龙葵总碱对肿瘤细胞膜钠泵及钙泵活性影响的研究

目的: 观察龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性的影响.方法:荷瘤小鼠分为治疗组(高剂量、中剂量、低剂量)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组),分别测定各组肿瘤细胞膜的Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性.结果:龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性均有明显的抑制作用,并且其抑制作用呈量效正相关.结论:龙葵总碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一.

青蒿总香豆素抗热应激作用及其机理的研究

目的:研究青蒿抗热应激作用及其机理.方法:利用高温高湿环境造成家兔热应激模型,观察青蒿总香豆素对家兔肛温上升及血液、肺组织磷脂酶A2活性和循环内皮细胞数目的变化,并测定其对脑、心脏、肾组织钠泵活性及小鼠抗脑缺氧能力的影响.结果:青蒿总香豆素可明显降低热应激家兔体温上升速度,并伴随血清、肺组织磷脂酶A2活性降低,循环内皮细胞减少,显著抑制脑、心、肾组织钠泵活性,延长断头小鼠张口喘气时间几近1倍.结论:香豆素部位可能是青蒿祛暑功效的活性成分群之一.

青蒿总香豆素解热作用及其机理初步研究

目的:研究青蒿总香豆素解热(降温)作用并探讨其作用机理.方法:从黄花蒿中提取总香豆素,利用内生致热原性家兔发热模型,观察青蒿总香豆素对发热家兔体温的影响并测定脑脊液、血清中前列腺素E2(PGE2)、环单磷酸腺苷(cAMP)水平以及肝脏、腓肠肌钠泵活性.结果:青蒿总香豆素可以显著降低正常及发热家兔体温,抑制肝脏、腓肠肌组织钠泵活性,降低发热家兔血液及脑脊液PGE2水平,对血液及脑脊液cAMP水平变化无明显影响.结论:香豆素成分可能是青蒿解热降温的有效部位,其作用机制与抑制钠泵活性及降低中枢PGE2水平有关.

木犀草素对缺血再灌损伤神经元的保护作用及机制研究

目的:探讨黄酮类化合物木犀草素对缺血/再灌损伤神经元的作用以及可能的作用机制.方法:原代培养的海马神经元经2 h的氧糖剥夺和24 h的再灌处理,分别检测细胞活性,乳酸脱氢酶漏出率和细胞凋亡率,采用Pulsinelli四动脉阻断法对SD大鼠施行10 min全脑缺血和24 h再灌,检测钠泵活性.结果:经氧糖剥夺/再灌后,海马神经元的活性比未经氧糖剥夺/再灌组显著地降低,乳酸脱氢酶漏出率和细胞凋亡率均显著地增高.在氧糖剥夺期间给予的木犀草素,在10～100μmol·L~(-1)能呈剂量依赖地逆转这些改变.进一步实验发现木犀草素能够显著地增强大鼠全脑缺血/再灌后的钠泵活性.在神经元氧糖剥夺/再灌模型上,利用钠泵抑制剂哇巴因能阻断木犀草素的神经元保护作用.结论:木犀草素能减轻缺血/再灌所致的神经元损伤,其保护机制可能与增强了神经元细胞膜上的钠泵活性有关.

低浓度哇巴因对白血病细胞生长的影响

本研究目的在于通过研究低浓度哇巴因对不同白血病细胞株生长的影响,探讨哇巴因用于白血病临床治疗的可行性.采用MTT法和流式细胞术检测低浓度(≤10 nmol/L)哇巴因对白血病细胞株生长的作用及细胞周期的影响,Western blot检测各细胞株钠泵α1亚单位在蛋白水平上的表达及哇巴因作用下的变化情况.结果表明:低浓度哇巴因可抑制巨核系白血病M07e、Meg-01细胞株的增殖,且呈浓度依赖性;10 nmol/L哇巴因作用24小时,这类细胞株的细胞周期被阻滞于G1期;其钠泵α1亚单位基础表达较低,经哇巴因干预后表达水平进一步降低;在相同浓度哇巴因作用下,淋巴系白血病B95、Jhhan细胞株出现增殖,S期及G2/M期细胞比率增高,其钠泵α1亚单位的表达也增高.结论:低浓度哇巴因可抑制巨核系白血病细胞株M07e、Meg-01的生长,这可能与该细胞株钠泵α1亚单位低表达及哇巴因对其的负调控有关.

急性肾炎患儿血清抗钠泵α1亚基抗体的检测

目的：检测急性肾小管肾炎患者血清抗钠泵α1亚基抗体的水平，并评价其对钠泵功能的影响。方法急性肾小球肾炎患儿195例，并对其中33例建立随访，分别于疾病期间及疾病痊愈后3个月和6个月检测血清抗钠泵α1亚基抗体的水平。同时使用受试者血清作用 HEK -293A 细胞膜蛋白后检测钠泵活性。结果急性肾小球肾炎患者血清抗钠泵α1亚基抗体水平较对照组显著升高（ P ﹤0.05），女性显著高于男性（ P ﹤0.05），且主要表现为 IgM 类抗体升高。3个月后血清 IgM 抗钠泵α1亚基抗体水平较患病时显著下降（ P ﹤0.05），但 IgG 抗钠泵α1亚基抗体水平较患病时显著升高（ P ﹤0.05）。6个月后 IgM 抗体平均降至表面健康对照组水平，但 IgG 类抗体水平仍高于对照组（ P ﹤0.05）。细胞实验结果表明，IgG 类抗钠泵α1亚基能显著抑制人肾脏细胞系 HEK -293A 细胞的钠泵活性（ P ﹤0.05），但 IgM 类抗体无上述作用（ P ﹥0.05）。结论急性肾小球肾炎患者血清中可存在钠泵α1亚基自身抗体。IgG 类钠泵α1亚基自身抗体能抑制钠泵的活性，这可能是导致急性肾小球肾炎慢性长期肾损伤的机制之一。

一种新的抗高血压药物-钠泵阻断剂

Na+,K+-ATPase(钠泵)是一种人体所必需的膜蛋白.它维持着哺乳动物细胞内外Na+,K+离子的转运,使钠、钾离子维持着一定的电化学梯度.这个离子梯度是机体基本功能活动所必需的,比如营养物质由细胞外向细胞内的转运,细胞内外渗透压的平衡及细胞容量的调节,以及维持细胞膜静息电位等.早,人们只知道洋地黄是Na+,K+-ATPase的唯一抑制剂.近年来,很多研究均发现动物和人体内存在多种类似强心甙的内源性钠泵抑制物(sodoium pump inhibitors,SPIs),而且发现它们可能调节钠泵的活性,维持体内的电解质平衡[1,2].新近发现一种新的物质,它可阻止哇巴因与Na+,K+-ATPase的结合,从而使MHS鼠的血压下降.1 降压治疗的现状动脉性高血压是多种器官并发症的独立危险因素.临床试验已证实,控制血压可改善高血压引起的中风、充血性心力衰竭及左室肥厚,但是试验结果同时也证实了高血压的治疗并不能预防所有与高血压相关的心血管疾病的发生,甚至,血压控制良好的患者心脏及肾脏并发症的发病率亦明显高于非高血压人群.尽管目前的抗高血压治疗已取得了很大的进展,但是在完全降低由高血压所致的危险性方面仍显不足,而且目前的方法还远不是佳的治疗方法.

“一肾一夹”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位的基因表达

目的 探讨“一肾一夹(1k1c)”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位各异构体基 因表达的改变，为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 分别应用分子生物学 RT-PCR及免疫组化技术，探讨1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α1、α2及α3亚单位mR NA及蛋白 水平基因表达的改变。结果 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变： 无论在mRNA或蛋白水平，α1亚单位表达增强，而α2与α3亚单位表达无改变。结论 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变，这种 改变可能参与了该模型的血压升高 机制。

钠泵α1亚单位基因突变与哈萨克族人原发性高血压的关系

哇巴因与地高辛对大鼠肾上腺钠泵α亚单位基因表达影响的对比研究

目的对比研究哇巴因与地高辛对大鼠肾上腺钠泵(Na+,K+-ATP酶)α亚单位基因表达的影响,探讨内源性哇巴因(EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制.方法长期给予大鼠注射小剂量哇巴因(20 μg*kg-1*d-1)与地高辛(32 μg*kg-1*d-1),动态观察大鼠血压变化;分别应用分子生物学RT-PCR及免疫组织化学技术,探讨各组大鼠肾上腺钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变.结果哇巴因与地高辛对大鼠血压的影响存在着明显差别,长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高,而地高辛对大鼠血压无影响.哇巴因与地高辛对肾上腺钠泵α亚单位的影响存在明显差异;哇巴因使α1亚单位表达减弱,α3亚单位增强,而α2亚单位在蛋白水平表达减弱,mRNA水平增强;地高辛使α3亚单位表达增强,α2亚单位无改变,α1亚单位在蛋白水平表达减弱,mRNA水平增强.结论哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变,为进一步揭示EO生理与病理作用以及洋地黄类药物药理与毒理作用的分子机制提供了理论及实验依据.

水通道蛋白5、钠泵α1亚单位在慢性阻塞性肺疾病患者气道表达的改变及临床意义

目的:通过测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中水通道蛋白5(AQP)、钠泵α1亚单位蛋白的表达及与肺功能变化的关系,明确AQP5、钠泵α1亚单位在COPD发生发展中的作用.方法:选取肺叶切除术患者肺组织标本52例,其中,对照组25例,COPD组27例;免疫组化法检测AQP5、钠泵α1亚单位蛋白表达.结果:与对照组相比,AQP5蛋白在COPD组表达降低(P＜0.05),在COPD中度组较轻度组表达亦降低,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).AQP5表达改变与FEV1/FVC、FEV1预计值呈正相关关系(Rs=0.717,P＜0.05;Rs=0.500,P＜0.01).钠泵α1亚单位在COPD组患者的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:AQP5参与了COPD患者气道黏液分泌的病理过程并与COPD气流受限有关,钠泵α1亚单位在COPD的发病机制中可能起辅助作用.

钠泵与心力衰竭发展的相关机制及药物研究

人类老龄化,缺血性心肌病生存率的改善,心源性突发性死亡的积极治疗虽然挽救了患者的生命却使其心功能发生了障碍,这些都增加了慢性充血性心力衰竭(CHF)疾病的快速流行.近些年来尽管在其治疗方浇面有了很大的提高,但对CHF的综合治疗还不够完善.

钠泵功能改变及内质网应激在大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的作用

目的:探讨钠泵活性改变及内质网应激(ERS)在大鼠离体心脏再灌损伤中的作用及其机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为6组(n=10):正常对照组(NC组)、缺血/再灌损伤组(I/R组)、哇巴因-缺血/再灌损伤组(OUA-I/R组)、地高辛抗血清-缺血/再灌损伤组(Anti-Dig-I/R组)、Src抑制剂PP2-哇巴因-缺血/再灌损伤组(PP2-OUA-I/R组)、PLC抑制剂U73122-哇巴因-缺血/再灌损伤组(U73122-OUA-I/R组).建立全心缺血30 min,再灌注120min的Langendorff大鼠离体心脏缺血再灌损伤模型.检测各组相同时间点心功能恢复率、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性,心肌中Na+-K+-ATP酶活性和钙离子水平.流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,Westem blot检测心肌钠泵α1亚基、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及凋亡蛋白Bcl-2/Bax的表达.结果:与I/R组相比,给予哇巴因预处理可使心功能恢复率明显下降,心肌酶漏出增多,Na+-K+-ATP酶的活性降低,心肌细胞内钙水平升高,细胞凋亡率增多,心肌钠泵α1亚基和Bcl-2表达降低,GRP78、CHOP和Bax表达升高;而Anti-Dig-I/R组与I/R组相比各指标均明显改善;给予Src抑制剂PP2或PLC抑制剂U73122后,哇巴因对心肌的损伤作用被部分阻断,表现为心功能恢复率升高,心肌酶漏出减少,Na+-K+-ATP酶的活性明显恢复,Ca2+水平下降,细胞凋亡率下降,心肌钠泵α1亚基和Bcl-2表达增多,GRP78和Bax表达减少.结论:钠泵功能改变和内质网应激共同参与大鼠离体心脏缺血再灌损伤,钠泵通路(Src和PLC)介导内质网应激是引起大鼠离体心脏缺血再灌损伤细胞凋亡机制之一.

大鼠脑穹窿下器官微量注射AngⅡ对肾近球小管Na+,K+-ATPase功能的影响

目的:探讨大鼠穹窿下器官(SFO)对外周肾小管钠泵的调节作用及机制.方法:在SFO分别微量注射血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),其中氯沙坦(losartan)组先用AngⅡ的1型受体(AT1)拮抗剂losartan预处理后再注射AngⅡ;放免法检测血清中内源性洋地黄样物质(EDLS)的水平和血浆AngⅡ水平;微分离大鼠肾脏单根近球小管,液闪法测定小管管周膜钠泵活性.结果:①SFO注射AngⅡ后,血清中EDLS在15 min开始升高,约60 min达高峰;②肾近球小管钠泵活性在SFO注射AngⅡ后30min和60min都显著下降;③用losartan预处理SFO后,再注射AngⅡ,血清EDLS水平升高和小管钠泵活性下降的效应被显著削弱.结论:大鼠SFO注射AngⅡ后,肾近球小管钠泵活性将下降,原因可能与SFO注射AngⅡ后,激动SFO的AT1受体,直接或间接升高血清EDLS水平有关.

肺泡上皮细胞钠泵清除急性肺损伤时肺泡内液体的研究进展

急性肺损伤时肺实质细胞受损,通透性增加,可产生严重的肺水肿,导致低氧血症.研究证实,肺水肿时伴肺泡上皮细胞钠泵功能降低或增强,增强钠泵功能能增加肺水清除,改善氧合.因此充分认识肺泡上皮细胞钠泵主动清除肺泡内液体的作用,对临床肺水肿治疗有重要意义.

兔内毒素性急性肺损伤时总肺水含量和肺组织Na+-K+-ATase活性的变化

在各种病因诱发急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的病生理过程中,受损肺泡及其基底膜的水肿增厚是直接导致氧和二氧化碳气体交换障碍的基础.钠泵--Na+-K+-ATPase活性可能会在其中有变化.

钠泵在血液透析低血压中的应用及护理

透析低血压是血液透析中常见的并发症之一,发生率可达20%～30%[1].透析低血压的一个重要原因是过多脱水导致的血容量显著下降,血容量下降超过15%时极易发生低血压,而与总体液量下降无关[2].2002年2月-2004年12月,本研究对21例在我科血液净化中心维持性血液透析常发生透析低血压的患者,在透析时使用钠泵400次,以有效地预防低血压的发生,透析1个月后检查透析前后血生化指标,显示血钠浓度变化不明显,现报道如下.

论"脾肾两虚,痰瘀内阻"病机在衰老中的病理意义及其相关性

随着年龄增长机体在形态结构、生理功能方面出现的一系列缓慢的,退行性变化,这些变化导致机体适应力、储备力日趋下降,终发展形成衰老[1].

蒺藜皂苷对热损伤小鼠睾丸钠泵表达的影响

目的 探讨蒺藜皂苷对热损伤小鼠睾丸钠泵表达的影响.方法 雄性小鼠30只,随机分为对照组、模型组和给药组,每组10只.建立睾丸热损伤模型,蒺藜皂苷灌胃(300 mg/kg,1t/d,8w).一半小鼠取附睾精子进行精子参数检测;一半小鼠心脏灌流固定,进行免疫组织化学染色检测睾丸组织钠泵的表达.结果 模型组与对照组比较,精子密度、活力、活率均显著下降,畸形率明显升高;生精细胞数目减少、排列紊乱;睾丸组织钠泵表达降低.给药组与模型组比较,精子密度、活力、活率升高,畸形率下降;生精细胞数目增多、排列紧密;睾丸组织钠泵表达升高.结论 蒺藜皂苷能够通过调节钠泵表达对小鼠热损伤生殖功能的保护作用.

硝普钠泵入抢救急性左心功能不全26例分析

急性左心功能不全是心内科重危症，若不及时处理，可危及生命。我院1998年1月至2000年12月，使用硝普钠泵入抢救急性左心功能不全26例，报告如下。