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基因融合双价疫苗文献资料
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鼠疫耶尔森菌重组质粒pVAX1/Fl-V的构建及其免疫效果的研究
目的获得含有鼠疫F1和v抗原编码基因的重组真核表达质粒pVAX1/F1-V,并测定其诱导特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因,分别与pGEM-T连接测序,构建pVAX1/F1-V融合重组质粒,转染Cos-7细胞,用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达,重组质粒pVAX1/F1-V加GM-CSF佐剂免疫BALB/c小鼠,观察免疫效果,400个半数致死量(LDso)强毒鼠疫菌皮下攻毒观察保护率.结果 pVAX1/F1-V在Cos-7细胞中表达,免疫鼠体内产生特异性抗体,通过抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主,攻毒保护率达60%.结论成功构建F1-v融合蛋白真核表达载体,具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,对强毒鼠疫菌皮下攻毒有一定的保护效力,为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础.
