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结核重症监护室中胞内分枝杆菌肺病与脓肿分枝杆菌肺病的临床特征比较分析
目的 分析结核重症监护室(ICU)中胞内分枝杆菌肺病与脓肿分枝杆菌肺病患者的临床特征,为临床诊治提供依据.方法 回顾性分析2012年1月至2017年5月杭州市红十字会结核ICU收治的非结核分枝杆菌肺病( NTM)患者74例的临床资料.其中脓肿分枝杆菌肺病患者54例,胞内分枝杆菌肺病患者16例,鸟分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌肺病患者各2例.对胞内分枝杆菌及脓肿分枝杆菌肺病复合群感染重症患者的临床特征、影像学表现、治疗与预后等情况进行分析.采用SPSS 21.0软件对数据进行分析.采用GraphPad Prism V5.01进行生存曲线分析.结果 74例NTM肺病患者中,脓肿分枝杆菌感染率为72.87%(54/74),胞内分枝杆菌的感染率为21.62%(16/74).胞内分枝杆菌肺病患者的年龄和入住 ICU 时间明显低于脓肿分枝杆菌肺病患者( t ＝－2.729和－6.150,P＜0.05或＜0.01),但两组性别分布、APACHE Ⅱ评分比较,差异均无统计学意义(P值均＞0.05).在基础疾病方面,胞内分枝杆菌肺病患者慢性阻塞性肺疾病(COPD)的比例明显低于脓肿分枝杆菌肺病患者(χ2＝3.902,P＜0.05),而支气管扩张比例明显多于脓肿分枝杆菌肺病患者(χ2＝23.888,P＜0.01).在合并症方面,脓肿分枝杆菌肺病患者合并脑卒中后遗症、帕金森症等中枢神经系统疾病(χ2＝14.872,P＜0.01)及糖尿病(χ2＝3.902,P＜0.05)的比例显著高于胞内分枝杆菌肺病患者,而合并咯血的比例明显低于胞内分枝杆菌肺病患者(χ2＝9.717,P＜0.01).胞内分枝杆菌肺病患者入住ICU主要原因为呼吸衰竭(93.75%)和感染性休克(6.25%),而脓肿分枝杆菌肺病患者为呼吸衰竭(90.74%)、心衰竭(11.11%)和肾衰竭(1.85%),两组患者入住ICU原因比较,差异均无统计学意义(P值均＞0.05).胞内分枝杆菌肺病组患者在机械通气前分离出NTM的比例明显高于脓肿分枝杆菌肺病组患者(χ2＝30.366,P＜0.01).在影像学方面,胞内分枝杆菌肺病组支气管扩张比例明显高于脓肿分枝杆菌肺病组(χ2＝23.888,P＜0.01).两组患者28 d病死率比较,差异无统计学意义(χ2＝3.244,P＞0.05),而胞内分枝杆菌肺病组患者120 d内生存率明显高于脓肿分枝杆菌肺病组患者(χ2＝12.780,P＜0.01).结论 当重症患者痰抗酸染色阳性时,须考虑NTM肺病可能.对于长期机械通气的重症患者须首先考虑脓肿分枝杆菌感染.
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脓肿分枝杆菌肺病误诊为肺结核35例临床分析
脓肿分枝杆菌属于快速生长分枝杆菌，曾作为龟分枝杆菌的亚种，随着分子生物学方法用于分枝杆菌菌型鉴定，它被作为独立的菌种存在，除可导致肺病外，还可导致淋巴结、皮肤软组织、骨关节和全身播散性病变，目前尚不清楚其发病率，但其所致的肺病预后极差［1］。脓肿分枝杆菌肺病的症状、病理特点和影像学表现与肺结核相似，但其对抗结核药物具有天然耐药，众多临床研究和病例报道均证实两者的鉴别十分困难，极易造成误诊误治。为提高该病的诊断水平，积累治疗经验，我们对杭州市红十字会医院结核科2010年1月至2015年1月收治被误诊为肺结核的35例脓肿分枝杆菌肺病患者进行临床分析。
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脓肿分枝杆菌对抗结核药物的耐药基因研究
目的：分析脓肿分枝杆菌对抗结核药物链霉素、乙胺丁醇的耐药基因，探讨其耐药机制。方法PCR-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析6株耐链霉素、乙胺丁醇的脓肿分枝杆菌临床株的rrs、rpsl、embB基因，观察其基因突变情况。结果6株脓肿分枝杆菌的rrs、rpsl、embB基因与对链霉素、乙胺丁醇敏感的结核分枝杆菌标准株（H37RV）的相应基因序列比较，其中rrs基因第513位密码子核苷酸序列出现A→C突变，rpsl基因核苷酸序列无变化，embB基因第303～305位密码子的核苷酸序列存在差异，仅第303、304位核苷酸编码的氨基酸序列不同。结论脓肿分枝杆菌对链霉素的耐药性可能与rrs基因突变有关，对乙胺丁醇的耐药性可能与embB基因突变有关。
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长期机械通气患者脓肿分枝杆菌感染临床特征与病原学分析
目的：分析研究重症监护病房（IC U ）发生呼吸道脓肿分枝杆菌感染病例的临床特点，提高临床医师分枝杆菌肺病的认识。方法采集2014年1－3月IC U 7例长期机械通气有发热等疑似感染患者呼吸道标本进行检测，同时进行抗酸染色镜检和接种培养，培养阳性的菌株采用GenoType M TBDR plus、Genotype CM 和Genotype AS探针法以及基因测序等方法进行鉴定，并开展流行病学调查。结果7例患者均确诊为脓肿分枝杆菌肺病，其中5例给予克拉霉素、莫西沙星、阿米卡星治疗，2例给予克拉霉素、莫西沙星、头孢西丁联合治疗，4个月后，6例患者症状好转、痰菌转阴、影像学改善，仅有1例患者死于基础疾病加重，所有环境样本培养均未检出脓肿分枝杆菌。结论脓肿分枝杆菌肺病均来自IC U且长期机械通气的老年患者，成为长期机械通气患者的潜在威胁，应加强医院感染预防控制措施。
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93例非结核分枝杆菌肺病患者临床分析
目的 总结非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)肺病临床特点、菌种分布及对常用抗结核药物的药敏情况.方法 收集我院2009年12至2012年12月痰中分离的721株分枝杆菌,初步鉴定分出结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌,并分析其中93株NTM对应的93例患者的临床特点、菌种分布以及对10种抗结核药物药敏结果.结果 我院NTM肺病占全部痰分枝杆菌培养阳性患者的12.9％,该病临床多表现为咳嗽、咳痰90例(96.8％)、咯血40例(43.0％)、气喘30例(32.2％)等,影像学多表现为支气管扩张60例(64.5％)、空洞35例(37.6％)、斑片渗出30例(32.3％)等.NTM菌种包括:脓肿分枝杆菌41例(44.1％)、胞内分枝杆菌16例(17.2％)、堪萨斯分枝杆菌5例(5.4％)、鸟型分枝杆菌5例(5.4％)、戈登分枝杆菌3例(3.2％)、偶发分枝杆菌3例(3.2％),未做基因分型20例(21.5％).药敏试验提示大多数NTM对10种抗结核药物耐药,尤其是脓肿分枝杆菌对10种抗结核药物全部耐药.结论 NTM肺病发病率较高,临床医生应对NTM行菌种基因鉴定及药敏试验以指导治疗,目前对NTM病尚缺乏有效治疗药物,需要研究新型的抗NTM药物.
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结节性痤疮误诊为结核1例
结核菌感染形成的结节,与脓肿分枝杆菌感染形成的结节,在病理组织上有很多相似之处,有时难以鉴别,单纯依据病理报告,易造成误诊,需要引起重视.
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脓肿分枝杆菌对头孢类抗生素的药物敏感性分析
目的：：研究临床痰标本中分离得到的脓肿分枝杆菌，进行3种头孢类抗生素的体外药物敏感性测定，以期了解头孢类抗生素的抗菌活性。方法：通过16SrRNA 鉴定的30株脓肿分枝杆菌，采用改良的微量肉汤稀释法，进行头孢西丁、头孢美唑和头孢哌酮的药物敏感性测定。结果：脓肿分枝杆菌的临床分离株对头孢美唑的敏感性高，敏感率达到90.00%；其次是头孢哌酮，其敏感率为76.67%；对头孢西丁的敏感性低，为16.67%。MIC50和 MIC90的分析显示，实验菌株对于头孢美唑的敏感性较好，其值分别为16μg/mL 和64μg/mL；头孢哌酮的敏感性次之，分别为4μg/mL 和256μg/mL；头孢西丁的敏感性低，分别为64μg/mL 和256μg/mL。结论：头孢美唑的抗菌活性好，其次是头孢哌酮，而头孢西丁的抗菌活性低。
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脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C的原核表达及活性鉴定
目的 原核表达脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C,并检测其生物学活性.方法 以脓肿分枝杆菌标准株( ATCC19977)基因组DNA为模板,PCR扩增非溶血性磷脂酶C基因,克隆至pQE-30载体,构建重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经Ni2+-NTA层析纯化后,采用杯碟法检测其生物学活性.结果 重组原核表达质粒pQE-30- MAB_0555经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为53 000,纯化后蛋白浓度为0.40 mg/ml,具有溶解蛋黄中卵磷脂的酶活性,无溶血活性.结论 成功地在大肠杆菌DH5α中表达了非溶血性磷脂酶C,为进一步研究其生物学功能及其在脓肿分枝杆菌致病机制中的作用提供了材料,也为研制脓肿分枝杆菌临床治疗药物及寻找新的药物作用靶点提供了思路.
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从血液中分离脓肿分枝杆菌1例报道
非结核分枝杆菌(nontuberculous Mycobacterium,NTM)是指除结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)复合群和麻风分枝杆菌外的分枝杆菌.目前共发现13个亚种154种NTM,大部分为腐物寄生菌,仅少部分对人体致病.Runyon分类法根据NTM在试管内的生长温度、生长速度、菌落形态及色素产生、与光反应的关系将其分为4组 [1],其中Ⅳ组为快速生长分枝杆菌(rapid growing Mycobacterium,RGM),培养3～5 d即有肉眼可见的菌落,多数在1周内形成较大的菌落.临床常见RGM包括脓肿分枝杆菌、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌和耻垢分枝杆菌等.2016年11月17日,周浦医院从1例胃癌化疗患者血液中分离出1株脓肿分枝杆菌,现报道如下.
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脓肿分枝杆菌致胫骨骨髓炎一例并文献复习
脓肿分枝杆菌是一种不需光、不产色和快速生长的分枝杆菌，主要侵犯肺部、皮肤和软组织，累及骨髓极为罕见。现将复旦大学附属华山医院收治的1例脓肿分枝杆菌患者的诊治情况及相关文献复习报道如下。
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脓肿分枝杆菌对理化因子的抵抗力
1969年Inman等[1]首次报道了12例因注射污染脓肿分枝杆菌的组织胺而引起的注射后脓肿.以后,该菌污染医院环境引起的散发感染甚至暴发流行的报道增多[2-5],并逐渐成为医院内感染的重要病原菌.由于对大多数抗生素,尤以抗结核药物不敏感,且无恒定的敏感药物,给治疗带来极大困难.因此,防止该菌的感染具有重要意义.现就脓肿分枝杆菌对理化因子的抵抗力进行研究,以利于更好地预防该菌引起的医院内感染.
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面部脓肿分枝杆菌感染2例
报告2例美容注射手术后面部感染脓肿分枝杆菌.例1.女,32岁.肉毒素注射1周后面部出现多发脓肿.例2.女,35岁.面部自体脂肪填充术2周后注射部位出现多发性脓肿.通过对2例患者脓液行各项检查鉴定出脓肿分枝杆菌,证实2例患者均为脓肿分枝杆菌感染.例1治疗3个月后基本痊愈,例2仍在随访中.
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粗糙型脓肿分枝杆菌致播散性皮肤感染
报告1例少见的播散性粗糙型脓肿分枝杆菌皮肤感染.患者女,16岁.因四肢播散性红斑、结节,伴反复发热、盗汗及淋巴结增大就诊.皮肤科检查:四肢散在数个暗红色斑,可触及蚕豆至鹌鹑蛋大皮下结节;左膝关节—4 cm×3 cm溃疡面.实验室及辅助检查:血常规中WBC及血红蛋白均下降;左膝关节溃疡分泌物涂片:抗酸染色阳性(++);血平皿培养:表现为粗糙型菌落形态;16S rRNA基因和RNA聚合酶β亚单位rpoB基因序列测定提示为脓肿分枝杆菌.诊断:播散性粗糙型脓肿分枝杆菌皮肤感染.予静脉滴注丁胺卡那霉素及口服克拉霉素治疗1年后痊愈.
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脓肿分枝杆菌16S rRNA检测及生物学特性研究
目的 鉴定1株脓肿分枝杆菌临床分离株.方法 取2017年12月18日就诊于潍坊医学院附属医院的1例疑似非结核分枝杆菌感染患者的脓液标本行细菌培养、革兰染色和抗酸染色;药敏试验采用比例法.提取菌株基因组DNA,选用16S rRNA通用引物进行PCR扩增,回收、纯化产物后测序,与GenBank数据库中已知脓肿分枝杆菌序列比较同源性.采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定分离株.结果 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱与16S rRNA基因检测均鉴定该分离菌为脓肿分枝杆菌.药敏试验显示该菌对阿米卡星、莫西沙星、左氧氟沙星敏感,对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、卡那霉素、卷曲霉素、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺、利福布汀耐药.诊断为左膝关节皮下软组织感染.根据药敏试验结果,给予阿米卡星和左氧氟沙星治疗后,症状好转.结论 16S rRNA检测与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱可用于脓肿分枝杆菌鉴定.
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液基微量稀释法体外测定脓肿分枝杆菌的药物敏感性
脓肿分枝杆菌(M.abscessus)属于速生非结核分枝杆菌(NTM),常导致人局部皮肤软组织和肺部感染.我们根据美国临床和实验窒标准协会CLSI制定的<分枝杆菌药敏试验确认标准>(CLSI M24-A)[1].采用液基微量稀释法对临床分离的2株脓肿分枝杆菌和1株脓肿分枝杆菌标准株做了7种抗菌药物的敏感性测定,建立统一的标准化分枝杆菌快生菌药物敏感试验方法.
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非结核分枝杆菌肺病的临床研究进展
非结核分枝杆菌( non-tuberculous Mycobacteria, NTM)是指除MTB、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等MTB复合群及麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌总称。迄今为止,共发现NTM菌种154种和13个亚种,其中大部分为腐物寄生菌,仅少部分NTM对人体致病,可侵犯肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组织和器官,并可引起全身播散性疾病[1]。加拿大安大略省的 NTM 肺病发病率从1997年的9．4/10万增加到2003年14．1/10万,鸟-胞内分枝杆菌复合菌组( Mycobacterium avium-intra-cellulare complex,MAC)和快速生长分枝杆菌( rap-idly growing mycobacteria,RGM)的发病率均明显高于肺结核[2]；2000年至2008年台湾地区NTM病发病率从2．7/10万增至10．2/10万, NTM 病占所有分枝杆菌病的比率从2000年的32．3%升至2008年的49．8%[3]。上海的一组资料显示,NTM肺病中以龟分枝杆菌、戈登分枝杆菌和脓肿分枝杆菌病常见[4]。
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偶然分枝杆菌感染所致皮下脓肿1例临床分析
偶然分枝杆菌也叫偶发分枝杆菌(Mycobacteriun fortuitum,Mf)为非结核分枝杆菌(NTM)Runyon分类法的第Ⅳ群-快生长菌.该细菌广泛存在于土壤和灰尘中,为环境中常见的分枝杆菌.非结核分枝杆菌造成皮肤感染比较少见,只是近几十年才发现.已证实能侵犯皮肤,皮下组织的细菌有海分枝杆菌,溃疡分枝杆菌,龟分枝杆菌,偶然分枝杆菌,和脓肿分枝杆菌等[1].近年来,随着NTM病疫情呈现上升趋势,偶然分枝杆菌造成皮肤或软组织感染,近几年在国内也有报道,并且医源性病例较多[2-5],而我院这例病人也是由于医源性感染造成的.
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脓肿分枝杆菌硝基还原酶基因的克隆表达及生物信息学分析
目的 克隆表达脓肿分枝杆菌中的硝基还原酶(nitroreductase,Nrd)基因,并对其对应的蛋白质进行生物信息学分析.方法 利用PCR技术从脓肿分枝杆菌中扩增Nrd的全基因序列,采用原核表达系统进行体外表达.采用生物信息学方法对Nrd蛋白的理化性质、结构和功能等重要参数进行了预测和分析,对其三级结构进行了同源建模.结果 从脓肿分枝杆菌中扩增出660 bp的目的 片段,体外表达获得了大小约为30 kDa的带有His标签的重组蛋白.生物信息学分析显示Nrd蛋白有219个氨基酸组成,理论分子量和等电点分别为24.38 kDa和6.52,是一种不稳定的亲水性蛋白质(不稳定系数为54.52,总平均亲水性为-0.244);二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规卷曲为主要构件;该蛋白的氨基酸序列与蛋白质结构数据库中3gr3蛋白A链的相似性高为60%,以3gr3蛋白A链为模板构建了Nrd蛋白的三维结构分子模型.结论 成功表达并纯化了脓肿分枝杆菌中的Nrd蛋白.预测结果显示该蛋白是硝基还原酶家族成员之一,这提示Nrd蛋白在脓肿分枝杆菌中可能执行还原对硝基苯甲酸的功能.
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脓肿分枝杆菌耐利福平机制的研究
目的 探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制.方法 采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的低抑菌浓度.通过利福平对脓肿分枝杆菌的低抑菌浓度的变化情况来分析细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平机制中的作用.结果 随着TWEEN-80、Trixon X-100、甲苯、乙醚、CCCP、利血平和泮托拉唑浓度的增加,利福平对脓肿分枝杆菌的低抑菌浓度逐渐降低.对于TWEEN-80、Trixon X-100、CCCP和泮托拉唑,利福平对脓肿分枝杆菌的低抑菌浓度由512 μg/mL降至小于32 μg/mL,0.1％的TWEEN-80、0.006 25％的Trixon X-100、0.1 μg/mL的CCCP和32 μg/mL的泮托拉唑为适浓度;对于甲苯、乙醚和利血平,利福平对脓肿分枝杆菌的低抑菌浓度由512 μg/mL降至64 μg/mL,0.25％的甲苯、0.25％的乙醚和8μtg/mL的利血平为适浓度.它们均能促进利福平对脓肿分枝杆菌的抑菌作用.结论 细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平的机制中有重要作用.
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1例脓肿分枝杆菌合并铜绿假单胞菌使用头孢西丁联合抗感染方案病例分析
临床药师参与1例脓肿分枝杆菌合并铜绿假单胞菌肺疾病患者的药物治疗经过,探讨含头孢西丁联合抗感染方案对脓肿分枝杆菌合并铜绿假单胞菌患者的有效性、剂量安全性及药学监护.经过分析与临床验证,该方案对患者比较安全,有一定的疗效,并为临床个体化用药提供参考.
