首页 > 文献资料
-
18β-甘草酸和18α-甘草酸对大鼠原代肝细胞CYP3A酶表达的影响
目的:研究甘草中的2种成分18β-甘草酸和18α-甘草酸对原代培养大鼠肝细胞中细胞色素P450 3A(CYP3A)在mRNA及蛋白水平表达的影响,并探讨其剂量.效应关系.方法:原位两步胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞并采用"胶原蛋白凝胶三明治"培养原代肝细胞,无血清条件下培养细胞,并用不同剂量的18β-甘草酸和18α-甘草酸处理细胞,RT-PCR法测定CYP3A mRNA表达水平,Western-blot法测定CYP3A蛋白表达.结果:实验条件下对照组、18β-甘草酸、18α-甘草酸处理组CYP3A基因及蛋白均可被检测,18βv甘草酸浓度依赖性诱导CYP3A mRNA(25～100 μmol·L~(-1))及蛋白表达(50～400μmol·L~(-1)),而18α-甘草酸浓度依赖性抑制CYP3A mRNA(25～100 μmol·L~(-1))及蛋白表达(25～100 μmol·L~(-1))表达.结论:18β-甘草酸和18αv甘草酸在转录水平上分别上调和下调大鼠肝细胞CYP3A的表达.
-
银杏叶提取物对辛伐他汀药物代谢影响的研究
目的:研究银杏叶制剂对辛伐他汀体外代谢及其代谢相关酶的影响,探讨两药是否存在相互作用,为临床上两药的合理联用提供试验依据.方法:将大鼠随机分为4组:分别为生理盐水对照组、苯巴比妥钠阳性对照组、低剂量银杏叶制剂组和高剂量银杏叶制剂组.灌胃10天后,处死动物摘取肝脏并制备成微粒体.分光光度法测定各组微粒体蛋白含量,红霉素N-脱甲基酶(ERDase)活性,HPLC测定辛伐他汀体外代谢情况.结果:与生理盐水对照组比较:苯巴比妥钠阳性对照组微粒体蛋白含量、ERDabe活性及辛伐他汀体外代谢均显著增加(P<0.05);高剂量银杏叶组上述各指标也明显增加(P<0.05),且数值均介于生理盐水和苯巴比妥钠两组之间;低剂量银杏叶组各指标仅有增加趋势,但差别无统计学意义.结论:大剂量银杏叶制剂可以诱导CYP3A的活性,促进辛伐他汀的体外代谢,提示银杏叶制剂与辛伐他汀或其他CYP3A底物合用时要注意药物的相互作用.
-
清开灵注射剂等5种中药注射剂对大鼠肝微粒体CYP3A的体外抑制作用
目的:考察清开灵注射剂、金纳多注射剂、疏血通注射剂、参麦注射剂、康艾注射剂这5种临床常用的中药注射剂对大鼠肝微粒体CYP3A的体外抑制作用,预测发生药物相互作用的可能性,以确保这些中药注射剂临床应用的安全性与有效性.方法:采用SD大鼠肝微粒体体外孵育法,在孵育体系中加入底物睾酮和不同体积的清开灵注射剂等5种中药注射剂,用高效液相色谱法测定睾酮的羟化代谢产物6β-羟基睾酮的生成量反映CYP3A的活性,酮康唑用作阳性对照药.结果:在体外孵育体系中,10%的清开灵注射剂大约能抑制93.0%的6β-羟基睾酮生成,抑制效果明显高于其他4种相同浓度的中药注射剂.根据其抑制动力学曲线,计算出清开灵注射剂的IC90和Ki值分别为1.O%和0.7%.结论:在体外系统中,金纳多注射剂和疏血通注射剂对大鼠肝微粒体CYP3A无抑制作用,参麦注射剂和康艾注射剂对CYP3A显示出弱的抑制作用,清开灵注射剂对CYP3A有明显的抑制作用.提示当清开灵注射剂与经CYP3A代谢的药物联合用药时可能会发生药物相互作用,临床联合用药须谨慎.
-
三七总皂苷对大鼠肝组织内药物代谢酶CYP3A的抑制作用及其动力学分析
目的:研究三七总皂苷(total saponins of the root and rhizome of Panax notoginseng,PNS)对大鼠肝组织内药物代谢酶CYP3A的抑制作用及其动力学分析.方法:采用差速离心法制备大鼠微粒体酶,用半数效量概率单位法及Lineweaver-Burk 双倒数作图法求得大鼠肝脏CYP3A的米氏常数(Km)、大反应速度(Vmax)和三七总皂苷对大鼠肝脏CYP3A的半数抑制浓度(IC50)以及判断三七总皂苷对CYP3A的抑制类型和抑制常数(Ki,Kis).结果:三七总皂苷对大鼠肝组织CYP3A有抑制作用,其IC50 689.54 mg·L-1；对底物氨基比林,CYP3A的Km0.036 mmol·L-1,Vmax是21.01 μmol·min-1·g-1；三七总皂苷对大鼠肝组织CYP3A属于混合性抑制,其抑制常数Ki247.79 mg·L-1,Kis321.79 mg·L-1.结论:三七总皂苷对大鼠肝脏CYP3A的活性有明显抑制作用.
-
MDR-1和CYP3A基因多态性在肝肾移植中的应用
MDR-1和CYP3A分别编码P-糖蛋白和药物代谢酶P4503A,两者对于免疫抑制剂在体内达到有效血药浓度水平具有重要的作用.本文介绍了这两个基因的多态性在药物代谢方面的作用,以及其多态性与环孢霉素A和普乐可复的关系.
-
葡萄柚与器官移植临床常用药物的相互作用及其机制
葡萄柚是一种具有食疗功效的水果,其可抑制肠道细胞色素P450 3A(CYP3A)和肠道转运蛋白,从而影响多种药物的吸收和代谢.器官移植患者需终生服用多种药物,以预防移植排斥反应和治疗并发症,其中许多药物为CYP3A的底物,血药浓度受包括葡萄柚在内的多种药物与食物的影响.本文综述了葡萄柚的作用机制,并深入分析了其对器官移植患者用药的影响.
-
异烟肼和利福平致小鼠原代肝细胞损伤时CYP2E1和CYP3A酶活性的变化
目的 研究异烟肼和利福平对小鼠原代肝细胞的损伤作用及对CYP450同工酶CYP2E1和CYP3A酶活性的影响.方法 从小鼠肝脏中分离出肝细胞,原代培养3 d后,加入药物后孵育2 d.收集细胞培养上清液,测定其中的乳酸脱氢酶(LDH)释放量以反映药物对肝细胞的损伤作用.测定CYP450酶活性的细胞分别加入CYP2E1和CYP3A的特异性底物(对硝基酚和咪达唑仑)孵育2 h,反应终止后用高效液相色谱-质谱法测定特异性底物的浓度,浓度减少程度代表CYP2E1和CYP3A活性的变化.结果 与对照组比,异烟肼中、高浓度组,利福平高浓度组,合用中、高浓度组LDH的释放量显著增加.与对照组比较,异烟肼组与合用组CYP2E1底物对硝基酚浓度均显著降低;利福平组与合用组CYP3A底物咪达唑仑浓度均显著降低.结论 高浓度的异烟肼和利福平均对小鼠原代肝细胞有损伤作用,两药合用时,低浓度能引起肝细胞损伤.异烟肼和利福平对CYP2E1和CYP3A酶活性的诱导可能是其导致肝损伤的机制之一.
-
葡萄柚汁对药物代谢动力学的影响
近年来关于葡萄柚汁(GFJ)对药代动力学影响的研究取得了较大的进展,本文综述了相关领域的研究结果.GFJ含有黄酮类、呋喃香豆素类及其他许多化学成分,通过对肠道转运蛋白及肠黏膜上皮细胞上代谢酶的抑制作用与多种药物在不同程度上发生相互作用.临床研究表明,GFJ可抑制肠道转运蛋白OATP介导的药物吸收过程,降低药物的生物利用度;GFJ也可抑制小肠CYP3A介导的药物代谢过程,导致血药浓度上升,从而使得药效增强或不良反应增加;当药物治疗窗较窄或同服GFJ使药物药动学显著改变时,GFJ与药物的相互作用可能有临床意义.了解GFJ与药物的相互作用有利于提高用药的安全性和有效性.
-
探针药物咪哒唑仑有限采样法预测抑制状态大鼠肝脏CYP3A代谢活性的研究
本研究以细胞色素P450(CYP)3A探针药物咪哒唑仑的系统清除率(CLs)为指标,评价有限采样法(LSS)预测肝脏CYP3A抑制状态的可行性.采用系列剂量的CYP3A选择性抑制剂酮康唑预处理大鼠,静脉注射咪哒唑仑(MDZ)后若干时间点收集血浆样品并检测MDZ浓度,经逐步回归分析和Jack-knife验证建立LSS模型.对经相同处理的另一随机群体进行验证分析,评价该LSS模型方程的准确性和重现性.通过绘制Bland-Altman散点图对由两点(60和90 min)或三点(30、60和90 min,或30、60和120 min)血浆药物浓度建立的LSS预测模型得到的CLs估计值(CLest)与二房室模型拟合值(观察值,CLobs)进行偏差分析并计算95%可信区间,表明两种方法得到的CLs具有较好的一致性,LSS法预测误差小,特别是两点LSS预测模型更为准确且简便.结果表明:以咪哒唑仑清除率为指标,采用有限采样法评价大鼠肝脏CYP3A抑制状态下的代谢活性是一种准确而简便的方法,为今后推广到临床评价肝脏代谢功能从而制定和调整治疗药物的给药方案提供了理论依据和实验室证据.
-
Cocktail法考察益气复脉对大鼠CYP450酶亚型活性的影响
目的:研究注射用益气复脉(冻干)对大鼠3种细胞色素P450酶亚型1A2,3A和2El体内代谢活性的影响.方法:将大鼠随机分为3组,低、高剂量组和空白对照组.低和高剂量组分别尾静脉注射益气复脉542和1 084 mg·kg-1·d-1,空白对照组给予等体积0.9％ NaCl溶液,连续7d.d8灌胃(ig)给予探针药混合溶液,用UPLC检测各探针的血药浓度.结果:与空白对照组相比,高剂量组氯唑沙宗的清除率(CL/F)升高,差异有统计学意义(P＜0.05).各组茶碱和氨苯砜的主要药动学参数均无显著差异.结论:高剂量益气复脉对大鼠CYP2E1有一定的诱导作用,而对CYPl A2和3A并无显著性影响.
-
Cocktail法评价注射用丹参总酚酸对大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP3A的诱导作用
目的:考察注射用丹参总酚酸(TSAI)对大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP3A的诱导作用.方法:健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、苯巴比妥钠诱导组和给药组,每组6只,雌雄各半,连续给药7d,处死,制备肝微粒体；将特异性探针底物非那西丁、睾酮与肝微粒体共孵育,高效液相色谱测定孵育所得代谢产物对乙酰氨基酚和6β-羟基睾酮的生成速率,评价TSAI对CYP1A2和CYP3A的诱导作用.结果:空白对照组、诱导组和给药组的对乙酰氨基酚的生成速率分别为(18.04±1.00),(43.07±2.90)和(16.03±2.41)ng· mg ·min-,6β-羟基睾酮的生成速率分别为(15.79±1.43),(40.86±3.32)和(17.12±2.65) ng·mg-1·min-1.结论:TSAI对大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP3A无诱导作用.
-
18α-甘草酸二铵与格列本脲联用对实验性糖尿病大鼠糖代谢的影响及其机制
目的探讨18 α-甘草酸二铵(DG)是否影响格列本脲(Gli)的代谢及降糖效应,联用的效应及其机制.方法观察DG (25 mg·kg-1·d-1,ip,×5 d)及与Gli(1 mg·kg-1·d-1,ig,×5 d)联用对实验性糖尿病大鼠空腹血糖、血浆胰岛素、胰岛素敏感性指数、肝糖原及CYP3A活性的影响.免疫组化方法观察胰岛及B细胞形态结构变化,定量分析胰岛素表达水平.结果与模型组相比,DG与Gli联用比单用Gli进一步降低空腹血糖,上调胰岛素及肝糖原水平.DG单用或联用Gli均抑制CYP3A活性并下调肝损伤指标.DG联用Gli时,随CYP3A活性下降,胰岛素及空腹血糖下降率均提高.免疫组化显示,DG可进一步改善Gli对胰岛及B细胞形态结构的影响,并使胰岛素分泌增加.结论DG可增强Gli降糖效应,其机制可能与其抑制CYP3A活性,使Gli代谢延缓,致使降糖效应增强并与其促进胰岛B细胞修复和再生有关,提示DG有作为口服降糖药辅助用药的可能性.
-
CYP3A基因多态性与心脏移植术后环孢素肾毒性的相关性
目的：探讨心脏移植受者CYP3A基因多态性与环孢素（CsA）所致肾毒性易感性的关系。方法：应用飞行时间质谱技术分析66例CsA免疫抑制治疗发生肾毒性（20例）和未发生肾毒性（46例）心脏移植术后患者的CYP3A基因多态性，并通过统计学分析CYP3A各单核苷酸多态性（SNP）位点基因型与CsA所致肾毒性之间的关系。结果：筛选出8个标签位点的等位基因在肾毒性和非肾毒性组间的分布差异均无统计学意义。经非条件性二元Logistic回归分析，在AIC定义的共显性和显性遗传模型下，未发现CYP3A基因8个SNP位点与CsA肾毒性的发生有显著性关联。结论：本研究显示心脏移植受者本次调查的CYP3A基因位点与CsA所致肾毒性无显著性关联。
-
氢化可的松法测定肿瘤患者CYP3A酶的活性
目的建立测定肿瘤患者CYP3A酶的活性的方法.方法将52例肿瘤住院患者随机分为2组,一组直接收集24 h尿液,另一组在给予100 mg氢化可的松(HC)后收集24 h尿液,测定尿液中HC与6β-羟基氢化可的松(6β-OHC)的含量,以6β-OHC/HC来评估CYP3A酶的活性.结果未使用HC的患者尿液中6β-OHC与HC的比值为(6.23±4.67),使用100 mg HC的患者其比值为(1.45±0.98).结论CYP3A酶的活性可以通过测定6β-OHC与HC的比值进行预测.
关键词： 6β-羟基氢化可的松 氢化可的松 CYP3A 尿液 -
中国汉族中小学生健康志愿者细胞色素P4503A酶活性分布
目的 观察中国汉族正常儿童体内CYP3A活性的分布.方法 用氢化可的松探针测定健康儿童个体内CYP3A酶活性.结果 儿童健康志愿者CYP3A酶活性分布经自然对数转换,呈正态分布其平均值为(0.87±1.54),其中男(0.93±1.61),女(0.87±1.56).结论 CYP3A酶活性随着年龄变化而有所改变,与性别无显著性差别.
-
厦门市学龄前儿童CYP3A酶活性分布特征的研究
目的 了解厦门地区学龄前儿童细胞色素P450 3A酶(CYP3A)及分布活性特征.方法 用氢化可的松(HC)非侵入性探针法,利用高效液相色谱(HPLC)测定尿液中6β-羟基氢化可的松(6β-OHC)、氢化可的松(HC)的浓度,以两者的浓度比定量表示CYP3A酶活性.结果 287名儿童酶活性呈左偏态分布,中位数为2.61,四分位数间距为3.97.结论 不同性别间酶活性水平无显著性差别;随着年龄的升高,酶活性水平呈现降低的趋势(P＜0.05),与年龄具有相关性;3岁组明显高于4岁组(P＜0.05).
关键词： CYP3A 氢化可的松 6β-羟基氢化可的松 高效液相色谱法 学龄前儿童 -
他克莫司发生药物相互作用的分子机制
目的 综述与免疫抑制剂他克莫司发生药物相互作用的分子机制,为临床合理用药提供证据.方法 查阅新相关文献,按照临床用药的不同类别,从药动学和药效学两方面对与他克莫司发生药物相互作用的分子机制进行归纳、总结.结果 他克莫司是CYP3A4和P-糖蛋白的底物,这是它与其他药物发生相互作用的分子基础.他克莫司与其结合蛋白形成的复合物可抑制钙调磷酸酶的活性,影响白细胞介素-2和其他细胞因子的表达,从而在药效学上与其他具有相似作用的药物发生协同作用.结论 他克莫司是目前广泛用于器官移植术后抗排斥反应的免疫抑制剂,可与多种药物发生药效学或药动学相互作用.临床上需要合并用药时,应密切关注他克莫司的血药浓度变化.
-
发育过程中细胞色素 P450 3A 的变化及其临床意义
目的 综述发育过程中 CYP3A 代谢酶的变化和对临床用药的影响.方法 查阅国内外相关文献,进行分析、归纳和综述.结果和结论 不同年龄 CYP3A 酶的表达和活性存在差异,对儿科临床用药具有直接的作用.细化儿童代谢酶发育的基础研究,可以提高儿童临床合理用药,提高临床试验的有效性和合理性,是促进儿童药品开发的必要支撑.
-
阳春砂仁和化橘红对小鼠肝脏CYP3A及肠道首过效应的影响
目的：研究阳春砂仁和化橘红对小鼠肝脏 CYP3A以及肠道首过效应的影响，以指导临床精细用药。方法：将小鼠分为纯水对照组（10 mL/kg），酮康唑（1.8 mg/kg）、阳春砂仁和化橘红高、低剂量组（30 mL/kg和10 mL/kg）。灌胃给药2次/d，连续3 d。以分光光度法测定血中对乙酰氨基酚浓度；用超速离心法分离小鼠肝微粒体；分光光度法检测微粒体中CYP3A活性。结果：以红霉素和氨基比林为底物测定肝脏CYP3A活性时，阳春砂仁和化橘红高、低剂量组与纯水对照组之间均无显著性差异（P ＞0.05）；血中APAP浓度测定结果显示，阳春砂仁和化橘红高、低剂量组显著高于纯水对照组（P ＜0.01或P ＜0.05）；P-gp偶联的ATP酶活性测定结果显示，阳春砂仁和化橘红高、低剂量组明显低于纯水对照组（P ＜0.01或P ＜0.05）。结论：阳春砂仁和化橘红对小鼠肝脏CYP3A的活性均没有抑制或诱导作用，对小鼠肠道P-gp活性具有不同程度的抑制作用。
-
壮骨关节丸对大鼠肝微粒体P450的影响
[目的]考察壮骨关节丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响.[方法]壮骨关节丸及其两个新工艺按含生药2.1 g/kg连续给大鼠灌胃7d,末次药后24h断头处死大鼠并取肝脏,用钙沉降法制备肝微粒体.在体外用含氨苯砜、非那西丁、奥美拉唑、氯唑沙宗的cocktail探针代谢来考察肝微粒体CYP3A、CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1的活性.[结果]cocktail探针在体外肝微粒体系统中代谢1h后,包括壮骨关节丸及其两个新工艺的给药组剩余氯唑沙宗浓度显著高于对照组,而奥美拉唑、非那西丁、氨苯砜浓度与对照组之间差异无统计学意义.[结论]壮骨关节丸可以抑制大鼠肝脏CYP2E1活性,但对CYP1A2、CYP3A及CYP2C19无显著影响.
