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  • 复方汉防己对肝星状细胞的增殖和TTR,ITIH1,SERPINF2表达的影响

    作者:冯玉佳;王要军;张福成;周超;权启镇

    目的:观察并比较复方汉防己和干扰素γ对肝星状细胞中转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)、间-α胰蛋白酶抑制因子家族的重链之一(inter-α inhibitor H1,ITIH1)、α-2抗纤溶酶(serpin peptidase inhibitor clade F member 2,SERPINF2)表达的影响.方法:不同浓度复方汉防己和干扰素γ作用于肝星状细胞(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)48 h,流式细胞仪检测复方汉防己和干扰素γ对HSC增殖的影响,RT-PCR法检测TTR,ITIH1,SERPINF2 mRNA水平的表达,用ELISA检测上清液中TTR,ITIH1,SERPINF2分泌,细胞免疫荧光检测HSC-T6细胞TTR,ITIH1,SERPINF2蛋白定位,Western blotting检测细胞中TTR,ITIH1蛋白的表达.结果:复方汉防己和干扰素y作用于HSC-T6后,与对照组比较,细胞增殖被明显抑制(P<0.05),TTR,ITIH1,SERPINF2蛋白及mRNA表达升高,与复方汉防己的浓度呈一定相关性,复方汉防己2.5g·L-1组的作用强于干扰素γ组(P<0.05).结论:复方汉防己可以抑制HSC增殖,上调TTR,ITIH1,SERPINF2蛋白及mRNA的表达,这可能是该药抗肝纤维化的机制之一.

  • 用分泌型萤光素酶报告系统比较TTR启动子与CMV启动子的体内外表达特性

    作者:罗顺涛;田文洪;王刚;董小岩;杨莉;吴小兵

    Gluc(Gaussia Luciferase)是一种高灵敏度分泌型萤光素酶.本研究利用Gluc的易分泌、高灵敏性和检测方法简单快速的特点,初步比较了TTR启动子(P_(TTR))与CMV启动子(P_(CMV))的体内外表达特性.首先构建了两种启动子-报告基因表达质粒pAAV2-neo-TTR-Gluc和pAAV2-neo-CMV-Gluc.用脂质体转染法将它们分别转染至两株肝细胞源的细胞株Huh7与HepG2以及两株非肝细胞源细胞株HEK293与HeLaS3.在转染后不同时间点取细胞培养上清液检测Gluc的表达.此外采用水动力注射法,将这两种质粒分别以注射剂量0.1μg、1μg和10μg/只经尾静脉注射至BALB/c小鼠体内,注射后2h开始在不同时间点上经尾静脉采集全血(2.5μl/次)并测定血液中的Gluc水平.细胞实验结果显示,P_(CMV)介导的Gluc表达都明显高于P_(TTR);然而,在HEK293和HeLaS3细胞中P_(CMV)比P_(TTR)的表达水平高50~300倍,而在Huh7和HepG2中仅高10倍以内,提示P_(TTR)具有相对的肝细胞特异性.在小鼠实验中,P_(CMV)介导的Gluc表达在各剂量组中也明显高于P_(TTR),然而它们表达水平变化特征明显不同:P_(CMV)介导的Gluc表达在质粒注射后约10h达到大值,此后迅速下降;而P_(TTR)介导的Gluc表达在质粒注射后约48h达到峰值,随后缓慢下降.上述实验结果提示,P_(TTR)虽然在表达强度方面不及P_(CMV),但其介导的表达水平维持长时间,下降较缓慢,比较适于目的基因在肝脏内的较长时间表达.

  • 结直肠癌患者血清中转甲状腺素蛋白的表达与肿瘤转移的相关性

    作者:胡慧慧;孟倩;张曼

    目的 对发生远处转移结直肠癌患者血清中转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)的表达进行研究,旨在探讨TTR的表达与结直肠癌转移的关系,进一步发现TTR与结直肠肿瘤转移之间的相关性.方法 收集23例结直肠癌患者血清,标本于-80℃保存.根据是否发生远处转移进行分类,未发生远处转移样本12例,远处转移样本1 1例.采用蛋白免疫印迹的方法对TTR的表达进行半定量分析.结果 利用Image J软件计算各组光密度比值,显示在未发生远处转移的结直肠癌患者血清中,TTR的表达量高于发生远处转移的患者,TTR在两组结直肠癌患者血清中表达差异有统计学意义(P=0.017).结论 TFR在结直肠癌患者血清中的表达水平与肿瘤是否发生转移存在相关性,因此,今后对于评估结直肠癌浸润与转移的水平,TTR可以发挥肿瘤标志物的作用.

  • 遗传性转甲状腺素蛋白淀粉样变性心肌病的临床特点

    作者:田庄;李剑;吴炜;陈未;张抒扬;方全

    目的 探讨遗传性转甲状腺素蛋白淀粉样变(ATTR)心肌病的临床特点.方法 本研究纳入13例通过组织活检、基因检测和超声心动图检查明确为遗传性ATTR心肌病的患者,同时纳入58例明确诊断为原发性淀粉样变(AL)心肌病患者作为对照.回顾性收集并分析以上患者的临床表现、实验室检查、心电图和超声心动图检查结果.结果 13例遗传性ATTR心肌病患者平均年龄26.0 ~62.0(47.0±11.0)岁,9例(69.2%)患者有家族史.与AL心肌病患者相比,遗传性ATTR心肌病患者病程较长17(14,27)个月,心脏受累症状不突出,主要表现为活动耐力减低;超声心动图主要表现为左心室肥厚但无扩大且收缩功能基本正常;遗传性ATTR心肌病患者更年轻[(47.0±1 1.0)岁比(57.0±10.0)岁,P<0.01];心电图低电压发生率较低(23.1%比55.2%,P<0.05);左心室间隔[17.0(16.0,19.0)mm比13.0(11.0,15.0) mm,P<0.001]及左心室后壁更厚[16.0(14.0,19.0)mm比12.0(11.0,14.0)mm,P<0.01];左心室舒张末内径较小[42.0(39.0,43.0) mm比46.0 (41.0,49.0)mm,P<0.05]而收缩功能更好[左心室射血分数62.0%(53.0%,65.0%)比54.0% (44.0%,61.0%),P<0.05].遗传性ATTR心肌患者心脏外受累主要表现为周围神经病变和慢性腹泻,肾、消化道和肝受累较少见;而AL心肌病患者则更多表现为肾、肝和胃肠道受累,周围神经病变和慢性腹泻少见.结论 遗传性ATTR心肌病患者主要表现为左心室肥厚而收缩功能基本正常,心电图无高电压表现;常合并周围神经或者自主神经病变及家族聚集特点.

  • 转甲状腺素蛋白相关心肌淀粉样变的认识及诊断进展

    作者:李莹莹

    淀粉样变性是淀粉样蛋白异常沉积引起的一组疾病.不同分型的心肌淀粉样变预后及治疗差别很大.转甲状腺素蛋白(TTR)相关心肌淀粉样变是近年来研究热点,随着认识的不断深入,诊断手段也不断发展,特别是无创技术的发展,比如心脏磁共振成像、放射性核素显影等,为疾病的早期诊断提供可能.

  • 转甲状腺素蛋白与子痫前期发病关系的研究

    作者:龚丽云;张震宇

    目的 通过建立子痫前期孕鼠模型探讨转甲状腺素蛋白与子痫前期发病的关系.方法 将健康SPF级CD-1小鼠按雌雄比2∶1合笼,雌鼠受孕后,随机将孕鼠分为四组,以使用生理盐水作为对照组,使用亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)建立子痫前期孕鼠模型,另两组使用TTR稳定剂及在子痫前期孕鼠模型上使用TTR稳定剂;观察四组孕鼠的血压情况;使用ELISA方法检测四组孕鼠在妊娠第18天时的尿蛋白情况和不同妊娠天数时血清TTR水平;比较四组孕鼠胎鼠和胎盘重量的差异;用Western blot方法检测四组孕鼠胎盘TTR的蛋白表达水平.结果 ①模型组孕鼠出现血压升高、尿蛋白明显增加和血清TTR水平下降,与对照组相比差异有统计学意义;给予TTR稳定剂治疗的子痫前期孕鼠出现血压和尿蛋白下降以及血清TTR水平下降缓慢,与模型组相比差异有统计学意义;②模型组胎鼠体重明显低于正常对照组,差异具有统计学意义;使用TTR稳定剂治疗的子痫前期孕鼠中,胎鼠体重增加,与模型组相比差异有统计学意义.四组孕鼠胎盘重量和胎盘TTR蛋白表达没有差异.结论 血清TTR水平的增加可以改善子痫前期孕鼠的相关症状,包括高血压、蛋白尿和子代的体重,验证了TTR与子痫前期发病的相关性,TTR下降可以导致子痫前期发生.

  • 家族性淀粉样变性多发神经病家系的产前基因诊断一例并文献复习

    作者:朱海燕;王皖骏;朱瑞芳;杨滢;何琳琳

    家族性淀粉样变性多发神经病( familial amyloid polyneuropathy,FAP)是以细胞外特异性淀粉样物质聚集、主要累及外周神经和白主神经系统为特征的常染色体显性遗传性神经系统疾病[1],是具有广泛种族分部的家族性综合征.FAP的临床症状多样,主要表现为进行性的周围运动神经和感觉神经障碍,以及自主神经功能异常,可出现肾病综合征、充血性心功能衰竭、心律失常等,多种症状可单独或合并出现,患者往往因心、肾损害而死亡.FAP的致病基因为转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)基因[2],位于染色体18q12.1,约7 kb,含有4个外显子.TTR负责转运甲状腺素和视黄醇,但基因发生突变时该蛋白的四聚体裂解为单体,形成淀粉样纤维,并在多种组织聚积而导致发病.目前,无有效消除淀粉样物质沉积的方法,主要以对症治疗来推迟靶器官的功能衰竭[3],但通过基因检测可以尽早识别症状出现前的患者,对于该病的防治具有重要意义.本研究对来自已明确诊断为TTR基因杂合突变的FAP家系[4]的第三代患者的子代进行产前基因诊断,为其提供遗传咨询及发病风险评估.

  • TTR Val50Leu突变导致家族性淀粉样多发性神经病的临床和电生理研究

    作者:杨硕;陈娜;潘华;翦凡;张磊;王颖

    目的 分析TTR Val50Leu突变导致家族性淀粉样多发性神经病的临床和电生理特点.方法 对一个由TTR Val50Leu突变导致的家族性淀粉样多发性神经病家系进行报道,先证者以足部疼痛为首发症状,2年内逐渐向小腿及上肢进展,并出现自主神经症状.通过对先证者及其家系中相关者进行临床表现 、电生理检查及基因检测,分析该病的临床和电生理特点.结果 先证者的外祖父 、母亲 、舅舅 、弟弟(其外祖父 、母亲 、舅舅已故)与其具有相似症状.先证者电生理检查上肢正中神经感觉传导受累,运动正常,尺神经的感觉传导及运动传导均正常,但尺神经F波异常,下肢胫神经和腓总神经的感觉传导及运动传导均未见肯定波形,腓肠神经受累,交感皮肤反应未引出.其弟弟上肢正中神经及尺神经改变同先证者,下肢胫神经运动波幅下降,腓总神经运动正常,交感皮肤反应四肢波幅降低,余同先证者.其女儿上述电生理检查未见异常.基因检测发现三者均在TTR基因exon2存在c.148G>T突变,TTR蛋白存在Val50Leu突变.结论 TTR Val50Leu突变导致的家族性淀粉样多发性神经病家系属早发型,以足部疼痛为首发症状,进展迅速,自主神经症状出现较早.电生理符合多发性神经病表现,早期可伴有交感皮肤反应波幅降低.

  • 转甲状腺素蛋白淀粉样变药物治疗研究进展

    作者:田庄;张抒扬;方全

    转甲状腺素蛋白(TTTR)淀粉样变是由于TTR沉积所致的系统性疾病,周围神经及心脏是主要受累脏器,严重影响患者的生活质量和生命.目前的治疗方法有限,迫切需要有新型疗法延缓或者逆转疾病进展.TTR稳定药物,如二氟尼柳和氯苯唑酸可延缓神经病变的进展,但对心肌病变是否有效仍需进一步研究.清除已形成淀粉样物质的药物(多西环素/牛磺熊去氧胆酸和抗血清淀粉样物质P抗体)目前在早期研发阶段,一旦成功,将能用于任何类型的系统性淀粉样变.基因沉默(如反义寡核苷酸和小干扰RNA)技术目前正在进行Ⅱ/Ⅲ期临床试验,初步显示能持续显著抑制突变和野生TFR合成,可能会进一步逆转淀粉样变.

  • 转甲状腺素蛋白在临床肿瘤中的研究进展

    作者:彭晨;王子安

    转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR),又称前白蛋白(prealbumin,PA)是一种由4个相同亚基组成的四聚体,每个亚基包括127个氨基酸.TTR的相对分子量为55×103,主要作用是作为转运蛋白参与甲状腺素及视黄醇的转运.TTR可以准确的反映机体内在蛋白的合成情况[1].体内蛋白丢失、热量不足和急性应激状态下,TTR会迅速下降.而在相反的情况下,其在体内的浓度会迅速上升.此外作为甲状腺素与视黄醇的转运蛋白,TTR可敏感地反映机体的营养状况及某些病理改变,在疾病的预测及其预后的判断中均发挥着重要的作用.

  • 家族性淀粉样变多发性神经性损害患者腺体组织存在淀粉样小体

    作者:李琬琛;宋林;王亮;苏桂新;李晓亮;郑芳;孙续国

    目的:报道家族性淀粉样变多发性神经性损害(familial amyloidotic polyneuropathy,FAP)患者腺体组织存在淀粉样小体,用于探讨淀粉样变形成机制。方法①临床收集转甲状腺素蛋白(transthyretin, TTR)相关淀粉样变患者,利用免疫亲和-质量分析装置法(Matrix assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/MS)法测定 TTR 基因突变类型。②刚果红(Congo red,CR)染色结合偏振光显微镜检查鉴定心脏组织是否发生淀粉样变沉积。③免疫组织化学染色鉴定淀粉样变沉积蛋白类型。④对 FAP 患者腺体组织进行形态分析以确定淀粉样小体的存在。结果①MALDI-TOF/MS 分析结果确定 TTR 基因突变类型为 ATTRVal30Met。②患者心脏组织经 CR 染色结合偏振光显微镜观察,确定淀粉样变沉积阳性,且沉积于小血管壁和心肌组织间隙。③免疫组织化学染色结果可见 TTR 免疫反应阳性,提示淀粉样变沉积前蛋白为 TTR。④对胰腺组织进行分析发现腺体腔内可见 CR 染色阳性和绿色荧光淀粉样小体,未见其与 TTR 抗体存在免疫原性反应。结论FAP 患者胰腺组织发现淀粉样小体,且未发现其与 TTR 抗体之间存在免疫原性反应。

  • 血清转甲状腺素蛋白新修饰型用于辅助检查类风湿关节炎

    作者:潘涛;么作义;王任利;张国栋;王亮;孙续国

    目的:分析类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)患者血清转甲状腺素蛋白(Transthyretin, TTR)代谢修饰型用于辅助临床检查 RA。方法按 RA 诊断标准,收集天津医科大学附属医院 RA 患者42例,骨性关节炎患者(OA)30例,健康体检人群38例,ELISA 法测定血清 TTR 蛋白水平。Western Bloting 法鉴定血清中 TTR 蛋白分子的聚合程度。MALDI-TOF-MS 法测定血清 TTR 蛋白的代谢修饰类型。结果ELISA 法测定血清 TTR 水平,显示早期 RA 患者血清为(502.46±109.25)mg/L,健康对照组为(424.98±118.52)mg/L,RA 患者明显升高(P <0.05);OA 组 TTR 蛋白含量为(363.91±106.41)mg/L,与对照组相比差异无统计学意义(P >0.075)。MALDI-TOF-MS 法分析 TTR 蛋白修饰类型,发现各组血清 TTR 蛋白修饰有4种 TTR 峰,分别是 m/z(13750.86±1.48),m/z(13830.63±2.76),m/z(13871.70±2.70),m/z (13919±14.77),分别对应 native-TTR,sμl-TTR,cys-TTR 和cysgly-TTR。结论早期 RA 患者血清 TTR 水平增加,且血清中 cys-TTR 类型比例明显高于 OA 患者和对照组,其结果有可能作为辅助检查 RA 的生物标志物。

  • 转甲状腺素蛋白与2型糖尿病

    作者:刘烨;郗光霞

    转甲状腺素蛋白(TTR)与2型糖尿病关系密切,TTR通过损伤β细胞、降低胰岛素敏感性、影响激素及脂肪因子代谢,直接或间接导致或加重2型糖尿病;2型糖尿病出现糖、脂、蛋白质代谢紊乱,可通过免疫机制及受体竞争机制影响转甲状腺素蛋白代谢.本文对二者的关系进行综述.

  • 寿胎丸对RSA模型小鼠子宫蜕膜Annexin A2及TTR表达影响的研究

    作者:李慧芳;雷磊;谭展望;卢丽丽;罗蕾

    目的:分析寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响.方法:建立复发性流产模型.CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为4组,分别为模型组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组和寿胎丸低剂量组,从妊娠第1d开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用蛋白印迹和免疫组化方法检测差异蛋白质Annexin A2及TTR的蛋白表达.结果:小鼠模型组与正常组相比,蜕膜Annexin A2表达明显降低,TTR表达明显下降,差异有显著统计学意义(P<0.01);寿胎丸高、中、低剂量组与模型组相比,蜕膜Annexin A2表达均升高,寿胎丸高剂量组蜕膜TTR表达升高,差异有显著统计学意义(P<0.01).结论:寿胎丸通过上调Annexin A2、TTR蛋白的表达,从而实现维持妊娠,降低胚胎丢失率,这可能是其安胎的作用机制之一.

  • 遗传性淀粉样变性家系1例报告并文献复习

    作者:陆怡敏;徐静;潘晓霞;史浩;王朝晖;陈以平;陈楠

    随着对淀粉样变性的认识不断深入,免疫球蛋白轻链型(AL型)及血清淀粉样蛋白A型(AA型)淀粉样变性的诊断有了一定的提高,而对于遗传性淀粉样变性的诊疗目前仍存在一定困难和误区.本文报道了一个遗传性淀粉样变性家系,并主要针对遗传性淀粉样变性中家族性淀粉样神经病变、溶菌酶性淀粉样变性、载脂蛋白AⅠ淀粉样变性、载脂蛋白AⅡ淀粉样变性、纤维蛋白原A-α链淀粉样变性的临床表现及诊疗进行讨论.

  • 子痫前期孕妇孕中期血清转甲状腺素蛋白的表达及其对妊娠结局的影响

    作者:金艳

    目的 探讨子痫前期(PE)孕妇孕中期血清转甲状腺素蛋白(TTR)的表达及其对妊娠结局的影响.方法 收集2012年5月-2016年2月间在该院进行产前检查(产检)及分娩的孕中期PE孕妇68例作为观察组,根据血清TTR含量中位数分为高TTR组、低TTR组各34例;另取同期在该院进行产检及分娩的正常孕妇50例作为对照组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TTR表达水平;记录各组孕妇的分娩方式、母婴不良结局发生情况.结果 观察组孕中期血清TTR表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(T=10.827,P<0.05);低TTR组、高TTR组的自然分娩率低于对照组,产钳助娩、刮宫产率高于对照组,TTR表达水平降低,自然分娩率降低,产钳助娩、剖宫产率上升,差异有统计学意义(x低TTR组vs.对照组=11.286、9.174、10.574;x高TTR组 vs.对照组=14.382、10.658、9.816;x2低TTR组 vs.高TTR组=9.163、12.573、10.729,均P<0.05);低TTR组、高TTR组的子痫、DIC、急性心衰、肝功能损害等母体不良结局发生率均高于对照组,TTR表达水平降低,子痫、DIC、急性心衰、肝功能损害等发生率上升,差异有统计学意义(x2低TTR组 vs.对照组=9.831、10.729、12.163、8.927;x2高TTR组 vs.对照组=12.093、9.117、10.564、12.764;x2低TTR组 vs.R组.高TTR组=12.047、10.652、13.193、8.372,均P<0.05);低TTR组、高TTR组胎死宫内、新生儿窒息、新生儿透明膜病、新生儿心脏发育不全等发生率高于对照组,TTR表达水平降低,胎死宫内、新生儿窒息、新生儿透明膜病、新生儿心脏发育不全等发生率上升,差异有统计学意义(x2低TTR组 vs.对照组=14.392、9.382、11.173、9.371;x2高TTR组vs对照组=9.173、10.684、14.214、9.872;x2低TTR组 vs.高TTR组=11.381、9.473、15.382、10.561,均P<0.05).结论 血清TTR表达水平降低是辅助诊断PE患者的可靠指标;TTR表达水平与母婴不良结局发生率间存在负相关关系.

  • 血清TTR、IGFBP-3对早产儿营养评估的临床研究

    作者:王金秀;莫革琴;丁雪晶;蒋曙红

    目的:探讨血清中TFR、IGFBP-3含量在早产儿出生后早期生长发育过程中的变化,为精确评价早产儿营养状态提供理论依据.方法:将73例早产儿中28周≤胎龄<30周15例为Ⅰ组,30周≤胎龄<32周29例为Ⅱ组,32周≤胎龄<34周29例为Ⅲ组,分别测定3组中早产儿生后第1、7、14天血清TFR、IGFBP-3含量并进行比较.结果:3组早产儿出生第1天TTR含量各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05);在出生第1、7、14天时血清TTR含量随日龄增长明显增高,IGFBP-3含量生后7天增高显著,差异有统计学意义(P<0.05).结论:血清TFR、IGFBP-3含量对评估早产儿生后早期营养状况有一定的价值.

  • 转甲状腺素蛋白含量及化学修饰在肺癌诊断中的价值

    作者:赵辉;潘涛;王庆艳;么作义;张国栋;董全红;王宝菊;张明红;孙续国

    目的 研究血清和腹水转甲状腺素(TTR)蛋白含量和化学修饰类型,在肺癌诊断中的作用.方法 日本东芝TBA120全自动生化分析仪测定血清和胸水总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、乳酸脱氢酶(LDH)及葡萄糖(GLU)的含量.免疫比浊法测定TTR、Apo A和Apo B三种蛋白含量.基于结果 胸水中有6种成分含量比血清明显减低,减低程度明显的顺序依次是:TG、TC、ApoA、Apo B和TTR,而增高的仅LDH一项指标.在蛋白指标中TTR减低明显.肺癌患者胸水TTR发生3种类型化学修饰,其中GLUT-TTR修饰型明显增高.结论 肺癌患者胸水TTR含量明显低于血清,并且glut-TTR修饰比例明显增高,可能作为肺癌诊断的辅助参考指标.

  • 毛细管电泳与MALDI-TOF/MS联用测定血清转甲状腺素蛋白的化学修饰

    作者:张文亮;宋林;李优鑫;魏殿军;胡可胜;孙续国

    目的 建立一种毛细管电泳(CE)与基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)联用测定血清转甲状腺素蛋白(TTR)化学修饰的方法.方法 用酶联免疫吸附法(ELISA)测定20例老年性淀粉样变( SSA)患者及20名健康体检者血清TTR浓度;CE法分离血清TTR并利用MALDI-TOF/MS测定TTR的化学修饰.结果 健康对照组及SSA组血清TTR浓度分别为0.25±0.04、(0.26 ±0.03) g/L,2组间差异无统计学意义(P> 0.05);MALDI-TOF/MS分析共发现4个TTR化学修饰峰,质/荷比(m/z)分别为:13 750.86±1.48、13 830.63±2.76、13 871.70 ±2.70、13 919.00±14.77;分别对应未修饰-TTR、磺化-TTR、半胱氨酸-TTR和半胱氨酸甘氨酸-TTR.结论 CE法分离血清TTR能够直接利用MALDI-TOF-MS测定其化学修饰,可用于临床检测血清TTR的化学修饰.

  • 转甲状腺素蛋白在病理性近视患者玻璃体中的表达及其结构分析

    作者:邵珺;辛瑜;姚勇;朱靖

    目的 探讨转甲状腺素蛋白(TTR)在病理性近视患者玻璃体中表达及其结构分析.方法 实验研究.收集黄斑区脱离(n=14)和病理性近视黄斑裂孔(n=9)的玻璃体样本,另选正常角膜供体眼玻璃体样本(n=8)作为正常对照.对3组玻璃体进行了酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹分析(western blot,WB)和圆二色谱(CD)分析.对所得数据进行单因素方差分析.结果 正常人、黄斑区脱离患者、黄斑裂孔患者玻璃体中TTR的浓度分别为(45.2±1.0)mg/L、(230.0±16.3)mg/L、( 109.8±19.0)mg/L,差异有统计学意义(F=2.69,P<0.05).SDS-PAGE结果显示,黄斑区脱离患者玻璃体中TTR四聚体结构明显比黄斑裂孔患者和正常对照的稳定;对电泳条带进行黑度积分分析,黄斑区脱离患者玻璃体中TTR含量约为黄斑裂孔患者玻璃体TTR含量的2.4倍,与ELISA的结果相一致.CD结果显示黄斑区脱离和黄斑裂孔患者玻璃体TTR的二级结构分别含有45%α螺旋和32%α螺旋,且在不同pH(4~11)下保持稳定.正常样本玻璃体TTR的二级结构含有5%α螺旋,且随pH(4~11)变化产生巨大波动.结论 黄斑区脱离患者以及黄斑裂孔患者玻璃体中TTR含量较高,二级结构相对稳定,且黄斑区脱离患者玻璃体TTR四聚体结构牢固,这可能与蛋白变异和错误折叠有关.

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