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蒺藜皂苷在心脑血管疾病中的研究进展
蒺藜皂苷是中药蒺藜中所有的一类主要化学成分,本文就蒺藜皂苷对心肌缺血、脑缺血等心脑血管疾病的药理作用进行了综述.
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蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL-7402生长抑制和诱导凋亡作用的研究
目的:探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用及诱导凋亡作用.方法:应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用,采用形态学观察以及流式细胞术(FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡的效应,采用流式细胞术检测BEL-7402细胞Bcl-2蛋白表达.结果:①STT能够剂量依赖地抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖;②细胞显现典型的凋亡形态学改变,FCM出现凋亡峰;③STT能降低BEL-7402细胞的Bcl-2蛋白表达.结论:STT在体外能抑制BEL-7402细胞的增殖并能诱导细胞凋亡,其诱导凋亡作用的途径之一是下调Bcl-2蛋白表达.
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蒺藜皂苷对肾癌细胞的实验影响
目的:探讨蒺藜皂苷(简称STT)对体外培养的肾癌细胞(786-O)的影响及其抑癌机制.方法:应用MTT法、Wright染色及AO荧光染色法和流式细胞术(FCM)及结合免疫荧光分别测定STT对细胞的生长抑制作用,细胞凋亡的形态变化,细胞周期及Bcl-2蛋白表达的影响.结果:MTT法显示STT可对786-O产生明显的细胞毒作用;Wright染色及吖啶橙荧光染色法发现STT可诱导786-O在体外产生凋亡;STT可使786-O的S期细胞比例增多;STT能够降低786-O细胞的抗凋亡蛋白Bcl-2及细胞周期蛋白DI的表达.结论:STT对786-O细胞有明显的体外生长抑制作用,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白表达而诱导细胞凋亡.
关键词： 蒺藜皂苷 癌细胞(786-O) 细胞凋亡 -
蒺藜皂苷对体外培养视网膜神经节细胞的保护作用
目的 观察不同浓度蒺藜皂苷(CSTT)对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)存活率的影响.方法 将出生后1～3天的SD乳鼠视网膜细胞,应用不同浓度的蒺藜皂苷分别与细胞共培养24h后,用MTT法检测492nm吸光度A值,并计算相应的存活率.结果 10-7g/L浓度的GSTT组RGCs的存活率为112.86%,(设对照组存活率为100%),10-7g/L浓度的GSTI组RGCs的存活率高于对照组(P<0.05).结论 GSTT能增加体外培养的大鼠视网膜神经节细胞的存活率,具有促进混合培养RGCs生长的作用.
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蒺藜皂苷激活PKCε抗氧化应激诱导心肌细胞凋亡的机制
观察蒺藜皂苷(gross saponins of Tribulus terrestris,GSTT)在过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导新生大鼠心肌细胞凋亡过程中对蛋白激酶C Eplison亚型(protein kinase C Eplison,PKCε)及凋亡相关蛋白的影响,探讨蒺藜皂苷抗心肌细胞凋亡的作用机制.新生大鼠心肌细胞原代培养,H2O2建立心肌细胞凋亡模型.流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting法检测phospho-PKCe及Bcl-2、Bax的蛋白含量:免疫细胞化学技术检测cleaved caspase-3蛋白含量.与模型组比较,GSTT(100 mg·L-1)预处理可明显降低H2O2诱导的心肌细胞凋亡率P<0.01),并增加phospho-PKCε及Bcl-2的蛋白含量P<0.01),降低Bax及cleaved caspase-3的蛋白含量(P<0.01);PKC抑制剂白屈菜红碱(chelerythrine,Che)可部分阻断蒺藜皂苷抗心肌细胞凋亡作用,与蒺藜皂苷组比较具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).GSTT抗心肌细胞凋亡的作用机制可能与激活PKCε后抑制线粒体依赖的凋亡有关.
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蒺藜皂苷对阿霉素损伤心肌细胞的保护作用
观察蒺藜皂苷(gross saponins of Tribulus terrestris,GSTT)对阿霉素(adriamycin,ADR)诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.分离出生1～3 d大鼠心肌细胞,培养72 h后随机分为正常对照组、ADR(终浓度为2.0 mg·L~(-1))模型组和GSTT(100、30及10 mg·L~(-1))组,继续培养24 h后,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养基中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)释放量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及应用Western blotting检测GSTT对凋亡相关蛋白caspase-3的作用.结果表明,与正常对照组比较,ADR模型组心肌细胞存活数明显减少,心肌细胞培养液中CK、LDH、AST释放量增加(P<0.01,P<0.001),同时SOD活力下降(P<0.01)而MDA、NO含量升高(P<0.001);与ADR模型组比较,GSTT(100和30 mg·L~(-1))组存活心肌细胞数增多(P<0.05,P<0.001),心肌细胞培养液中CK、LDH、AST含量明显降低,SOD活力增加、MDA和NO含量降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001).流式细胞仪检测GSTT(100和30 mg·L~(-1))组心肌细胞凋亡数明显减少(P<0.05,P<0.01),caspase-3含量下降(P<0.05,P<0.001).GSTT对ADR损伤的心肌细胞具有保护作用,可减轻心肌细胞损伤,抑制心肌细胞凋亡,其机制与抗自由基作用有关.
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蒺藜皂苷对谷氨酸致阿尔茨海默病模型小鼠的作用
目的:研究蒺藜皂苷对阿尔茨海默病模型小鼠的作用.方法:采用谷氨酸致阿尔茨海默病模型小鼠为实验对象,以其学习记忆能力、脑内单胺类递质含量、背海马和齿状回内β淀粉样蛋白前体(β-APP)阳性神经元的数量为指标,考察蒺藜皂苷抗阿尔茨海默病的作用.结果:蒺藜皂苷(50,100 mg·kg-1,ig)能明显对抗阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的下降,增加脑内单胺类递质的含量,抑制背海马和齿状回内β-APP阳性神经元的生成.结论:蒺藜皂苷对谷氨酸所致的阿尔茨海默病有明显的改善作用.
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蒺藜皂苷抗衰老作用的实验研究
目的观察蒺藜皂苷对衰老动物学习记忆功能及脑衰老生化指标的影响.方法采用D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型.结果蒺藜皂苷可明显提高衰老小鼠学习记忆功能,降低脑组织中老化代谢产物与其相关酶(LPO,LF,MAO-B)的活性,并能促进免疫器官的增长.结论提示了蒺藜皂苷具有抗衰老的作用.
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蒺藜皂苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织PPARγ和NF-κB炎症信号途径表达的影响
目的 探讨蒺藜皂苷对局灶性脑缺血大鼠脑组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARy)和核因子κB (NF-κB)炎症信号途径表达的影响,并进一步探讨其潜在的机制.方法 将40只SD大鼠依据随机数字表法分为假手术组、模型组和蒺藜皂苷低剂量组和高剂量组,每组10只,采用线栓法制备大鼠脑缺血/再灌注损伤模型.脑缺血/再灌注24h后检测大鼠神经功能损伤评分;酶联免疫吸附测定法检测大鼠脑组织NF-κB、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)1β的水平;免疫印迹法检测大鼠脑组织PPARγ蛋白表达水平.结果 与模型组比较,蒺藜皂苷治疗低剂量组和高剂量组大鼠神经功能损伤明显减轻[(1.8±0.7)分、(1.3±0.5)分比(2.3±0.7)分],差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组NF-κB、TNF-α、IL-1β[(18.4±1.5) μg/mg、(916±128) pg/mg、(169±16) pg/mg]比较,蒺藜皂苷低剂量[(16.4±1.3) μg/mg、(257±110) pg/mg、(148±16) pg/mg]和高剂量组[(15.0±1.2) μg/mg、(665±72) pg/mg、(139±14) pg/mg]缺血脑组织NF-κB、TNF-α和IL-1β水平明显降低(P＜0.05).结论 蒺藜皂苷可能通过激活PPARγ的表达,进而抑制NF-κB炎症信号途径,抑制炎性因子的表达,降低炎症反应,从而减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤而发挥其神经保护作用.
关键词： 脑缺血/再灌注 蒺藜皂苷 炎症 核因子κB 过氧化物酶体增殖物激活受体γ -
蒺藜皂苷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
目的 探讨蒺藜皂苷(GSTT)后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 56只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、缺血后处理组、阳性药尼可地尔1.0 mg/kg组、GSTT (100,30,10 mg/kg)组.采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支的方法,制备心肌缺血再灌注损伤模型,分离血清,采用分光光度法测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,EIASA法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6 (11-6)的量.光学显微镜下观察受损心肌病理组织学改变,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况.结果 与模型组比较,GSTT 100,30 mg/kg组I,DH,MDA,TNF-α和IL-6的量明显降低、SOD的活性明显升高(P<0.01),凋亡细胞数量明显减少(P<0.01),心肌组织形态明显改善.结论 再灌注同时ipGSTT进行药物后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,能减少自由基生成,抑制心肌细胞凋亡.
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蒺藜皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用
缺血性脑血管疾病是心脑血管疾病中的常见病、多发病,是危害人类健康的三大疾病之一,严重影响了人们的正常生活和身体健康.蒺藜皂苷(gross saponins from Tribulus terrestris L.,GSTT)是从蒺藜地上部分中提取,临床主要用于心脑血管疾病的治疗.本课题组研究[1,2]表明,GSTT可减轻心肌缺血损伤,抑制心肌细胞凋亡,减轻脑缺血神经功能缺损,改善生化指标.本实验在此基础上进一步研究GSTT对脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的保护作用并探讨其可能的机制.
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蒺藜皂苷对H2O2诱导PC12细胞凋亡保护作用及其机制研究
目的 探讨蒺藜皂苷(gross saponin of nibulus terrestris,GSTT)对H2O2诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC12)凋亡的保护作用及其机制.方法 实验分为对照组、模型组及蒺藜皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组.用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax.结果 与模型组比较蒺藜皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P＜0.001),凋亡比率下降(P＜0.01),线粒体膜电位回升(P＜0.01),Bcl-2表达增加(P＜0.05),而Bax的表达降低(P＜0.05).结论 蒺藜皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关.
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蒺藜皂苷预适应对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响
目的 建立Langendorff离体心脏灌流系统,制备缺血再灌注实验模型,观察蒺藜皂苷(gross saponins from Tribulus terrestris,GSTT)预适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤心功能的影响.方法 56只大鼠随机分为7组.正常对照组、缺血/再灌组(I/R)、心肌缺血预适应组(IPC)、阳性药腺苷组、GSTT 200、100、50 mg/L组,缺血30 min,再灌40 min,记录给药前、再灌后5、10、15、20、30 min心率(HR)、左室收缩压(LVSP)等心功能指标,并同步记录冠脉流量(CF),同时测定心肌组织ATP水平.结果 I/R组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP 明显下降(P<0.001);IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP均明显升高(P<0.05、0.01);I/R组再灌注后各时间点(5、10、15、20,30 min)CF明显减少(P<0.001);与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后各时间点(5、10、15、20、30 min)CF均增加(P<0.05、0.01、0.001);I/R组Na+-K+ATP酶活力明显降低(P<0.001).与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/I,预适应组和腺苷预适应组Na+-K+ATP酶活力明显升高(P<0.05、0.01).I/R组的Ca2+-Mg2+ATP酶活力有增高趋势,与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组Ca2+-Mg2+ATP酶活力明显升高(P<0.05、0.01).结论 GSTT可抑制心功能低下,舒张冠状动脉,增加冠脉血流量而改善心肌的供血、供氧;GSTT还可增加心肌组织ATP酶活性,通过抑制Na+/Ca2+交换,使得细胞摄取的Ca2+减少.
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蒺藜皂苷对缺血心肌细胞内核转录因子-κB的作用
目的 研究蒺藜皂苷对培养大鼠乳鼠心肌细胞H2O2损伤时心肌细胞内蛋白激酶C(PKCε)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及核转录因子-κB(NF-κB)水平的影响.方法 利用培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,采用H2O2建立心肌细胞损伤模型,应用PKCε抑制剂Chelerythrine干预后,观察细胞形态学改变,应用流式细胞仪定性检测细胞凋亡率,Western blotting定量检测各组PKCε、ERK1/2及NF-κB水平.结果 蒺藜皂苷明显保护受损心肌细胞,降低细胞凋亡率,并且能够升高PKCε、ERK1/2及NF-κB水平;应用Chelerythrine可部分阻断蒺藜皂苷的上述作用.结论 蒺藜皂苷对H2O2损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其保护作用机制与PKCε、ERK1/2及NF-κB激活有关.
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蒺藜皂苷、高压氧对急性脑梗死患者近远期疗效及其再发的影响
目的 通过观察蒺藜皂苷(GSTT)和/或高压氧治疗对急性脑梗死(ACI)不同治疗时期神经功能缺损程度评分(NDS)的改善,探讨其对脑梗死近远期疗效及再发的影响;通过对各影响因素的分析讨论影响脑梗死再发的独立因素.方法 96例ACI 患者随机分成4组,对照组行常规治疗;高压氧(HBOT)组除常规治疗外在发病4 d～40 d行高压氧治疗;GSTT组除常规治疗外在发病13 d～40 d给予GSTT; HG组除常规治疗外在发病19 d～41 d内服用GSTT,并在发病8 d～40 d内行高压氧治疗.观察治疗15 d、20 d和30 d时及治疗半年、1年、2年时NDS水平,并对比各组2年内脑梗死再发百分比,分析影响其再发的独立因素.结果 治疗30 d仅HBOT组NDS较治疗前降低(P<0.01),治疗半年、1年、2年各组NDS较治疗前均降低(P<0.05 或P<0.01);治疗30 d和半年,HBOT组NDS较对照组、GSTT组和HG组NDS降低(P<0.05或P<0.01);治疗1年和2年,HBOT组、GSTT组和HG组NDS较对照组降低(P<0.05或P<0.01).脑梗死总再发率为12.5%(12/96),其中各组再发率分别为对照组30.0%,HBOT组16.0%,GSTT组8.3%,HG组为0,各组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBOT可促进脑梗死患者神经功能恢复的速度;HBOT和/或GSTT可明显提高脑梗死患者远期疗效; GSTT有预防脑梗死再发的作用,并且在此方面与HBOT有显著的协同作用.
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蒺藜皂苷对衰老小鼠睾丸生精功能影响
目的 探讨蒺藜皂苷对D-半乳糖所致衰老小鼠睾丸生精功能影响,为临床延缓衰老研究奠定实验基础.方法 健康昆明种小鼠40只,随机分为对照组、衰老模型组、蒺藜皂苷组和维生素E组,每组10只.经颈背部皮下注射5％D-半乳糖,连续6周,建立小鼠亚急性衰老模型.蒺藜皂苷和维生素E组分别灌胃给予蒺藜皂苷和维生素E,对照组和衰老模型组给予等体积纯净水.检测全血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力；附睾精子密度、精子活率和活精子百分率.结果 蒺藜皂苷组小鼠全血CAT及GSH-Px活力分别为(24.28±1.53)U/mgHb和(205.65±10.94)酶活力单位,明显高于衰老模型组小鼠(P＜0.01),蒺藜皂苷组小鼠附睾精子密度、精子活率和活精子百分率分别为(6.34±0.24)×105个/mL、(73.28±1.60)％和(76.61±2.19)％,与衰老模型组比较,明显提高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 蒺藜皂苷可通过抗氧化作用改善衰老小鼠生精功能.
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蒺藜皂苷对抗D-半乳糖致小鼠皮肤衰老的影响
目的 探讨蒺藜皂苷对D-半乳糖所致小鼠皮肤衰老的影响.方法 健康昆明种小鼠40只,随机分为正常对照组、衰老模型组、蒺藜皂苷组和维生素E组,每组10只.颈背部皮下注射5％D-半乳糖连续6w,建立小鼠亚急性衰老模型.给药组同时灌胃给予蒺藜皂苷和维生素E,正常对照组和衰老模型组给予等体积纯净水.检测全血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力；检测皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)含量.结果 蒺藜皂苷可提高全血CAT及GSH-Px活力,提高皮肤SOD活力,降低皮肤MDA含量,提高Hyp含量.结论 蒺藜皂苷具有抗D-半乳糖所致小鼠皮肤衰老的作用.
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蒺藜皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响
目的 探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响及机制.方法 选择对数生长的卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组,实验组加STr.采用MTr法检测细胞活性,流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3肿瘤细胞凋亡率及细胞周期变化；应用免疫组化检测SKOV3 Bcl-2和Bax蛋白表达变化.结果 与对照组相比,实验组对卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用(P＜0.05).细胞周期分析显示,实验组使卵巢癌细胞的S期细胞比例减小,G1期细胞比例增大(P＜0.05).STr能够降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),增加Bax蛋白表达(P＜0.01).结论 STT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,其机制可能与细胞周期发生停滞有关,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白和增加Bax蛋白的表达而诱导细胞凋亡.
关键词： 蒺藜皂苷 卵巢癌细胞SKOV3 细胞增殖 -
蒺藜皂苷对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤形态结构的影响
目的 探讨蒺藜皂苷对D-半乳糖所致衰老小鼠皮肤形态结构的影响.方法 健康昆明种小鼠40只,随机分为正常对照组、衰老模型组、蒺藜皂苷组和维生素E组,每组10只.经颈背部皮下注射5％D-半乳糖连续6w,建立小鼠亚急性衰老模型.给药组同时灌胃给予蒺藜皂苷和维生素E,正常对照组和衰老模型组给予等体积纯净水.取材,光镜标本制备,染色,观察皮肤形态结构；TUNEL法检测皮肤组织凋亡细胞.结果 与衰老模型组相比,蒺藜皂苷组皮肤真皮层显著增厚,纤维成分增多,排列较紧密,皮肤形态学结构较接近正常对照组,皮肤组织凋亡细胞减少.结论 蒺藜皂苷可明显改善老化皮肤的形态结构,对皮肤具有一定的抗衰老作用.
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蒺藜皂苷和多非利特对心律失常作用靶点的影响
目的:探讨蒺藜皂苷(GSTT)与多非利特(Dofetilide)抗心律失常作用及其机制.方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备缺血性心律失常模型观察两药的抗心律失常作用;分离豚鼠心肌细胞并使用膜片钳记录Ikr和Ik1电流,探讨两药抗心律失常机制.结果:与模型组比较,10 mg·kg-1多非利特组明显减少心肌缺血诱发大鼠心律失常次数,差异具有显著性(P＜0.01),而20 mg·kg-1和40 mg·kg-1GSTT组对大鼠心肌缺血引起的心律失常次数虽有减少趋势,但无统计学意义(P＞0.05);50 mg·L-1和100 mg·L-1GSTT对Ikr、Ik1电流无明显影响,而5μmol·L-1多非利特可明显抑制Ikr和Ik1电流,与对照组比较差异具有显著性(P＜0.01).结论:多非利特对大鼠冠脉结扎诱发的缺血性心律失常有明显疗效,多非利特抗心律失常作用机制为抑制Ikr和Ik1;而GSTT对上述靶点无明显影响,未见GSTT明显抗心律失常作用.
