首页 > 文献资料
-
编码微球悬浮芯片与改良ELISA鼠疫杆菌检测方法的比较研究
[目的]寻求快速、准确、简便的鼠疫杆菌检测方法.[方法]分别建立鼠疫杆菌编码微球悬浮芯片检测方法和改良ELLSA方法,并进行比较.[结果]悬浮芯片对F1抗原低可以检测到840pg/ml,检测鼠疫杆菌到1×103cfu/ml;用改良ELISA法检测,对F1低可以检测到53ng/ml,检测鼠疫杆菌到1×104cfu/ml.[结论]悬浮芯片检测比ELISA具有更高检测灵敏度,并且具有高效、快速、敏感、特异、低成本等优点.
-
中越河口-老街边境地区鼠传疾病病原的调查研究
[目的]掌握中越河口-老街边境地区鼠携带汉坦病毒、钩端螺旋体和鼠疫杆菌的情况.[方法]2008年11月和2009年4月在云南省河口县和越南老街市的居民区用鼠笼捕鼠,取鼠肺、肝和肾脏组织.从鼠肺中提取RNA,用RT-PCR方法扩增汉坦病毒核酸;从鼠肝和肾脏中提取DNA,用PCR方法分别扩增鼠疫杆菌和钩端螺旋体核酸.[结果]在河口-老街边境地区捕获黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠、小家鼠、臭鼳鼱和斯氏家鼠共198只,黄胸鼠数量多,占总数的79.8%;从老街黄胸鼠鼠肺中检测到3份汉坦病毒核酸,阳性率为4.41%;从河口黄胸鼠、褐家鼠和大足鼠鼠肾中共检测到7份钩端螺旋体核酸,河口黄胸鼠钩端螺旋体核酸阳性率为11.36%;未检测到鼠疫杆菌核酸.[结论]中越河口-老街边境地区鼠传疾病病原有汉坦病毒和钩端螺旋体,应加强当地鼠传疾病的监测.
-
建立快速检测鼠疫耶尔森菌的胶体金免疫层析法
[目的]建立检测鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)的胶体金标记免疫层析方法.[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并标记鼠疫杆菌的抗体,制成免疫层析检测试纸条,进行特异性和敏感性评价,并对面粉、土壤、奶粉、淀粉等不同材料进行模拟添加鼠疫菌检测.[结果]用多种不同的常见细菌或近缘细菌进行测试,未出现非特异性反应,检测鼠疫杆菌的灵敏度为1×105cfu/ml,对水、土壤、奶粉、面粉、淀粉、酵母粉等不同材料中鼠疫杆菌进行检测也取得同样结果,10~15min即可得到结果.[结论]建立了1种可以用于现场快速检测鼠疫杆菌的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础.
-
首例入境集装箱中发现疑似鼠疫感染死鼠的检测
目的:通过对入境集装箱中发现的死鼠进行实验室检测,加强叫岸对入境啮齿动物携带鼠疫杆菌的监测力度.方法:分别用胶体金和PCR方法对入境集装箱中发现的死鼠进行鼠疫杆菌检测.结果:该样本鼠疫杆菌F1抗原阳性,pla基因和fra基因PCR扩增均为阳性,判定该样本为疑似鼠疫杆菌感染.结论:在口岸一线加强对入境鼠类携带鼠疫杆菌检测具有重要意义.同时,应不断加强口岸公共卫生核心能力建没,加强公共卫生实验室建没及重大疫情检测技术储备.
-
2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究
[目的]寻求能够快速定性/定量检测4种传染病及其病原体的试验方法.[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(以下简称EHEC O157),评价方法的灵敏性、特异性.通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的"白色粉末"和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用.应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1 236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用.通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O157以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力.[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入"白色粉末"的样品灵敏性为1×104cfu/test,炭疽芽孢低检测限为1×105cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97%;鼠疫杆菌检测灵敏性为5×104cfu/ml,低检测菌数为5×103cfu/test,在107cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括近缘假结核耶尔森菌;EHEC O157检测灵敏性为1×103cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98%.胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157检测灵敏度分别为1×106cfu/ml、1×105cfu/ml、1×105cfu/ml,"白色粉末"等环境样品低可检测敏感性为1×105cfu,1×104cfu,1×104cfu/test.胶体金免疫层析方法分别应用于炭疽、鼠疫强毒株的检测,检测限为5×104cfu/test和7×104cfu/test.在实际血清样品检测中,与间接血凝方法对比,鼠疫抗体UCP和胶体金免疫层析方法有更好的敏感性.血清样品检测显示,SARS抗体的胶体金和UCP免疫层析方法均有较好的特异性和敏感性.[结论]2种免疫层析方法都有快速、敏感、特异的特点:上转磷光免疫层析方法可实现定量检测,敏感性优于胶体金免疫层析法;炭疽检测与加拿大RAMP检测系统相当;胶体金免疫层析法具有简便、直观、易行的特点.2种免疫层析方法均适合于炭疽芽孢芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157、鼠疫杆菌抗体、SARS抗体的现场检测和筛查.
-
鼠疫检测法
鼠疫是中国法定甲类传染病.在香港,我们将鼠疫的病原体-鼠疫耶氏菌或称鼠疫杆菌分为第3类危害群,即高危害病原体.所有检查的程序,必须在设有严格防护措施的专用实验室内进行.
-
几种消毒剂在鼠疫实验室的应用研究
为筛选适合鼠疫实验室应用的化学消毒剂,采用载体和悬液定性试验对8种化学消毒剂,分别进行杀灭鼠疫杆菌效果测定,并进行了实际应用研究.结果,所试验的各种消毒剂对载体上和悬液内鼠疫杆菌均有较好的杀灭作用.用1 000 mg/L以下含氯消毒剂和过氧化物类消毒剂可作为生物实验室防护服装消毒和污染器材的消毒.2 000 mg/L以上浓度可用于含菌平皿等污染物品消毒.所有消毒剂对动物脏器内鼠疫杆菌杀灭效果均不好.
-
对来自马达加斯加的鼠疫杆菌进行系统生物地理学和分子流行病学分析
鼠疫杆菌各菌株间高度的遗传相似性导致对其进行系统生物地理学和分子流行病学研究面临较大困难.马达加斯加是鼠疫的高发国家,研究者在马达加斯加的25个区域收集了1939-2005年间分离得到的262株菌株,在全基因组水平上选取了56个单核苷酸多态性(SNP)以及43个可变数目串联重复序列(VNTR)位点,测定所收集菌株的上述SNP及VNTR标记数据,采用邻位法构建系统树,研究马达加斯加中鼠疫的扩散模式和不同亚型的地理分布特征.与SNP差异相比,研究者发现VNTR有着更高水平的多态性.
-
"人见死鼠如见虎"--鼠疫的三次世界性大流行
鼠疫(plague)又名黑死病,是鼠疫杆菌引起的一种烈性传染病.在历史上,以其危害惨烈给人类造成巨大灾难.鼠疫是典型的自然疫源性疾病.病原体广泛寄居于鼠类及旱獭等野生啮齿动物体内,由带菌跳蚤叮咬引起人类鼠疫,发生腺鼠疫、肺鼠疫及败血症型鼠疫,临终病人因严重呼吸困难和缺氧,造成皮肤出血坏死,患者皮肤呈紫黑色,故有黑死病之称.在鼠疫暴发流行期间,人和鼠大量死亡,尸陈街巷,惨象绝伦,令见者惧惧,谈鼠变色.在人类的历史上,古今中外都有大量的诗文和绘画,描述鼠疫大流行时的恐怖景象.
-
鼠疫杆菌基因测序已完成
英国桑格中心的科学家近日宣布完成了鼠疫杆菌的基因组测序工作,这将有助于研究该病菌的进化过程,为这种烈性传染病寻找新的抗菌药和疫苗.桑格中心的科学家在新一期英国<自然>杂志上报告说,他们从一位于1992年死于肺炎型鼠疫的人身上收集到一种称为"C092"的鼠疫杆菌菌株,对之进行了测序.这一菌株的染色体约包含465万个碱基对,其中约3.7%的序列是重复的,还有约150个已经不起作用的假基因,以及一些可能导致疾病的染色体片段.鼠疫杆菌基因组特征表明,这种病菌在进化的过程中,曾经频繁地从其它微生物获取新的基因,本身的染色体片段也经常发生重组.这些过程可能是病菌迅速进化的关键.科学家认为,鼠疫杆菌是由一种生活在动物肠道、危害性相对较小的微生物--假结核耶尔森氏菌进化来的,而且产生的历史已有几千年.可能正是通过从其它微生物窃取基因及自身染色体片段重组的过程,鼠疫杆菌在极短的时间里获得了在啮齿类哺乳动物和跳蚤之间转移的能力,并学会了在血液里生存.跳蚤将鼠疫杆菌传播给人类,引起肿胀、出血、咳嗽等症状,然后迅速导致死亡.研究人员希望对鼠疫杆菌的多种菌株及与它亲缘关系较近的其它病菌进行测序,通过对比研究,更好地了解鼠疫杆菌的特性和进化过程.摘自<中国病理学网>
-
溴敌隆青稞毒饵现场灭鼠效果观察
石渠县是鼠疫疫区,1997年省鼠疫疫源调查队曾分离出鼠疫杆菌.为控制鼠疫流行,我们进行了现场灭鼠试验.
-
口服鼠疫F1-Ⅴ重组融合蛋白活菌疫苗的构建及免疫效果的初步研究
鼠疫耶尔森菌能产生很多由染色体或质粒编码的毒力因子,包括pgm、pst、Yops、F1抗原、Ⅴ抗原等[1].F1和V抗原已被证实为主要保护性抗原,且存在属间保守性,F1-Ⅴ融合抗原分子在免疫原性和免疫保护性上具有叠加效应,将两者联合接种可保护小鼠抵抗109 LD50强度攻击[2].在鼠疫杆菌基因组、蛋白组和功能基因组研究的基础上,F1和Ⅴ是鼠疫新型疫苗研究首选的保护性抗原分子的靶标.
-
鼠疫耶尔森菌重组质粒pVAX1/Fl-V的构建及其免疫效果的研究
目的获得含有鼠疫F1和v抗原编码基因的重组真核表达质粒pVAX1/F1-V,并测定其诱导特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因,分别与pGEM-T连接测序,构建pVAX1/F1-V融合重组质粒,转染Cos-7细胞,用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达,重组质粒pVAX1/F1-V加GM-CSF佐剂免疫BALB/c小鼠,观察免疫效果,400个半数致死量(LDso)强毒鼠疫菌皮下攻毒观察保护率.结果 pVAX1/F1-V在Cos-7细胞中表达,免疫鼠体内产生特异性抗体,通过抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主,攻毒保护率达60%.结论成功构建F1-v融合蛋白真核表达载体,具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,对强毒鼠疫菌皮下攻毒有一定的保护效力,为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础.
-
对天花可能出现的人为灾难应有准备
"9.11"灾难和炭疽杆菌感染的人为扩散事件之后,烈性传染病的病原体可能作为生物战剂威胁人类的议论又起波澜.被调查的西方公众认为:"炭疽事件仅仅是一个大阴谋的前奏";美国政府更认为:"必须做好对付生物恐怖威胁的准备.""除炭疽杆菌外,天花病毒、鼠疫杆菌、埃博拉出血热等若作为生物武器,其危险性毫不逊色."本文重点对1999年5月召开的第52届世界卫生大会批准"迟于2002年底准备销毁储存的天花病毒"决议后的有关情况作一点述评.
-
鼠疫杆菌F1抗原结构基因caf1在酿酒酵母中的同源重组及初步鉴定
目的研究新型的防治鼠疫的基因疫苗.方法将鼠疫杆菌F1抗原结构基因caf1构建至pHSS6-mTn-3xHA/lacZ转座文库质粒中,将此重组质粒经Not I酶切线性化,然后以醋酸锂法转化至酵母细胞中进行同源重组,再以尿嘧啶缺陷型培养基对阳性转化子进行筛选.结果转化子经菌落PCR方法分析鉴定,证明其为重组阳性转化子.结论以同源重组方式构建酿酒酵母表达系统,用以表达鼠疫杆菌F1表面抗原,为经消化道途径实现对鼠疫的基因防治创造条件.
-
蚤类传播鼠疫机制的发现
人类历史上发生过3次世界性鼠疫大流行,丧生人口超过历次战争造成的死亡人数总和.恐怖的幽灵困扰人们上千年,直到1894年,耶尔森( Alexandre Yersin)在香港发现并且正确鉴定了鼠疫杆菌—耶尔森氏菌( Yersionia pestis),才揭开鼠疫神秘的面纱,鼠疫研究开始了真正的科学进程.
-
拜耳制药莫西沙星获 FDA 批准用于鼠疫方面的应用
瘟疫是一种罕见而潜在致命的细菌性感染。鼠疫在世界大部分地区(包括美国在内)是极其罕见的,全球每年发生的病例有1000-2000例。鼠疫的3种常见形式是腺鼠疫(淋巴结感染)、肺炎性鼠疫及败血症性鼠疫。鼠疫可通过感染跳蚤的咬伤、接触感染的动物或人类、或实验室暴露而传播给人类。引起鼠疫、鼠疫杆菌的细菌被认为是一种生物威胁媒介,可潜在用作一种生物恐怖主义媒介。近日,FDA 批准拜耳医疗保健制药莫西沙星用于鼠疫包括这款药物在肺炎型鼠疫(肺部感染)及败血症性鼠疫(血液感染)方面的应用。Avelox 还获批用于成年鼠疫患者的预防。“今天的批准为鼠疫治疗提供了一种额外的疗法,”FDA 药物评价与研究中心抗菌产品办公室主任、医学博士、公共卫生学硕士 Cox 称。FDA 根据该机构的《动物效验规章》批准莫西沙星,如果在人身上进行试验不可行或不道德,《动物效验规章》可允许使用充分及良好控制的动物研究疗效结果。由于鼠疫是这样的一种罕见疾病,因此在人身上进行充分的疗法试验是不可能的。莫西沙星的批准基于在实验室条件下感染了鼠疫杆菌的非洲绿猴身上进行的一项疗效研究。在感染了鼠疫杆菌并开始发烧之后,动物被随机选择接受10d 的莫西沙星或安慰剂治疗。主要终点是研究末期生存期。所有以莫西沙星治疗的猴子生存下来。以安慰剂治疗的猴子均死亡。莫西沙星的安全性在临床研究及该药物现有临床应用的上市后信息中有描述。
-
分子变化铸成“杀手”鼠疫杆菌
科学家一直试图弄清楚,著名的“杀手”细菌--鼠疫杆菌是怎样一步步“炼”成的。《自然-通讯》杂志公开的一项遗传学研究显示,能造成鼠疫的细菌鼠疫杆菌,首先形成可以造成致命肺病的能力,然后才形成其高度传染的性质。而决定二者之间转变的是相对简单的分子变化,说明其他呼吸道病原体也可以通过一个相似的路径形成。
-
鼠疫远距离传播的探讨
鼠疫是鼠疫杆菌引发的致死性极高的恶性传染病,被列为我国甲类传染病之首.鼠疫的传染性极强,病死率高.20世纪80年代,印度暴发了一场鼠疫,造成500多亿美元的经济损失.此后,马达加斯加、乌干达等国也相继暴发了鼠疫流行,鼠疫每次的大流行都伴随着鼠疫的远距离传播[1-11],故本文对鼠疫的远距离传播进行探讨.
-
鼠疫自然疫源地调查预防方法
鼠疫(Plague)是由鼠疫杆菌经跳蚤或其他传播途径而引起的一种危害人类严重的烈性自然疫源性传染病.本病原在啮齿动物间流行,仅在一定条件下通过病鼠、带菌蚤或其他途径将鼠疫杆菌传给人,造成人间鼠疫,预防不当可致广泛大流行,历史上有过惨痛的教训.