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结核分支杆菌KatG rpoB rpsL pncA耐药基因的检测
目的:结核病在许多国家出现回升的一个主要原因是细菌耐药性问题,随着联合药物治疗的使用,又出现了耐多药结核杆菌,使许多结核病病情进展迅速,难以治疗,增加了死亡率,为探讨耐药结核菌快速检测方法的临床应用价值,本文用PCR-SSCP检测结核分支杆菌耐药基因KatG rpoB rp sL pncA突变.
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药物对分枝杆菌低抑菌浓度快速测定方法的研究
采用分枝杆菌变色培养系统(方法见中华检验医学杂志2001,24:306),对耐多药结核杆菌(MDR-TB)和非结核分枝杆菌感染(MOTT)的MIC测定进行了分析.检测18株MDR-TB对克拉霉素(CLA)、阿奇霉素(AZI)、罗红霉素(ROX)、左氧氟沙星(LEV)、司帕沙星(SPA)、环丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFL)、卷曲霉素(CAP)、阿米卡星(AMI)、乙硫异烟胺(TH1314)、丙硫异烟胺(PTA)、多西环素(DOX)和米诺环素(MIN)13种抗生素的MIC及34株MOTT对MIN、OFL、 DOX、AZI、CLA、CIP、AMI、头孢西丁(CEF)和亚胺培南/西司他丁钠(IM)9种抗生素的MIC.
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耐多药及广泛耐药结核病的诊断与治疗
结核病患者感染的结核分枝杆菌经体外试验证实至少同时对异烟肼、利福平耐药,被称为耐多药(multidrug resistance,MDR).耐多药结核病(MDR-TB)包括原发性和获得性两种类型.原发性MDR-TB是由耐多药结核杆菌的传播引起的,而获得性MDR-TB是在治疗过程中出现的,这也是当前MDR-TB产生的主要原因.结核病患者感染的结核分枝杆菌经体外试验证实除至少同时对异烟肼、利福平耐药外,还对任何氟喹诺酮类药物产生耐药,以及3种二线抗结核注射药物(卷曲霉素、卡那霉素和阿米卡星)中的至少1种耐药,被称为广泛耐药(extensively drug resistance,XDR).MDR-TB的流行与传播使本已严峻的全球结核病防治形势变得更加紧迫,广泛耐药结核病(XDR-TB)的出现更是带来了前所未有的挑战.
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结核分枝杆菌异烟肼耐药性研究进展
近20余年来,由于耐药结核杆菌尤其是耐多药结核杆菌(MDR-TB)的肆意横行,各国的结核病疫情均呈回升趋势,全球发病率和死亡率不断升高[1].我国的耐药情况尤为严重.据统计目前初始耐药率为18.6%,获得性耐药率为46.5%,全国现有耐药的涂阳肺结核病人约42万;在全球对53个国家的耐药调查中,河南省的原发MDR-TB耐药率位居第2位.因此在WHO近公布的全球38个国家和地区的结核病耐药监测资料中,中国被列为"特别引起警示的国家和地区"之一[2].近年来,各国学者采用分子生物学技术对结核杆菌耐药机制进行深入研究,定位了结核分枝杆菌包括异烟肼在内的耐药基因的位置和基因突变位点,从而促进了第一代快速鉴定耐药突变菌株方法的建立和新型抗结核药物的开发.
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抗结核中成药--优福宁
结核病是由结核杆菌引起的慢性传染病,可累及全身多个脏器,但以肺结核为常见.近年来,结核病疫情又有新的增长势头,而且面临着耐多药结核杆菌的挑战.世界卫生组织通报,全球已有近20亿人口受结核菌感染,已有2000万结核病人,每年还在以新增加800万人的速度发展,其中95%是在发展中国家,每年有300万人口死于结核病.我国属于结核病高流行地区,疫情呈三高一低类型:患病率高,死亡率高,耐药率高,年递降率低.我国现有结核病人约600万,每年至少新增150万病人,每个传染源每年可传染10～15人,每年死于结核病的人数约25万,是单一病菌引起死亡多的传染源.结核病仍是当前严重危害人民健康的公共卫生问题.
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耐多药结核杆菌对二线抗结核药物的敏感性研究
目的 探讨耐多药结核杆菌对二线抗结核药物的敏感性.方法 选取2012年6月-2015年3月我院收治的结核感染复治患者44例的临床资料.将44株对异烟肼和利福平耐药的阳性结核菌株,复苏接种到罗氏培养基上,培养25 d.观察患者耐多药结核菌对不同二线抗结核单种药物敏感情况和多种药物敏感情况.结果 44株耐多药结核分枝杆菌对CPM、AMK、LOF、PAS的敏感率依次为72.73%、90.91%、63.64%、45.45%.结论 所纳入研究者对PAS敏感度较低,对CPM、AMK、LOF已表现出一定的耐药性,临床需引起足够的重视.
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耐多药结核杆菌与药物敏感菌株蛋白质比较
目的 比较结核分支杆菌耐多药菌株与药物敏感菌株在蛋白表达水平的差异,为进一步研究结核杆菌耐药的分子调控机制提供依据.方法 利用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)分离耐多药结核分支杆菌和结核分支杆菌药物敏感菌株总蛋白质,通过计算机图像分析软件比较分析电泳图谱,切取部分差异蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析.结果 发现27个蛋白质点具有明显差异,其中耐多药结核分支杆菌有6个蛋白质点明显表达上调.质谱分析发现,6个蛋白质点分别代表的蛋白质为无机焦磷酸酶、多肽脯氨酰基顺反同分异构酶A、延伸因子Tu、420个氨基酸的未知功能蛋白质、双加氧酶和转录调节蛋白(MoxR).结论 耐多药结核杆菌与药物敏感菌株在蛋白表达水平存在明显差异.
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开封市涂阳肺结核患者耐多药情况调查
目的 了解开封市涂阳肺结核患者的耐多药水平以及耐多药肺结核患者的病史特征,为制定耐多药结核病的防控策略提供参考依据.方法 对开封市2011年3-9月登记的442例涂阳肺结核患者留取痰标本进行传统罗氏培养和药敏试验,并对被诊断为耐多药的19例肺结核患者进行关于病史情况的问卷调查.结果 开封市涂阳肺结核患者的痰标本培养阳性率为95.5％( 422/442),总耐多药率为4.5％(19/422),新涂阳和复治涂阳肺结核患者耐多药率分别为1.5％(5/331)和15.4％(14/91).在耐多药涂阳肺结核患者中,47.4％( 9/19)耐HRS、4.21％(8/19)耐HRES.在耐多药复治涂阳肺结核患者中,100.0％(14/14)的患者有≥1年的病史.78 6％(11/14)有＞1个月的不规则治疗或中断治疗,50.0％(7/14)曾未完成规定疗程,50.0％( 7/14)的既往治疗次数≥2次.结论 虽然开封市涂阳肺结核患者的耐多药率低于全国平均水平,耐药谱较为集中,但复治涂阳肺结核患者的耐多药率仍然较高,耐多药的复治涂阳肺结核患者既往治疗依从性普遍较差,仍需要从提高基础DOTS质量方面进一步加强耐药结核病防治工作.
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南京地区结核分枝杆菌耐药性调查
目的 摸清南京地区常用抗结核药物的耐药情况,为结核病防治提供科学依据.方法 对2008年7月-2011年7月期间收集的临床分枝杆菌菌株,采用绝对浓度法检测对抗结核药物的敏感性.结果 从临床标本中共分离出抗酸分枝杆菌3 251株,其中结核复合群3 119株,占96.0％；非结核分枝杆菌132株,占4.0％.所有抗酸分枝杆菌对9种抗结核药的耐药率为:RIF(36.51％)、INH (45.19％)、SM(27.78％)、EB (12.58％)、DIP (10.49％)、LVX (16.70％)、PAS (6.61％)、AMK (7.69％)、CPM (5.44％).结核复合群中耐多药结核菌(MDR-TB)占28.70％;广泛耐多药结核菌(XDR- TB)占4.55％.结论 南京地区结核杆菌的总体耐药趋势得到了一定程度的控制,但XDR- TB比率较高,应加强重点监测.
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肺结核流行状况分析
肺结核是由结核杆菌侵入人体引起的一种慢性消耗性传染病[1].由于耐多药结核杆菌的出现,结核病有可能再度成为不治之症.结核病疫情下降十分缓慢,据2000年全国流调结果,活动性和涂阳肺结核的患病率分别为367/10万和122/10万,与1990年比较,年递降率分别为5.4%和3.2%,因此肺结核仍是一个严峻的社会公共卫生问题.为了解正阳县肺结核的发病情况、制定肺结核的防治对策并进一步控制本病的流行提供参考依据,现将2003年正阳县肺结核发病流行情况分析报告如下.
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耐多药结核杆菌对二线抗结核药物的敏感性观察
目的:观察耐多药结核杆菌对二线抗结核药物的敏感性.方法:收集44例结核感染复治患者的痰液标本,将44株对异烟肼和利福平耐药的阳性结核菌株,复苏接种到罗氏培养基上,培养25d.观察耐多药结核菌菌株对二线抗结核药物的敏感性.结果:44株耐多药结核菌对氨基水杨酸(PAS)耐药率高(54.55％),其次为左旋氧氟沙星(LOF)36.36％和卷曲霉素(CPM)27.27％,对丁胺卡那(AMK)耐药率低(9.09),显著低于其余3种药物(均P<0.05);二联用药中,对CPM+PAS方案耐药率高(27.27％),显著高于其他方案(P<0.05),其次为CPM+LOF方案(18.18％),对CPM+LOF+PAS+AMK四联方案无耐药性(0.00％).结论:耐多药结核杆菌对AMK、CPM敏感度较高,对于PAS、LOF存在一定的耐药性,临床需引起足够的重视.
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67例耐多药肺结核病人的治疗效果观察
目的 观察并总结耐多药肺结核患者采用左氧氟沙星、微卡(冻干治疗用母牛分枝杆菌菌苗)联合治疗的效果. 方法 将临床确定为耐多药肺结核67例随机分为观察组和治疗组,其中观察组34例采用3PZ+丙硫异烟胺+卷曲霉素+左氧+微卡/15力克肺疾+丙硫异烟胺+左氧;对照组33例采用3PZ+丙硫异烟胺+卷曲霉素/15力克肺疾+丙硫异烟胺方案,以探讨左氧氟沙星、微卡联合治疗耐多药肺结核疗效. 结果 观察组和对照组18月后痰菌阴转率分别为61.8%、36.4%,差异有统计学意义. 结论 左氧氟沙星、微卡联合治疗耐多药肺结核可取得满意疗效,值得进一步推广使用.
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MGIT960法和绝对浓度法对耐多药结核杆菌药敏检测结果比较
目的 评价MGIT960法和L-J绝对浓度法在耐多药结核杆菌(MDR-TB)药敏实验中的临床应用价值,确定一种快速准确的药敏检测方法. 方法 收集兰溪市2010-2011年间痰培养阳性,经菌种鉴定和异烟肼、利福平药敏试验确定为耐多药的结核杆菌菌株,采用MGIT960法和L-J绝对浓度法对一线抗结核药物链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和二线抗结核药物卷曲霉素(CPM)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)和乙硫异烟胺(ETH)进行药物敏感性检测,比较两种检测方法的一致性. 结果 212例阳性标本中分离出耐药菌株118例,经一线药敏试验确定为耐多药的菌株80例,占总耐药率的67.8％.MGIT960法和L-J绝对浓度法进行药物敏感性检测,符合率除ETH以外均在80％以上,以绝对浓度法为金标准,MGIT960法的敏感度和特异度分别是SM 100％和93％,EMB 86％和81％,OFX 93％和88％,KAM 92％和94％,ETH 100％和56％,CPM 88％和87％. 结论 MGIT960法与L-J绝对浓度法对耐多药结核杆菌药敏检测结果除了ETH以外均具有很好的一致性,为耐多药患者一／二线药敏检测提供快速有效的诊断方法.
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月华胶囊对耐多药结核分枝杆菌抑菌效力的体外研究
目的探讨传统方剂月华丸剂改为月华胶囊体外对耐多药结核菌的作用.方法采用试管稀释法:①将药物做连续2倍稀释,观察当菌液浓度不变时,不同浓度月华胶囊溶液对耐多药结核菌的抑制作用;②将耐多药结核菌做几何级稀释,观察当药液浓度不变时,不同浓度的耐多药结核菌对月华胶囊溶液的敏感性.结果①月华胶囊溶液对耐多药结核菌的低抑菌浓度(MIC)250mg/mL;②耐多药结核分枝杆菌对月华胶囊溶液敏感的高菌量浓度为10-2mg/mL.结论月华胶囊溶液在试管中对耐多药结核杆菌有一定的抑制作用.
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结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区耐药结核杆菌耐药性的相关性研究
目的：探讨结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆耐药结核杆菌耐药性的相关性。方法：新疆耐异烟肼、耐利福平、耐链霉素、耐乙胺丁醇、耐多药结核杆菌及药物敏感菌株分别行RT－PCR，测原始状态及抗痨药物选择压力下PhoP和PhoR基因表达及差异；复制各菌株动物模型并从肺、肝、脾分离菌株，测PhoP和PhoR基因表达及差异。结果：耐药结核杆菌PhoP和PhoR基因转录水平较药物敏感菌株显著升高；各菌株药物选择压力作用下PhoP和PhoR基因转录水平较原始状态显著上调；各动物模型肺、肝、脾分离菌株PhoP和PhoR基因转录水平较原始状态显著升高。结论：结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区耐药结核杆菌的耐药性具有相关性。
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MGIT960法和绝对浓度法对耐多药结核杆菌药敏检测比对分析
目的：评价MGIT960法和绝对浓度法（ L-J法）在耐多药结核杆菌药敏试验中的临床应用价值，确定一种快速准确的药敏检测方法。方法收集痰培养阳性，经菌种鉴定和异烟肼、利福平药敏试验确定为耐多药的结核杆菌菌株，采用MGIT960法和L-J法对一线抗结核药物链霉素（ SM）、乙胺丁醇（ EMB）和二线抗结核药物卷曲霉素（CPM）、卡那霉素（KM）、氧氟沙星（OFX）和乙硫异烟胺（ETH）进行药物敏感性检测，比较两种检测方法的一致性。结果212例阳性标本中分离出耐药菌株118例，经一线药敏试验确定为耐多药的菌株80例，占总耐药率的67.8％。 MGIT960法和L-J法进行药物敏感性检测，符合率除ETH以外均在80％以上，以L-J法为金标准，MGIT960法的敏感度和特异度分别是SM 100％和93％，EMB 86％和81％，OFX 93％和88％，KM 92％和94％， ETH 100％和56％，CPM 88％和87％。结论 MGIT960法与L-J法对耐多药结核杆菌药敏检测结果除了ETH以外均具有很好的一致性，为耐多药患者一、二线药敏检测提供快速有效的诊断方法。
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耐多药肺结核的局部药物介入治疗研究
目的探讨局部药物介入治疗耐多药肺结核病的效果. 方法226例耐多药肺结核住院患者随机分为治疗组和对照组,均用3DL1OZA/18DL1OZ化疗方案治疗21个月,其中治疗组108例在强化治疗阶段根据36株耐多药结核菌抑制试验结果,进行介入药物治疗.结果提高抗结核药物浓度,可有效控制耐药结核菌生长,而所需浓度远远低于局部给药浓度.临床观察治疗组痰菌阴转率(88.9%)比对照组(71.1%)高,痰菌阴转速度也快,空洞闭合率(35.6%)比对照组(19.8%),疗效较好.未发现与介入治疗有关的毒副作用. 结论经纤支镜引导灌注抗结核药物,是治疗耐多药肺结核的有效方法,其有促使痰菌转阴、空洞闭合的作用.并且有安全无创,无明显毒性反应,并发症少的优点,值得临床推广应用.
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结核分枝杆菌耐药特点分析
目的 分析临床分离结核分枝杆菌的耐药特点.方法 用改良罗氏培养基间接药敏实验绝对浓度法检测结核菌的耐药情况.结果 210株临床分离株中对6种药物全部敏感仅有1株;两种以上药物耐药的有148株,耐药率70.48%;同时耐INH和RFP的菌株有90株,耐药率42.86%.结论 耐药及耐多药结核菌感染是临床治疗结核病的一个严重问题;临床分离的结核杆菌耐药率和耐多药率高;分析临床分离株的耐药特点,对控制结核病传染及指导临床合理用药具有重要意义.
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结核分枝杆菌临床分离株耐药特点分析
目的:分析临床分离结核分枝杆菌的耐药特点.方法:用改良罗氏培养基间接药敏实验绝对浓度法检测结核菌的耐药情况.结果:结核菌总耐药率83.2%,耐多药率为66.4%.其中初始耐药率68.4%,初始耐多药率36.8%,复治耐药率92.4%,复治耐多药率84.7%.结论:耐药及耐多药结核菌感染是临床治疗结核病的一个严重问题.临床分离结核杆菌耐药率和耐多药率高.分析临床分离株耐药特点,对控制结核病传染及指导临床合理用药具有重要意义.
