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2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究
[目的]寻求能够快速定性/定量检测4种传染病及其病原体的试验方法.[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(以下简称EHEC O157),评价方法的灵敏性、特异性.通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的"白色粉末"和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用.应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1 236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用.通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O157以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力.[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入"白色粉末"的样品灵敏性为1×104cfu/test,炭疽芽孢低检测限为1×105cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97%;鼠疫杆菌检测灵敏性为5×104cfu/ml,低检测菌数为5×103cfu/test,在107cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括近缘假结核耶尔森菌;EHEC O157检测灵敏性为1×103cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98%.胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157检测灵敏度分别为1×106cfu/ml、1×105cfu/ml、1×105cfu/ml,"白色粉末"等环境样品低可检测敏感性为1×105cfu,1×104cfu,1×104cfu/test.胶体金免疫层析方法分别应用于炭疽、鼠疫强毒株的检测,检测限为5×104cfu/test和7×104cfu/test.在实际血清样品检测中,与间接血凝方法对比,鼠疫抗体UCP和胶体金免疫层析方法有更好的敏感性.血清样品检测显示,SARS抗体的胶体金和UCP免疫层析方法均有较好的特异性和敏感性.[结论]2种免疫层析方法都有快速、敏感、特异的特点:上转磷光免疫层析方法可实现定量检测,敏感性优于胶体金免疫层析法;炭疽检测与加拿大RAMP检测系统相当;胶体金免疫层析法具有简便、直观、易行的特点.2种免疫层析方法均适合于炭疽芽孢芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157、鼠疫杆菌抗体、SARS抗体的现场检测和筛查.
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252Cf放射性同位素中子源辐照杀灭炭疽杆菌的理论研究
目的 研究252Cf放射性同位素中子源辐照杀菌的可能性.方法 通过MCNP模拟计算方法,推算其所使用的模型,计算出252Cf中子辐射杀灭炭疽杆菌芽孢的辐照剂量和辐照时间.结果 经MCNP理论模拟研究,建立了MCNP模拟252Cf中子源产生的中子辐射消毒的模型,推演出使用石蜡作为反射材料可取得好的结果.计算出用252Cf中子辐射杀灭炭疽杆菌芽孢的辐照剂量为1000 Gy,辐照时间为18 min.结论 利用252Cf中子辐射杀灭炭疽杆菌芽孢具有实际应用的可能性.
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炭疽芽孢杆菌重要生物活性基因及其调控
一、炭疽芽孢杆菌在自然界的生存及致病作用概述炭疽(anthrax)是由炭疽芽孢杆菌(bacillus anthracis)引起的一种人兽共患病,主要发生在牛及其他食草哺乳动物,患者通过接触被感染的动物和存在于空气、土壤中的炭疽杆菌芽孢发病,一般不形成人与人的直接传播.
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PCR检测炭疽杆菌芽孢的原理及其应用
炭疽杆菌是一种人畜共患的致病菌。经消化道、呼吸道或皮肤接触而使人致病。其中皮肤炭疽是常见的形式，易发生于接触污染的动物或动物制品的工业或农业部门中。建立一种检测动物制品或环境中发生炭疽和确定危险地区。目前许多传统的检验方法，包括细菌分离培养，溶血性实验，荚膜染色，噬菌体裂解实验，串珠实验等虽较为特异，但完成需要时间长，且必需大量纯化细菌。而近年来发展起来的PCR技术提供了一个快速鉴定标本中存在炭疽杆菌芽孢的可靠方法。本文综述了PCR检测炭疽杆菌芽孢的原理及其技术应用。
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炭疽的基础和临床
炭疽(anthrax)是由炭疽杆菌引起的人畜共患性急性传染病,人类由于接触牛、羊、马等病畜或炭疽杆菌芽孢污染的皮毛而感染.本病的临床特征为皮肤病变,表现为皮肤的非化脓性无痛性溃疡、焦碳样结痂及周围组织广泛的非凹陷性肿胀和全身毒血症状,少数波及肺、肠、脑膜或形成败血症.
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内蒙古呼伦贝尔地区皮肤炭疽5例
2005年6月~2015年9月约11年间,内蒙古呼伦贝尔市海拉尔区传染病院传染科共收治皮肤炭疽5例,经流行病学调查、临床表现、实验室检查证实,均诊断为皮肤炭疽,现报告如下:例1 男,48岁,蒙古族,牧民,2005年6月5日因"右手臂红肿、发热5天,发黑1天"而入院,其病前1周曾有剥皮及食病死羊史,其剥皮时右手背、手臂有蚊虫叮咬史,因右手背发痒,继而出现局部红、肿、热、痒,后于本地外科就诊,于其右手臂行切开引流术,同时予抗炎治疗2天,术后切开处肿胀明显,且手腕部皮肤逐渐变黑而转入我院.查体:体温38.5℃.右手背、整个手臂可见皮肤充血、肿胀,尤其切口处肿胀明显,水肿处呈透明、柔软、微红.皮温高,右手腕部见一直径约2cm皮肤坏死区,色暗红,有触痛,中间呈黑色.右腋下淋巴结肿大.辅检:2005年6月6日血常规 WBC 18.1×109/L、GRAN 15.9×109/L;手臂部渗出物涂片查炭疽杆菌芽孢阳性.治疗给予抗炎治疗14天,同时予局部予1:2000高锰酸钾液冲洗、四环素软膏外涂.体温恢复正常,右手背、手臂红肿逐渐消退,25天后手腕、手臂部黑痂脱落而出院.
