首页 > 文献资料
-
砷对脑星形胶质细胞的毒性作用
探讨砷对脑星形胶质细胞的毒性作用.以原代培养脑星形胶质细胞(astrocyte,AST)为实验对象,在含砷浓度分别为0、5、10、20、30 μmol/L的培养液中培养24 h,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞线粒体膜电位的水平,荧光双波长分光光度计法检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i).与对照组相比,AST活力及线粒体膜电位水平随砷暴露浓度的增加而明显下降；[Ca2+],随砷暴露浓度的增加而显著升高.砷对AST具有明显的毒性作用,在5 ～30 μmol/L的浓度范围内其毒性作用随砷暴露浓度的增加而增强,可引起AST内钙超载,并破坏线粒体功能.
-
洗心汤对Aβ1-42诱导的海马神经元线粒体功能的影响
目的:观察名方洗心汤对Aβ1-42损伤的海马神经元线粒体的调控作用,探讨名方洗心汤防治阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的可能作用机制.方法:提取Wistar新生鼠海马神经元并培养,分正常对照组,Aβ模型组,低、中、高浓度治疗组;Annexin V/PI法检测细胞凋亡率;JC-1荧光法检测线粒体膜电位;流式细胞仪技术和免疫荧光技术分别检测ROS与Cyt-c的蛋白基因表达.结果:洗心汤含药脑脊液对Aβ1-42诱导所致细胞凋亡具有显著保护作用.结论:名方洗心汤能够修复线粒体功能,从而提高Aβ1-42诱导细胞的存活率.
-
半夏泻心汤药物血清对ICC线粒体膜电位与[Ca2+]i的影响
目的:观察半夏泻心汤对小鼠Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)线粒体膜电位与细胞内Ca2+浓度的影响.方法:制备大鼠含半夏泻心汤药物血清,体外分离培养ICC,用药物血清处理ICC,作用24h后,采用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光测定,利用激光共聚焦显微扫描技术和特异性荧光探针标记线粒体膜电位及[Ca2+]i.结果:半夏泻心汤药物血清能提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i.结论:半夏泻心汤可能通过提高ICC线粒体膜电位,降低ICC[Ca2+]i以促进胃肠运动.
-
猫爪草皂苷对结肠癌LoVo细胞凋亡和线粒体电位的影响
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus temate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞的增殖和凋亡作用及作用机制.方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg·mL-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜现察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率.结果:与对照组比较,猫爪草皂苷处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对LoVo细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);随着浓度的增加凋亡率增加,药物组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);流式细胞仪细胞周期分析图可看出细胞阻滞在C1期,随着给药浓度的增加,细胞凋亡峰(AP峰)越来越明显(图1);激光共聚焦扫描技术观察显示,细胞经皂苷作用4h、8h、12h后,线粒体膜电位下降(P<0.05).结论:猫爪草皂苷可导致人结肠癌LoVo细胞线粒体膜电位下降,具有明显抑制增殖和诱导凋亡作用.
-
红景天苷对缺氧缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响
目的:观察红景天苷对神经细胞系SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响.方法:四唑盐比色实验(MTT)检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率.结果:缺氧/缺糖损伤2h可诱导SH-SY5Y细胞凋亡和坏死,分别为18.59%(P＜0.01)和4.94%(P＜0.01),形态学观察也发现SH-SY5Y细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,线粒体膜电位和活性分别降低29.17%(P＜0.01),38.80%(P＜0.01),随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多,线粒体膜电位和活性进一步下降;红景天苷能显著降低SH-SY5Y细胞凋亡及坏死的百分率,提高线粒体膜电位和活性,其作用随剂量增加而作用增加.结论:红景天苷可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生.
-
绞股蓝不同有效成分对氧化损伤内皮细胞线粒体膜电位的影响
目的 探讨绞股蓝不同成分(绞股蓝总皂苷Gps、绞股蓝皂苷X1LX GpXILX、绞股蓝皂苷AGpA、人参皂苷GRb3)对氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞氧化应激损伤线粒体膜电位的影响.方法 采用CCK-8法分别观察不同浓度Gps、GpXILX、GpA、GRb3对EA.Hy926细胞活力的影响,明确它们作用于EA.Hy926细胞的浓度;采用ox-LDL诱导氧化应激损伤模型,分别予Gps、GpXILX、GpA、GRb3处理24h.用微量法检测细胞氧化应激损伤丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及T-AOC含量,流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位的变化.结果 不同浓度Gps、GpXILX、GpA、GRb3对EA.hy926细胞增殖无明显的抑制效应.ox-LDL诱导细胞后使细胞中MDA含量增高,SOD活力降低,T-AOC含量降低.而Gps、GpXILX、GpA、GRb3预处理能降低MDA的含量,Gps、GpXILX、GRb3能增强SOD的活性,提高T-AOC含量.线粒体膜电位数据显示,ox-LDL诱导细胞后使细胞线粒体膜电位降低.而Gps、GpXILX、GpA、GRb3处理细胞后能显著增加EA.hy926细胞线粒体膜电位.结论 不同成分绞股蓝对ox-LDL所致内皮细胞氧化应激损伤具有不同程度的保护作用,可能与降低EA.hy926细胞氧化应激,提高抗氧化防御和稳定线粒体膜电位有关.
关键词： 绞股蓝皂苷 内皮细胞损伤 氧化应激 线粒体膜电位 EA.hy926细胞 -
神经干细胞移植联合脑源性神经营养因子局部注射对老年性痴呆鼠海马线粒体膜电位及行为学的影响
背景:移植神经干细胞的分化受移植部位微环境、各种生长及细胞因子的影响.目的:实验拟观察神经干细胞移植与脑源性神经营养因子联合应用对老年性痴呆鼠行为学恢复及海马线粒体膜的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于 2006-09/2007-09在重庆医科大学动物实验室及细胞实验室完成.材料:神经干细胞来源于新生1 d龄SD大鼠.Y迷宫筛选对电击敏感并逃避迅速的三四月龄健康雄性SD大鼠,随机分成4组:正常对照组、神经干细胞组、脑源性神经营养因子组、联合组移植,每组10只.方法:分离培养大鼠神经干细胞.参照包新民等的大鼠脑立体定位图谱制备老年性痴呆大鼠模型.造模后,神经干细胞组双侧海马区注射神经干细胞, 脑源性神经营养因子组双侧海马区注射脑源性神经营养因子,联合移植组注射神经干细胞同时持续侧脑室注射脑源性神经营养因子.主要观察指标:用分子生物学检测老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位的变化,行Y迷宫试验观察大鼠行为学中学习记忆能力.结果:联合移植组老年性痴呆大鼠海马线粒体膜电位明显升高, 并高于神经干细胞组、脑源性神经营养因子(P < 0.05), 与正常对照组比较无明显差异.脑源性神经营养因子组、神经干细胞组学习记忆能力虽有明显恢复,但与联合移植组和正常对照组比较还有一定的距离(P < 0.05).结论:神经干细胞与脑源性神经营养因子联合应用能能稳定海马线粒体功能,从而抑制神经细胞凋亡,能改善老年性痴呆鼠的学习记忆功能障碍.
-
应用细胞培养、流式细胞技术和Western Blot检测氮杂糖化合物SZL在体外抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖与诱导凋亡的效应
目的:存在于细胞表面的糖复合物参与细胞的通讯、增殖、迁移、分化等生理过程,在机体中具有复杂的生物学调控作用.探讨氮杂糖化合物SZL在体外对人宫颈癌HeLa细胞生长、DNA损伤、线粒体膜电位以及细胞凋亡的干预.方法:实验于2004-12/2006-12在北京大学医学部细胞生物学系完成.①实验材料:人子宫颈癌HeLa细胞株由北京大学医学部细胞生物学系杜晓娟副教授提供.SZL由北京大学天然药物及仿生药物重点实验室叶新山教授合成.②实验方法:取对数生长期HeLa细胞,消化后制成细胞悬液,按1.5×103/孔的密度接种,培养24 h细胞完全贴壁后,SZL组加入5.10,25,50,100 μmol/L的SZL,空白对照组加入DMEM培养液.③实验评估:SZL作用24,48,72 h后,采用酸性磷酸酶法检测细胞生长抑制情况,瑞氏染色镜下观察细胞形态;AnnexinV-PI染色后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Rhodamine123标记活细胞后,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化;Western Blot法检测SZL作用后凋亡相关蛋白的表达;单细胞凝胶电泳检测SZL作用后细胞DNA损伤情况.结果:①细胞生长抑制:5,10,25,50,100 μmol/L SZL作用24,48,72 h后的半数抑制浓度分别为73.6,43.2,33.6 μmol/L,显著抑制Hela细胞的增殖.镜下空白对照组HeLa细胞分布均匀,胞质透明清亮,呈铺展状态生长;50 μmol/L SZL作用24 h后,HeLa细胞密度变稀,体积变小,胞核染色质呈聚集状态.②细胞凋亡:50,100 μmol/L SZL作用24 h后细胞凋亡率分别为(3.51±0.41)%,(58.46±8.45)%;在24～48 h过程中,凋亡的细胞逐渐坏死,SZL作用48 h后细胞凋亡率分别为(10.51±2.20)%,(17.29±7.52)%.空白对照组24,48 h后细胞凋亡率均为1%.③线粒体跨膜电位的变化:50 μmol/L SZL作用24,48 h后,HeLa细胞的线粒体膜电位平均荧光强度均明显低于空白对照组(P＜0.01).④凋亡相关蛋白的表达:25,50,100 μmol/L SZL作用HeLa细胞48 h后,凋亡相关蛋白pro-caspase3、Bcl-2表达降低,细胞色素c含量升高.⑤细胞DNA损伤;50 μmol/L SZL作用24 h后,受损细胞DNA在电场中迁出,呈现彗星状拖尾.结论:氮杂糖类化合物SZL能够抑制HeLa细胞的增殖,诱导细胞发生DNA损伤,通过干预线粒体途径实现细胞凋亡.
-
赤芍总苷诱导K562细胞凋亡及对线粒体膜电位和Ca2+的影响
目的:赤芍总苷能诱导鼠HepA和S180细胞凋亡,但赤芍总苷能否抑制K562细胞增殖及其诱导K562细胞凋亡的机制尚不明确.观察赤芍总苷诱导人红白血病细胞株K562细胞凋亡及线粒体膜电位与Ca2+水平的变化,以探讨凋亡机制.方法:实验于2007-03-02/2007-10-20在北京中医药大学细胞生化实验室,国家重点实验完成.①实验材料:赤芍总苷由西安奥晶科技发展有限公司提供,批号:060417,纯度>95%.人红白血病K562细胞株购自上海中科院细胞库.②实验方法:取对数生长期的K562细胞,培养24 h后加入50 mg/L赤芍总苷进行干预,光镜下观察细胞形态.MTT显色法检测25,50,75,100,150,200,400 mg/L赤芍总苷对K562细胞增殖的抑制作用,以仅加入无血清培养基培养的为对照.③实验评估:采用Annexin V/PI双标记法检测凋亡效应,罗丹明123(Rh123)染色流式检测线粒体膜电位和荧光染料Fluo-3AM流式检测K562细胞内游离Ca2+浓度.结果:①50 mg/L 赤芍总苷作用K562细胞24 h后,出现核固缩、核碎裂和凋亡小体等形态学改变.②与对照组相比,不同质量浓度赤芍总苷能明显抑制K562细胞的增殖(P < 0.01),并具有量效关系,呈时间和剂量依赖性.③细胞线粒体经Rh123染色呈现明亮绿,不同质量浓度赤芍总苷干预组荧光强度均较对照组明显减弱,膜电位水平较高.④赤芍总苷可引起细胞线粒体膜电位下降.不同质量浓度赤芍总苷组细胞内游离Ca2+浓度均升高, 线粒体膜电位下降,与对照组比较差异显著(P < 0.01).结论:赤芍总苷诱导K562细胞凋亡的可能机制是通过减低细胞内线粒体膜电位及提高游离Ca2+水平,从而导致细胞凋亡.
-
β淀粉样前体蛋白17肽对糖尿病大鼠海马神经细胞线粒体膜电位和凋亡的干预
背景:糖尿病大鼠存在学习和记忆障碍,β淀粉样前体蛋白17肽具有改善这一行为的作用.糖尿病是否通过影响海马区神经细胞的膜电位及凋亡导致学习和记忆障碍以及β淀粉样前体蛋白17肽的相关作用机制尚不清楚.目的:观察糖尿病大鼠海马区神经细胞的线粒体膜电位和凋亡以及β淀粉样肽前体蛋白干预对其影响.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室和河北保定市第一中心医院内分泌科.材料:实验中指标测定部分于2002-05/2002-08在解放军总医院仪器测试中心完成.动物造模及干预阶段在首都医科大学附属宣武医院动物室完成.选用Wistar雄性大鼠18只.将大鼠按随机抽签法分为3组,正常对照组,糖尿病模型组,β淀粉样前体蛋白17肽治疗组,每组6只.方法:①糖尿病模型组和β淀粉样前体蛋白17肽治疗组大鼠禁食12 h后用pH值4.4链脲佐菌素按60mg/kg腹腔注射诱发糖尿病模型.3 d后测尾静脉血糖＞15 mmol/L为造模成功.正常对照组大鼠不造模.β淀粉样前体蛋白17肽治疗组于背部皮下注射β淀粉样前体蛋白17肽,3.4μg/只,每周3次,共10周.正常对照组及糖尿病组给予等量的生理盐水相同部位注射,每周3次,共10周.②满10周时,将大鼠麻醉,断头取脑后冰浴下取海马组织制备单细胞悬液,采用线粒体膜电位特异性荧光探针JC-1标记线粒体及Annexin-V-FITC&PI双染色技术,进行流式细胞仪上机检测线粒体膜电位和凋亡发生率.③数据间差异比较采用单因素方差分析.主要观察指标:各组大鼠海马神经细胞线粒体膜电位和海马单细胞凋亡率比较结果.结果:进入结果分析大鼠18只,每组6只.①海马神经细胞线粒体膜电位:糖尿病模型组明显低于正常对照组[(551.91±53.36),(809.88±82.41)道,P＜0.01],β淀粉样前体蛋白17肽治疗组高于糖尿病模型组[(705.99±89.92)道,P＜0.05],与正常对照组相近(P=0.146).②海马单细胞凋亡率:糖尿病模型组明显高于正常对照组和β淀粉样前体蛋白17肽治疗组[(5.32±1.37)%,(1.03±0.55)%,(2.80±0.92)%,P＜0.01,0.05].结论:海马线粒体膜电位下降和细胞的凋亡可能参与糖尿病脑病的发生发展;β淀粉样前体蛋白17肽具有改善这一病理过程的作用.
-
嗜酸性粒细胞在激素抵抗型哮喘中的作用
目的了解嗜酸性粒细胞在激素抵抗型哮喘(SRA)的发病机理和诊断中的意义。方法采集SRA患者和非激素抵抗型哮喘(NSRA)患者的外周血，Percoll密度梯度法分离嗜酸性粒细胞，分别应用DPH染色荧光分光光度计测量嗜酸性粒细膜粘性和罗丹明123染色流式细胞仪测定其线粒体膜电位。结果SRA患者低密度嗜酸性粒细胞(HE)比例增加，嗜酸性粒细胞的膜粘滞度增加，线粒体膜电位的相对荧光强度下降。结论功能活跃的HE增多可能是SRA发生的机理之-，嗜酸性粒细胞膜流动性及线体膜电位的改变，有助于SRA和其他哮喘的鉴别。
-
持续低氧对小鼠胚胎成纤维细胞增殖及饲养层制备的影响
背景:在传统的胚胎干细胞培养体系中,饲养层细胞制备和胚胎干细胞的培养扩增大都是在常氧条件下进行的,氧培养条件的改变有可能影响饲养层细胞,从而改变胚胎干细胞的生长特性或分化能力,但尚未见到这方面的系统研究报道.目的:观察低氧培养对饲养层细胞及小鼠胚胎干细胞干性维持的影响.方法:原代小鼠胚胎成纤维细胞分为常氧组(体积分数20%O2)和低氧组(体积分数5%O2)持续传代培养,绘制生长曲线,检测活性氧水平和线粒体膜电位.将小鼠胚胎干细胞分为常氧组(饲养层为常氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数20%O2条件下培养)和低氧组(饲养层为低氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数5%O2条件下培养),观察胚胎干细胞的生长形态,检测干细胞多能性指标Oct4、Sox2以及低氧诱导因子HIF-1α mRNA表达.结果与结论:①与常氧组相比,低氧组小鼠胚胎成纤维细胞增殖较快,线粒体膜电位上升,产生活性氧减少(P < 0.05);②胚胎干细胞碱性磷酸酶染色阳性,Oct4、Sox2高表达,低氧组形成的中小集落及HIF-1α mRNA表达比常氧组显著增多(P < 0.05);③结果表明,体积分数5%O2持续低氧培养利于维持饲养层细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)的活力和胚胎干细胞的干性维持.
-
大麻素2型受体激活对钛颗粒诱导成骨细胞凋亡的干预作用
背景:成骨细胞凋亡而导致的成骨减少是终假体松动的重要原因,大麻素2型受体的激活可促进成骨细胞的增殖,减少细胞凋亡率的发生.目的:探讨钛颗粒负荷下,大麻素2型受体激动剂HU-308对成骨细胞株MC3T3-E1凋亡的抑制作用及保护机制.方法:将体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1分5组培养,空白对照组以常规细胞培养基培养;钛颗粒组以含2.5 g/L钛颗粒的细胞培养基培养;低浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-9 mol/L HU-308的细胞培养基培养;中浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-8 mol/L HU-308的细胞培养基培养;高浓度药物组以含2.5 g/L钛颗粒+10-7mol/L HU-308的细胞培养基培养.培养48 h,检测各组细胞增殖活性、凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平及Caspase-3活性.结果与结论:①与空白对照组比较,钛颗粒组细胞增殖活性、线粒体膜电位水平明显下降(P＜0.01或P＜ 0.05),凋亡率、细胞内活性氧水平、Caspase-3活性明显升高(P＜ 0.01或P＜0.05);②与钛颗粒组比较,高浓度药物组细胞增殖活性、线粒体膜电位水平升高(P＜0.05),中、高浓度药物组细胞凋亡率、细胞内活性氧水平、Caspase-3活性降低(P＜ 0.01或P＜0.05);③结果表明,HU-308能有效逆转钛颗粒对MC3T3-E1成骨细胞活性的抑制及促凋亡作用,而这些保护作用可能是HU-308通过调节细胞内活性氧水平、提升线粒体膜电位水平及Caspase-3活性来实现的.
-
超低频电磁场处理水对骨骼肌细胞糖脂代谢及线粒体功能的影响
背景:超低频电磁场处理水(简称频谱水)作用于生物体,在很多方面能够改善生物体的生理功能,但其对骨骼肌细胞糖脂代谢和线粒体功能的影响上,还需要更进一步的理论和实验研究.目的:探究频谱水培养对C2C12骨骼肌细胞糖脂代谢和线粒体功能的作用.方法:采用频谱水配制的DMEM培养C2C12骨骼肌细胞96 h后收样,甲基噻唑基四唑(MTT)细胞计数法检测细胞增殖,检测培养基中葡萄糖含量、细胞内三酰甘油浓度、线粒体ATP含量,线粒体膜电位,以及葡萄糖糖转运子1、4和细胞色素C氧化酶的蛋白水平.结果与结论:频谱水培养C2C12骨骼肌细胞96 h细胞葡萄糖消耗量增加2.4％(P＜0.05),三酰甘油浓度略有减少(P＞0.05),葡萄糖糖转运子1蛋白表达增加35.8％(P＜0.05),细胞色素C氧化酶1蛋白表达增加43.7％(P＜0.01),线粒体ATP含量和线粒体膜电位均没有明显变化(P＞0.05).结果提示:①频谱水培养C2C12骨骼肌细胞可通过增加骨骼肌细胞膜上葡萄糖糖转运子1的含量来提高骨骼肌细胞葡萄糖利用量.②频谱水不改变正常骨骼肌细胞线粒体膜电位.③频谱水可能通过提高线粒体中细胞色素C氧化酶1的表达量而在骨骼肌细胞能量需要增加时加强线粒体的产能功能.
-
冬凌草甲素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨冬凌草甲素对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其诱导凋亡的机制.方法 采用不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的成纤维细胞,在不同的时间用MTT法检测冬凌草甲素对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖抑制作用,用Hoechst染色、流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位的变化,用比色法检测Caspase-3活性变化.结果 浓度为20、40、80 μmol/L冬凌草甲素加入瘢痕疙瘩成纤维细胞中48 h,其抑制率[(20.47±2.29)%、(25.44 d-2.62)%、(44.37±0.59)%]和凋亡率[(10.23±1.83)%、(16.03±2.21)%、(30.83 4-3.43)%]呈明显的浓度依赖性,与空白对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01);而线粒体膜电位的荧光强度(564.43±27.17、421.54±18.94、288.43±15.29)呈明显下降趋势,与空白对照组(757.24±28.86)比较,其差异有统计学意义(P<0.01);Caspase-3活性(33.46±3.97、45.43±10.87、68.44±15.32)呈明显增强趋势,与空白对照组(19.76±2.43)比较,其差异有统计学意义(P<0.01).结论 冬凌草甲素可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并呈明显的时间和浓度依赖性.其机制与降低线粒体膜电位继而诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡有关.
-
枸杞多糖对蓝光诱导损伤人视网膜色素上皮细胞凋亡及线粒体膜电位影响
目的 利用蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelial cell,hRPE cell)损伤建立年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的实验模型,观察不同浓度的枸杞多糖对hRPE细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,探讨枸杞多糖防治AMD的可行性.方法 通过蓝光诱导建立hRPE细胞光损伤模型,不同浓度的枸杞多糖进行干预.实验分组:A组为正常hRPE细胞,B组(hRPE+光照)为光照损伤组,C组(hRPE+光照+0.01 mg/ml枸杞多糖),D组(hRPE+光照+0.1 mg/ml枸杞多糖),E组(hRPE+光照+1 mg/ml枸杞多糖).倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并检测光照后24h及48h各组细胞的凋亡数及线粒体膜电位.结果 (1)倒置像差显微镜下见正常hRPE细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚.光照损伤组部分细胞体积缩小,变圆,细胞周围见透亮圈；细胞核缩小,出现核边聚,培养液中出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.枸杞多糖干预组少许细胞积缩小,变圆,折光性改变,培养液中未出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.(2) Annexin V-FITC/PI凋亡检测显示A组凋亡细胞数量少；B组凋亡细胞数量多；C组、D组及E组凋亡细胞数量与B组细胞差异有统计学意义(P＜0.01)；E组凋亡细胞数量与A组差异无统计学意义(P＞0.05).(3)线粒体膜电位检测显示A组阳性细胞数量多；B组阳性细胞数量少；C组、D组及E组阳性细胞数量及线粒体膜电位与B组相比差异有统计学意义(P＜0.01)；E组与A组差异无统计学意义(P＞0.05),B、C、D组与A组比较P ＜0.05有统计学意义.结论 枸杞多糖能抑制蓝光诱导损伤的hRPE凋亡,增强hRPE细胞线粒体膜电位,对hRPE有很好的保护作用.
-
补骨脂素加长波紫外线诱导HL-60、NB4细胞凋亡时对线粒体膜电位的影响
目的 研究补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60、NB4凋亡时对线粒体膜电位(ΔΨm)的影响.方法 细胞与不同浓度PSO,接受或不接受UVA照射后共同培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果 PUVA处理后的HL-60、NB4细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,ΔΨm下降,PUVA的作用显著强于前两者(P<0.01).结论 PUVA可诱导人白血病细胞发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位水平.
-
血管内皮细胞线粒体膜电位与缺氧及血管紧张素Ⅱ的相关性
目的 观察缺氧及血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)对血管内皮细胞(VEC)线粒体膜电位的影响.方法 建立VEC缺氧损伤模型;实验设为空白对照组、缺氧组、Ang-Ⅱ作用组、缺氧加Ang-Ⅱ作用组等四组.细胞经过Rhodamine 123负载后,用激光共聚焦显微镜测定VEC内Rhodamine 123的荧光强度代表线粒体膜电位.结果 VEC分别经过缺氧及Ang-Ⅱ损伤后,线粒体膜电位明显降低(P<0.01);缺氧与Ang-Ⅱ联合作用可引起VEC线粒体膜电位较单纯缺氧或单纯Ang-Ⅱ作用进一步降低(P<0.05).结论 缺氧及Ang-Ⅱ可引起VEC线粒体膜电位明显降低,造成VEC损伤.
-
KA2012MBL复合提取液体外抗肿瘤活性评价及相关机制研究
目的：系统评价KA2012 MBL复合提取液的抗肿瘤活性及对P-gp介导的肿瘤多药耐药的克服能力，并初步探讨KA2012 MBL复合提取液的抗肿瘤机制。方法应用SRB法测定KA2012 MBL复合提取液对K562/A、K562/S和HGC-27的细胞毒活性，应用流式细胞术检测KA2012 MBL复合提取液对K562/S细胞的细胞周期阻滞作用、凋亡诱导作用和对其线粒体膜电位的影响作用。结果 KA2012 MBL复合提取液对肿瘤细胞株K562/A、K562/S和HGC-27均具有细胞毒活性，IC50值分别为（1．12±0．15）％（v/v％）、（1．18±0．04）％（v/v％）、（1．21±0．17）％（v/v％），并可有效克服P-gp介导的肿瘤多药耐药。流式细胞术检测结果显示KA2012MBL复合提取液可有效降低K562/S细胞的线粒体膜电位，并可使 K562/S 细胞阻滞在 G0/G1期，从而诱导其凋亡。结论KA2012 MBL复合提取液通过诱导肿瘤细胞凋亡而杀死肿瘤细胞，同时能克服P-gp介导的肿瘤多药耐药。
-
PUVA对HL-60细胞凋亡及线粒体膜电位的影响
[目的]研究补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)对人白血病细胞HL-60凋亡及线粒体膜电位的影响.[方法]HL-60细胞接受或不接受UVA照射后,在不同浓度PSO培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,多因素方差分析法进行统计学处理.[结果]PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态;PSO、UVA照射及PUVA在作用后24h均可使细胞凋亡率增加,Δψm下降,对照组、80μg/mL PSO组、5min UVA组及PUVA(80μg/mL PSO +5min UVA)组凋亡率分别为(10.60±0.31)%、(26.94±0.26)%、(28.53±0.05)%、(37.72±0.09)%;线粒体膜电位水平分别为388.47±6.35、173.17±10.89、200.00±2.91以及71.83±9.47,各组间P<0.01,PUVA的作用明显强于前两者.[结论]PUVA可诱导人白血病细胞HL-60发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位.
