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食品中常见有机磷农药残留的检测方法
为有效解决食品安全事件频发问题,本文对食品中常见的有机磷农药残留的检测方法进行了介绍和分析。目前的检测方法包括传统色谱法(气相色谱法、高效液相色谱法)、快速检测法(荧光免疫法、放射免疫法、酶免疫分析法、流动注射免疫)与快速酶抑制检测法。
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热休克蛋白70在缺糖损伤的HeLa细胞中对Bax和Bcl-2以及Bax构象改变的影响
目的 观察热休克蛋白70(Hsp70)对缺糖引起的HeLa细胞凋亡的影响,探讨其与凋亡相关的Bcl-2家族成员的相互作用关系. 方法 用人正义Hsp70重组质粒稳定转染HeLa细胞获得Hsp70过表达细胞.采用Hsp70过表达和正常HeLa细胞无糖培养建立两组细胞损伤模型,并均取3个平行样本.四甲基偶氮唑盐(MTT)法测细胞活率;Hoechst染色法和Giemsa染色法检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测Bax和Bcl-2的表达变化,并计算其灰度比值;细胞免疫化学和荧光免疫法检测Bax构象改变情况. 结果 缺糖48h内,Hsp70明显抑制了HeLa细胞凋亡并增强其活力,同时也抑制了凋亡细胞中 Bax/Bcl-2的增高以及Bax的构象改变. 结论 缺糖诱导下,热休克蛋白70在HeLa细胞中能够通过与Bcl-2家族成员作用而抑制凋亡的发生.
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一种新型的压电免疫传感器在急性白血病免疫分型中的应用
为了将压电免疫传感器应用于急性白血病的临床免疫分型,首次研制了一种以等离子体聚合膜和金纳米粒子自组装技术为基础的新的压电免疫传感器,用于吸附固定多种淋巴细胞表面标志分子的单克隆抗体,检测急性白血病人血样中的相应分化抗原.结果表明:该方法的检出率与临床常用的荧光免疫法相接近,无显著性差异(x2=3.4,P>0.05).结论:本研究中的免疫传感检测法具有成本低、操作方便和能进行实时监测与定量检测等优点,将其应用于急性白血病的临床免疫分型是可行的.
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血清β-hCG定量检测系统的不足与对策
血清β-hCG的栓测方法要有方免法、时间分辩荧光免疫法和化学发光法,三种汶法相比较,前二者渐被化学发光法取代.
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NT-proBNP 在急性呼吸困难时的鉴别诊断价值分析
目的:探讨快速测定血浆 nt-proBnP 在急性呼吸困难时的鉴别诊断价值。方法荧光免疫法测定158例以呼吸困难为主诉的急诊或住院患者血浆 nt-proBnP 的浓度,心脏彩超测定心脏射血分数和左室舒张压末内径。结果心衰患者血浆 nt-proBnP 浓度明显高于非心衰患者,对于心衰 nt-proBnP 有很强的预测价值。NT-proBNP>2000pg/ml,诊断心衰的敏感性为92.1%,特异性为94.4%,心衰患者 nt-proBnP 的浓度与心脏射血分数呈负相关,与左室舒张末内径呈正相关。结论快速测定血浆 nt-proBnP 有助于心源性与非心源性呼吸困难的鉴别诊断。
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急性胰腺炎实验室诊断的两项新技术
血/尿淀粉酶、脂肪酶检测是诊断急性胰腺炎的常用实验室方法,但是这些酶的实验方法敏感性和特异性不如人意.近来荧光免疫法测定胰蛋白酶原-2层析法尿胰蛋白酶原-2快速检测试纸条,被许多专家推荐为急性胰腺炎筛选试验.1 α-淀粉酶α-淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,此外,肝脏、输卵管也分泌,精液、乳汁中也存在.α-淀粉酶检测主要采用碘淀粉比色法、酶联-4-基酚糖苷测定法等,碘淀粉比色法简单、快速且价廉,现在仍被许多实验室延用.但需手工操作,蛋白碘相互作用干扰、需要空白及试剂缺乏稳定性等,影响其应用.
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应用间接荧光免疫法测定细胞核中特异CMV病毒早期抗体(PENA)方法的建立
目的介绍一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法.方法对508例病人应用间接荧光免疫法测定细胞核中的特异病毒早期抗体(PENA).结果强阳性252例,阳性率50.60%;弱阳性81例,阳性率16.24%.结论该方法操作简便,可对CMV感染进行早期测定及诊断,同时具有敏感性和稳定性,是测定CMV感染的一种较好的方法.
关键词: 荧光免疫法 IgG 细胞核内早期病毒抗体 -
颗粒增强散射免疫比浊法测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的方法学评价
半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)又名胱抑素C或γ-痕迹蛋白,测定cystatin C的方法有很多,但是许多传统方法如放射免疫法(RIA)、荧光免疫法(FIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)等检测均属于非均相免疫测定,难以使用自动化仪器进行.
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在检验实习生中开展抗核抗体检测教学的体会
为了使学生初步对抗核抗体(ANA)的检测及应用有一个较深刻的理解,本人在带教学生过程中制定了一套教学方法,使学生能更加系统地掌握抗核抗体的操作及运用。抗核抗体的检测采用间接荧光免疫法进行测定,试剂及仪器采用德国欧蒙公司产品。在荧光显微镜观察荧光核型:斑点型、核点型、核膜型等常见抗体的荧光核型,使学生能够掌握ANA荧光核型判断及运用。
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人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La 的原核表达及纯化鉴定
目的:制备重组人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及 SSB-La,为建立自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定基础。方法在 NCBI 上查询人52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La 的碱基序列和氨基酸序列,运用软件预测抗原表位,选择抗原表位并对密码子进行偏嗜性改造,采用人工合成方法合成抗原表位序列并插入至原核表达载体 pET30a 中。将重组质粒导入大肠杆菌 BL21经 IPTG 诱导表达,表达的重组蛋白用镍离子亲和层析柱纯化,用荧光免疫法测定重组蛋白活性。结果重组人自身抗原 SSB-La 是可溶性表达,52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1以及 Scl-70是包涵体形式表达;纯化产物经荧光免疫法测定活性,结果显示:SSB-La, Scl-70以及 Jo-1具有较高的抗原活性,52-kDRo/SSA,rRNP 以及 SmD1抗原活性较弱。结论成功制备了重组人自身抗原52-KDRoSSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及 SSB-La,为下一步研究开发自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定了基础。
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平喘宁对哮喘患者血清嗜酸细胞阳离子蛋白及白细胞介素2受体的影响
1 材料与方法正常对照组32名~男15名,女17名;年龄24~59岁,排除过敏性寄生虫病史,分别用荧光免疫法和酶联免疫吸附实验双抗体夹心法测定血清嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)及可溶性的白细胞介素 2 受体(SIL-2R)水平.
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清热凉血中药治疗血清抗精子抗体阳性73例临床观察
1 临床资料 73例患者均为2005-05~2007-12收治,其中男性3例,女性70例;年龄24~43岁;结婚短1.5年,长19年.均采用间接荧光免疫法检测,73例血清抗精子抗体阳性患者中滴定度为1:32者为52例,2例为男性;滴定度为1:100者21例,其中1例为男性.
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静脉药瘾者T细胞亚群与丙型肝炎病毒感染的关系
为探讨静脉药瘾者(IVDUs)T辅助细胞与丙型肝炎病毒(HCV)感染的相互关系,以利于阐明Th1/Th2在HCV感染中的作用,我们采用放射免疫测定法(RIA)、荧光定量聚合酶链反应(F-PCR)和荧光免疫法对收集的381例静脉药瘾者进行了检测,现将结果报道如下.
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改进微生物法监测人体内硫酸奈替米星血药浓度
奈替米星(netilmicin)为半合成的氨基苷类抗生素,化学组成为3-N-乙基西索米星.由于奈替米星对对氨基苷乙酰转移酶AAC(3)稳定[1],且在本类药物中具有高效、低毒的特点,已成为治疗革兰阴性杆菌的首选药物之一,在临床上应用广泛.由于奈替米星的药动学过程存在个体差异,可能会导致严重的不良反应,在使用该药物时应进行血药浓度监测,以达到个体化给药的目的.笔者查阅了国内近10a来对人体内奈替米星血药浓度测定的方法,均为荧光免疫法、放射免疫法、酶免疫法等,微生物法尚未见报道.我们希望通过建立一种准确、简便、易操作的微生物测定法,用以监测该药的血药浓度,在临床上使用该药物时,进行有效的药学干预,协助临床合理用药.
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普门特定蛋白分析仪检测全血C反应蛋白性能验证
目的:验证普门(Lifotronic)PA900特定蛋白分析仪检测全血C反应蛋白(CRP)的临床应用价值。方法采用58份EDTA抗凝全血标本进行两种方法比对,以艾科美(i-CHROMA)为X方法,普门特定蛋白分析仪为Y方法,并以EP软件统计,观察两种方法一致性;以CRP校准物质加入基础全血标本中进行回收试验,观察方法正确度;以CRP浓度低值、中值和高值进行简易重复性试验。结果普门特定蛋白分析仪与艾科美全血CRP比对结果为Y=0.953X-1.08(r=0.9769);使用CRP校准物质BCR470,对普门及艾科美全血CRP进行加标回收试验,普门平均回收率在90.4%,艾科美平均回收率106.9%;线性范围上限普门为288 mg/L,而艾科美为180 mg/L;普门全自动CRP仪在全血标本CRP低值(5.9 mg/L)、中值(40.9 mg/L)、高值(122.4 mg/L)的精密度试验,结果显示CV分别为2.8%、2.3%和2.4%。结论普门特定蛋白分析仪检测全血CRP整体性能指标良好。与艾科美比较,2种方法结果一致性良好。因使用不同的CRP校准物质,两方法结果有所差异,但在可接受范围内,在实际使用中要加以注意。普门全自动分析仪检测全血CRP更具简便、灵活、快速的特点,大大提高了工作效率,完全能满足临床需要。
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狂犬病"测毒"泛滥遗害无穷
据
报道,XX市一工人被邻居家所养宠物犬(犬主声称进行过预防接种)咬伤,全程接种了人用狂犬疫苗,后经某县级单位检测其血清抗体,报告结果为阴性.该男恐惧,遂前往一家省级单位对伤人犬"测毒"(检测带狂犬病毒情况),检测后伤者被告知犬是"带毒犬".伤者大惊,又急赴另一省级单位咨询,并以荧光免疫法再测其血清抗体,经仔细检测,其血清抗体效价还较高,1∶80仍为阳性(所遇一般人疫苗注射后多为1∶10~1∶20呈阳性),但该男不信,认为结果是假的,是应家属之请求故意安慰他的.尽管其后的三个多月内该男一再找专家咨询,医生向他反复解释,他还到多家知名大医院看专家门诊,但始终解除不了他心里的压力和精神上的困扰,总觉周身不适,浑身疼痛,头晕乏力,自认为"带毒犬"咬了,肯定已得了狂犬病,因而惶惶不可终日.后在"咬伤"三个多月后终于精神崩溃而上吊自杀.类似事件尚有一些.这一以生命为代价换来的教训值得我们很好地总结. -
抗CCP抗体在类风湿性关节炎诊断中的应用
目的 评价抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)的检测在诊断类风湿性关节炎中的临床意义,特别是对早期类风湿性关节炎的诊断价值.方法 用酶联免疫固相吸附试验(ELISA法)检测抗CCP,免疫比浊法检测RF,荧光免疫法检测AKA.结果 抗CCP对RA诊断的敏感性为51.2%,特异性为96%,对早期RA的敏感性为66.67%,特异性98%,AKA对早期RA的敏感性为41%特异性为86%,RF对早期RA的敏感性为24%.特异性为82%.结论 抗CCP抗体检测对RA诊断的特异性高于RF,敏感性低于RF,但在早期RA中敏感性高于RF,检测抗CCP抗体对RA的诊断及治疗具有重要意义,若联合检测AKA、抗CCP抗体及RF可提高对RA的诊断的敏感性及特异性.
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三种方法在沙眼衣原体检测中的对比分析
非淋病性尿道炎是目前比较常见的人类性传播疾病之一,而沙眼衣原体是主要的致病因素之一.主要传染途径是性接触传染.沙眼衣原体的几种常用实验诊断方法均有各自局限性.细胞培养法奉为"金标准",但因费用昂贵,技术难度大,难以推广.PCR基因扩增技术以其高度敏感性和特异性适于该病原体检测.本文用PCR、快速法及荧光免疫法三种方法测定了一批标本并进行对比性分析,报道如下.
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孕酮、β-HCG测定在异位妊娠治疗中的临床意义
目的:探讨孕酮、血HCG指标的检测在异位妊娠患者治疗方案选择中的临床价值.方法:对我院住院治疗的80例采取保守治疗异位妊娠患者进行回顾性分析,患者在治疗前、治疗后均采用荧光免疫的方法对患者孕酮,β-HCG进行测定,并对所测结果进行比较分析.结果:80例采取保守治疗的患者有56例成功,24例失败.治疗前,成功组孕酮值为(11.7±7.15)ng/mL,β-HCG值为(1 109.3±384.3)U/L;而失败组相应值为(18.14±3.67) ng/mL,(1 775±271.5)U/L;两项数据均具有显著差异(P<0.05).结论:对患者孕酮、β-HCG水平检测可以作为异位妊娠患者治疗方案选择的重要依据.
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荧光免疫法、ELISA法与PCR在婴幼儿腹泻常见病毒检测中的价值
目的 探讨荧光免疫法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法与聚合酶链式反应(PCR)检测婴幼儿腹泻常见病毒的结果与一致性.方法 对急性腹泻婴幼儿61例分别用荧光免疫法、ELISA法、PCR技术对患儿粪便标本中肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒及诺如病毒抗原进行检测.结果 荧光免疫法肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒及诺如病毒抗原阳性检出率分别为11.48%、11.48%、6.56%及13.11%;ELISA法上述病毒抗原阳性检出率分别为1.64%、27.87%、13.11%及29.51%,PCR上述病毒抗原阳性检出率分别为26.23%、1.64%、1.64%、1.64%.荧光免疫法与ELISA法对比,轮状病毒、诺如病毒抗原阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05),对于轮状病毒两种方法检测结果有较好一致性;荧光免疫法同PCR对比,肠道腺病毒、诺如病毒抗原阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),对于轮状病毒及肠道腺病毒,两种方法检测结果有较好一致性;ELISA法与PCR对比,4种病毒抗原阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05),对于4种病毒,两种方法检测结果有较好一致性.结论 ELISA法与PCR对婴幼儿腹泻常见病毒检测一致性较高,在临床诊断中,可采用ELISA法进行初筛,再通过PCR进行确认,以提高诊断效率及准确性.