDPN组相比,DPN组的年龄、病程、FPG、HbA1c升高(P<0.05).Logistic回归分析结果显示,年龄(OR=1.079,95% CI=1.032~1.129)、病程(OR=1.099,95%CI=1.019~1.185)、FPG(OR=1.195,95% CI=1.026~1.390)、HbA1c(OR=1.416,95% CI=1.113 ~1.802)为DPN的危险因素.结论:2型糖尿病神经病变存在马尾及周围神经近端损害,年龄、病程、FPG、HbA1c是影响DPN的危险因素.
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人前列腺癌组织中ALKBH3及VEGF-C蛋白的表达
目的:探讨前列腺癌组织中ALKBH3蛋白的表达及其与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)关系.方法:采用免疫组化SP法检测136例前列腺癌组织和129例前列腺增生组织中ALKBH3和VEGF-C蛋白的表达,分析前列腺癌组织中ALKBH3与VEGF-C蛋白表达的关联性.结果:前列腺癌组织中ALKBH3与VEGF-C蛋白的阳性表达率高于前列腺增生组织(P <0.001).ALKBH3和VEGF-C蛋白的表达与前列腺癌的组织分化、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05).前列腺癌组织中ALKBH3与VEGF-C蛋白的表达呈正关联(rP=0.684,P=0.565).结论:ALKBH-3可能与VEGF-C协同作用,促进了前列腺癌的发生发展.
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右美托咪定对全弓置换术患者血清炎症因子的影响
目的:探讨右美托咪定对全弓置换术患者血清炎症因子的影响.方法:因A型急性主动脉夹层行全弓置换手术患者32例,将其分为2组:对照组(A组,19例)和右美托咪定组(B组,13例).B组于进入手术室后静脉滴注负荷量右美托咪定1 μg/kg,以0.6 μg/(kg·h)静脉泵注至手术结束,A组给予等容量生理盐水持续输注.两组患者分别在麻醉诱导前(T1)、手术结束时(T2)、术后4 h(T3)、术后8h(T4)、术后24 h(T5)测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1)水平.结果:B组在T3、T4、T5时间点血清TNF-α、IL-6、IL-1水平均较A组明显降低(P<0.05).结论:在全弓置换术中,静注右美托咪定,能够减少术后TNF-α、IL-6、IL-1的释放,抑制炎症反应,改善预后.
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颈椎C2~7三维有限元模型的建立与优角度牵引仿真研究
目的:建立颈椎C2 ~7三维有限元模型,探讨不同角度牵引对颈椎间盘的影响.方法:对一名30岁健康成年男性志愿者的颈椎进行CT扫描成像,应用Mimics 10.01、Geomagic Studio逆向工程软件生成颈椎间盘并建立实体CAD模型,然后导入Ansys Workbench 15.0软件得到颈椎C2 ~7三维有限元模型并进行有效性验证,在所建模型上添加载荷及约束,模拟人体平躺时0 ~ 20°变角度牵引,得出牵引治疗中各段颈椎间盘的优牵引角度.结果:成功建立了C2 ~7三维有限元模型.同一大小牵引力作用下,颈椎间盘C2~3、C3 ~4、C4 ~5、C5~6、C6 ~7的优牵引角度分别为2°、4°、8°、13°、17°.结论:建立了有效的颈椎C2~7三维有限元模型.
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不同严重程度强迫症患者的性格特征和心理状况
目的:探讨不同严重程度的强迫症患者的性格特征、心理状况.方法:选取符合DSM-Ⅳ强迫症诊断标准的82例患者,其中轻度患者13例,男8例,女5例;中度患者43例,其中男29例,女14例;重度患者26例,其中男16例,女10例.采用Yale-Brown强迫症量表(Y-BOCS)进行临床严重程度评估,同时采用艾森克人格问卷(EPQ)、症状自评量表(SCL-90)分别评估患者的性格特征、心理状况等.结果:重度患者EPQ中神经质维度的得分高于轻度和中度患者(P<0.01).SCL-90中躯体化、强迫状态、人际关系、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执、精神病性9个因子得分均高于轻度和中度患者(P<0.05).结论:强迫症患者存在不健全的性格基础,与其疾病的发生、发展及症状严重程度密切相关.
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心脏X综合征患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2水平的变化
目的:分析心脏X综合征患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2 (Lp-PLA2)水平变化的临床意义.方法:选择心脏X综合征患者52例作为病例组,健康人52例作为对照组.采用双抗体夹心免疫层析法测定2组血浆Lp-PLA2的水平;并同时测定血浆尿酸、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(FBG)、C反应蛋白的水平.结果:与对照组相比,病例组血浆Lp-PLA2、TG、FBG均明显升高(P<0.05),病例组血浆Lp-PLA2与TC呈正相关(r=0.411,P=0.004),与HDL呈负相关(r=-0.610,P<0.001).结论:血浆Lp-PLA2可以很好地反映血管病变情况,同时提示炎症参与了心脏X综合征的发生发展.
关键词: 脂蛋白相关磷脂酶A2 心脏X综合征 -
结核分枝杆菌Rv1242蛋白抗原表位的预测
目的:预测结核分枝杆菌Rv1242蛋白的抗原表位.方法:利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv1242氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位.结果:Rv1242蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,有7个亲水性区域,含有B细胞抗原肽表位(可能在17-38、72-82、84-90、116-130、134-143位氨基酸残基或其附近),这些表位抗原性较好,都含有β转角和不规则卷曲结构,表面可能性和柔韧性都较大.该蛋白还含有T细胞抗原肽表位(可能在24-33、42-59、68-77、90-108位氨基酸残基或其附近).结论:Rv1242蛋白可能是一个既有T细胞抗原表位、也有B细胞抗原表位的抗原,该研究为进一步研究该蛋白抗原表位及其应用奠定了基础.
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t(8;21)急性髓系白血病的临床特征及预后分析
目的:观察t(8;21)急性髓系白血病(AML)的临床特征并分析影响预后的因素.方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院68例初治成人t(8;21)AML患者的血常规、骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学、疗效及生存状况,分析影响总体生存(OS)、无复发生存(RFS)的因素.结果:68例t(8;21)AML按FAB分型1例为M1型,1例为M4型,66例为M2型.单纯t(8;21)AML病例占38.2% (26/68),伴附加染色体异常病例占61.8% (42/68),主要为伴性染色体(-Y或-X)缺失.59例行流式细胞术检测,CD34阳性率93.2%,CD19阳性率54.2%,CD56阳性率79.7%,CD34CD19共表达者占54.2%.总体完全缓解(CR)率为94.1% (64/68),1个疗程CR率为73.5% (50/68).64例可统计生存的患者3aOS率为44.8%,3 a RFS率为47.9%.白细胞指数、染色体核型、中大剂量Ara-C疗程数对OS有影响(P<0.05).结论:白细胞指数、染色体核型、中大剂量Ara-C疗程数是影响t(8;21)AML预后的主要因素.
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右腋下微创切口在6个月以下小婴儿心脏直视手术中的应用
心脏外科技术正迎来微创的大潮,手术切口缩小和隐蔽使得心外科手术更易为患者接受.然而,对于年龄在6个月以下的小婴儿,国内多数心脏中心仍采用胸骨正中手术切口,其对小婴儿胸廓美观方面影响较大[1].郑州市儿童医院自1995年开始采用右腋下微创切口行心脏直视手术,随着经验的总结和操作技术的改进,在适应证的选择上逐步向低年龄、低体重患儿靠近.2010年1月至2014年10月,采用右腋下微创切口完成各类心脏直视手术共2218例,其中年龄小于6个月的小婴儿452例,疗效满意,现分析报道如下.
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双肺多发原发性脑膜瘤一例及文献复习
原发的中枢神经系统外的脑膜瘤报道少见,而肺原发性脑膜瘤(primary pulmonary meningioma,PPM)则罕见,双肺多发的则更为罕见[1].郑州大学第二附属医院于2009年收治1例双肺多发PPM,现结合相关文献报道如下,以提高临床医师对该病的认识.
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虎杖苷对K562细胞增殖及凋亡的影响
目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率.另取对数生长期的K562细胞,分为3组,观察组加入80 μmol/L的虎杖苷,阴性对照组加入DMSO,空白对照组不处理,培养24 h后,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测p-Akt、p-mTOR、p70S6K、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平.结果:虎杖苷能有效抑制K562细胞增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.001).80 μmol/L虎杖苷作用24 h后,K562细胞凋亡率增加(P<0.001);细胞周期出现G0/G1期至S期的阻滞(P<0.001);p-Akt、p-mTOR、p70S6K、Bcl-2蛋白表达永平下降(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05).结论:虎杖苷可有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,可能是通过抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路及调控相关凋亡蛋白的表达来实现的.
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斜视矫正术中眼心反射的动态心电图观察
目的:应用动态心电图(DCG)连续观察并分析斜视矫正术中眼心反射(OCR)的发生特点.方法:借助12导联同步DCG,对68例斜视矫正术(涉及176条眼外肌)中OCR的发生率、发生时机、DCG变化特征、不同眼外肌OCR敏感性、麻醉对心律和OCR的影响、术后恢复情况进行分析.结果:68例眼外肌矫正术中OCR发生率高达94.12%;勾拉眼外肌时OCR的发生率高和为严重;OCR的DCG特征以窦性心律减慢(64.70%)为主,少数(4.55%)出现短暂全心停搏;3级OCR或全心停搏者均在停止手术操作或给予阿托品后恢复正常窦性心律;OCR均于术后3h恢复到术前状态.结论:DCG可用于术中OCR的监测.
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多西霉素对局灶性脑缺血小鼠炎症反应的影响
脑缺血后数小时内脑组织会发生炎症反应,炎症对神经元的损伤可延续数日至数周[1].基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)是一类能够破坏细胞外基质结构的蛋白水解酶,许多神经系统疾病的病理生理过程中均伴随MMP活性增加[2].因此,急性脑缺血后脑组织炎症损伤可能与MMP密切相关.单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)属于趋化因子家族,能通过诱导炎症细胞聚集加重组织损伤[3].MCP-1激活被认为是白细胞浸润的关键步骤[4].肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)属于前炎症因子,其激活是神经系统炎症反应的关键环节,并且可能参与血脑屏障的破坏及脑组织内炎症反应的起始环节[5-6].作者观察了MMP抑制剂多西霉素对光化学法诱导的局灶性脑缺血模型小鼠缺血皮层中MCP-1和TNF-α表达的影响,探讨其用于脑缺血治疗的机制.
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 02 |
1998 | 01 02 03 04 |
1997 | 01 02 03 04 |
1996 | 01 02 03 04 |
1995 | 01 02 03 04 |
1994 | 01 02 03 04 |
1993 | 01 02 03 04 |
1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 03 04 |
1989 | 01 02 03 04 |
1987 | 01 02 03 04 |
1986 | 01 02 03 04 z1 |
1985 | 01 02 03 04 |
1984 | 01 02 03 04 |
1983 | 01 02 03 04 |
1982 | 01 02 03 04 |