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血管平滑肌细胞表型转化在高盐诱导的大鼠颈动脉重构中的作用
目的 探讨血管平滑肌细胞发生表型转化在高盐饮食诱导的Wistar大鼠颈动脉重构中的作用以及替米沙坦的干预效应.方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组(0.5％NaCl饲料饲养)、高盐模型组(4％NaCl饲料饲养)和替米沙坦组(替米沙坦+4％NaCl饲料饲养),共喂养24周.HE染色和Masson染色观察颈动脉中膜形态结构的变化.通过real-time PCR和免疫组织化学法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α (SM22α)、骨桥蛋白(OPN)的mRNA和蛋白在颈动脉的表达.结果 与比照组比较,高盐模型组大鼠的血压明显升高(P＜0.05),颈动脉中膜增厚、中膜厚度/腔径比、血管壁横截面积、中膜胶原容积分数增加,增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达明显增加(P＜0.01),α-SMA、SM22α的蛋白和mRNA表达明显降低,而OPN的蛋白和mRNA表达升高;与高盐模型组比较,替米沙坦组大鼠的血压降低,颈动脉中膜厚度和血管壁横截面积减少、中膜胶原容积分数降低、PCNA阳性表达率减少(P＜0.01),α-SMA、SM22α的蛋白及mRNA表达升高,而OPN的蛋白和mRNA表达降低.结论 4％高盐饮食可引起Wistar大鼠颈动脉重构和血压升高,其机制之一可能为血管平滑肌细胞在高盐的作用下发生了由收缩型向合成型转变的表型转化;替米沙坦能够抑制血管平滑肌细胞发生袁型转化,并改善颈动脉重构.
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碱性环境和高磷条件下大鼠胸主动脉平滑肌细胞成骨样表型转化中钙激活钾通道mRNA的表达
目的 观察碱性环境中高磷诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞中电导钙激活钾通道(KCa3.1)与大电导钙激活钾通道(KCa1.1)表达的变化,以及探究钙激活钾通道与大鼠胸主动脉平滑肌细胞表型转化之间的关系.方法 采用组织块贴壁法培养原代大鼠主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/L β-甘油磷酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型.使用HCl和NaHCO3调节培养基pH值.细胞随机分为5组:正常pH 7.4组、高磷pH 7.4组、高磷pH 7.7组、高磷pH 8.0组、TRAM-34干预组,共培养4天.用逆转录-聚合酶链反应检测各组细胞中KCa3.1、KCa1.1α、KCa1.1β、Runt相关转录因子2(Runx2)和平滑肌22α(SM22α)表达.结果 与正常pH 7.4组相比,高磷组Runx2水平明显升高,且随着pH升高而表达量增加(P＜0.05);高磷组SM22α水平明显下降,且随着pH升高而表达量减少(P＜0.05).与正常pH 7.4组相比,高磷pH 7.4组KCa3.1表达升高(P＜0.05),KCa1.1α表达下降(P＜0.05).在高磷组中,随着pH升高KCa3.1、KCa1.1α表达量增加(P＜0.05).在同一组中KCa3.1表达高于KCa1.1α(P＜0.05).KCa1.1β表达在3个高磷组间未见统计学差异(P＞0.05).与高磷pH8.0组相比,TRAM-34干预组Runx2mRNA水平明显下降(P＜0.05),SM22α mRNA水平明显上升(P＜0.05).相关分析显示,KCa3.1表达与Runx2表达呈正相关(r=0.945,P＜0.01),与SM22α表达呈负相关(r=-0.926,P＜0.01);在正常pH 7.4组、高磷pH 7.4组中KCa1.1α表达与Runx2表达呈负相关(r=-0.746,P=0.029),与SM22α表达呈正相关(r=0.971,P=0.002);在高磷pH 7.7组、高磷pH 8.0组中KCa1.1α表达与Runx2表达呈正相关(r=0.805,P=0.002),与SM22α表达呈负相关(r=-0.806,P=0.005);KCa1.1β表达与Runx2、SM22α表达不相关(r=0.414,P=0.356;r=-0.155,P=0.714).结论 碱性环境中平滑肌细胞钙激活钾通道表达参与高磷诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞的表型转化.
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24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMC表型转化的影响及其与ERK1/2通路的关系
目的 观察24-乙酰泽泻醇A(alisol A 24-acetate)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化及其表型转化过程中合成基质金属蛋白酶9(MMP-9)能力的影响,并探讨与ERK1/2的相关性.方法 以酶消化法体外培养大鼠VSMC,ox-LDL(50 mg/L)进行诱导,24-乙酰泽泻醇A(10 mg/L)进行干预,免疫细胞化学染色观察VSMC收缩表型标记蛋白SM22α的变化;RT-PCR检测VSMC MMP-9 mRNA的表达及Western blot检测VSMC MMP-9和ERK、p-ERK蛋白表达的变化.结果 在ox-LDL诱导下,VSMC收缩表型标志蛋白SM22α的表达降低,细胞向合成型转化,促进MMP-9的合成,伴随着ERK1/2磷酸化水平升高(P＜0.05);在24-乙酰泽泻醇A的干预下,VSMC收缩表型标志蛋白SM22α的表达增加,细胞向收缩表型转化,伴随着MMP-9及p-ERK的表达下降(P＜0.05).结论 24-乙酰泽泻醇A能有效抑制VSMC表型转化和MMP-9的表达,其机制可能与抑制ERK1/2信号通路有关.
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高糖对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响及其机制
目的 探讨高糖对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的影响及机制.方法 利用组织块贴壁法培养大鼠主动脉VSMC,以3～5代细胞为靶细胞,待细胞融合后用2％胎牛血清的DMEM同步化12h,再经含低糖(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖(25 mmol/L葡萄糖)及甘露醇(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)的DMEM处理24h.以改良Boyden小室观察VSMC迁移能力的变化,细胞免疫荧光分析骨架蛋白F-actin的改变,荧光定量RT-PCR分析收缩型平滑肌标志基因α-SMA和合成型平滑肌标志基因骨桥蛋白(OPN)以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因的表达情况.结果 高糖促进VSMC迁移.在高糖环境下,VSMC由收缩型向合成型转变,即α-SMA的表达量明显下降,而OPN的表达量明显升高;高糖促进MMP-2、MMP-9的基因表达(分另为低糖组的3.12倍和2.22倍),使F-actin的排列发生明显改变.结论 高糖促进VSMC迁移,其可能的机制涉及VSMC的表型转变、基质金属蛋白酶表达及F-actin排列的改变.
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载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化早期血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞
目的 探讨动脉外膜成纤维细胞表型转化与早期动脉粥样硬化病灶形成的关系.方法 选择6周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠和野生型C57BL/6小鼠,高脂喂养2、4和8周后,在各个时间点处死动物后选取升主动脉制备连续切片,用免疫组织化学方法观察不同时间血管外膜α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1的表达变化.体外培养高脂喂养2周的载脂蛋白E基因敲除小鼠和C57BL/6小鼠动脉外膜成纤维细胞,免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白的表达,通过透射电镜观察细胞超微结构,Western Blot检测α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1蛋白的表达.结果 体内实验发现载脂蛋白E基因敲除小鼠高脂喂养2周、4周后血管外膜检测到α平滑肌肌动蛋白的阳性表达,8周后呈现弱阳性,随高脂喂养时间增加,载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉外膜细胞转化生长因子β1表达增强.而C57BL/6小鼠血管外膜细胞一直未检测到α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1的阳性表达.体外实验观察到载脂蛋白E基因敲除小鼠血管外膜成纤维细胞部分表现为α平滑肌肌动蛋白阳性,肌丝明显增多,α平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1蛋白表达水平都明显高于野生型C57BL/6小鼠(P＜0.05),而C57BL/6小鼠血管外膜成纤维细胞则表现为α平滑肌肌动蛋白阴性,超微结构无明显改变.结论 动脉粥样硬化病灶形成早期血管外膜成纤维细胞表型即转化为肌成纤维细胞.
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大鼠microRNA-145慢病毒表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞表型转化的影响
目的 构建针对Rno-iR-145的慢病毒表达载体并探讨其在血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用.方法 人工合成驶有酶切位点粘端miR-145 shDNA双链模板序列,克隆于LV3 pGLV/H1/GFP+ Puro-miRNA慢病毒穿梭载体中,转染293T细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染大鼠原代VSMC,倒置荧光显微镜下观察VSMC感染后的荧光表达情况,实时荧光定量PCR检测miR-145的表达情况；实验分为空白对照组、PDGF组、PDGF+ miR-145组和细胞转染阴性慢病毒载体组(miR-NC组)；采用实时荧光定量PCR测定miR-145对VSMC增殖相关基因PCNA、c-Jun及分化相关基因SM22α mRNA表达水平的影响.结果 成功构建了microRNA-145慢病毒载体,测定病毒滴度为1×109TU/mL.倒置荧光显微镜下观察大鼠microRNA-145慢病毒表达载体感染成功,MOI值为50,感染72h时感染率高.实时荧光定量PCR结果显示PDGF可使PCNA、c-Jun表达增加,而使SM22α表达降低；miR-145可使PDGF诱导的去分化型VSMC增殖相关基因PCNA、c-Jun表达降低,分化相关基因SM22α表达增加.结论 miR-145慢病毒载体可高效感染大鼠原代VSMC.感染miR-145慢病毒后可抑制VSMC的表型转化.
关键词： microRNA-145 慢病毒表达载体 血管平滑肌细胞 表型转化 -
降钙素基因相关肽介导内皮祖细胞抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化
目的 初步探讨内皮祖细胞抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化的分子机制.方法 从人脐带血分离、培养、诱导内皮祖细胞分化并鉴定,制备早期内皮祖细胞条件培养基,酶联免疫吸附试验检测降钙素基因相关肽分泌情况.经降钙素基因相关肽抗体预处理内皮祖细胞条件培养基或阻断内皮祖细胞降钙素基因相关肽受体后,采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹观察内皮祖细胞条件培养基对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞收缩表型标志基因平滑肌α-肌动蛋白以及合成表型标志基因骨桥蛋白表达变化的作用;进一步观察内皮祖细胞条件培养基对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖信号通路(ERK、核因子κB通路)的作用.结果 早期内皮祖细胞能够分泌较高浓度的降钙素基因相关肽,并且较晚期内皮祖细胞及脐静脉内皮祖细胞高;内皮祖细胞条件培养基处理能明显抑制血管平滑肌细胞表型转化;阻断降钙素基因相关肽作用后,内皮祖细胞条件培养基对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化的抑制能力明显降低;同时内皮祖细胞条件培养基能够明显抑制血管紧张素Ⅱ诱导的ERK以及核因子κB通路的活化;阻断降钙素基因相关肽作用后,内皮祖细胞条件培养基对血管紧张素Ⅱ诱导的ERK、核因子KB信号通路活化的抑制能力明显降低.结论 降钙素基因相关肽参与介导内皮祖细胞抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞的表型转化,其机制可能与其抑制血管平滑肌细胞ERK、核因子KB信号通路活化有关.
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内皮祖细胞对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化的影响
目的 观察内皮祖细胞对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化的影响.方法 采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,EGM-2细胞培养基进行培养,诱导单个核细胞贴壁向内皮祖细胞分化.采用荧光显微镜双染色、流式细胞术鉴定内皮祖细胞,间接免疫荧光检测血管平滑肌细胞标志物平滑肌α-肌动蛋白、钙调节蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹检测早期内皮祖细胞条件培养液、晚期内皮祖细胞条件培养液以及人脐静脉内皮细胞条件培养液对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞收缩表型标志基因平滑肌α-肌动蛋白以及合成表型标志基因骨桥蛋白表达变化的影响.结果 与对照组比较,血管紧张素Ⅱ(10-6mmol/L)诱导血管平滑肌细胞增殖48 h后,平滑肌α-肌动蛋白mRNA和蛋白表达明显减少,而骨桥蛋白mRNA和蛋白表达明显增加,提示血管平滑肌细胞从收缩表型向合成表型转化;与血管紧张素Ⅱ组比较,早期内皮祖细胞条件培养液、晚期内皮祖细胞条件培养液以及人脐静脉内皮细胞条件培养液处理后均不同程度抑制血管紧张素Ⅱ诱导的平滑肌α-肌动蛋白表达减少和骨桥蛋白表达增加,其中以早期内皮祖细胞条件培养液的抑制效果明显.结论 内皮祖细胞能够抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞从收缩表型向合成表型转化.
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缝隙连接阻断剂对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响
目的 探讨缝隙连接阻断剂对大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响.方法 采用贴块法培养大鼠主动脉平滑肌细胞,细胞免疫荧光染色法检测大鼠主动脉平滑肌细胞缝隙连接蛋白43的表达,荧光漂白后恢复技术检测缝隙连接介导的细胞间通讯.四唑盐比色法测定细胞增殖能力,逆转录聚合酶链反应法检测平滑肌α-肌动蛋白的表达,并观察缝隙连接特异性阻断剂18α-甘草次酸对上述指标的影响.结果 大鼠血管平滑肌细胞体外培养3天后可表达缝隙连接蛋白43.荧光物质能够通过缝隙连接在相邻细胞间进行传递,孤立细胞荧光恢复率显著低于相邻细胞(7.30%±0.58%比80.61%±6.57%,P<0.01);而18α-甘草次酸能够抑制缝隙连接介导的细胞间通讯,18α-甘草次酸组荧光恢复率显著低于对照组(61.43%±7.62%比80.61%±6.57%, P<0.05).18α-甘草次酸可抑制血管平滑肌细胞增殖,并且可促进平滑肌α-肌动蛋白信使核糖核酸的表达.结论 缝隙连接阻断剂可促进大鼠血管平滑肌细胞由合成型向收缩型转化,提示缝隙连接在调节血管平滑肌细胞表型转化过程起一定作用.
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GATA-6基因在一氧化氮-环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶信号通路抑制血管平滑肌细胞表型转化中的作用
目的 探讨一氧化氮一环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶信号通路是否通过对GATA-6表达进行调节来抑制苯肾上腺素诱导的血管平滑肌细胞表型转化.方法 组织贴块法原代培养Wistar大鼠血管平滑肌细胞.四甲基偶氮唑盐法测定血管平滑肌细胞的增殖,逆转录聚合酶链反应以及免疫印迹法测定GATA-6和平滑肌肌球蛋白重链的表达水平.结果 一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶选择性环磷酸鸟苷类似物Sp-8-pCPT-cGMPs抑制苯肾上腺素诱导的血管平滑肌细胞增殖,但环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶拮抗荆Rp-8-pCFT-cGMPs促进血管平滑肌细胞增殖.S-亚硝基-N-乙酰青霉胺和Sp-8-pCPT-cGMPs促进GATA-6和平滑肌肌球蛋白重链mRNA和蛋白质的表达,而Rp-8-pCPT-cGMPs则降低其表达水平.结论 一氧化氮一环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶信号通路在转录水平和翻译水平促进GATA-6和平滑肌肌球蛋白重链的表达,进而参与维持血管平滑肌细胞分化表型.
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粉防己碱对内膜损伤后血管平滑肌细胞表型转化和p38表达的影响
目的研究粉防己碱防治血管内膜损伤后再狭窄与血管平滑肌细胞表型转化及其信号转导途径之间的关系.方法采用HE染色检测假损伤组、损伤组和粉防己碱组损伤后28天的血管形态学改变;分别使用免疫组织化学和免疫印迹技术检测损伤组和粉防己碱组损伤后7、14和28天增殖细胞核抗原、平滑肌α-肌动蛋白和p38表达的变化.结果假损伤组血管壁各层结构完整;损伤组新生内膜面积显著增加,管腔面积显著缩小;粉防己碱组内膜增殖较损伤组明显减轻,管腔面积增加.损伤后7天,粉防己碱组与损伤组之间血管壁平滑肌α-肌动蛋白、增殖细胞核抗原和p38表达变化无显著性差异,新生内膜增殖程度亦基本相同.粉防己碱治疗14和28天,血管壁增殖细胞核抗原和p38表达均低于损伤组;而损伤后14天平滑肌α-肌动蛋白表达略高于损伤组,损伤后28天两组间无显著性差异.结论粉防己碱可不同程度地拮抗内膜损伤后血管平滑肌细胞表型转化及p38信号转导,继而减缓新生内膜增殖.
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阿托伐他汀对肌细胞增强因子2A基因突变型血管平滑肌细胞的作用
目的 观察阿托伐他汀对肌细胞增强因子2A (MEF2A)基因突变型血管平滑肌细胞(VSMC)的作用.方法 将人主动脉血管平滑肌细胞分为3组:①WT组,转染野生型(WT) MEF2A质粒；②△21组,转染21碱基缺失突变型(△21) MEF2A质粒；③阿托伐他汀组,转染MEF2A△21质粒,并在实验前向该组细胞培养基中加入阿托伐他汀溶液至终浓度100 μmol·L-1.通过溴化噻唑基蓝四唑(MTT)法和Millicell小室观察VSMC的增殖和迁移变化,免疫印迹(Western blotting)检测VSMC内平滑肌α肌动蛋白、SM22α、骨桥蛋白、p38和ERK1/2丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路表达差异.结果 MEF2A基因△21突变可促进VSMC增殖、迁移和表型转化.而阿托伐他汀可抑制这些变化,并且明显下调磷酸化p38和ERK1/2信号通路表达.结论 阿托伐他汀通过作用于p38和ERK1/2 MAPK信号通路,以抑制MEF2A基因突变诱导的VSMC增殖、迁移和表型转化.
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细胞外基质成分对于平滑肌细胞表型及增殖的影响
目的 观察层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)等细胞外基质成分对于体外培养平滑肌细胞(VSMC)表型转化和增殖活性的影响.方法 将原代和传代培养的大鼠主动脉VSMC分别接种于不同细胞外基质蛋白包被的培养板上,作用24、48、72 h后,以RT-PCR和Westernblot法检测VSMC表型标志平滑肌肌动蛋白(SMA-α)、骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测VSMC增殖活性.结果 与对照组相比,LN包被组SMA-α基因及蛋白表达增强,OPN则表达减弱,且可维持48 h以上,于72h后,与对照组趋于一致,FN包被组OPN基因及蛋白表达增强,SMA-α表达减弱,ColⅣ包被组SMA-α、OPN与对照组比较无统计学意义,FN组增殖活性显著增强,并与作用时间呈正比,LN包被组与ColⅣ包被组对VSMC增殖活性无明显影响.结论 LN可延迟VSMC表型转化,FN则促进VSMC表型转化与增殖,细胞外基质成分对于VSMC表型转化和增殖具有重要的调节作用.
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雌激素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响
目的探讨雌激素在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化模型中对肾小管上皮细胞表型转化的影响.方法雌性SD大鼠30只,随机分为4组:对照组;生理雌激素组(单纯UUO);低雌激素组(UUO+OVX);高雌激素组(UUO+E2).21 d后处死各组大鼠,用光镜观察梗阻肾组织病理变化,并用免疫组化和RT-PCR方法检测肾组织α-SMA蛋白和mRNA的表达.结果生理雌激素组出现肾小管间质纤维化改变,其肾组织α-SMA表达上调,与对照组相比有统计学意义(P＜0.01);和生理雌激素组相比,低雌激素组纤维化病变加重,α-SMA表达明显增多(P＜0.05);而高雌激素组则病变减轻,上述表达减少(均为P＜0.05).结论雌激素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞表型转化而发挥延缓肾间质纤维化的作用.
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瑞舒伐他汀抑制血管平滑肌细胞表型转化的机制研究
目的 研究瑞舒伐他汀是否可以抑制大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化及其机制.方法 SD大鼠主动脉VSMCs原代细胞培养鉴定,取4～7代细胞用于实验.用不同浓度的瑞舒伐他汀干预VSMCs,Western blot检测各组标本中骨骼肌肌动蛋白(SM-actin)、平滑肌22 α(SM-22α)、滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、骨桥蛋白(OPN)的表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,划痕试验观察细胞迁移情况.通过免疫组织化学法(ICC)检测SM-actin的表达从而观察VSMC的形态.转染过表达KLF-4或空白对照质粒至离体培养的VSMCs中,用瑞舒伐他汀干预,并采用上述实验方法检测VSMCs表型转化情况.结果 MTT结果显示,与对照组比较,瑞舒伐他汀组VSMCs增殖能力降低,差异有统计学意义(P＜0.05).划痕试验结果显示,与对照组比较,他汀组VSMCs迁移减少,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测显示,与对照组比较,他汀组VSMCs中SM-22 α、SM-MHC、OPN表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05).ICC结果显示,与对照组VSMCs的细胞形态比较,他汀组VSMCs形态变细、变长.转染KLF-4过表达质粒后,与对照组比较,转染KLF-4过表达质粒可以增加VSMCs的增殖和迁移,差异有统计学意义(P＜0.05),逆转他汀对VSMCs表型转化有抑制作用.结论 瑞舒伐他汀通过下调KLF-4,抑制大鼠主动脉VSMCs表型转化.
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黑木耳多糖对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化的研究
目的 通过黑木耳多糖对血管平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化的影响,探讨黑木耳多糖降血脂和抗氧化以外的抗动脉粥样硬化形成作用.方法 将30只新西兰白兔随机分为正常对照组、模型组和实验组3组,分别给予普通饲料(正常组)、高胆固醇饲料(模型组)以及高胆固醇加黑木耳多糖饲料(实验组)喂养.第12周末处死动物,取主动脉行组织形态学观察及用透射电镜和免疫组织化学方法分析平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化.结果 实验组主动脉斑块面积明显小于模型组,模型组和实验组分别为(0.44±0.10)和(0.30±0.83),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);透射电镜和免疫组化结果显示:模型组动脉粥样硬化斑块的平滑肌细胞内内质网、线粒体增多,主要为合成表型;而实验组平滑肌细胞内内质网、线粒体少,主要为收缩表型,并且斑块内bFGF和PDGF的表达减少.结论 黑木耳多糖可抑制动脉粥样硬化过程中血管平滑细胞从收缩表型向合成表型的转化,从而抑制平滑肌细胞合成和分泌bFGF、PDGF和其他细胞外基质的能力,从而减少动脉粥样硬化形成中血管平滑肌细胞参与的过程.
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中枢性调控对严重烧伤大鼠结肠平滑肌细胞表型转化的影响
目的 探讨具有中枢性调控作用的颈交感神经阻滞对严重烧伤大鼠的治疗作用,明确颈交感神经阻滞对严重烧伤大鼠胃肠运动功能及结肠平滑肌细胞表型转化的影响.方法 将体重约200 g的SD大鼠随机分成正常组,烧伤对照组和CSB组,烧伤组和CSB组均制作成30％ TBSAⅢ度烧伤模型.CSB组通过颈交感神经双侧连续阻滞6d,正常组和对照组颈部连续注射生理盐水6d.通过免疫组化观察大鼠结肠平滑肌α-肌动蛋白表达情况.结果 在实验后的第6天,与正常组(76.23±3.82)％相比,烧伤对照组的炭末推进率(61.14±3.71)％显著降低,而CSB组(73.85±4.10)％无明显变化,但是CSB组炭末推进率要明显高于烧伤对照组.在烧伤对照组(26.75±3.68)中,大鼠结肠平滑肌细胞α-肌动蛋白表达水平要显著低于正常组(35.13±5.27)和CSB组(32.08±4.53),正常组和CSB组没有明显差异.结论 大鼠的胃肠运动功能在烧伤后明显受到了抑制,通过颈交感神经阻滞能够显著改善这种抑制作用.具有中枢性调控作用的颈交感神经阻滞能够提高结肠肌α-肌动蛋白表达,增强结肠平滑肌的收缩功能,这将有利于肠道运动功能的维持,防止肠道缺血,防止细菌的过度繁殖及移位,促进机体的修复.
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血管紧张素 II 通过细胞外信号调节激酶1／2通路调控过氧化氢酶的表达及促进成纤维细胞表型转化
目的：探讨细胞外信号调节激酶1/2（ ERK1/2）在高血压大鼠模型动脉外膜血管重塑中的作用。方法：利用血管紧张素II （ Ang II）微泵灌注制备高血压大鼠模型，随机分为未处理组、生理盐水灌注组和Ang II灌注组。分别检测各组大鼠尾动脉收缩压及血管形态学改变；Western blotting技术检测外膜成纤维细胞过氧化氢酶（ CAT）蛋白在未处理组、单纯Ang II、ERK1/2抑制剂PD98059和Ang II＋PD98059培养下的表达。结果：大鼠颈动脉HE染色和收缩压结果显示，与未处理组及生理盐水灌注组相比，Ang II组大鼠颈动脉中膜厚度和收缩压明显增加（P＜0.01），动脉形态结构有明显改变，并且有显著的病理性血管重塑发生。 Western blotting 检测结果显示， PD98059作用下CAT比单纯Ang II明显增高（P＜0.05），表明ERK1/2信号通路能够恢复Ang II诱导的CAT表达下调。结论：Ang II可能通过ERK1/2信号通路下调血管外膜CAT的表达，进而促进血管细胞表型转化，导致血管病理性重塑发生。
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角膜基质细胞的表型转化及其分子机制
角膜瘢痕是继发于多种角膜疾病的病理性改变,是许多角膜疾病造成视力不同程度损害甚至丧失的直接原因,也是影响角膜屈光手术效果的重要因素.对于角膜损伤愈合后的角膜瘢痕,目前临床上主要治疗方法是穿透性或者板层角膜移植术,但因为角膜供体材料缺乏和经济原因,大量的患者无法得到手术治疗而终丧失视力.
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溶血磷脂酸与血管平滑肌细胞表型转化
2003年人类基因组计划的完成开辟了人类遗传学、人类病理学等研究领域的新时代,然而近年来解析人类基因组意义过程中遇到一系列的难题使人们认识到DNA序列本身并不能解释所有关于遗传信息传递、人类疾病生物学基础等问题.随着研究的深入,人们逐渐认识到不仅蛋白编码序列,而且非编码序列、表观遗传机制等也是影响遗传信息传递、疾病发生等过程中的重要因素.
