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雄黄解毒散中雄黄成分分析
目的 建立雄黄解毒散中雄黄成分的分析方法.方法 采用古蔡氏法对雄黄中毒性成分三氧化二砷进行半定量分析;采用硫酸钾、硫酸铵和硫酸对雄黄解毒散进行消化处理,采用滴定法对制剂中雄黄的主要成分二硫化二砷进行定量分析.结果 每克雄黄解毒散中三氧化二砷含量不高于5 mg;每克雄黄解毒散中二硫化二砷平均含量为141.5 mg.结论 本法简便可行,可有效地控制制剂质量.
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不同产地雄黄及其炮制品中二硫化二砷和可溶性砷含量比较
目的:比较研究不同产地雄黄及其炮制品中主成分As2S2及可溶性砷盐As2O3的含量差异.方法:采用2010年版《中国药典》雄黄项下的滴定法测定不同产地雄黄及其炮制品中As2S2的含量,采用AFS-230E型原子荧光光度计检测上述样品中可溶性砷盐As2O3含量.结果:不同产地的雄黄及其炮制品中As2S2,As2O3含量存在显著差异.雄黄炮制后,炮制品中As2S2含量均提高,As2O3含量均明显降低.除吉林和江苏2个产地的的雄黄及其炮制品中As2S2含量＜90.0％,其余样品均符合药典规定；且雄黄炮制品中As2O3含量均能控制在1.7mg·g-1以下.结论:研究结果可为指导雄黄临床合理用药提供参考依据.
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复方黄连膏中雄黄的质量控制
目的 控制复方黄连膏中雄黄的质量.方法 对雄黄中毒性成分三氧化二砷采用古蔡氏法进行限度检查;对雄黄主要成分二硫化二砷利用硫酸钾、硫酸铵和硫酸消解后采用滴定法进行定量分析.结果 复方黄连膏中可溶性砷含量不高于15.6 μg/g,二硫化二砷含量不低于2.21 mg/g.结论 本方法简便易行,可以有效控制制剂中雄黄的质量.
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清心牛黄片中雄黄含量测定
目的 建立清心牛黄片中雄黄的含量测定方法.方法 先用硫酸钾、硫酸铵和硫酸对清心牛黄片进行消化处理,再采用滴定法用碘滴定液对清心牛黄片中的雄黄进行定量测定.结果 清心牛黄片中雄黄的平均回收率为97.72％,RSD=1.78％(n=6).结论 本方法简便、定量准确,重复性好,便于操作.
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2005年版《中国药典》中含雄黄制剂安全性探讨
雄黄Realgar又名黄金石、石黄,为硫化物类矿物,主要成分为二硫化二砷(arsenic disulfide,As2S2),2005年版<中国药典>一部(下称药典)规定雄黄含砷量以As2S2计,不得少于90.0%.药典规定:雄黄有毒,每日0.05～0.1 g,入丸散用,外用适量.但笔者经计算发现,药典中一些含雄黄制剂的雄黄日服用量超出了规定,其中也包括一些儿童用药,应引起临床的重视.
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不同厂家牛黄解毒片雄黄含量考察
牛黄解毒片为常用中成药,<中国药典>自1977年版开始收载,方中雄黄为医药之一,具攻毒消肿之功效[1].雄黄的主要成分为二硫化二砷(As2S2),中药复方制剂中砷等重金属的含量问题,近年来已引起国内外的广泛关注[2].<中国药典>1995年版一部牛黄解毒片项下只有雄黄的显微定性鉴别,无含量测定指标[3].本文采用<中国药典>方法对牛黄解毒片中雄黄含量(以As2S2计)进行测定,方法简便,数据可靠,重现性好,并对不同厂家生产的11批样品雄黄含量进行考察,为有关部门修订其质量标准提供参考.
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二硫化二砷诱导LY8细胞株凋亡的机制探讨
目的：探讨二硫化二砷诱导弥漫大 B 细胞淋巴瘤细胞株 LY8凋亡的机制。方法将不同浓度的二硫化二砷与弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株LY8共培养。采用CCK-8方法测定细胞活性；AnnexinⅤ-PI方法测定细胞凋亡率，采用Western blot技术在蛋白水平测定凋亡相关因子BCL-2、Bax和caspase-3的表达。结果随着二硫化二砷浓度的增高，细胞活性越低，细胞凋亡率越高；随着二硫化二砷作用时间的延长，细胞活性越低，细胞凋亡率也越高。其差异均有统计学意义。Western blot结果显示：与对照组比较，二硫化二砷下调caspase-3蛋白的表达，Bax/BCL-2的比例升高并伴随着Bax断裂。结论二硫化二砷以时间和剂量依赖的方式抑制 LY8细胞生长和诱导凋亡，诱导凋亡的机制可能与线粒体通路相关，并伴随着Bax断裂。
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急性早幼粒细胞白血病完全缓解后巩固治疗方案的初步探讨
自全反式维甲酸(ATRA)及砷剂应用以来,急性早幼粒细胞白血病(APL)完全缓解(CR)率可达85%以上,但多数患者要复发[1-3].目前临床更关注CR后的巩固治疗及远期疗效,目的是提高持续完全缓解率(CCR).1995年6月～2000年10月我们采用ATRA及联合化疗交替治疗法与ATRA、及白血康治疗原名:复方青黛片,其有效成分主要为二硫化二砷)[1,4].序贯治疗法两种巩固治疗方案,对APL CR后的49例患者分组治疗,进行疗效比较,并动态分析PML/RARα融合基因与疗效及预后的关系.
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对《中国药典》一部含朱砂、雄黄成方制剂有关问题的商榷
朱砂、雄黄均为有毒中药,其主要成分分别为硫化汞(HgS)和二硫化二砷(As2S2).现代药理研究表明,汞和砷均为细胞原浆毒.汞、砷化合物与体内酶蛋白的巯基具有特异的亲和力,可使酶失去活性,影响细胞正常代谢,导致细胞死亡,因而引起神经系统及其他系统的功能与器质性病变[1,2].含朱砂、雄黄的中成药中均有可溶性汞和游离汞及三氧化三砷存在.临床也屡有报道大量或长时间服用含朱砂、雄黄或外用雄黄的制剂造成急、慢性中毒.笔者在1973年曾调查处理2例小儿因湿疹涂用某乡村医生配制的含大量雄黄的药膏,造成砷中毒死亡的医疗事故.过量的汞、砷对人体的危害已为人们所共识.
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雄黄药材质量标准亟待修订
雄黄为硫化物类雄黄矿物药材,主含二硫化二砷(AS2S2).该品的炮制方法为水飞法,三氧化二砷检查必须符合规定.雄黄辛,温;有毒.具解毒杀虫,燥湿祛痰,截疟之功效.在临床上,用于痈肿疔疮,虫积蛟伤,虫积,腹痛,惊痫,疟疾.该品为28种毒性药材之一,临床用药安全尤为重要.
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牛黄消炎片中雄黄的含量测定及可溶性砷盐检查
牛黄消炎片是常用中成药之一,具有清热解毒,消肿止痛之功效.收载于<卫生部药品标准>中药成方制剂第七册(1993年版),由牛黄、雄黄、蟾酥等七味药物组成,其中雄黄、蟾酥为有毒成分.<中国药典>[1]2000年版规定了雄黄中二硫化二砷的含量不得低于90.0%,同时规定了三氧化二砷的限量检查,原标准中只收载了片剂的常规检查项目,不能控制其内在质量,为了保证人民用药安全有效、完善质量标准,本文对制剂0中的雄黄进行了定量分析,对可溶性砷(As2O3)做了检查,介绍如下.
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滴定法测定蒙药筋骨风痛膏中二硫化二砷的含量
目的 建立蒙药筋骨风痛膏中二硫化二砷的含量测定方法.方法 加入硫酸钾、硫酸铵与硫酸消解后,采用滴定法用碘滴定液滴定.结果 平均回收率为98.31%,RSD为1.57%(n=9).结论 方法可靠、简便、重复性好,可用于该制剂的质量控制.
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青黄散组分抑制BCL-2、 XIAP-1、c-IAP协同诱导KG1a细胞凋亡的实验研究
目的 研究中药砷复合制剂青黄散(由青黛和雄黄二药组成)组分靛玉红(Indirubin,青黛的有效成分)和二硫化二砷(Arsenic Disulfide,As2S2,雄黄的有效成分)对非M3型急性髓系白血病(AML)KG1a细胞株的单独和联合杀伤作用,并探讨相关杀伤作用机制.方法 采用瑞氏姬姆沙染色法观察靛玉红与As2S2作用于KG1a细胞的形态,采用流式细胞术检测靛玉红与As2S2作用于KG1a细胞凋亡率,采用CCK-8检测靛玉红与As2S2作用于KG1a细胞抑制率,进一步用Western blot检测KG1a细胞Bcl-2、Smac、XIAP-1、c-IAP、Caspase-3蛋白的表达.结果 青黄散组分靛玉红与As2S2单独对KG1a细胞均具有增殖抑制作用,联合用药的增殖抑制率、凋亡率作用更明显(P＜0.05),CompuSyn软件分析靛玉红和As2S2以1:1组合对KG1a细胞株的联合指数(CI)＜0.9.联合用药在形态学上能明显促进细胞的凋亡变化,增加细胞的Caspase-3和Smac蛋白表达,抑制BCL-2、XIAP-1、c-IAP蛋白的表达.结论 青黄散组分靛玉红与As2S2能联合抑制KG1a细胞增殖和诱导其凋亡,其机制与抑制BCL-2、XIAP-1、c-IAP蛋白表达,促进Caspase-3、Smac蛋白表达相关.本药可用于治疗常规药物抵抗的AML并为非M3型AML的治疗提供相关实验依据.
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三氧化二砷在白血病治疗中的临床应用
1 三氧化二砷的临床应用历史砷(Arsenic,AS)是广泛分布在环境中的自然物质,作为微量元素存在于正常人体内,总量约为14～21mg.无机砷化物主要有三种类型:红色砷化物,主要成分为二硫化二砷(AS2S 2);黄色砷化物,主要成分为三硫化二砷(AS2S3);白色砷化物,主要成分为三氧化二砷(AS2O3).
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国产中成药中雄黄应用及其溶出量的研究
目的 了解和掌握国产中成药所含雄黄(As_2S_2)状况;以体外实验探讨雄黄在不同pH值溶液中可溶性砷溶出量.方法 通过查阅2005年我国卫生部发布的中药保护及中药部颁标准,摘录含雄黄中药药剂总量、雄黄含量及服用方法等数据,通过对上述数据归类统计,评价我国中药成方制剂所含雄黄情况;将细粉状药用雄黄于pH值为1、3、5、7、9、11的溶液中37℃水浴4 h,取上清用超低温捕集.氢化物发生.原子吸收分光光度计进行砷检测,计算砷溶出量.结果 共查阅登记在录中药3 860种,其中含雄黄方剂121种[包括既含雄黄又含朱砂(HgS)的74种],占总数的3.13%.在各种含雄黄方剂中,口服药物97种(80.17%),外用药物10种(8.26%),口服兼外用药物14种(11.57%);供儿童服用方剂45种(1.17%);折合砷含量质量分数<15%者108种(89.26%),>15%者6种(4.96%),范围为0.46%～27.52%;日平均折合砷摄入量<10mg者10种(8.26%),10～500mg之间者79种(65.29%),>500mg者11种(9.09%).雄黄在体外的可溶性砷溶出实验表明,1 mg雄黄在pH值分别为1、3、5、7、9、11的溶液中仅溶出无机砷(iAs),且随pH值升高iAs溶出量呈增高趋势,溶出量分别为1.58、1.24、1.57、1.62、2.28、4.76 μg.结论 我国中药成方中雄黄应用广泛.其所含砷化合物的健康影响应引起关注;药用雄黄所含无机砷在碱性环境中可能更易吸收.
关键词： 砷 雄黄 二硫化二砷 无机砷 超低温捕集.氢化物发生.原子吸收分光光度计 -
雄黄雌黄的电镜-能谱仪分析
雄黄主要成分为二硫化二砷,雌黄主要成分为三硫化二砷,两者经常同时存在[1,2].雄黄具有燥湿、杀虫、祛风和解毒之功效.对于雄黄和雌黄的检验,常用方法为化学分析法,对两者难以区别.为了进一步探讨雄黄和雌黄的化学组成和形态结构,进而建立一种新的检验方法,作者采用扫描电子显微镜和能谱仪对两者的形态结构和元素组成进行了测定.
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二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的研究
目的 观察二硫化二砷(As2S2)诱发哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的作用.方法 采用卵白蛋白制备哮喘豚鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸细胞.将嗜酸细胞悬浮生长于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,嗜酸细胞初始浓度均为2×109 L-1.A组As2S2以1.4063mg/L终浓度分别加入细胞培养液中培养3,6,12,24,48h.B组将As2S2终浓度调整为0.04,0.09,0.18,0.35,0.70,1.41,2.81mg/L,培养6h.2组均以不加As2S2为对照.Wright's染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变化.流式细胞仪检测观察嗜酸细胞凋亡率.结果 嗜酸细胞与As2S2作用6h后,Wright's染色、透射电子显微镜均观察到嗜酸细胞出现凋亡的形态学改变.将嗜酸细胞与终浓度为1.4063mg/L As2S2在培养基中分别培养3,6,12,24,48h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2作用时间的延长而先升高,于24h达高,凋亡率为27.19%,而后下降.各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较均有显著性差异.将嗜酸细胞与不同终浓度As2S2在培养基中分别培养6h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较亦均有显著性差异.结论 As2S2可促进哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着As2S2作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显.
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二硫化二砷和靛玉红对骨髓增生异常综合征细胞MUTZ-1凋亡及其相关蛋白的影响
目的 研究中药青黄散主要成分二硫化二砷(As2S2)和靛玉红对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株MUTZ-1细胞周期、凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响.方法 实验于2015年6月-2016年6月在中国中医科学院西苑医院血液科实验室进行.以MDS-RAEB细胞株MUTZ-1为研究对象,实验分4组:对照组、As2S2组、靛玉红组和联合组(As2S2和靛玉红联合应用).以As2S2、靛玉红及二者联合分别作用MUTZ-1细胞48 h和72 h,以流式细胞术检测细胞周期,以Annexin V-FITC/PI法检测细胞的凋亡情况,以流式细胞术检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达.结果 As2S2和靛玉红对MUTZ-1细胞有明显的抑制作用.与对照组相比,As2S2组和联合组在48 h时S期和G2/M期细胞的比例减少、G0/1期细胞比例增加(P均＜0.05);在72 h时S期细胞的比例减少、G0/1期细胞比例增加(P均＜0.01),G2/M期细胞的比例无明显变化(P=0.842).与对照组比较,靛玉红组细胞不同时间点各细胞周期无明显变化(P均＞0.05).与As2 S2组和靛玉红组相比,联合组在48 h时S期和G2/M期细胞比例减少,G0/1期细胞比例增加(P均＜0.01);72 h时S期细胞比例减少,G0/1期比例增加(P＜0.01).与对照组相比,As2S2组和靛玉红组细胞早期凋亡明显增加(P＜0.05).与As2S2组和靛玉红组相比,联合组促进早期凋亡作用也增强(P＜0.05).与对照组比较,靛玉红组和联合组在48 h时细胞表达Caspase-3增加(P＜0.01);As2S2组在72 h时细胞表达Bcl-2减少(P＜0.01)、Bax增加(P＜0.05).与As2S2、靛玉红组相比,联合组对MUTZ-1细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的无影响(P＞0.05).结论 中药青黄散主要成分As2S2和靛玉红通过促进MDS细胞MUTZ-1的凋亡、影响凋亡相关蛋白起到治疗MDS的作用,单用As2S2可抑制MUTZ-1细胞的增殖,与靛玉红联合应用能增强其调控细胞周期、促进细胞凋亡的作用.
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长期过量服用牛黄解毒片会中毒
临床上发现,一些长期有便秘、痤疮的患者为了泻火解毒,缓解症状,自行大量、长期地服用牛黄解毒片,结果却出现了皮疹、剧痒、发热、哮喘、胸闷、心悸、腹泻等症状,这时应该警惕“砷中毒”.牛黄解毒片由牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草等8味药物组成,有清热解毒、散风止痛的功效,能治疗肺胃蕴热引起的头晕目眩、口鼻生疮、牙痛、咽喉疼痛、耳鸣肿痛、便秘等.配方中其他成分毒性较低,但雄黄的主要成分为二硫化二砷,遇热易分解氧化,变成有毒的三氧化二砷,即俗称的砒霜,可影响到神经系统、消化系统、造血系统和泌尿系统,造成慢性砷中毒.
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嘎玛珠尔阴道栓的剂量分析
蒙药嘎玛珠尔主要成分有朱砂、银朱、雄黄、麝香等.为了便于宫颈糜烂患者的使用,我院制剂室根据临床治疗经验,将其制成甘油明胶基质的栓剂.由于其中朱砂、银朱、雄黄均属毒性药材,为此就其主要成分二硫化二砷、硫化汞含量同时进行了测定,现报告如下.
