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树突状细胞吞噬经光化学处理的异基因细胞后对同基因T细胞的免疫调控
本研究探讨树突状细胞(DC)吞噬经PUVA(8-methoxypsoralen plus UVA irradiation,8-甲氧基补骨脂素联合长波紫外线照射的体外光化学治疗)处理的同种异基因淋巴细胞后对于同基因T细胞的免疫调控作用.分离LEW大鼠骨髓细胞,经IL-4和GM-CSF共同诱导制备骨髓来源的LEW大鼠DC.分离DA大鼠脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的DA大鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP),检测PUVA-SP的凋亡率.在体外将PUVA-SP或SP与受者骨髓来源的未成熟DC共同培养,检测上述处理对受者DC表面分子CD40、CD86、MHC-Ⅱ的影响.以CFSE标记PUVA-SP,通过荧光显微镜观察LEW大鼠DC吞噬DA大鼠PUVA-SP的情况.通过混合淋巴细胞培养(MLR),检测吞噬DA大鼠PUVA-SP的LEW大鼠DC(PUVA-SP DC)对LEW大鼠T细胞的刺激作用,同时检测MLR培养上清中细胞因子IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ的浓度.结果表明:PUVA处理能够在24小时内诱导62.87%的DA大鼠脾淋巴细胞发生早期凋亡.LEW大鼠DC与DA大鼠PUVA-SP共培养后,可有效吞噬PUVASP.LEW大鼠DC与DA大鼠SP混合培养后,其表面分子MHC-Ⅱ、CD40以及CD86的表达阳性率分别为65.6%、45.6%和36.5%,明显高于未经处理的受者DC组27.7%、22.9%和13.0%(p<0.01);而DC与PUVA-SP混合培养后,其表面分子MHC-Ⅱ、CD40及CD86的表达仍保持较低的水平,分别为25.7%、21.0%和13.4%,与未经任何处理的对照组DC相当(p>0.05),而远远低于LPS刺激后的成熟DC(82.3%、71.7%和63.2%)(p<0.01).DA大鼠SP共培养后的LEW大鼠DC可以刺激LEW大鼠T细胞显著增殖,刺激指数在加载DC数量为2×103、10×103、20×103组分别为1.7546、3.9798和5.0220,而吞噬DA大鼠PUVA-SP的LEW大鼠DC则诱导了T淋巴细胞低反应性,刺激指数分别为1.0120、1.1518和1.4093,二者差异有统计学意义(p<0.01).此外,与SP DC相比,PUVA-SP DC明显抑制了T细胞IFN-γ的分泌(140.17 4±2.28 vs 37.67 4±1.76)(p<0.01),刺激了IL-10(33.11±1.82 vs 69.58 ±1.83)(p<0.01)、IL-4的分泌(11.11±1.07 vs 23.83±0.73)(p<0.01),但对IL-2的分泌没有抑制作用(418.18 ±4.55 vs 423.86±5.39)(p>0.05).结论:PUVA-SP DC能够诱导大鼠T细胞对异基因抗原的免疫低反应,还可在体外诱导LEW大鼠T淋巴细胞由Th1向Th2免疫偏移.
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补骨脂素联合长波紫外线A诱导HL-60细胞凋亡作用的研究
本研究探讨中药补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线A(ultraviolet A,UVA)(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60凋亡的作用及其可能的作用机制.采用MTT法观察PUVA对HL-60细胞增殖的影响;采用电子显微镜技术观察细胞超微结构改变;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率、线粒体跨膜电位水平以及细胞Fas、FasL蛋白的表达;荧光定量PCR技术检测细胞Fas、FazL mRNA的表达;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测caspase8、caspase 3蛋白的表达.结果表明,PUVA可抑制HL-60细胞的增殖,使凋亡率增加,作用呈时间、浓度依赖性;UVA照射时间15分钟和PSO浓度为80μg/ml 时,HL-60细胞增殖的抑制率、凋亡率达峰值;PUVA作用后HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变,细胞线粒体跨膜电位水平下降;PUVA作用4小时Fas mRNA的表达升高,FasL mRNA的表达下降;PUVA作用24小时Fas、FasL在蛋白水平的表达亦呈现相同规律;PUVA可使HL-60细胞caspase 8、caspase 3蛋白的表达增强,在作用后8小时强度达峰值.结论:PUVA能够抑制HL-60细胞的增殖.并诱导其凋亡,可能的机制是PUVA作用于Fas/FasL 系统,使Fas基因表达升高、FasL基因表达下降,激活下游caspase 8、caspase 3的表达,线粒体膜电位水平降低亦可能参与了这个过程.
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中西医结合疗法及综合护理治疗斑秃疗效观察
目的：观察中西医结合方法及综合护理措施治疗斑秃的临床疗效。方法2011年6月—2014年6月我科门诊诊治的120例斑秃患者随机分为两组，每组各60例。对照组给予外用卤米松乳膏、米诺地尔酊及PUVA光疗；试验组采用中西医结合治疗，在对照组基础上加用活力苏口服液、复方甘草酸苷片、中医针刺，并配合一系列综合护理措施。两组治疗周期均为12周。疗程结束后，分别计算斑秃恢复评分和治愈率。结果对照组治愈率为83.3%，试验组治愈率为95.0%，试验组治愈率显著高于对照组（P＜0.05）；试验组在第2周时评分已显著低于治疗前（P＜0.05），而对照组在第8周评分才显著低于治疗前（P＜0.05），且在第8周和第12周时，试验组评分也显著低于同期的对照组患者（P＜0.05，P＜0.01）。结论中西医结合加综合护理对斑秃疗效更佳，且不良反应更低，患者的生活质量提高。
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PUVA疗法新进展
PUVA疗法又称光化学疗法.本文讨论了PUVA疗法的专门知识、作用机理、具体操作过程、副作用,治疗银屑病和白癜风的疗效和目前进展.
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蕈样肉芽肿的分子生物学基础及相关治疗
蕈样肉芽肿(mycosis fungoides,MF)是皮肤T细胞淋巴瘤中为常见的一型[1].MF的治疗分为局部治疗和系统治疗2种:局部治疗即皮肤靶向治疗(skin-directed therapies,SDT):包括外用糖皮质激素、氮芥、补骨脂素(8-MOP)加长波紫外线照射(PUVA)和(或)中波紫外线(UVB)照射;系统治疗主要用于晚期患者,包括单一应用化疗药物或联合化疗、体外PUVA等.
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维生素D3类似物治疗银屑病的新进展
近10年来,维生素D3类似物导致了银屑病外用疗法的变革.已经证明体内活化的维生素D3类似物具有可靠的抗银屑病作用.钙泊三醇是银屑病一线治疗药物,联合其他几种抗银屑病药物如外用皮质类固醇、PUVA、环孢素和阿维A等效果更佳.
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补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导人白血病细胞凋亡时对线粒体膜电位的影响
目的 研究补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞K562、NB4凋亡时对线粒体膜电位的影响.方法 细胞与不同质量浓度PSO,接受或不接受UVA照射后共同培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果 PUVA处理后的K562、NB4细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,线粒体膜电位下降,PUVA的作用显著强于前两者(P
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中药熏蒸配合PUVA治疗寻常型银屑病的疗效观察与护理
目的:观察中药熏洗配合光化学疗法(PUVA)治疗寻常型银屑病的临床疗效.方法:将80例寻常型银屑病患者按入院先后顺序分为对照组和观察组各40例,对照组采用中药熏洗治疗,观察组采用中药熏洗配合PUVA治疗,治疗结束后分析临床疗效.结果:观察组近期总有效率为100%,治愈率为62.50%;对照组近期总有效率为87.50%,治愈率为37.50%.差异有显著性意义(P＜0.05).观察组远期治愈率为86.00%,复发率为29.50%;对照组远期治愈率为54.00%,复发率为49.88%.差异有极显著性意义(P＜0.01).结论:中药熏洗配合PUVA治疗寻常型银屑病疗效好,安全,复发率低,值得临床推广应用.
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生发酊合PUVA治疗斑秃30例
斑秃为现代都市常见病,我们依据斑秃的病因病机,自制生发酊,配合PUvA,同时内服斑秃丸治疗斑秃30例,疗效较显著,现将所治病例总结报道如下.
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PUVA诱导HL-60细胞凋亡时对Fas、FasL表达的影响
[目的]探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60凋亡时对Fas、FasL表达的影响.[方法]以HL-60细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理.[结果](1)PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60细胞发生凋亡,对照组、80 μg/mL PSO组、5 min UVA组及PUVA(80 μg/mL PSO+5 minUVA)组凋亡率分别为(10.60±0.31)%、(26.94±0.26)%、(28.53±0.05)%、(37.72±0.09)%,各组间P＜0.01,PUVA的作用明显强于前两者.(2)电镜下观察经PUVA处理后的HL-60细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变.(3)PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,上述四组Fas mRNA的表达量分别为(8.40±0.59)×103、(1.62±0.36)×105、(1.50±0.26)×105、(7.88±0.38)×106拷贝数/μ;Fas蛋白的表达量分别为(3.29±0.39)%、(18.73±1.22)%、(18.17±1.07)%、(47.03±1.36)%;FasL mRNA的表达量分别为(8.69±0.44)×107、(2.71±0.29)×107、(2.64±0.31)×107、(2.61±0.33)×105拷贝数/μg;FasL蛋白的表达量分别为(58.67±1.75)%、(37.40±1.73)%、(33.90±1.90)%、(15.60±1.42)%,各组间P＜0.01,PUVA的作用明显强于前两者.[结论](1)PUVA可诱导白血病细胞HL-60发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射.(2)PUVA诱导HL-60凋亡的途径之一为上调HL-60细胞FasmRNA表达水平,下调FasL mRNA表达水平.
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PUVA对HL-60细胞凋亡及线粒体膜电位的影响
[目的]研究补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)对人白血病细胞HL-60凋亡及线粒体膜电位的影响.[方法]HL-60细胞接受或不接受UVA照射后,在不同浓度PSO培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,多因素方差分析法进行统计学处理.[结果]PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态;PSO、UVA照射及PUVA在作用后24h均可使细胞凋亡率增加,Δψm下降,对照组、80μg/mL PSO组、5min UVA组及PUVA(80μg/mL PSO +5min UVA)组凋亡率分别为(10.60±0.31)%、(26.94±0.26)%、(28.53±0.05)%、(37.72±0.09)%;线粒体膜电位水平分别为388.47±6.35、173.17±10.89、200.00±2.91以及71.83±9.47,各组间P<0.01,PUVA的作用明显强于前两者.[结论]PUVA可诱导人白血病细胞HL-60发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位.
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PUVA诱导HL-60、NB4细胞凋亡时对Fas、FasL表达的影响
目的 探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞HL-60、NB4凋亡时对Fas、FasL表达的影响.方法 以HL-60、NB4细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果 PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60、NB4细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者.电镜下观察经PUVA处理后的HL-60、NB4细胞超微结构,可见明的凋亡形态学改变.PSO,UVA照射及PUVA均可上调HL-60,NB4细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者.结论 PUVA可诱导白血病细胞HL-60、NB4发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射.PUVA诱导HL-60、NB4凋亡的途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平.
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阿维A治疗泛发型连续性肢端皮炎1例
报道1例泛发型连续性肢端皮炎患者,予阿维A 30mg/d治疗3周后,全身皮损基本消退,仅双手10指仍见脓疱.随后将阿维A减为20mg/d,并加用PUVA治疗2周,患者痊愈.
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原发性皮肤间变大细胞淋巴瘤治疗进展
原发性皮肤间变大细胞淋巴瘤是间变大细胞性淋巴瘤的一种罕见类型,多见于50岁以上成年男性,临床上多以四肢单发或多发的实性结节、斑块和(或)肿块为首发表现,严重时可破溃形成溃疡,部分病损可自行消退;对于不能自愈而病灶局限者多选择手术切除或局部放疗;累及全身皮肤或皮肤以外者,多采用单药或联合化疗方案,其5～10年缓解率约90％以上,预后较好.全文就原发性皮肤间变大细胞淋巴瘤治疗进展进行综述.
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局部PUVA治疗白癜风52例疗效观察
目的 观察局部PUVA治疗白癜风的临床疗效.方法 将白癜风102例随机分为局部PUVA治疗组和0.1%甲氧沙林液对照组,观察两组治疗效果,进行临床疗效判定.结果 治疗组显效率69.23%,总有效率88.46%,均明显优于对照组(30%,60%),两组比较有统计学意义(P＜0.01).结论 局部PUVA治疗白癜风有较好的疗效.
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改良PUVA疗法治疗慢性斑块性银屑病疗效分析
目的:探索用改良PUVA疗法治疗慢性斑块性银屑病的疗效和安全性.方法:67例寻常型银屑病患者口服8-MOP0.6 mg/kg后照射UVA和UVB,每周3次,共治疗8周,用PASI积分评价疗效,并记录不良反应.结果:治疗开始2～4周后出现疗效,随着治疗时间的延长,PASI总积分逐渐下降,有效率逐渐提高,在治疗结束时痊愈率达到96.5%,有效率达100%.27例患者(40.3%)出现不良反应,绝大多数为轻度,没有因不良反应停止治疗的病例.结论:改良PUVA疗法治疗慢性斑块性银屑病具有良好疗效和安全性.
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NB-UVB和PUVA在银屑病治疗中的应用现状
应用NB-UVB和PUVA治疗银屑病已取得了令人满意的疗效,与其他方法联合应用不但可提高疗效,而且减少副作用的发生.本文就NB-UVB和PUVA治疗银屑病的作用机制、应用方法、临床疗效和副作用等进行综述.
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白癜风治疗进展
白癜风为病因不清,可能与遗传、自身免疫、神经精神化学等因素有关的获得性色素脱失性皮肤病.本病治疗相对困难,目前尚无特效治疗方法.近年来一些新的药物、新技术的出现,给白癜风的治疗带来了新的措施.本文对白癜风的治疗进展做一综述,以供临床参考.
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PUVA治疗51例白癜风患者的护理
白癜风(vitiligo)是一种常见的后天性色素脱失性皮肤病,因影响患者美观和社会交柱,患者的精神心理负担比较沉重,患者都希望能得到较好的治疗.
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PUVA诱导NB4、K562细胞凋亡时对Fas、FasL表达的影响
目的:探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病细胞NB4、K562凋 亡时对Fas、FasL表达的影响.方法:以NB4、K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理.结果:PSO,UVA照射及PUVA均可诱导NB4、K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者.电镜下观察经PUVA处理后的NB4、K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PUVA均可上调NB4、K562细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者.结论:PUVA可诱导白血病细胞NB4、K562发生凋亡,其作用强于PSO及UVA照射,作用途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平.
