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植物生长调节剂及氮素处理对拟巫山淫羊藿采后再萌发的影响
为了探究适宜的促进拟巫山淫羊藿采后快速萌发、恢复生长的方案,选用6-BA、尿素、碳酸氢铵及GA3在采收后喷根处理,在不同的时期统计生物学指标,并采用高效液相的方法检测干燥成熟叶片中淫羊藿苷类黄酮成分的含量.结果表明6-BA 90 mg·L-1(B1),6-BA 60 mg·L-1 (B2)及综合1(6-BA 30 mg· L-1+尿素300 mg·L-1)、综合2(6-BA 60 mg· L-1+尿素300 mg·L-1)、综合4(6-BA 60 mg·L-+碳酸氢铵300 mg·L-1)显著促进了采后芽萌发,使快速建立新的光合体系,在处理1个月时分枝数分别较对照组提高165.9％,115.76％,103.86％,104.50％,81.67％.但是6-BA 90 mg· L-1 (B1),6-BA 60 mg·L-1 (B2)处理组第2年萌发的分枝数及总叶片产量较对照组显著降低;综合1、综合2、综合4处理虽然第2年萌发的分枝数与对照组相比无显著差异,但是所获得的平均每株叶片产量有显著增加,增幅为36.80％,32.84％,45.97％,且对其中的淫羊藿苷类有效成分没有显著影响,因此,该实验的综合1、综合2及综合4处理为较合适的促进拟巫山淫羊藿采收后再萌发的实验处理.
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红花黄酮类成分累积量与功能基因表达水平的关联分析
记录并计算红花开花1～7d的平均产量,采用HPLC检测红花中羟基红花黄色素A(HYSA)、槲皮素、柚皮素和山柰酚的含量,使用Real-time PCR检测chs,chi的相对表达量,并进行相关性分析.红花平均产量、HYSA和柚皮素的含量及基因表达量之间呈现相似的变化趋势.平均产量于开花第3天达到大值,与HYSA含量存在较高正相关性(r=0.756,P＜0.05),与chi的相对表达量存在极高正相关性(r=0.892,P＜0.01);柚皮素含量与chs的相对表达量存在较高正相关性(r=0.766,P ＜0.05).该研究为红花中黄酮类成分合成及调控机制研究提供理论依据,为研究红花品质差异形成的分子机制奠定基础.
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河北香菊中黄酮类成分体外抗氧化活性研究及构效关系探讨
目的:通过研究河北香菊中5种黄酮类成分木犀草素、芹菜素、金合欢素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷的体外抗氧化活性,探讨河北香菊的抗氧化机制及黄酮类化合物抗氧化活性的构效关系.方法:采用紫外-可见分光光度法测定对DPPH自由基的清除作用及对H2O2诱导的大鼠红细胞溶血的抑制作用；用硫代巴比妥酸法(TBA)测定对H2O2诱导的大鼠脑匀浆脂质过氧化反应的抑制作用；用谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P)试剂盒法测定对大鼠血浆中谷胱甘肽过氧化物酶的影响.结果:河北香菊中5种黄酮类成分在清除DPPH自由基、抗红细胞溶血、抑制脑匀浆脂质过氧化、提高谷胱甘肽过氧化物酶活力方面均呈现出较好的活性,活性顺序表现为木犀草素＞木犀草苷＞芹菜素＞金合欢素＞金合欢苷.结论:河北香菊所具有的抗氧化活性与其所含黄酮类成分清除自由基、抑制脂质过氧化、提高抗氧化物酶活性有关,且黄酮类化合物的抗氧化活性与其结构中的羟基数目和位置以及糖苷的空间位阻有关.
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枳壳的临床应用心得
枳壳是芸香科植物酸橙(Citrus aurantium L)及其栽培变种的干燥未成熟果实.枳壳中含有多种化学成分,主要含柚皮苷、橙皮苷等黄酮类成分.是中医临床上常用的理气药之一,具有理气开胸、行滞消胀、破气消积、化痰散痞的功效.现结合病例谈谈心得.
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红花MYB转录因子基因克隆及表达分析
红花是菊科一年生草本植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花,为活血化瘀常用中药.黄酮类成分是红花主要有效成分,MYB转录因子广泛参与调控黄酮类成分的合成,对红花MYB转录因子克隆及表达分析为解析红花黄酮类成分的调控机制、调控黄酮类成分的合成具有重要意义.本研究基于在线二代转录组数据,首先利用iTAK软件对MYB转录因子进行注释,设计引物对长片段MYB转录因子基因进行克隆,其次对克隆到的MYB转录因子基因进行序列分析,再次利用实时荧光定量PCR对克隆的MYB转录因子基因表达进行分析.注释筛选得到8个长片段MYB转录因子基因,成功克隆到6个MYB转录因子基因,分别命名为CtMYB-TF1、CtMYB-TF2、CtMYB-TF4、CtMYB-TF5、CtMYB-TF6及CtMYB-TF7.序列分析表明,克隆到的6个MYB转录因子基因都具有MYB转录因子核心结构域,其中CtMYB-TF7转录因子同已报道黄酮类成分合成调控因子AtMYBL2及AtMYB 12关系较近.表达分析表明,Ct MYB-TF5、CtMYB-TF6及CtMYB-TF7在根、茎及叶中表达量低,在花中表达量高.研究结果为进一步研究红花黄酮类成分的分子调控奠定基础.
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银杏酮酯黄酮类成分指纹图谱分析方法建立
目的:利用HPLC-DAD建立一个适用于银杏酮酯提取物(总黄酮和内酯含量达到50％的银杏叶提取物,简称GBE50)及银杏酮酯片中黄酮类成分指纹图谱的分析方法,并运用UPLC/ESI-QTOF-MS结合MSE技术进一步指认10批次银杏酮酯提取物指纹图谱中共有峰.方法:采用Agilent Poroshell 120 SB C1s色谱柱(150 mm ×4.6 mm,2.7 μm),检测波长254 nm,参比波长450 nm,参比带宽20 nm;柱温35℃;流速1 mL· min-;进样量10 μL;流动相以0.1％磷酸-水溶液为A相,乙腈溶液为B相进行梯度洗脱.结果:以10个批次的银杏酮酯提取物为样品建立了银杏酮酯提取物的指纹图谱,相似度均＞0.90;并通过液质联用分析方法指认出其中41个共有峰成分.结论:建立的指纹图谱方法可整体评价银杏酮酯提取物药品质量,对银杏酮酯提取物及其制剂银杏酮酯片内在成分进行全面分析,为质量评价提供新手段.
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4种柴胡地上部分黄酮类成分的含量测定
目的:建立一种同时测定柴胡属植物地上部分6种黄酮类成分含量的HPLC法.方法:采用Hanbon ODS C<,18>色谱柱(150 mm×6 mm,5 μm),流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为甲醇-乙腈(5:1),梯度洗脱,检测波长360 nm.结果:建立了芦丁、广寄生苷、水仙苷、槲皮素、山奈素、异鼠李素的HPLC含量测定方法,6种指标性成分在各自浓度范围内线性关系良好(r<'2>0.9997);平均回收率分别为98.35%,99.18%,100.95%,99.05%,98.77%和98.25%;方法重复性RSD分别为0.75%,1.02%,1.55%,1.29%,0.45%和0.56%.结论:该法灵敏快捷,适于柴胡属植物中黄酮类成分的分离与测定.
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甘草黄酮类化学成分研究进展
甘草味甘,性平,有调和诸药及解毒的作用.随着甘草应用的日益广泛及对甘草药效学与药理学研究的深入,甘草黄酮所具有的抗溃疡、抗癌、抗氧化等功用逐渐被人们揭示出来,因此,衡量甘草质量的指标除了它的皂苷类成分,还应包括它的黄酮类成分.以下分别就它的新的黄酮成分及其含量测定加以总结,分析.
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葛根及其异黄酮类成分治疗酒依赖的研究进展
酒依赖是指长期大量饮酒可使人产生对酒的依赖性.凡饮酒成为癖好,对酒的耐受性明显增强,停用或少用即产生精神和躯体不适反应.酒依赖不仅对患者本人的精神和躯体健康有严重损害,同时可造成严重的家庭和社会问题.
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罗布麻定时脉冲片中5种酚酸及黄酮类成分的含量测定
目的 建立高效液相色谱法测定罗布麻定时脉冲片中5种酚酸及黄酮类成分含量的方法.方法 采用Hypersil C18(4.6 mm x 200 mm)色谱柱,乙腈-10 mmol· L-1醋酸铵缓冲液(pH 4,醋酸调节)为流动相,洗脱程序:0 min,10%乙腈;8 min,15%乙腈;16 min,17%乙腈;40 min,38%乙腈.流速1.0 mL ·min-1.检测波长为256 mn.结果 2种酚酸及3种黄酮成分的峰面积与浓度的线性关系良好(r >0.999 0);加样回收率为(94.3±1.80)%-(102.4±2.89)%.结论 该方法简单、准确,重现性较好,可用于罗布麻定时脉冲片内在质量的控制和评价.
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藏药甘青青兰的生物活性成分研究
目的 分离和鉴定藏药甘青青兰活性部位的化学成分.方法 用体积分数80%乙醇提取,用硅胶色谱和凝胶柱(LH-20)色谱分离,采用IR,MS,NMR等谱学方法确定结构.结果 经药理活性筛选后,由具有一定药理作用的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分离纯化了18个化合物,分别鉴定为5,7,4'-三羟基-3',5'-二甲氧基黄酮(1)、5,3',4'-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮(2)、pedalitin(3)、香草酸(4)、对羟基桂皮酸(5),5,6,4'-三羟基-7-甲氧基黄酮(6)、pedaliin-6"-acetate(7)、cirsiliol-4'-glucoside(8)、香树脂醇(9)、β-谷甾醇(10)、(R,S)-迷迭香酸正丁酯(11)、迷迭香酸甲酯(12)、苯甲酸(13)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(14)、pedaliin(15)、绿原酸甲酯(16)、5,4'-二羟基-6,7-二甲氧基黄酮-4'-O-β-D-葡萄糖苷(17)、迷迭香酸(18).结论所鉴定的18个化合物中,有11个化合物即化合物1～2,4～6,11～13,16～18为首次从该种植物中分离得到,其中化合物11对HBV具有抑制作用,而化合物18有一定的抑制作用.
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过山蕨中黄酮类成分的研究
目的 研究过山蕨(Camptosorus sibiricus Rupr.)中黄酮类化学成分.方法 采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法、高效液相色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定了其化学结构.结果 从过山蕨70%乙醇提取物中分离得到6个黄酮类化合物,并鉴定其结构为:山柰酚(1);山柰酚-7.0-α-L-鼠李糖苷(2);山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3);山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4);山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5);山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-鼠李糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(6).结论 化合物2,3,4,5,6均为首次从该属植物中分离得到.
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“一测多评”法测定淡豆豉药材中4种黄酮类成分
目的 建立淡豆豉药材中4种黄酮类成分同时测定的一测多评含量测定方法.方法 色谱条件:采用Diamonsil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.5％冰醋酸溶液(B),梯度洗脱(0～25 min,30％ ～45％A,25 ～ 50 min,45％～60％A),流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长260 nm.以大豆苷元为指标,建立药材中该成分与大豆苷、染料木苷及染料木素的相对校正因子,利用校正因子计算4种黄酮类成分的含量,实现一测多评,同时采用外标法测定4种黄酮类成分的含量,比较计算值与实测值的差异.结果 15批淡豆豉药材中4种黄酮类成分的含量可以用一测多评法进行测定,建立的校正因子重复性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异.结论 以外标法测定大豆苷元,利用相对校正因子实现大豆苷,染料木苷,染料木素测定是准确的,可行的,一测多评法可以用于特定的不同类型成分间的测定.
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反相高效液相色谱法测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量及采用其指纹色谱图鉴定淫羊藿
淫羊藿为小檗科淫羊藿属Epimedium的多种植物的茎叶,具有"补肾壮阳、祛风除湿"的功效.2000年版<中国药典>一部共收载了5个品种,淫羊藿含多种黄酮类成分[1],其中淫羊藿苷为有效成分之一,药典将该成分作为衡量淫羊藿药材质量优劣的指标之一.近年来,屡见报道用高效液相色谱法测定淫羊藿制剂中淫羊藿苷的含量,但测定上述5个品种药材中淫羊藿苷含量并用其指纹色谱图来鉴定品种的报道则少见.本研究采用等度洗脱反相高效液相色谱法测定了5个品种中淫羊藿苷的含量,并为其品种的鉴定提供了参考依据.
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RP-HPLC法测定灯盏花素注射液的含量
灯盏花素为菊科植物短葶飞蓬(灯盏细辛)中提取的黄酮类成分,主要药效成分为灯盏花乙素.灯盏花素注射液具有活血化瘀,通络止痛,临床上用于中风后遗症,冠心病,心绞痛的治疗.
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HPLC法同时测定银黄颗粒中三种黄酮类成分的含量
目的 建立同时测定银黄颗粒中三种黄酮类成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素)的含量的高效液相色谱方法.方法 采用Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇-0.2％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长为275 nm,柱温30℃,进样量20 μl.结果 三种成分在建立的方法下分离良好,在考察的浓度范围内,浓度与峰面积之间呈良好的线性关系(r＞0.9997);回收率(n=9)均在94.4％～104.7％范围,RSD均＜2.1％.结论 本方法简便、准确,精密度高,重复性好,可以用于银黄颗粒的质量控制.
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菝葜化学成分及其抗氧化活性的研究
目的 研究菝葜Smilax china的化学成分及其抗氧化活性.方法 采用硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱法进行分离,NMR等波谱学方法进行结构鉴定;采用TEAC法对化合物单体的抗氧化活性进行测定.结果 从菝葜中分离得到了7个化合物和1个混合物.分别鉴定为:cinchonain Ib(Ⅰ)、catechin-(7,8-bc)-4β-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅱ)、catechin-(5,6-e)-4β(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅲ)和catechin-(5,6-e)-4α-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅳ)的混合物、二氢山柰酚(Ⅴ)、二氢槲皮素(Ⅵ)、儿茶素(Ⅶ)、棕榈酸(Ⅷ)、β-胡萝卜苷(Ⅸ);抗氧化实验结果表明,化合物Ⅰ～Ⅶ均具有较强的抗氧化活性.结论 化合物Ⅰ～Ⅳ、Ⅶ、Ⅷ为首次从该植物中分离得到.
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金龙胆草萜类成分的研究
金龙胆草为菊科白酒草属植物苦蒿Conyza blinii Lévl.的干燥地上部分,分布于我国西南地区.系70年代四川省发掘的民间草药,具有清热解毒、消炎祛痰、止咳平喘之功效,用于慢性气管炎、胃肠炎、肾炎、肝炎、痢疾、口腔炎、中耳炎、风火牙痛、湿疹、痔疮、外伤出血、烫火伤及牲畜创伤.金龙胆草及其制剂在<中国药典>1997年版一部及<四川省药品标准>中收载[1].我们对金龙胆草黄酮类成分、萜类成分、皂苷类成分等进行了系统的研究,本文报道对金龙胆草萜类成分的研究结果.作者从金龙胆草中分离得到7个萜类化合物,其中5个为三萜类化合物,2个为二萜类化合物,经理化性质和光谱数据分别鉴定为α-香树脂醇(Ⅰ),β-香树脂醇(Ⅱ),β-香树脂酮(Ⅲ),木栓醇(Ⅳ),木栓酮(V),白酒草内酯(Ⅵ),苦蒿素(Ⅶ).其中,Ⅰ、Ⅱ为首次从该植物中分离得到,Ⅲ、Ⅳ为首次从白酒草属植物中分离得到.
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玉米须黄酮类成分的提取分离与结构鉴定(Ⅰ)
玉米须Zea mays L.为禾本科玉蜀黍属植物玉米的花柱和柱头,含有多种化学成分,如挥发油、皂苷、生物碱、黄酮类、多聚戊糖、尿囊素、有机酸等.
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蜀葵花的化学成分研究(Ⅱ)——黄酮类成分研究
目的 研究蜀葵Althaea rosea花中的黄酮类化学成分.方法 用各种柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱解析鉴定其化学结构.结果 分离得到9个黄酮类化合物,分别鉴定为紫云英苷(astragalin,Ⅰ)、山柰酚(kaempferol,Ⅱ)、洋芹素(apigenin,Ⅲ)、香橙素(aromadendrin,Ⅳ)、异甘草苷(isoliquiritin,Ⅴ)、南酸枣苷(choerospondin,Ⅵ)、虎耳草苷(saxifragin,Ⅶ)、4',5,7,8-tetrahydroxy-3-methoxyflavone(Ⅷ)、芦丁(rutin,Ⅸ).结论 其中化合物Ⅲ～Ⅷ为首次从蜀葵属中得到,化合物Ⅰ为首次从该植物中得到.
