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2007-2013年出入境人群丙肝实验室检测结果分析及检测流程探讨
目的 了解酶联免疫吸附实验检测丙肝(HCV)的可信区间,探讨针对出入境人群有效的抗-HCV检测流程.方法 收集四川、广东、云南、辽宁、深圳等国际旅行卫生保健中心2007-2013年出入境体检者的部分血清样本183份,用ELISA、免疫印迹、RT-PCR的方法分别进行检测,对3种方法检测的结果进行分析比较.结果 免疫印迹试验共检出确认阳性152例,不确定2份,阴性29份;ELISA法阳性且确证结果为阳性的样本为152例,ELISA阳性确证不确定为2份,ELISA阴性确证阴性为29份,外籍人士和中国籍人士核抗原、NS3-1、NS3-2、NS4、NS5阳性率分别进行比较,显示差异无统计学意义.丽珠试剂在S/CO值≥6时,阳性预测值为100％,丽珠试剂S/CO比值＜3时,无确证为阳性的标本;采用荧光定量PCR检测183份样本的核酸含量,阳性共134例,阴性49份.结论 ELISA试剂检测S/CO值≥6时与WB确证阳性结果有较高的符合性,外籍人士和中国籍人士HCV阳性免疫印迹条带分布无明显差异,抗-HCV结果能部分反映HCV复制状态,但抗-HCV并不与HCV RNA结果平行或同步.根据本研究的数据分析,绘制出适用于出入境检验检疫机构的HCV检测流程图.
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增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体的组织病理学及其转化生长因子β2的表达
目的 观察玻璃体视网膜病变玻璃体的组织病理及玻璃体中转化生长因子β2(TGF-β2)在不同级别增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中的表达及其浓度变化,探讨PVR发病过程中TGF-β2与PVR等级的相关性.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附剂测定法(ABC-ELISA)检测玻璃体切割术中干抽获得的30例玻璃体中TGF-β2的表达和含量,应用两样本近似t'检验和直线相关分析判断TGF-β2含量与PVR等级的相关性.另3例标本取自玻璃体切割机集液盒、离心集液盒中液体,取沉淀物,用石蜡包埋,按常规制作病理切片,观察病变玻璃体中的细胞形态,并使用链霉亲和素-生物素复合物(SABC)免疫组织化学方法染色,观察TGF-β2在细胞间质和细胞上的表达.结果 PVR玻璃体中有多种细胞成分和胶原纤维,并散布色素颗粒.细胞以上皮样细胞和成纤维样细胞居多.玻璃体中TGF-β2在细胞间质和上皮样细胞均有棕黄色阳性表达.ELISA显示各组之间TGF-β2含量比较差异有统计学意义(P《0.001).TGF-β2含量和PVR等级存在直线相关关系,相关系数r=0.868,具有统计学意义(P《0.001).结论 玻璃体视网膜病变中,组织病理学改变表现为视网膜色素上皮细胞和成纤维细胞增生.玻璃体内有TGF-β2表达,不同PVR等级玻璃体中TGF-β2含量差异有显著性,其含量与PVR等级具有正向相关性,可能是由于RPE细胞的增生致使分泌TGF-β2增多引起的.
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血清IL-5、TNF-α检测对慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床意义
目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重期外周血白细胞介素-5(IL-5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)指标变化.方法 选择在我院住院的COPD急性加重期患者70例,开始治疗前采用ELISA方法检测血清IL6、TNF-α水平,并与同期住院的70例COPD缓解期患者和70例健康体检者的检测结果进行比较.结果 COPD急性加重期患者IL-5、TNF-α浓度明显高于COPD缓解期组和对照组(P＜0.05),同时COPD缓解期患者血清IL-5、TNF-α浓度也明显高于健康对照组(P＜0.05).结论 COPD急性加重期患者IL6、TNF-α明显升高,提示均参与了COPD的发生、发展；COPD缓解期虽然炎症明显减轻,但细胞因子仍持续升高并持续引起组织损伤.IL6、TNF-α等细胞因子的监测对COPD的治疗有重要临床意义.
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酶免疫测定进展
1971年瑞典斯德哥尔摩大学的Engvall和Perlmann[1]与荷兰Organon Tecknika公司的van Weemen和Schuurs[2]分别发表了首创的以酶作为标记物的免疫测定(enzyme immunoassay,EIA);瑞典学者称之为"酶联免疫吸附剂测定"(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA),因为测定中应用了固相吸附剂以便于分离"游离的"和"结合的"酶结合物.1974年Voller等在《世界卫生组织公报》上发表了以实验室中通用的8×12孔塑料微量滴定板(简称微板)为固相的ELISA方法检测血清中疟疾抗体的报告等[3],展示了ELISA在医学检验中广阔的应用前景.其后世界卫生组织在各国举办了"ELISA讲习班".1978年在上海和北京的讲习班上,Voller和Bidwell作了讲演.这一活动促进了国内开展ELISA的研究和应用.1983年用ELISA检测乙型肝炎标志物的研究报告发表[4],推动了国产ELISA试剂的大规模生产和广泛的临床应用.
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血清IL-8、TNF-α及IGF-Ⅰ检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床意义
目的 观察慢性阻塞性肺病(COPD)患者急性加重期外周血白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)指标变化.方法 选择我院住院的COPD急性加重期患者60例,开始治疗前采用ELISA方法检测血清IL-8、TNF-α及IGF-Ⅰ水平,并与同期住院60例COPD缓解期患者和60例健康体检者进行比较.结果 COPD急性加重期患者IL-8、TNF-α及IGF-Ⅰ浓度明显高于COPD缓解期组和对照组(P＜0.05),同时COPD缓解期患者血清IL-8、TNF-α及IGF-Ⅰ浓度也明显高于对照组(P＜0.05).结论 COPD急性加重期患者IL-8、TNF-α及IGF-Ⅰ明显升高,其参与了COPD的发生、发展.COPD缓解期虽然炎症明显减轻;但细胞因子仍持续升高并持续引起组织损伤.IL-8、TNF-α、IGF-Ⅰ等细胞因子的监测在慢性阻塞性肺疾病的诊疗指导中有重要临床意义.
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儿童急性呼吸道肺炎支原体感染流行特点及与气候因素的关系探讨
目的 探讨儿童急性呼吸道肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染流行特点及与气候因素的关系.方法 选择2006年1月-2009年12月因急性呼吸道MP感染住院的患儿8 368例,运用实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测鼻咽部分泌物中MP基因片段,采用定量酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清中MP特异性抗体,同时收集2006-2009年苏州地区有关气象资料.计数资料组间率的比较采用x2检 验,各气象因素间的交互作用,自变量的筛选,则采用逐步回归分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 MP感染总阳性率为32.9％,2006-2009年分别为25.6％、29.0％、36.7％、40.0％,年度之间比较差异有统计学意义(x2=127.96,P＜0.05).春、夏、秋、冬季分别为31.8％、38.8％、37.4％、23.3％,不同季节MP感染阻性率比较差异有统计学意义(-139.77,P＜0.05).MP感染好发于每年的5-11月,即夏秋季节,流行月份(2009年11月)可高达55.4％.MP感染与月平均气温呈正相关(r=0.529,P＜0.05),与其他气候因素无相关性.结论 MP是儿童急性呼吸道感染的主要病原之一,不同季节感染率不同,气候因素尤其是温度,对MP的流行起着重要作用.
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济南市无偿献血者HBV感染情况分析
目的 分析济南市无偿献血者HBV感染情况,为隐匿性乙型肝炎(乙肝)的检测提供依据.方法 选择2010年6月-2012年12月采集的无偿献血者血液标本207705份,均经酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查,经筛查后HBsAg、抗-HCV和抗-HIV-1/2无反应性及仅1种试剂为反应性的标本共203606份,进行核酸扩增技术(nucleic acid amplification techniques,NAT)检测.结果 ELISA检测HBsAg阳性1059份,阳性率0.510％;NAT检测NAT阳性130份,阳性率0.064％.检出HBV DNA阳性标本74份,阳性率64.910％.结论 HBV感染仍是导致血液淘汰的重要原因之一,通过NAT检测,可以极大地增加隐匿性乙肝的检出率,降低血液残余风险.要加强采血前征询及HBsAg快检工作,提高实验室检测水平,确保血液安全.
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中和确证试验对ELISA两步法HBsAg阳性结果的风险评价
我国采供血实验室将乙型肝炎表面抗原(HBsAg)作为HBV感染的常规检测指标,使用2种不同的酶联免疫吸附试剂进行筛查.但是由于不同厂家生产的试剂灵敏度和特异性存在差异,往往出现不同试剂对弱阳性标本检测结果不一致的情况,由此可导致不同程度的漏检或假阳性.血液安全至关重要,我们通过对85例HBsAg ELISA阳性标本的确证试验,分析ELISA阳性与确证阳性的符合性,评价国产HBsAg ELISA两步法试剂的检测效能,现将结果报告如下.
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ELISA法检测Zeta链联合血红蛋白电泳对地中海贫血筛查的价值
目的 探索适用于农村地中海贫血(thalassemia,地贫)的筛查模式.方法 对南宁市郊农村750对育龄夫妇行血常规检测,平均红细胞体积(mean cell volume,MCV)下降者定义为地贫表型阳性.夫妇一方或双方地贫表型阳性者联合酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测Zeta链和国产电泳仪行血红蛋白电泳,与地贫基因结果进行比对.结果 750对育龄夫妇中,261对(34.8％)夫妇任一方地贫表型阳性,接受Zeta链和血红蛋白电泳检测.97对夫妇一方HbA2增高者行β地贫基因检测,检出4对(0.41％)β地贫高危夫妇,即夫妻双方均携带β地贫基因,电泳结果与基因检测结果一致.α地贫基因检测结果表明,119例(22.7％)受试者携带--SEA.Zeta链诊断--SEA的漏诊率为5.9％(7例,其中5例为HbH病患者),误诊率为0.5％(2例).以夫妇双方任一方Zeta阳性为标准,11对α地贫高危夫妇均可筛查出.结论 ELISA法检测Zeta链联合血红蛋白电泳法是一种有效、经济、方便、易于在农村地区应用的地贫筛查模式.
