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四物合剂对顺铂损伤小鼠卵巢的保护作用
目的:观察四物合剂对顺铂损伤小鼠卵巢的保护作用,并对其作用机制进行探讨.方法:小鼠腹腔注射顺铂3.0 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续7 d,并灌饲四物合剂14 d,观察小鼠动情周期和卵巢、子官的系数变化,血清中雌性激素水平及卵巢形态.结果:注射顺铂3 d始,模型小鼠动情周期停滞于间期,至13 d时,灌饲四物合剂小鼠部分开始恢复动情周期变化;顺铂模型组小鼠卵巢系数显著低于对照组,四物合剂各组小鼠的卵巢系数与对照组比较无差异,与模型组比较有统计学差异;模型组血清E2和P水平较对照组有降低,但无统计学意义,四物合剂大剂量组E2较模型组升高,小剂量组P较模型组升高,但也均无统计学意义;模型组FSH/LH比值较对照组明显升高,四物合剂中、小剂量组可恢复到正常水平,与模型组比较变化显著;卵巢切片显示模犁小鼠卵巢中的各级发育卵泡数量减少,而闭锁卵泡数增加,四物合剂中剂量组可见多个发育卵泡.结论:顺铂可诱导小鼠卵巢损伤,使其功能下降,四物合剂可改善顺铂诱导的卵巢功能损伤.
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还少胶囊治疗月经不调的药效学评价及分子机制研究
还少胶囊应用于月经不调已取得了很好疗效,药效研究表明还少胶囊可明显促进幼鼠性腺发育,提高其卵巢指数,可升高大鼠血清雌二醇水平,降低大鼠血清卵泡刺激素水平,对雌激素和催产素所致小鼠痛经和醋酸所致小鼠疼痛具有明显抑制作用.由于中药复方成分的复杂性,其治疗月经不调的物质基础和分子机制尚未得到阐释,该研究借助整合药理学平台,对其进行探讨.在整合药理学平台(http: //www.tcmip.cn/) 中药材数据库收集了还少胶囊中13味药的所有化学成分共631种,建立了还少胶囊的化学成分数据库,进行了潜在靶标预测;同时建立了"menstrual"的候选疾病靶标;基于PPI相互作用数据库,构建了还少胶囊药物潜在靶标与疾病靶标相互作用网络,筛选出关键靶标485个,疾病与药物共有靶点为PPP2CB, PRKCB,DGKA,PPP2CA,与蛋白磷酸化、蛋白激酶活性相关;基因功能分析和通路富集分析表明还少胶囊作用通路集中在内分泌系统、促性腺激素释放激素信号转导通路、雌激素信号转导通路、催产素信号途径、甲状腺激素信号通路、VEGF信号通路、FCεRI信号通路等.该研究从动物水平验证了还少胶囊对月经不调的有效性,中药整合药理学平台预测结果为有效成分和分子机制的进一步研究提供了方向指引,同时动物实验已部分验证了中药整合药理学平台预测的准确性.
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和元缓癸汤治疗女童特发性真性性早熟32例临床疗效观察
2004年3月-2006年3月,笔者用和元缓癸汤治疗女童特发性真性性早熟32例,并与促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)治疗的30例作对照,现将结果 报告如下.临床资料1纳入标准 年龄5～8岁,并且符合下列症状、体征中3项以上,理化检查值达到标准.症状和体征:(1)乳房发育,乳头乳晕增大,色泽变深;(2)阴唇发育,色素沉着;(3)阴道分泌物增多;(4)月经来潮;(5)不同程度阴毛、腋毛生长.理化检查:(1)GnRH兴奋试验阳性,促黄体激素(LH)峰值＞12IU/L,LH峰值与卵泡刺激素(FSH)峰值之比＞1;
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腹腔镜卵巢打孔术联合中药治疗难治性多囊卵巢综合征不孕患者的临床观察
多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)是育龄期妇女常见的内分泌紊乱性疾病,是糖代谢异常与生殖功能障碍并存的一种特殊疾病,以慢性无排卵及高雄激素血症为主要特征[1].临床表现为闭经、多毛、肥胖、高雄激素及黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH)比值增高,其病因复杂,治疗棘手[2].其发病率为5%～10%,占无排卵性不孕症的50%～70%[3].治疗以调整内分泌状态、改善机体生物微环境、促排卵为主,取得了一定疗效,但仍有20%～25%患者对常用促排卵药物克罗米芬(CC)存在抵抗,促排卵率、妊娠率低.腹腔镜下卵巢打孔术可有效恢复正常的排卵周期,提高药物敏感性,降低卵巢过度刺激综合征(OHSS)及多胎妊娠的风险,但疗效不持久,如术后结合药物治疗,可明显改善患者的排卵及受孕机会,笔者观察卵巢打孔后服用中药养精种子汤的疗效,现将结果报告如下.
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补肾中药对青春期功能性子宫出血患者血清激素水平的影响
我们用单纯补肾中药治疗无排卵型功能性子宫出血(简称功血)取得了较好的临床疗效,总有效率达88.4%[1].为了进一步探讨青春期功血的发病机制及补肾中药对该病的治疗机理,我们对1998年10月-2001年10月来我院就诊的38例青春期功血患者治疗前后做了血清激素水平测定,观察患者在阴道出血期间血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)的含量.同时测定20例正常青春期女性月经期间的血清激素水平作为对照组.现将结果报告于下.
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中西医结合在辅助生殖中卵巢储备力下降的应用
目的:探讨中西医结合治疗在辅助生殖中卵巢储备力下降的临床效果.方法:将60例符合卵巢储备力下降中西医诊断标准的患者随机分为观察组和对照组.对照组采用中药治疗,观察组在对照组的治疗基础上加入克龄蒙治疗,比较两组的临床治疗效果.结果:经过临床治疗后两组的FSH、LH以及E2均比治疗前显著改善,但是两组的改善情况差异不显著;两组月经积分均比治疗前改善,观察组优于对照组;两组不良反应发生率差异无统计学意义.结论:对于辅助生殖中卵巢储备力下降患者采用中西医结合的方法治疗,可以降低血清的FSH以及LH,提高E2水平值,从而改善卵巢的储备功能,促进月经的来潮.
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六味地黄汤治疗更年期综合征的实验研究
本研究以对六味地黄汤对去势大鼠的作用,探讨六味地黄汤治疗更年期综合征的作用机制.1实验材料选择武汉大学医学院实验动物中心提供的雌性未孕Wistar大鼠30只,体重210～250g,实验前室内适应环境1周,室温20～28C,标准饲料.熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓以8:4:4:3:3:3的重量比配伍组成并制成汤剂.雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)放免试剂盒由中美合资天津九鼎医学生物工程公司提供.IGC-1200γ放射免疫计数器.数据处理计算机、离心机、恒温浴槽等.
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育龄期非妊娠妇女血清低水平β-HCG与LH、FSH的临床意义
目的 探讨育龄期非妊娠妇女血清中检测出的低水平(β-HCG＞0.10且＜5.30mIU/mL)β-HCG以及LH、FSH的水平对临床的诊断意义.方法 通过对84例实验组血清中检出低水平β-HCG的育龄期非妊娠妇女及80例对照组(β-HCG ＜0.10mIU/mL)血清中LH、FSH、E2含量检测.结果 所选取研究对象的年龄对研究无影响;育龄期非妊娠妇女血清LH、FSH均较对照组高,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 当育龄期非妊娠妇女血清检测到低水平β-HCG时,进一步检测其血清FSH和LH的浓度,可以对停经与卵巢功能相关性评价提供诊断参考.
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抑制素测定的临床意义
抑制素(inhibin, INH)是一种多肽糖蛋白, 在男性主要由睾丸支持细胞(steroli细胞)分泌, 女性主要由卵巢颗粒细胞分泌.INH在反馈调节垂体前叶合成分泌卵泡刺激素(FSH)方面具有重要作用, 并参与多种生殖内分泌、旁分泌及自分泌的调节.INH有两种活性形式, 分别称为抑制素-A(inhibin A, INH A)和抑制素-B(inhibin B, INH B), 它们都有2个亚基, 一个叫α亚基, 另一个叫β亚基, 通过二硫键连接而成.INH A(αβA)和INH B(αβB)的α亚基完全相同, 但β亚基不同.INH的β亚基可以形成二聚体称为ACT.人INH的α亚基与猪INH的α亚基约85%相同, βA亚基的全部, βB亚基的98%氨基酸残基与猪INH相同[1].
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卵泡刺激素促进卵巢上皮癌移植瘤生长
目的研究卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)在卵巢上皮癌发生、发展中的作用.方法卵巢上皮癌细胞系OVCAR3转染FSH受体表达质粒,得到FSH刺激敏感的FSH受体稳定表达细胞系OVCAR3-FSHR.部分裸鼠去势(切除双侧卵巢),分别将OVCAR3及OVCAR3-FSHR接种到裸鼠皮下,测量肿瘤体积,免疫组化鉴定血管形成相关因子、细胞生长刺激及抑制因子受体在肿瘤组织中的表达.结果接种OVCAR3-FSHR细胞、并注射FSH的去势裸鼠(A组)移植瘤体积(302.69 mm3±49.27 mm3)明显大于去势、接种OVCAR3细胞(B组,130.34 mm3±28.25 mm3)、未去势分别接种OVCAR3-FSHR细胞(C组,76.83 mm3±22.56 mm3)和OVCAR3细胞(D组,32.38 mm3±7.84 mm3)者.A组中血管内皮细胞生长因子(VEGF)阳性细胞数明显高于其他各组,而转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβⅡ receptor,TβRⅡ)阳性细胞数低于其他各组.结论 FSH可能通过促进肿瘤的血管形成、降低肿瘤细胞对生长抑制因子的反应等方式促进卵巢上皮癌细胞在移植裸鼠体内的生长.
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GnRH-A促进雌兔FSH与LH分泌及卵巢发育的作用
目的 探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制.方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L GnRH-A抗原1.0 mL,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组于20 d加强注射1次.ELISA法测定血清FSH和LH含量.于70 d无菌切取卵巢,光镜和电镜观察.结果 40 d时EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组血清FSH和LH浓度均达到峰值,明显高于EG-Ⅰ和CG组的FSH和LH(P<0.01),且EG-Ⅱ组高于EG-Ⅲ组(P<0.05).EG-Ⅱ组和EG-Ⅲ组卵巢皮质变厚,卵泡纵径和横径均增大,且与剂量相关.实验组卵巢卵泡数增加,生长加快.细胞核、线粒体和线粒体嵴变大,细胞质中的皮质颗粒和分泌物增多,透明带和微绒毛变大.结论 GnRH-A能促进FSH和LH的合成及卵巢与卵泡的发育,加强注射效果更明显.
关键词： 促性腺激素释放激素类似物 卵泡刺激素 黄体生成素 卵巢 组织结构 -
卵泡刺激素注入胃腔对大鼠胃泌素分泌的影响
目的研究胃腔内卵泡刺激素(FSH)对大鼠胃泌素分泌的影响,为消化道产生的生殖内分泌激素是否有调节消化的功能提供实验依据.方法胃腔直接注射FSH以模拟外分泌产生的FSH,并以免疫组织化学、酶联免疫分析法(ELISA)检测卵泡刺激素刺激后,胃内胃泌素免疫反应阳性细胞的密度,血清和胃液中胃泌素的含量.结果胃腔内注射FSH后,大鼠胃窦壁内单位面积胃泌素免疫反应阳性细胞密度(16.65±2.63)比对照组(9.60±1.72)显著增加(P＜0.01),胃液中胃泌素ELISA检测的A值(0.41±0.037)比对照组(0.28±0.046)显著增加(P＜0.01);血液中胃泌素含量的A值(0.86±0.054)比对照组(0.62±0.070)显著增加(P＜0.01). 结论外源的FSH对胃泌素的合成和释放均起明显的促进作用.
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卵泡刺激素及其受体在大鼠胰腺的共定位观察
目的观察卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR)在大鼠胰腺中的共存关系,以了解FSH对胰腺的功能意义.方法应用免疫荧光组织化学双标记染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果.结果部分外分泌腺细胞、导管上皮细胞及部分胰岛细胞呈FSH反应阳性,呈强绿色荧光.小血管内皮细胞也呈FSH反应弱阳性,呈弱的绿色荧光.部分胰岛细胞呈FSHR反应阳性,呈强红色荧光.一些外分泌腺上皮细胞呈FSHR反应弱阳性,呈淡红色荧光.有一些胰岛细胞呈FSH和FSHR双阳性反应,呈黄色荧光或红、绿相间荧光. 结论FSH及其受体均存在于大鼠胰腺中,胰岛中的部分细胞共同存在FSH及其受体,FSH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用.
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卵泡刺激素对大鼠胰岛素和胰高血糖素分泌影响的体外研究
目的研究卵泡刺激素(FSH)在体外对胰腺组织分泌胰岛素和胰高血糖素的影响.方法体外孵育大鼠胰腺组织并施加不同浓度FSH,应用酶联免疫分析(ELISA)方法检测上清液中胰岛素和胰高血糖素的含量.结果当FSH浓度小于10-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而减少;当FSH浓度大于10-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而增加.结论FSH在体外对胰岛素和胰高血糖素分泌具有相同的双向调节作用,FSH可能对胰腺内分泌具有调节功能.
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Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响
目的 研究Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响.方法 21d SD雌性大鼠,注射PMSG 20IU,48h后对卵巢颗粒细胞进行原代培养,用TGFβRⅡ抗体及不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,通过免疫细胞化学方法观察TGFβ信号通路中Smad2/Smad3和P-Smad2/P-Smad3(磷酸化Smad2/3)表达的变化.结果 1.Smad2/Smad3主要定位于卵巢颗粒细胞胞质,其活化形式P-Smad2/P-Smad3有少量表达;2.经FSH处理后, Smad2/Smad3向核内转移增多,P-Smad2/P-Smad3的表达增强,并与FSH的作用时间及剂量呈正相关性;3.TGFβRⅡ被抗体完全中和后再用FSH处理,Smad2/Smad3的核阳性率无显著增多, P-Smad2/P-Smad3的表达未见明显增强.结论 1.FSH促进Smad2/Smad3的磷酸化;2.FSH对 Smad2/Smad3的激活作用与TGFβ受体密切相关.
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卵泡刺激素对体外孵育大鼠下颌下腺分泌NGF和EGF的影响
目的 通过确定卵泡刺激素(FSH)与神经生长因子(NGF)或表皮生长因子(EGF)在大鼠下颌下腺的共定位关系,研究FSH在体外对大鼠下颌下腺组织分泌NGF和EGF的影响. 方法 采用邻片免疫组织化学共定化方法 ;体外孵育大鼠下颌下腺组织并给予不同浓度FSH,应用酶联免疫分析方法 检测上清液中NGF和EGF的含量. 结果 大鼠下颌下腺浆液性腺上皮细胞、颗粒曲管及大于颗粒曲管的导管上皮细胞均呈FSH、NGF及EGF免疫反应阳性,FSH与NGF或EGF有共存性;当FSH浓度大于10-5～10-6时,NGF或EGF分泌量随FSH浓度的递减而降低;当FSH浓度小于10-5～10-6时,NGF或EGF分泌量随FSH浓度的递减而升高. 结论 FSH在体外对NGF或EGF分泌具有相同的双向调节作用,FSH可能对下颌下腺内分泌具有调节功能.
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大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究
目的研究卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)共定位的关系.方法采用邻片免疫组织化学共定位方法.结果大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性,阳性颗粒分布在细胞质内,细胞核阴性.邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性,小部分呈免疫反应阴性.两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内,细胞核阴性.结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH.
关键词： 卵泡刺激素 黄体生成素 促性腺激素释放激素受体 免疫组织化学 大鼠下颌下腺 -
卵泡刺激素与卵泡刺激素及黄体生成素共同干预对玻璃化冻存小鼠卵巢组织血管内皮生长因子表达的影响
目的 通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织卵泡刺激素(FSH)及FSH和黄体生成素(LH)共同干预,观察冻融卵巢组织的形态学改变以及两种激素干预对冻存卵巢组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,寻找佳的提高冻融卵巢组织卵泡存活及VEGF表达的激素干预方式.方法 4周龄C57 BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),300IU/L FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及150IU/LFSH+ 150IU/L LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+ LH),每组30个卵巢样本.通过常规组织学、Western blotting 技术,观察并分析各组卵巢组织形态结构改变及VEGF蛋白表达量;通过荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测VEGF mRNA表达情况.结果 OG-FSH+ LH组正常卵泡百分比高,且显著高于OG-FSH组(P ＜0.05);VEGF蛋白表达量在OG-FSH+ LH组显著高于OG-FSH组(P＜0.05);荧光定量PCR检测结果表现为VEGF mRNA表达量在OG-FSH+ LH组高,其次为OG-FSH组,低是VCG组(P＜0.05).结论 玻璃化冻存全程添加FSH+ LH的干预方式较单独FSH干预具有更高正常卵泡百分比和更佳的VEGF蛋白表达.
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大鼠下颌下腺卵泡刺激素及其受体的原位杂交及核心片段的序列分析
目的：探讨大鼠下颌下腺组织中是否表达卵泡刺激素（FSH）及其受体（FSHR），为进一步研究FSH对下颌下腺的功能调节提供理论依据。方法正常SD大鼠20只，体质量（200±20）g，腹腔麻醉后切取下颌下腺，采用原位杂交方法对FSH及FSHR进行细胞定位，探讨大鼠下颌下腺是否存在FSH及其受体mRNA，从下颌下腺组织中分别提取总RNA，运用RT-PCR获得FSH及其受体基因的cDNA核心序列，并对其序列进行分析。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞含有 FSH和FSHR mRNA杂交信号，信号物质分布于胞质内，胞核呈阴性反应。从大鼠下颌下腺组织中扩增的FSH及FSHR基因的特异性条带分别为193bp和413bp。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞能合成卵泡刺激素及其受体，进一步说明下颌下腺是FSH作用的靶器官。
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FSH受体的特性和表达的调控
卵泡刺激素(FSH)是垂体分泌的一种糖蛋白激素,主要作用是促进和维持正常的性腺发育和生殖功能.FSH的生理功能是通过分布于性腺的特异性受体所介导的.支持细胞(sertoli cell)和颗粒细胞(granulosa cell)分别是FSH作用于睾丸和卵巢的靶细胞.FSH的结构和生理功能虽然已被广泛的研究和阐明,但其作用的分子机制,尤其是在促进配子产生过程中的作用机制尚不清楚.因此,研究FSH受体(FSHR)的分子结构和功能、以及FSHR的基因表达与调控,进而阐明对配子形成的意义,已经成为阐明FSH功能的关键.
