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金标银染文献资料
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基于酪胺信号放大和金标银染的致病菌生物芯片检测方法的灵敏度评价研究
目的 对基于酪胺信号放大和金标银染技术的致病菌可视化生物芯片检测方法进行评价.方法 以伤寒沙门氏菌和痢疾志贺菌作为检测对象,建立生物芯片的TSA-金标银染高灵敏度可视化检测技术,优化试剂浓度、反应温度、温育及银染时间等检测条件,比较了TSA-金标银染与单独金标银染、TSA-金标银染与TSA-荧光的检测灵敏度.并对进口水产品样品进行了伤寒沙门氏菌和痢疾志贺菌的应用检测.结果 检测条件优化结果为:Streptavidin-HRP稀释比例为1∶1 500,Biotin-Tyramine稀释比例为1∶200+ 0.5％ H2O2,Streptavidin-Nanogold稀释比例为1∶100；温育温度37℃,温育时间20 min,银染显色时间8～10min.TSA-金标银染比单独金标银染的检测灵敏度提高10～100倍,与TSA-荧光的检测灵敏度相同,达到103 CFU/ml.检测进出口水产品样品伤寒沙门氏菌和痢疾志贺菌结果与SN标准方法检测结果一致.结论 基于酪胺信号放大和金标银染技术的致病菌可视化生物芯片检测方法,为致病菌低成本快速检测提供了新思路.
